Metabolismo de radicais livres durante a diapausa da lagarta do girassol (Chlosyne lacinia)

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Programa de Pós-Graduação em Biologia Molecular, 2014.Em diferentes processos de depressão metabólica animal (e.g. hibernação, estivação e diapausa), o sistema antioxidante endógeno exerce relevante papel, sendo um importante componente da maquinaria de adaptação fisiológica. Dentre as situações de depressão metabólica nas quais o metabolismo redox foi estudado, a diapausa destaca-se por ter sido pouco estudada, e menos ainda se conhece sobre o papel de antioxidantes na diapausa de insetos tropicais. O objetivo deste estudo foi identificar adaptações do metabolismo redox associadas à diapausa tropical, utilizando como modelo lagartas do girassol Chlosyne lacinia. Neste estudo, foram determinadas as atividades de enzimas do metabolismo intermediário e do sistema antioxidante, além das concentrações de glutationa e de indicadores de estresse oxidativo em homogeneizados de corpo inteiro. Foram analisados animais coletados em três períodos, janeiro e março de 2010 e junho de 2011. Os grupos experimentais foram animais ativos (controle), animais em diapausa por menos de 24 horas, 20, 40, 60 e 120 dias, e animais ativos por 48-72h após 120 dias de diapausa. A atividade de citrato sintase (CS) diminuiu 70% no início da diapausa, sendo restabelecida no final da diapausa. As atividades das enzimas antioxidantes ascorbato peroxidase, glutationa peroxidase e catalase seguiram o mesmo padrão, diminuindo 64%, 51% e 43% respectivamente no inicio da diapausa e retornando aos valores de animais ativos no final da diapausa. As atividades de glicose 6-fosfato desidrogenase e piruvato quinase permaneceram inalteradas. No inicio da diapausa, houve um aumento abrupto (360%) da atividade de isocitrato desidrogenase dependente de NADP+ (ICDH), cuja atividade permaneceu elevada até o quadragésimo dia de diapausa. A atividade de glutationa transferase (GST) aumentou em resposta à diapausa, nas primeiras 24 horas de diapausa de animais amostrados em 2011 (370%). Em janeiro e março de 2010, o aumento da atividade de GST foi influenciado por variações na atividade dos grupos controles. As concentrações de equivalentes de glutationa (GSH-eq), glutationa reduzida (GSH) e de glutationa dissulfeto (GSSG) diminuíram significativamente durante a diapausa e retornaram aos níveis do controle após a diapausa. A razão GSSG/GSH-eq permaneceu inalterada. As concentrações de TBARS e proteínas carboniladas foram reduzidas ou permaneceram inalteradas durante a diapausa. A diminuição da atividade de CS sugere redução do metabolismo aeróbico, também observada em diferentes casos de diapausa. Uma menor potencial de produção de espécies reativas de oxigênio em conjunto com os mecanismos de economia energética durante a diapausa podem explicar a diminuição dos níveis de antioxidantes endógenos. O início da diapausa é marcado por um elevado potencial de produção de NADPH, que pode ser empregado no sistema antioxidante, na síntese de ácidos graxos e na síntese de polióis – servindo como um mecanismo de proteção à desidratação. A elevada atividade de GST, observada também em outros insetos em diapausa, pode exercer funções além da destoxificação de xenobióticos, incluindo a ligação e transporte de biomoléculas. A ausência de evidencias de aumento de estresse oxidativo e de desequilíbrio redox indica que C. lacinia apresenta adaptações bioquímicas eficientes para sobreviver às transições metabólicas de entrada e saída da diapausa. ___________________________________________________________________________________________ ABSTRACTAnimals challenged with adverse environmental conditions rely on metabolic depression is as an important adaptive response. Endogenous antioxidant defenses play important roles in different metabolic depression processes (e.g. hypoxia tolerance, freezing, hibernation, estivation and diapause). Among the situations of metabolic depression in which the redox metabolism have been addressed, diapause is one of the least studied, especially in tropical insects. The aim of this work was to identify adaptations of the redox metabolism associated to tropical diapause employing as an animal model the bordered patch Chlosyne lacinia caterpillars. The determination of antioxidant and intermediary metabolism enzymes activity and of glutathione and oxidative stress markers concentrations were conducted in whole body homogenates. Animals were collected in three different months, January and March (2010), and June (2011). Experimental groups were active animals (control), diapausing animals for 0-24 hours, 20, 40, 60 and 120 days, and post-diapause active animals. Citrate synthase (CS) activity decreased (70%) at the diapause beginning and returned to control levels at the end of diapause. The activities of the antioxidant enzymes ascorbato peroxidase, catalase and glutathione peroxidase (selenium independent) also decreased by 64%, 51% and 43% respectively at the diapause beginning and returned to control levels at the end of diapause. The activities of glutathione reductase and selenium dependent glutathione peroxidase were not detected in C. lacinia. There were significant correlations between antioxidant activities and CS activity. Glucose 6-phosphate dehydrogenase and pyruvate kinase activity remained unchanged is response to diapause. Isocitrate dehydrogenase (NADP+) activity increased at diapause beginning and remained higher than control until the 40th day of diapause. Glutathione transferase (GST) activity increased in response to diapause. In the first 24 hours of diapause GST activity increased by 370%. The concentrations of glutathione equivalents (GSH-eq), reduced glutathione (GSH) and oxidized glutathione (GSSG) decreased significantly during diapause and returned to control levels after diapause. Thus, the GSSG/GSH-eq ratio was unaltered. The levels of oxidative stress markers (TBARS and protein carbonyls) either decreased or remained constant during diapause. The results indicate decreased mitochondrial density and reduced aerobic metabolism those were already related during diapause in other species. Potentially diminished production of reactive oxygen species together with mechanisms of reduced energetic demand justify the reduction of endogenous antioxidants. Diapause beginning is accompanied by an increased potential production of NADPH, which could be used by the antioxidant system, by fatty acid synthesis and by polyol synthesis – as dehydration resistance mechanism. Increased GST activity, also observed in other diapausing insects, could play roles other than xenobiotics detoxication, including the binding and transport of biomolecules. The biological function of GST during diapause must be further investigated. The lack of evidences showing oxidative stress or redox imbalance indicates that C. lacinia presents efficient biochemical adaptation to survive the metabolic transitions occurring in the tropical diapause under low humidity

