Cuantificación de taxol y baccatin III en callos de Taxus baccata por cromatografía líquida de alta eficiencia (HPLC)

Callos de Taxus baccata fueron inducidos a partir de segmentos de agujas y tallos en el medio de cultivo TM5 suplementado con diferentes concentraciones de picloram en combinación con ácido giberélico (GA3) y kinetina. Los segmentos de tallo produjeron callos con tasas de crecimiento más altas que las obtenidas a partir de las agujas. Los mejores medios para la inducción de callos fueron TM5 suplementados con 1 o 6 mg/L de picloram en combinación con 0,1 mg/L de GA3 y 0,1 mg/L de kinetina respectivamente. El análisis por HPLC de los extractos metanólicos de los callos determinó que el rango de concentración de Taxol estuvo entre 1,90¿8,75 mg/L y el de Baccatin III entre 4,55¿18,90 mg/L.Callus of Taxus baccata were induced from needles and stem explants in the culture media TM5 supplemented with different picloram oncentrations in combination with GA3 and kinetin. Stem segments gave the highest growth rate than those obtained from the needles. The best media for callus induction were the TM5 with 1 mg/L or 6 mg/L of picloram, plus 0.1 mg/L of GA3 and 0.1 mg/L of kinetin, respectively. The HPLC analysis of the different callus methanolic extracts showed a concentration range between 1.90¿8.75 mg/L for Taxol and between 4.55¿18.9 mg /L for Baccatin III

Evaluación de la actividad antifúngica de extractos vegetales sobre el hongo mycosphaerella fijiensis MORELET

Los cultivos de plátano y banano son afectados por el hongo Mycosphaerella fijiensis Morelet causante de una de las enfermedades más destructivas concida como Sigatoka Negra (SN), la cual genera cuantiosas pérdidas económicas para los cultivadores. Para el control de esta enfermedad se emplean diversos tipos de fungicidas de síntesis que aumentan los costos de producción y causan deterioro significativo al medio ambiente asi como a la salud de los trabajadores. En este trabajo se evaluaron 84 extractos vegetales (1000mg/L) obtenidos de 42 plantas recolectadas en el Parque Regional Natural Ucumarí (Risaralda, Colombia) para determinar su actividad fungicida a través de los métodos de elongación del tubo germinativo de las ascosporas y de la medición del crecimiento radial del micelio de M. fijiensis. El extracto metanólico de la especie Topobea cf discolar (UTP-160, Melastomataceae) presentó la mayor actividad antifúngica, al reducir en 100% el crecimiento de M. fijiensis en sus dos ciclos reproductivos, lo cual hace a este extracto una fuente potencial para el control de la Sigatoka Negra.Plantain and banana crops are affected by the fungus Mycosphaerella fijiensis Morelet which caused one of the most destructive diseases known as Black Sigatoka, producing great economic losses to growers. To control this disease it has been employed several types of synthetic fungicides that increase production costs, and cause significant damages to the environment and plantation´s workers. In these study 84 plant extracts (1000 mg/L) from 42 plant species collected in the Natural Reserve Ucumari (Risaralda, Colombia) were evaluated to determine its fungicide potency through the methods of measuring the length of the germinative tube of ascospore and the measurement of radial growth of the M. fijiensis mycelium. The methanolic extract from Topobea cf discolor (UTP-160, Melastomataceae) showed the strongest inhibitory effects, since it reduced M. fijiensis growth in 100%, in both phases of its reproductive cycle; then this extract has a great potential for Black Sigatoka control

Ciclótidos de la especie Guettarda crispiflora (Rubiaceae)

En este estudio se obtuvieron  los extractos de diclorometano e hidrometanólico de G. crispiflora. El extracto hidrometanólico fue purificado con poliamida DPA 6S y posteriormente por sílica gel en fase reversa (C18). La purificación final se realizó por cromatografía líquida de alta eficiencia (HPLC) preparativa y la presencia de los péptidos fue evidenciada en cromatografía de capa delgada en sílica gel y por electroforesis en geles de poliacrilamida desnaturalizante. Los ciclótidos obtenidos fueron parcialmente caracterizados por espectrometría de masas (LC-MS). Adicionalmente, los extractos crudos y las fracciones cromatográficas obtenidas  de G. crispiflora fueron evaluadas contra las bacterias Bacillus subtilis, Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa y Staphylococcus aureus, por el método de difusión en agar, pero no presentaron actividad antimicrobiana a las concentraciones evaluadas.

