Regeneration of plants from apical meristem tips and nodal segments of Arachis pintoi

The in vitro regeneration potential of shoot apical tips (2 to 3 mm in length), meristems (0.3 to 0.5 mm in length), and nodal segments (4 to 7 mm long with an axillary bud) of diploid (2n = 2x = 20) and triploid (2n = 3x = 30) cytotypes of Arachis pintoi was evaluated. Explants were cultured on MS medium supplemented with different concentrations and combinations of naphthaleneacetic acid (NAA) and benzyladenine (BA). In one experiment the effect of gibberellic acid was tested. The cultures were done in liquid and solid media. Plant regeneration can be readily achieved from all explants in one step of 30 d culture on MS + 0.01 mg/L each of NAA and BA or two steps consisting of 1) shoots regeneration through culture of explants on MS + 0.01 mg/L each of NAA and BA, and 2) induction of rooting in regenerated shoots by reculture on MS + 0.01 mg/L NAA. The plantlets were successfully transferred to pots in a greenhouse.Fil: Rey de Badaró, Hebe Yolanda. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Nordeste. Instituto de Botánica del Nordeste. Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Ciencias Agrarias. Instituto de Botánica del Nordeste; ArgentinaFil: Mroginski, Luis Amado. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Nordeste. Instituto de Botánica del Nordeste. Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Ciencias Agrarias. Instituto de Botánica del Nordeste; Argentin

Cryopreservation of plant germplasm in Argentina

This review describes the current status of development of methods for cryopreservation (at -196ºC) of plants germplasm in Argentina. Arachis pintoi, a forage legume, has been maintained as seeds using vitrification method. Additionally, apical meristems, shoot tips, and somatic embryos have been cryopreserved using encapsulation-dehydration. Zygotic embryos, encapsulated and dehydrated, have permitted the cryopreservation of seven species of the genus Ilex. Various explants (apical meristems, uninodal segments, buds and somatic embryos) of Melia azedarach have been cryopreserved using the encapsulation-dehydration method. Protocols based in encapsulation-dehydration have also been developed for shoot tips of Citrus sinensis, seeds and protocorms of Oncidum bifolium and anthers of Oryza sativa. Vitrification protocols have been developed forcryopreservation of shoot tips of Solanum tuberosum and seeds of Toona ciliata.Fil: Mroginski, Luis Amado. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Nordeste. Instituto de Botánica del Nordeste. Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Ciencias Agrarias. Instituto de Botánica del Nordeste; ArgentinaFil: Rey de Badaró, Hebe Yolanda. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Nordeste. Instituto de Botánica del Nordeste. Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Ciencias Agrarias. Instituto de Botánica del Nordeste; Argentin

Organogenesis and plant regeneration of Arachis villosa Benth. (Leguminosae) through leaf culture

With the aim of developing an efficient plant regeneration protocol, leaflet explants of three accessions of Arachis villosa Benth. (S2866, S2867 and L97) were cultured on basic Murashige and Skoog medium supplemented with different combinations of plant growth regulators: α-naphthalenacetic acid, indole-3-butyric acid, 6-benzylaminopurine, kinetin and thidiazuron. The accession L97 was the only one able to differentiate buds through indirect organogenesis. The most suitable combination for bud regeneration was the basic medium added with 13.62 μM thidiazuron and 4.44 μM 6-benzylaminopurine. These results show the important role of the genotype in morphogenetic responses and the organogenetic effect of thidiazuron in Arachis villosa accession L97. A thidiazuron lacking media (only 0.54 μM α-naphthalenacetic acid, 13.95 μM kinetin and 13.32 μM 6-benzylaminopurine were added) promoted the elongation of the regenerated buds. Adventitious rooting was achieved 90 days after the isolated shoots were transferred to a rooting medium containing 0.54 μM α-naphthalenacetic acid.Fil: Fontana, María Laura. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Nordeste. Instituto de Botánica del Nordeste. Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Ciencias Agrarias. Instituto de Botánica del Nordeste; ArgentinaFil: Mroginski, Luis Amado. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Nordeste. Instituto de Botánica del Nordeste. Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Ciencias Agrarias. Instituto de Botánica del Nordeste; ArgentinaFil: Rey de Badaró, Hebe Yolanda. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Nordeste. Instituto de Botánica del Nordeste. Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Ciencias Agrarias. Instituto de Botánica del Nordeste; Argentin

Enhanced seed germination of Ilex dumosa R. (Aquifoliaceae) through in vitro culture of cut pyrenes