Trichlorfon for Treatment of Cutaneous Habronemosis - Evaluation of Intravenous Regional Perfusion in the Distal Equine Limbs

Background: Equine cutaneous habronemiasis is common in the distal regions of the limbs. Organophosphates, applied systemically, one previously used treatment, which is highly effective, but currently in disuse, due to the risks of intoxica-tion. Regional perfusion is a potential technique for distal limb wounds, since, in addition to being used in low doses, it prevents systemic circulation of the drug and possible intoxication, and has a lower treatment cost. The current work aimed to perform clinical, laboratory, and venography evaluations of the use of trichlorfon in regional intravenous perfusion, as a possible form of treatment for cutaneous habronemosis in the distal region of equine limbs.Materials, Methods & Results: Twelve horses were used, divided into two groups, with the left thoracic limb (LTL) being the test limb, and the right thoracic limb (RTL) the control limb. At moment zero (M0), distal radiography and venography were performed. The tourniquet was then loosened and after five minutes, at moment one (M1), the tourniquet was repositioned for 1.25 mg/kg (G1) and 5.5mg/kg (G2) trichlorfon injections into the left thoracic limb, diluted in 20 mL of Ringer's lactate solution, and 20 mL of Ringer's lactate solution was applied to the right thoracic limb. The tourniquet was maintained for 30 minutes after infusion in both groups. At moment two (M2), four days later, blood tests, radiography, and venography were repeated. Every day between M0 and M2, physical examinations were performed, including measurement of the pastern, fetlock, and coronet band, and a lameness examination. There were no significant alterations in clinical parameters, behavior, and appetite. In the blood cell count, there was an increase in leukocytes on D4 in G2, although remaining within the reference values for the species. The biochemical tests showed no alterations. There were no changes in the circumferences evaluated and 4 horses from G2 presented lameness in the LTL and one in the RTL. In the venograms, one G2 animal was noticed to be hypoperfused in all LTL plexuses. Discussion: The use of trichlorfon in regional perfusion at a dose of 1.25 mg/kg demonstrated safety, with no clinical, laboratory, and lameness changes in any of the animals. At the highest dose (5.5 mg/kg), individual reactions were observed, such as different degrees of lameness, swelling, and heat in foot. Serial venographies document the response to treatment used, it was decided to perform the second venography 4 days after the trichlorfon perfusion and the first initial venography evaluation, following the recommendations for the repetition time of the examination and evaluation of the use of the drug. The evaluation of radiographic images of venography, in a grading system created considering the range of contrast in five regions by the three examiners experienced in podiatry and the analysis of radiographic images of limbs of horses, without having participated in the previous procedures was important for the reliability of the assessment. The areas of hypoperfusion observed in the venography were not related to trichlorfon perfusion. It is essential that the application of trichlorfon be performed correctly, intravenously, to avoid reactions such as necrosis, pain, edema, erythema, lameness, and even more severe inflammatory reactions, such as phlegmon and thrombophlebitis. Although a small number of animals were used in this study, trichlorfon regional perfusion of equine limbs, at a dose of 1.25 mg/kg may be a technique appears to be inert to hoof vascularization

