Los resultados de este trabajo permiten concluir que es posible la conservación a corto/mediano plazo de explantes de té mediante el uso de la baja temperatura. La sobrevivencia, formación de vástagos y longitud de vástagos son influenciados por el
tiempo de exposición a las bajas temperaturas. Es posible la conservación de plantas de té utilizando segmentos uninodales a bajas temperaturas, por un período máximo de 5 meses sin subcultivo, momento a partir del cual la sobrevivencia y calidad de los explantes declinan rápidamente. Los segmentos uninodales y yemas axilares son los explantes que permiten una mejor
conservación y generación de vástagos.Fil: Molina, Sandra Patricia. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Estación Experimental Agropecuaria Cerro Azul; ArgentinaFil: Pérez, María Laura. Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Ciencias Agrarias; ArgentinaFil: Rey, Hebe Yolanda. Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Ciencias Agrarias; ArgentinaFil: Mroginski, Luis Amado. Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Ciencias Agrarias; Argentin

Molina, Sandra Patricia

Mroginski, Luis Amado

Perez, María Laura

Rey, Hebe Yolanda

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Con el objetivo de encontrar si era posible la conservación de plantas de té a baja temperatura y determinar el tiempo máximo de sobrevivencia, se instaló el presente ensayo. Para el mismo se utilizaron segmentos uninodales provenientes de plantas madres del Clon CH 14 INTA, perteneciente al programa de mejoramiento de la EEA Cerro Azul-INTA, en la provincia de Misiones. Los explantes fueron cultivados en medio basal MS a la mitad de la concentración de macro y micronutrientes, suplementado con BAP (1,0 mg L-1). Luego fueron mantenidos en heladera a una temperatura de 4°C. Los tratamientos consistieron de distintos períodos de tiempo en heladera: 0, 30, 60, 90, 120, 150 y 180 días, luego de los cuales fueron transferidos a cámara de cultivo (25 ± 2°C). Transcurridos 30 días en estas condiciones se evaluaron: sobrevivencia (%), formación de vástagos (%) y longitud promedio de vástagos (cm). En general, la sobrevivencia fue elevada en todos los tratamientos, registrándose valores promedio entre 70 y 90%, excepto en el de 180 días. Para la formación de vástagos el comportamiento fue similar, con valores relativamente altos en todos los tratamientos, excepto para el de 180 días. Se registraron valores entre 1,0 y 1,2 cm de longitud de vástagos para los 5 primeros tratamientos y de 0,80 cm para el tratamiento de 180 días. De los datos presentados se puede concluir que es posible la conservación de plantas té utilizando segmentos uninodales, a bajas temperaturas, por un período máximo de 4 meses, momento a partir del cual la sobrevivencia y calidad de los explantes declinan rápidamente.Fil: Molina, Sandra. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria; ArgentinaFil: Pérez, María Laura. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Nordeste. Instituto de Botánica del Nordeste (i); ArgentinaFil: Rey de Badaró, Hebe Yolanda. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Nordeste. Instituto de Botánica del Nordeste (i); ArgentinaFil: Mroginski, Luis Amado. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Nordeste. Instituto de Botánica del Nordeste (i); Argentin