Ciclótidos de la especie Guettarda crispiflora (Rubiaceae)

En este estudio se obtuvieron  los extractos de diclorometano e hidrometanólico de G. crispiflora. El extracto hidrometanólico fue purificado con poliamida DPA 6S y posteriormente por sílica gel en fase reversa (C18). La purificación final se realizó por cromatografía líquida de alta eficiencia (HPLC) preparativa y la presencia de los péptidos fue evidenciada en cromatografía de capa delgada en sílica gel y por electroforesis en geles de poliacrilamida desnaturalizante. Los ciclótidos obtenidos fueron parcialmente caracterizados por espectrometría de masas (LC-MS). Adicionalmente, los extractos crudos y las fracciones cromatográficas obtenidas  de G. crispiflora fueron evaluadas contra las bacterias Bacillus subtilis, Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa y Staphylococcus aureus, por el método de difusión en agar, pero no presentaron actividad antimicrobiana a las concentraciones evaluadas.

Características de los culmos de guadua de acuerdo al sitio y su estado de madurez

From two natural bamboo stands dominated by the bamboo species guadua (Guadua angustifolia Kunth) located in sites with different ecological conditions, culms were assessed in order to elucidate possible changes in physical- mechanical properties and lignin content as well. Test pieces were collected from the two sites and were obtained from guadua culms with ages between 1 and 5 years. Among sites the values obtained of physical-mechanical properties and lignin content tend to increase with culms age; however, these changes were not always significantly different (p>0.05). Those culms from the warmer and drier site located at lower altitude showed on average values significantly (p<0.05) higher of the variables assessed. Considering the results obtained, culm maturity is an important factor influencing both physical-mechanical properties and lignin content, however ecological conditions determine larger differences in these variables to be considered for selecting bamboo culms when specific attributes are required by the market.Culmos de la especie de bambú guadua (Guadua  angustifolia Kunth) obtenidos de bosques naturales dominados por esta especie y localizados en dos sitios con condiciones ecológicas diferentes,  fueron evaluados para determinar cambios en propiedades fisicomecánicas y lignina. Las  probetas evaluadas  fueron tomadas de culmos en diferente estado madurez cuya edad oscilaba entre 1 y 5 años.  Dentro de cada sitio, los valores de las propiedades evaluadas  tienden a ser  más altos en edades mayores,  pero no siempre estas diferencias fueron significativas (p>0.05). Mientras que aquellos culmos  que provenían del sitio localizado a menor altitud,  más cálido y más seco mostraron valores significativamente mayores (p<0.05) para las variables evaluadas. Con base en los resultados obtenidos, se debe considerar que aunque la madurez de los culmos es relevante para la definición de propiedades  físico-mecánicas y lignina, las condiciones de sitio representan cambios que deben ser considerados cuando se quiere hacer una selección de los mismos y de ciertos atributos que son requeridos en el mercado