Efficiency and deposition of paraquat application with adjuvant and nozzles inclination angle over Digitaria spp., Sonchus oleraceos and Amaranthus viridis

O uso de herbicidas de ação de contato com o paraquat normalmente necessita de maior atenção com aspectos de tecnologia de aplicação em relação aos de ação sistêmica. Com objetivo de avaliar a deposição e eficiência da aplicação de paraquat associado a adjuvantes e ângulos de inclinação das pontas de pulverização no controle de plantas daninhas, um experimento foi conduzido a campo em fatorial 2x3+1, com cinco repetições. Sete tratamentos foram constituídos por duas condições do herbicida Gramoxone® (paraquat, 150 g i.a. ha-1), utilizado com os adjuvantes Agral® (0,1% v/v) e Fulltec® (0,05% v/v;), três angulações da inclinação da ponta de pulverização no sentido do deslocamento da aplicação (+30°; 90°; -30°) e uma testemunha sem aplicação. Os alvos naturais foram plantas de Digitaria spp., Sonchus oleraceos e Amaranthus viridis, e os alvos artificiais, tampas plásticas sobre a superfície do solo, sendo todos com 10 repetições. Não foram constadas diferenças significativas entre a deposição média da aplicação de paraquat com adjuvantes e ângulos da ponta de pulverização para A. viridis e lâminas de plástico. Para Digitaria spp. a deposição do paraquat com Agral® foi superior ao Fulltec® utilizando-se ângulos de +30° e 90°. Para S. oleraceos houve aumento da deposição do paraquat com Fulltec® para o ângulo de -30°. Todos os tratamentos controlaram eficientemente (³ 91,0%) as plantas daninhas aos 3 dias após aplicação, não havendo diferenças significativas em relação as condições estudadas.The use of contact action herbicides with paraquat usually requires more attention with application technology aspects in relation to the systemic action ones. In order to evaluate the efficiency and deposition of paraquat application associated with adjuvant and nozzles inclination angle in weeds control, an experiment was conducted in field conditions using a factorial scheme 2 x 3 +1, with five repetitions. Seven treatments were constituted by two conditions of Gramoxone® herbicide (paraquat, 150 g a.e. ha-1), used with Agral® (0.1% v/v) and Fulltec® (0.05% v/v;) adjuvant, three nozzles inclination angle in direction of application offset (+30°; 90°; -30°) and a check without application. Natural targets were Digitaria spp., Sonchus oleraceos and Amaranthus viridis and artificial targets, plastic covers positioned over soil surface, with 10 repetitions. No significant differences were observed between application medium deposition of paraquat with adjuvant and nozzles inclination angles for A. viridis plastic covers. For Digitaria spp., paraquat deposition with Agral® was superior to Fulltec® using +30° and 90° angles. For S. oleraceos there was increased in paraquat deposition with Fulltec® for -30° angle. All treatments presented efficient management (³ 91.0%) for weeds control at 3 days after application, with no significant differences regarding the studied conditions

O papel da equipe interdisciplinar no tratamento de pacientes / The role of the interdisciplinary team in the treatment of patients