An in vitro culture protocol was developed that increased the germination percentage and decreased the lag time to germination for Ilex dumosa R. pyrenes as a tool for replacing the laborious task of embryo rescue technique. This method involves transversely cutting surface-sterilized pyrenes with a scalpel blade, then placing the micropylar one-third end with the rudimentary embryo (0.25 mm long) on solidified (agar 0.65%) quarter-strength salts and vitamins of Murashige and Skoog, 1962 medium with 3% sucrose, and incubating in a growth room at 27 ± 2 8C with a 14-h photoperiod (116 mmolm?2 s?1). Most of the cut pyrenes (greater than 50%) germinated within the first month after inoculation and achieved maximum germination (70%) in 2 months compared with whole pyrenes, which began to germinate 3 months after sowing and required more than 8 months for maximum germination (37%). Moreover, the germination percentage of cut pyrenes was significantly higher than the germination of isolated embryos (34%). Thus, the cut pyrenes culture is a simpler and more effective technique than embryo rescue. Easily, on average, a trained operator is able to culture ~1000 cut pyrenes per day instead of ~100 isolated embryos.Fil: Dolce, Natalia Raquel. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Nordeste. Instituto de Botánica del Nordeste (i); Argentina. Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Ciencias Agrarias; ArgentinaFil: Mroginski, Luis Amado. Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Ciencias Agrarias; Argentina. Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Ciencias Agrarias; ArgentinaFil: Rey, Hebe Yolanda. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Nordeste. Instituto de Botánica del Nordeste (i); Argentina. Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Ciencias Agrarias; Argentin

Embryogenic cell suspensions from different explants and cultivars of Eragrostis curvula (Schrad.) Nees

The aim of this work was the establishment of embryogenic calli and cell suspensions from different explants and cultivars ofweeping lovegrass, Eragrostis curvula (Schrad.) Nees, to be used as targets for biolistic transformation. Calli were initiated from immature inflorescences, seeds, embryos, leafbases and root tips. Modified MS medium (Murashige and Skoog, 1962) was used for calli induction and proliferation. Cell suspensions were established and maintained in AAF medium (Wang et al., 1993). Morphogenic calli, embryogenic cell suspensions of moderate growth rate - consisting mainly of compact proembryogenic cell c1usters- and green plants were obtained from all the explants and cultivars assayed, except root tips. Both, explant and genotype were very important factors to be considered in order to obtain a morphogenic response and to establish cell suspensions from this grass. The statistical analysis detected interaction between both factors, explants and genotypes. Immature inflorescences were the best source of explant and Kromdraai was the cultivar that showed the best morphogenic response (expressed as the percentage of calli/explant and the percentage of calli with green spots -every green spot developed into green plants-) with inflorescences, embryos and leafbases. For Morpa and Don Pablo embryos as explants were less responsive than seeds and leafbases. There were no differences in leafbases for all the three cultivars analysed.Fil: Echenique, Carmen Viviana. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Universidad Nacional del Sur. Departamento de Agronomía; ArgentinaFil: Díaz, Marina. Universidad Nacional del Sur. Departamento de Agronomía; Argentina. Provincia de Buenos Aires. Gobernación. Comisión de Investigaciones Científicas; ArgentinaFil: Polci, Pablo Aldo. Universidad Nacional del Sur. Departamento de Agronomía; ArgentinaFil: Mroginski, Luis Amado. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Nordeste. Instituto de Botánica del Nordeste. Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Ciencias Agrarias. Instituto de Botánica del Nordeste; Argentin

Efectos del cloruro de cloro colina y el paclobutrazol sobre el crecimiento de plantas y la calidad de raíces tuberosas de mandioca (Manihot esculenta Crantz cv. Rocha)

The effects of chlorocholine chloride (CCC) and paclobutrazol (PBZ) foliar application on shoot and root parameters of cassava field-grown plants were studied (0, 45 and 90 mg active ingredient per plant). CCC and PBZ reduced total plant and first branch height, aerial fresh mass and tuberous root number. PBZ delayed branching and significantly decreased tuberous root fresh mass, while CCC caused no modifications in these parameters. In addition, CCC and PBZ treatments did not modify tuberous root diameter, while PBZ reduced tuberous root length significantly. Starch content was increased by both growth regulators at the lower dose, whereas dry matter content was increased only by CCC. In conclusion, CCC suppresses excessive vegetative growth, favours quality attributes and does not alter yield, hence improving harvest index. Although PBZ at a low dose increases the starch content and harvest index, its effects on other parameters are undesirable.Fil: Medina, Ricardo Daniel. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Nordeste. Instituto de Botánica del Nordeste. Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Ciencias Agrarias. Instituto de Botánica del Nordeste; ArgentinaFil: Burgos, A.. Universidad Nacional del Nordeste; ArgentinaFil: Difranco, V.. Universidad Nacional del Nordeste; ArgentinaFil: Mroginski, Luis Amado. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Nordeste. Instituto de Botánica del Nordeste. Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Ciencias Agrarias. Instituto de Botánica del Nordeste; ArgentinaFil: Cenóz, P.. Universidad Nacional del Nordeste; Argentin