Molina, Sandra

Pérez, María Laura

Rey de Badaró, Hebe Yolanda

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Ciencia y Tecnología de los Cultivos Industriales, Año 4 Nº 6 - 2014 21Scientific Publishers. pp: 131-135.4. Instituto Nacional de la Yerba Mate. h t t p: // w w w. i ny m .o r g . a r/ i m a ge n e s/Estadisticas/2013-12-Estadisticas.pdf5. Kitajima E.W., y Nome C.F. 1999. Microscopía electrónica en virología vegetal. En: Métodos para detectar patógenos sistémicos (D.M. Docampo y S.L. Lenardon, eds.). Instituto de Fitopatología y Fisiología Vegetal (IFFIVE) INTA-JICA. pp: 75-77.6. Ministerio de Agricultura, Ganadería y Pesca. Secretaria de Desarrollo Rural y Agricultura Familiar. Subsecretaria de Desarrollo de Eco-nomías Regionales, 2010. Informe de coyun-tura cadena infusiones: YERBA MATE (erva mate, maté). Performans 2009. http://www.minagri.gob.ar/SAGPyA/economias regiona-les/Indec.php.7. Schmelzer K. 1962. Untersuchungen and vi-ren der Zier- und Wild-geholze. 1. Virosen an Viburnum und Ribes. Phytopathologische Zeitschrift 46: 17-52.8. Schwenk F.W., Smith S.H., and Williams H.E. 1971.Component ratio differences in strains in Alfalfa mosaic virus. Phytopathology 61: 1159-1163.9. Ruter J.M., and Gitaitis R.D. 1993. Impa-tiens necrotic spot virus in woody landscape plants in Georgia. Plant Disease 77: 318.10. Sosa D.A., Barbaro S., Alvarenga F.A., De Coll O., Ohashi D.V., Rybak M., y Agostini J.P. 2011Técnicas de cultivo in vitro y almacenamiento a baja temperatura para la conservación de explantes de téSandra Molina1, María Pérez2, Hebe Rey2 y Luis Mroginski21- INTA EEA Cerro Azul. 2- UNNE, Fac. de Cs. Agrarias, IBONE.Correo-e: molina.sandra@inta.gob.arINTRODUCCIÓNLas plantas propagadas clonalmente son usualmente mantenidas en jardines botáni-cos y preservadas por multiplicación conti-nua de estacas (10). Este procedimiento es laborioso y expone a las plantas a factores bióticos y abióticos adversos (7 y 10).El almacenamiento in vitro a baja tempera-tura de germoplasma es una alternativa para la preservación de una variedad de especies vegetales (2). Las mayores ventajas de esta técnica son los requerimientos reducidos en labor y espacio, la eliminación de problemas relacionados a patógenos y la reducción de la erosión genética si las condiciones de al-macenamiento son logradas (4).La técnica más aplicada es la reducción de temperatura, combinada con una reducción en la concentración de elementos nutritivos o disminución en la intensidad de luz o alma-cenamiento en oscuridad. Corredoira et al. (3), han logrado definir las condiciones para el desarrollo y mantenimiento a mediano plazo de un banco de germoplasma in vitro de varias especies leñosas, entre ellas dos del género Camellia, a partir de explantes noda-les y ápices caulinares.Con el objetivo de conocer si es posible la conservación de plantas de té a baja tem-peratura y determinar el tiempo máximo de sobrevivencia, se ejecutó el presente ensayo.MATERIALES Y MÉTODOSComo explantes se utilizaron segmentos uni-nodales, yemas axilares y meristemas pro-venientes de plantas madres del Clon CH 14 INTA, perteneciente al programa de mejora-miento de la EEA Cerro Azul-INTA, en la pro-vincia de Misiones.Ciencia y Tecnología de los Cultivos Industriales, Año 4 Nº 6 - 201422La desinfección y aislamiento de los explan-tes se realizó según Molina et al. (8). Los ex-plantes fueron cultivados en medio basal MS (9) a la mitad de la concentración de macro y micronutrientes, suplementado con BAP (1,0 mg L-1). El pH del medio fue ajustado a 5,8 antes del agregado de 0,7% de agar Sigma (A-1296) y luego esterilizado en autoclave a 121°C por 15 minutos.Los explantes cultivados fueron manteni-dos en heladera a una temperatura de 4°C sin subcultivo. Los tratamientos consistieron de distintos períodos de tiempo en helade-ra: 0, 30, 60, 90, 120, 150 y 180 días, luego de los cuales fueron transferidos a cámara de cultivo (25 ± 2°C). El testigo corresponde al tratamiento no conservado en heladera. Transcurridos 30 días en estas condiciones se