Inhibición de ADN por extractos vegetales de plantas de la ecorregión cafetera

Este estudio presenta los resultados de la inhibición del ADN de 52 extractos metanólicos y 51 de diclorometano evaluados con el ADN del esperma de Herring mediante la reducción de la señal de absorción al ultravioleta a través del método de HPLC descrito por Pezzuto y colaboradores. Se evaluaron 103 extractos pertenecientes a plantas de las familias: Asteraceae, Euphorbiaceae, Melastomataceae, Rubiaceae y Solanaceae recolectadas en el Parque Regional Natural Ucumarí (PRNU, Colombia). Los porcentajes de inhibición más altos del ADN lo presentaron los extractos metanólicos de las siguientes especies pertenecientes a la familia Asteraceae: Schistocarpha sinforisi Cuatrec. (68.3%), Aspilla quinquernervis Blake (50.74%) y Verbesina nudipes Blake (43.20%); adicionalmente, el porcentaje de inhibición de la Solanaceae, Deprea glabra Standl fue del 41.01%. Todos los extractos de diclorometano evaluados mostraron baja inhibición del ADN.This study present the results of DNA inhibition of 52 methanol and 51 dichloromethane crude plant extracts against the with Herring sperm DNA evaluated in terms of absorbance reduction of the peak, following the HPLC method described by Pezzuto and his colleagues. The 103 plant extracts belong to the Asteraceae, Euphorbiaceae, Melastomataceae, Rubiaceae and Solanaceae families and were collected in the Regional Natural Park Ucumarí (RNPU, Colombia). The highest percentages of DNA inhibition within the six plant families studied were shown by the methanol extracts of Schistocarpha sinforosi Cuatrec. (68.30%), Aspilla quinquenervis Blake (50.74%) and Verbesina nudipes Blake (43.20%) all members of the Asteraceae family; followed by the methanol extract of Deprea glabra (Standl.) A.T. Hunziker (41.01%) a member of the Solanaceae family. The dichloromethane plant extracts studied displayed weak percentage of DNA inhibition

Detección in-vitro de inhibidores de la acetilcolinesterasa en extractos de cuarenta plantas de la flora colombiana mediante el método cromatográfico de ellman

En la búsqueda de plantas como fuente potencial de fitocompuestos inhibidores de la enzima acetilcolinesterasa (AChE) se normalizó el método cromatográfico de Ellman, con extractos metanólicos y de diclorometano de 40 plantas recolectadas en el Parque Regional Natural Ucumarí (PRNU). La verdadera actividad inhibitoria sobre AChE fue observada en los extractos metanólicos de las plantas pertenecientes a la familia Solanaceae: Witheringia coccoloboides (Damn) Hunz, Solanum sp, Solanum deflexiflorum Bitter, Solanum leucocarpum Dunal y en el extracto de diclorometano de la última planta, los cuales presentaron halos de inhibición significativos de la AChE en el ensayo por cromatografía de capa delgada (CCD). los mismos extractos fueron positivos frente al revelador de Dragendorff, sugiriendo que estos inhibidores pueden ser de naturaleza alcaloidal. También, se detectaron por CCD aldehídos y aminas los cuales se consideraron como falsos-positivos en el ensayo de inhibición de la AChE.In the search of plants as potential source of inhibitors of the enzyme acetylcholinesterase (AChE) the Ellman chromatographic method was standardized, to determine the inhibitory activity against the AChE of methanolic and dichloromethane extracts from 40 plants collected in the Natural Regional Park Ucumarí (PRNU). The true inhibitory activity on the acetylcholinesterase was observed in the methanolic extracts of the plants belonging to the family Solanaceae: Witheringia coccoloboides (Damn) Hunz, Solanum sp, Solanum leucocarpum Dunal, Solanum deflexiflorum Bitter and the dichloromethane extract of Solanum leucocarpum Dunal which presented inhibition spots on the AChE in thin layer chromatography (TLC) assay. These extracts were also positive against the Dragendorff reagent, suggesting that the acetylcholinesterase inhibitors (IAChE) can be of alkaloidal origen. In addition, thin layer chromatography allowed to detect aldehydes and amines like false-positive in the AChE inhibition assay

Tendencias en investigación y desarrollo (i+d) relacionadas con organismos endofíticos

La naturaleza emerge, cada día más, como un laberinto sin fin de especies. Los seres humanos y, en particular, los investigadores que se dedican a la investigación científica se deslumbran con una miríada de especies animales y vegetales, aparentemente incontable, que existe debajo de una palabra simple: biodiversidad. No es sorprendente ver que, asociados en diversas formas, junto a los animales y plantas, existe un número también incontable de especies de microorganismos (hongos y bacterias). En este universo, aumenta cada vez más, el gran potencial ecológico, químico, farmacológico e industrial de los organismos endofíticos, todavía poco conocidos, ya que están escondidos en el interior de las plantas. En este documento sobre “Tendencias en investigación y desarrollo (I+D) en organismos endofíticos”, los autores presentan este universo de especies endofíticas, abordando no solamente la importancia y las aplicaciones de estas especies, si no que ofrecen un mapa de países, instituciones e incluso investigadores que trabajan en esta área, en una visión global y equilibrada sobre el tema. Además, este material recopila diversos aspectos relevantes en la investigación sobre organismos endofíticos, como las tendencias en el área de patentes, aspectos metodológicos y análisis de producción científica en el área de endofíticos. Es un trabajo exhaustivo, completo y que puede conducir a discusiones políticas, científicas y académicas sobre este tema, tan relevante en el área de biotecnología industrial en la actualidad. Espero que la lectura pueda agradarles a todos, de la misma manera que me agradó a mí; en especial a los jóvenes investigadores, para incentivarlos a embarcarse en el estudio de organismos endofíticos sobre las más diversas ópticas del trabajo científico