Micropropagation efficiency determination of cassava (Manihot esculenta, Euphorbiaceae) genotypes of interest to the Northeast of Argentina

Numerosos trabajos de propagación in vitro de mandioca se han citado, sin embargo, la eficiencia de la multiplicación sólo se ha establecido para un número muy restringido de cultivares y/o subcultivos. Con el objeto de evaluar el comportamiento in vitro de 20 cultivares de mandioca de interés para el Nordeste Argentino durante la fase de multiplicación (6 subcultivos totales realizados cada 30 días), se cultivaron segmentos uninodales en medio basal de Murashige y Skoog (1962) más 0,01 mg/L de ácido 1-naftalenacético, 0,01 mg/L de 6-bencilaminopurina y 0,1 mg/L de ácido giberélico. En el 100% de los cultivares fue posible la regeneración de plantas durante los 6 subcultivos. Independientemente del subcultivo, el número promedio de nudos regenerados por explante varió significativamente con el cultivar (P0,0001), rondando valores de 2 a 5 nudos. El número promedio de nudos acumulados fue significativamente distinto dependiendo del cultivar, alcanzando valores de 46 a 16.568 nudos totales (P0,0001). Fue posible distinguir 3 grupos de cultivares, en relación a su capacidad de propagación y de crecimiento en longitud. El conocimiento de la tasa de multiplicación de distintos cultivares de mandioca permitirá ajustar los protocolos para optimizar la eficiencia de la micropropagación de mandioca.Micropropagation efficiency determination of cassava (Manihot esculenta, Euphorbiaceae) genotypes of interest to the Northeast of Argentina. In vitro cassava propagation has been reported in numerous studies; however, the efficiency of multiplication had only been established in a very restricted number of cultivars and / or subcultures during micropropagation. In order to evaluate the in vitro multiplication of 20 economically important cassava cultivars of Northeast Argentina (six total subcultures performed every 30 days), uninodal segments were cultured in basal Murashige and Skoog (1962) supplemented with 0.01 mg/L of 1-naphthaleneacetic acid, 0.01 mg/L of 6-benzylaminopurine and 0.1 mg/L gibberellic acid. Plant regeneration was possible in 100% of the cultivars during the 6 subcultures. Regardless of the subculture, the average number of nodes regenerated per explant varied significantly among cultivar from two to five nodes per plants (P?0,0001). The average number of accumulated nodes was significantly different among cultivars with values that ranged from 46 to 16,568 nodes per plants (P?0,0001). Results show variability due to genotype, distinguishing three cultivars groups according to their propagation efficiency and growth in length ability. Determining the multiplication rate of different cassava cultivars is essential for optimizing micropropagation.Fil: Medina, Ricardo Daniel. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Nordeste. Instituto de Botánica del Nordeste. Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Ciencias Agrarias. Instituto de Botánica del Nordeste; ArgentinaFil: Schaller, Silvia Cristina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Nordeste. Instituto de Botánica del Nordeste. Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Ciencias Agrarias. Instituto de Botánica del Nordeste; ArgentinaFil: Dolce, Natalia Raquel. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Nordeste. Instituto de Botánica del Nordeste. Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Ciencias Agrarias. Instituto de Botánica del Nordeste; ArgentinaFil: Mroginski, Luis Amado. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Nordeste. Instituto de Botánica del Nordeste. Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Ciencias Agrarias. Instituto de Botánica del Nordeste; Argentin

A cryopreservation protocol for immature zygotic embryos of species of Ilex (Aquifoliaceae)