evaluaron: sobrevivencia (%), formación de vástagos (%) y longitud promedio de vás-tagos (cm).El experimento fue repetido tres veces con 10 réplicas por cada repetición.RESULTADOS Y DISCUSIÓNLos mejores resultados, en términos de so-brevivencia y formación de vástagos, se obtuvieron cuando se utilizaron segmentos uninodales y yemas axilares como explan-tes (Figuras 1 y 2). En cambio, con el uso de meristemas, los valores de estos parámetros fueron significativamente más bajos (Figura 3). La sobrevivencia de los segmentos uninodales fue elevada hasta los 150 días de conservación a bajas temperaturas, registrándose valores promedio entre 73 y 97%. A partir de los 180 días, dicho parámetro disminuye drásticamen-te hasta valores del 10% (Figura 1). Similar comportamiento fue observado con las ye-mas axilares (Figura 2).Si bien no existen diferencias estadística-mente significativas en el porcentaje de so-brevivencia hasta los 150 días, se observa una disminución progresiva a medida que el período de almacenamiento aumenta. Re-sultados similares fueron encontrados por Ahmed et al. (1) en la conservación de ger-Figura 1. Sobrevivencia (%) de segmentos uninodales de té almacenados a 4°C durante distintos tiempos de expo-sición.Figura 2. Sobrevivencia (%) de yemas axilares de té, alma-cenados a 4°C durante distintos tiempos de exposición.Figura 3. Sobrevivencia (%) de meristemas de té, almace-nados a 4°C durante distintos tiempos de exposición.Ciencia y Tecnología de los Cultivos Industriales, Año 4 Nº 6 - 2014 23moplasma de Pyrus.Un mayor tiempo de exposición provocó el amarronamiento y posterior muerte de los explantes. Según Janeiro et al. (5), la necrosis de los explantes es común cuando se realiza el almacenamiento a baja temperatura, pu-diendo los mismos regenerar especialmente desde yemas laterales que permanecen in-mersas en el agar.Kulkarni et al. (6), trabajando con yemas axi-lares encapsuladas y conservadas a 4°C en-contraron que es posible el almacenamiento de micropropágulos de té por períodos de hasta 60 días. La alta sobrevivencia lograda en el presente trabajo indica el mejor com-portamiento de segmentos uninodales al al-macenamiento a bajas temperaturas de una manera más simple y económica comparada con el encapsulamiento.Respecto a la variable formación de vástagos, se observó en general el mismo comporta-miento en los tres explantes utilizados. Los va-lores más altos correspondieron al testigo y a períodos de conservación más cortos. A medi-da que aumentó el tiempo de conservación a baja temperatura, disminuyó la formación de vástagos. Los segmentos uninodales presen-taron los mayores porcentajes de formación de vástagos, seguidos por las yemas axilares, siendo los meristemas los explantes con me-nor capacidad de regenerar, luego de la con-servación a baja temperatura (Cuadro 1).Para la variable longitud de vástagos, no se encontraron diferencias estadísticas signifi-cativas entre los distintos tratamientos. Sólo se observó una mayor longitud de vástagos cuando se utilizaron segmentos uninodales como explante, con valores entre 1,03 y 1,23 cm hasta los 150 días de conservación a 4°C (Cuadro 2). En general, los vástagos no pre-sentan necrosis ni amarronamiento (Figura 4).CONCLUSIONESLos resultados de este trabajo permiten con-cluir que es posible la conservación a corto/mediano plazo de explantes de té mediante el uso de la baja temperatura.La sobrevivencia, formación de vástagos y longitud de vástagos son influenciados por el tiempo de exposición a las bajas temperaturas.Es posible la conservación de plantas de té utilizando segmentos uninodales a bajas temperaturas, por un período máximo de 5 meses sin subcultivo, momento a partir del cual la sobrevivencia y calidad de los explan-tes declinan rápidamente.Los segmentos uninodales y yemas axilares son los explantes que permiten una mejor conservación y generación de vástagos.Cuadro 1. Formación de vástagos promedio (%) en segmentos uninodales, yemas axilares y meristemas de té conserva-dos a baja temperatura (4°C), durante diferentes períodos de tiempo.