Evaluacion de la actividad antifungica de extractos vegetales sobre el hongo mycosphaerella fijiensis morelet.

Los cultivos de plátano y banano son afectados por el hongo Mycosphaerella fijiensis Morelet causante de una de las enfermedades más destructivas, conocida como Sigatoka Negra (SN), la cual genera cuantiosas pérdidas económicas para los cultivadores. Para el control de esta enfermedad se emplean diversos tipos de fungicidas de síntesis que aumentan los costos de producción y causan deterioro significativo al medio ambiente así como a la salud de los trabajadores. En este trabajo se evaluaron 84 extractos vegetales (1000 mg/L) obtenidos de 42 plantas recolectadas en el Parque Regional Natural Ucumarí (Risaralda, Colombia), para determinar su actividad fungicida a través de los métodos de elongación del tubo germinativo de las ascosporas y de la medición del crecimiento radial del micelio de M. fijiensis. El extracto metanólico de la especie Topobea cf discolor (UTP-160, Melastomataceae) presentó la mayor actividad antifúngica, al reducir en 100% el crecimiento de M. fijiensis en sus dos ciclos reproductivos, lo cual hace a este extracto una fuente potencial para el control de la Sigatoka Negra.Plantain and banana crops are affected by the fungus Mycosphaerella fijiensis Morelet which caused one of the most destructive diseases known as Black Sigatoka, producing great economic losses to growers. To control this disease it has been employed several types of synthetic fungicides that increase production costs, and cause significant damages to the environment and plantation´s workers. In these study 84 plant extracts (1000 mg/L) from 42 plant species collected in the Natural Reserve Ucumari (Risaralda, Colombia) were evaluated to determine its fungicide potency through the methods of measuring the length of the germinative tube of ascospore and the measurement of radial growth of the M. fijiensis mycelium. The methanolic extract from Topobea cf discolor (UTP-160, Melastomataceae) showed the strongest inhibitory effects, since it reduced M. fijiensis growth in 100%, in both phases of its reproductive cycle; then this extract has a great potential for Black Sigatoka control

Cuantificacion de taxol y baccatin iii en callos de taxus baccata por cromatografia liquida de alta eficiencia (hplc).

Callus of Taxus baccata were induced from needles and stem explants in the culture media TM5 supplemented with different picloram concentrations in combination with GA3 and kinetin. Stem segments gave the highest growth rate than those obtained from the needles. The best media for callus induction were the TM5 with 1 mg/L or 6 mg/L of picloram, plus 0.1 mg/L of GA3 and 0.1 mg/L of kinetin, respectively. The HPLC analysis of the different callus methanolic extracts showed a concentration range between 1.90�8.75 mg/L for Taxol and between 4.55� 18.9 mg /L for Baccatin III .Callos de Taxus baccata fueron inducidos a partir de segmentos de agujas y tallos en el medio de cultivo TM5 suplementado con diferentes concentraciones de picloram en combinación con ácido giberélico (GA3) y kinetina. Los segmentos de tallo produjeron callos con tasas de crecimiento más altas que las obtenidas a partir de las agujas. Los mejores medios para la inducción de callos fueron TM5 suplementados con 1 o 6 mg/L de picloram en combinación con 0,1 mg/L de GA3 y 0,1 mg/L de kinetina respectivamente. El análisis por HPLC de los extractos metanólicos de los callos determinó que el rango de concentración de Taxol estuvo entre 1,90�8,75 mg/L y el de Baccatin III entre 4,55�18,90 mg/L