Tropical Ilex species have recalcitrant seeds. This work describes experiments demonstrating the feasibility of long-term conservation of Ilex brasiliensis, I. brevicuspis, I. dumosa, I. intergerrima, I. paraguariensis, I. pseudoboxus, I. taubertiana, and I. theezans through cryopreservation of zygotic rudimentary embryos at the heart developmental stage. The embryos were aseptically removed from the seeds and precultured (7 days) in the dark, at 27± 2ºC on solidified (0.8% agar) 1/4MS medium, [consisting of quarterstrength salts and vitamins of Murashige and Skoog (1962) medium] with 3% sucrose and 0.1 mg/l Zeatin. The embryos were then encapsulated in 3% calcium alginate beads and pretreated at 24 h intervals in liquid medium supplemented with progressively increasing sucrose concentrations (0.5, 0.75 and 1 M). Beads were dehydrated for 5 h with silicagel to 25% water content (fresh weight basis) and then placed in sterile 5 ml cryovials. Then the beads were either plunged rapidly in liquid nitrogen were they were kept for 1 h (rapid cooling) or cooled at 1ºC min-1 to -30ºC. Then the beads were immersed in liquid nitrogen for 1 h (slow cooling). The beads were rewarmed by immersion of the cryovials for 1 min in a water bath thermostated at 30ºC. Finally, beads were transferred onto culture medium (1/4MS, 3% sucrose, 0.1 mg/l zeatin, solidified with 0.8% agar) and incubated in a growth room at 27 ± 2ºC under a 14 h light (116 μmol. m-2.s-1)/ 10 h dark photoperiod. Maximum recovery percentages between 15 and 83% (depending on de the species and the treatment) were obtained with the cryopreserved embryosFil: Mroginski, Luis Amado. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Nordeste. Instituto de Botánica del Nordeste. Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Ciencias Agrarias. Instituto de Botánica del Nordeste; ArgentinaFil: Sansberro, Pedro Alfonso. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Nordeste. Instituto de Botánica del Nordeste. Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Ciencias Agrarias. Instituto de Botánica del Nordeste; ArgentinaFil: Scocchi, Adriana M.. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Nordeste. Instituto de Botánica del Nordeste. Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Ciencias Agrarias. Instituto de Botánica del Nordeste; ArgentinaFil: Luna, Claudia Verónica. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Nordeste. Instituto de Botánica del Nordeste. Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Ciencias Agrarias. Instituto de Botánica del Nordeste; ArgentinaFil: Rey de Badaró, Hebe Yolanda. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Nordeste. Instituto de Botánica del Nordeste. Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Ciencias Agrarias. Instituto de Botánica del Nordeste; Argentin

Técnicas de cultivo in vitro y almacenamiento a baja temperatura para la conservación de explantes de té

Los resultados de este trabajo permiten concluir que es posible la conservación a corto/mediano plazo de explantes de té mediante el uso de la baja temperatura. La sobrevivencia, formación de vástagos y longitud de vástagos son influenciados por el tiempo de exposición a las bajas temperaturas. Es posible la conservación de plantas de té utilizando segmentos uninodales a bajas temperaturas, por un período máximo de 5 meses sin subcultivo, momento a partir del cual la sobrevivencia y calidad de los explantes declinan rápidamente. Los segmentos uninodales y yemas axilares son los explantes que permiten una mejor conservación y generación de vástagos.Fil: Molina, Sandra Patricia. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Estación Experimental Agropecuaria Cerro Azul; ArgentinaFil: Pérez, María Laura. Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Ciencias Agrarias; ArgentinaFil: Rey, Hebe Yolanda. Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Ciencias Agrarias; ArgentinaFil: Mroginski, Luis Amado. Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Ciencias Agrarias; Argentin

Plant regeneration of Rhabdadenia Ragonesei (Apocynaceae) by in vitro culturing of leaf explants

Se regeneraron plantas de Rhabdadenia Ragonesei Woodson (Apocynaceae) mediante el cultivo in vitro de explantes foliares en condiciones ambientales controladas. El procedimiento consistió en: 1) Desinfección de las hojas por inmersión en etanol al 70% (10 s) seguida de inmersión en NaOCl al 1,1% (15 min) y lavado tres veces con agua destilada estéril. 2) Inducción de callos y yemas mediante el cultivo de explantes foliares en el medio de Murashige y Skoog (MS) + 3 mg/L de benciladenina (BAP). 3) Subcultivo de callos y yemas en MS + 1 mg/L de BAP y 4) Enraizamiento de los vástagos obtenidos en MS + 0,5 mg/L de ácido naftalenacético.Plants of Rhabdadenia Ragonesei Woodson (Apocynaceae) were regenerated in vitro from leaves explants. The procedure employed includes: 1) Surface sterilization of leaves by immersion in 70% ethanol (10 s) followed by 1,1%NaOCl (15 min) and three wash with sterile distilled water. 2) Callus and buds induction by culture on Murashige and Skoog medium (MS) + 3 mg/L benzyladenine (BAP). 3) Subculture of callus and buds on MS + 1 mg/L BAP, and 4) Rooting on MS + 0.5 mg/L naftalenacetic acid.Fil: Flachsland, Eduardo Alberto. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Nordeste. Instituto de Botánica del Nordeste. Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Ciencias Agrarias. Instituto de Botánica del Nordeste; ArgentinaFil: Schinini Cacace, Aurelio. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Nordeste. Instituto de Botánica del Nordeste. Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Ciencias Agrarias. Instituto de Botánica del Nordeste; ArgentinaFil: Terada, Graciela. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Nordeste. Instituto de Botánica del Nordeste. Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Ciencias Agrarias. Instituto de Botánica del Nordeste; ArgentinaFil: Furst, Graciela. Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Ciencias Agrarias; ArgentinaFil: Mroginski, Luis Amado. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Nordeste. Instituto de Botánica del Nordeste. Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Ciencias Agrarias. Instituto de Botánica del Nordeste; Argentin