* Letras distintas en sentido de las columnas indican diferencias significativas para p<0,05.Ciencia y Tecnología de los Cultivos Industriales, Año 4 Nº 6 - 201424Cuadro 2. Longitud promedio (cm) de vástagos formados a partir de segmentos uninodales, yemas axilares y meristemas de té, conservados a baja temperatura (4°C), durante diferentes períodos de tiempo.* Letras distintas en sentido de las columnas indican diferencias significativas para p<0,05.Figura 4. Vástagos formados en segmentos uninodales de té, conservados a baja temperatura (4°C), durante diferentes períodos de tiempo: a) 30 días, b) 60 días, c) 90 días, d) 120 días, e) 150 días y f) 180 días. (Las barras verticales indican 1,0 cm).Ciencia y Tecnología de los Cultivos Industriales, Año 4 Nº 6 - 2014 25BIBLIOGRAFÍA CITADA1- Ahmed M., Anjum M.A., Shah A.H. and Ha-mid A. 2010. In vitro preservation of Pyrus germplasm with minimal growth using diffe-rent temperature regimes. Pakistan Journal of Botany 42: 1639-1650.2- Ballester A., Janeiro L.V. and Vieitez A.M. 1997. Cold storage of shoot cultures and algi-nate encapsulation of shoot tips of Camellia japonica L. and Camellia reticulate Lindley. Scientia Horticulturae 71: 67-78.3- Corredoira E., San José M.C., Martínez T., Valladares S., Couselo J.L., Janeiro L., Vieitez A.M. y Ballester A. 2011. Conservación de ger-moplasma en especies leñosas con técnicas de cultivo in vitro y almacenamiento en frío. Spanish Journal of Rural Develoment 2: 15-24.4- Engelmann F. 1991. In vitro conservation of tropical plant germplasm – a review. Euphyti-ca 57: 227-243.5- Janeiro L.V., Vieitez A.M. and Ballester A. 1995. Cold storage of in vitro cultures of wild cherry, chestnut and oak. Annals of Forest Science 52: 287-293.6- Kulkarni V.M., Varshney L.R., Bapat V.A. and Rao P.S. 2002. Propagation of tea (Camellia sinensis (L.) O. Kuntze) by shoot proliferation of alginate-encapsulated axillary buds stored at 4°C. Current Science 83: 941-944.7- Kuranuki Y. and Sakai A. 1995. Cryopreserva-tion of in vitro-grown shoot tips of tea (Ca-mellia sinensis) by vitrification. CryoLetters 16: 345-352.8- Molina S.P., Pérez M.L., Rey H.Y. y Mrogins-ki L.A. 2013. Regeneración de plantas de té (Camellia sinensis) por cultivo in vitro de me-ristemas, yemas axilares y segmentos unino-dales. Rev. FCA UNCUYO 45: 127-134.9- Murashige T. and Skoog F. 1962. A revised medium for rapid growth and bio assays with tobacco tissue cultures. Physiologia Planta-rum 15: 473-497.10- Shibli R.A., Shatnawi M.A., Subaih W.S. and Ajlouni M.M. 2006. In vitro conservation and cryopreservation of plant genetic resources: a review. World Journal of Agricultural Scien-ces 2: 372-382.Presencia de reovirus y torradovirus en co-infección con un potexvirus en cultivos de mandioca en ArgentinaAndrea Zanini1, Liliana Di Feo1, Andrés Luque2 y Patricia Rodríguez Pardina11- Instituto de Patología Vegetal (IPAVE) CIAP- INTA. 2- Instituto de Fisiología y Recursos Ge-néticos Vegetales (IFRGV) CIAP- INTA. Córdoba.Correo-e: ldifeoar@yahoo.com.arINTRODUCCIÓNEn los últimos años, las infecciones virales en cultivos de mandioca en África, han tenido un efecto devastador sobre la producción de raíces tuberosas y, en América, hay eviden-cia de la aparición de varias enfermedades virales que causan pérdidas de rendimiento significativas (1). Algunos de estos virus se han asociado con distintos síntomas foliares, como por ejem-plo el Cassava vein mosaic virus (CsVMV), reportado únicamente en Brasil (2) y el Cas-sava common mosaic virus (CsCMV), con amplia distribución en Brasil, Colombia, Pa-raguay, África y Asia y recientemente citado en Argentina (3-7). Al menos uno de estos patógenos, el Cassava frogskin-associated virus (CsFSaV), está asociado con síntomas radiculares graves (enfermedad del “cuero de sapo”). Este virus se distribuye en Brasil, Venezuela, Costa Rica, Panamá y Perú, y la patología en la que participa es la principal limitante de la producción de mandioca en 

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