Introdução: Com a evolução da Medicina, surgiu a necessidade de se ter uma nova abordagem ao paciente, de forma que se tivesse uma melhor conduta e atuação por parte da equipe da saúde. Nesse contexto, passa-se a ter as equipes interdisciplinares, as quais são formadas por profissionais de saúde de diferentes áreas de atuação: médicos, enfermeiros, técnicos de enfermagem, nutricionistas, fisioterapeutas, psicólogos, serviço social, odontólogos. Nessa dinâmica em equipe se tem pontos positivos, como a maior troca entre os profissionais, o que gera benefícios ao paciente, porém também se tem alguns problemas, como a dificuldade de comunicação entre diferentes especialistas. Objetivos: Elucidar a importância e a relevância das equipes interdisciplinares na área da saúde. Metodologia: Trata-se de uma revisão de literatura, por intermédio da busca de artigos e textos publicados entre 1994 e 2021, utilizando os seguintes termos de pesquisa (palavras-chave e delimitadores): interdisciplinaridade, saúde, pacientes, equipe interdisciplinar.  Foram utilizadas as bases de dados: Scielo, Pepsic, Google Acadêmico. Dessa forma, foram selecionados 10 artigos e textos na língua portuguesa para servir de base para este trabalho. Revisão de Literatura: O termo interdisciplinaridade, embora atualmente bastante difundido e empregado, foi proposto ainda no século XX e ainda apresenta algumas divergências a respeito do seu real significado. Com as mudanças sociais, econômicas e históricas ocorridas ao longo dos anos fizeram com que os problemas de saúde assumissem um caráter multifacetado, fazendo, dessa forma, surgir a necessidade de uma integração maior dos profissionais de saúde. A Medicina, pautada, principalmente, na busca pela cura dos enfermos, em muito pode se beneficiar do uso de equipes interdisciplinares, haja vista que a complexidade inerente a cada paciente exige que o profissional atue de acordo com sua área do saber para que o melhor tratamento individualizado seja ofertado. Contudo, se tem principalmente três obstáculos que impedem ou atrapalham a utilização da interdisciplinaridade pela equipe de saúde no tratamento dos pacientes: a ineficácia das instituições de ensino na formação de profissionais orientados para essa prática, a presença de uma estrutura rígida de poder por parte de algumas instituições e a inadequada operacionalização do próprio conceito de interdisciplinaridade durante o atendimento ao paciente. Conclusão: Portanto, embora existam vários benefícios associados à atuação das equipes interdisciplinares, ainda são necessárias mudanças no contexto atual para que o funcionamento adequado dessas diversas áreas seja otimizado

The Peptide Salamandrin-I Modulates Components Involved in Pyroptosis and Induces Cell Death in Human Leukemia Cell Line HL-60

Amphibian secretions have been extensively investigated for the production of bioactive molecules. Salamandrin-I is an antioxidant peptide, isolated from the skin secretion of the fire salamander, that has induced no toxicity in microglia or erythrocytes. Importantly, the administration of antioxidants may constitute an adequate therapeutic approach to cancer treatment. Here, with the purpose of better characterizing the therapeutic potential of salamandrin-I, we investigated whether this antioxidant peptide also exerts anticancer activity, using the human leukemia cell line HL-60 as a cancer model. Salamandrin-I treatment induced a significant reduction in HL-60 proliferation, which was accompanied by cell cycle arrest. Furthermore, the peptide-induced cell death showed a significant increase in the LDH release in HL-60 cells. The cellular toxicity exerted by salamandrin-I is possibly related to pyroptosis, since the HL-60 cells showed loss of mitochondrial membrane potential and hyperexpression of inflammasome components following the peptide treatment. This is the first demonstration of the anticancer potential of the salamandrin-I peptide. Such results are important, as they offer relevant insights into the field of cancer therapy and allow the design of future bioactive molecules using salamandrin-I as a template

Influência da ciclicidade na taxa de prenhez em animais submetidos ao programa IATF / Influence of the cyclicity on the pregnancy rate in animals submitted to the IATF program

Um dos principais fatores que afeta a produtividade da bovinocultura é a baixa eficiência reprodutiva nos rebanhos brasileiros. Nos últimos anos a utilização da técnica de inseminação artificial em tempo fixo (IATF) vem ganhando destaque por apresentar soluções para esse problema. A utilização desta biotecnologia garante resultados satisfatórios quanto à taxa de prenhez e a eficiência reprodutiva dos rebanhos, recentemente diversos estudos têm demonstrado que vacas cíclicas apresentam maiores taxas de prenhez na IATF.  O objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito da ciclicidade após IATF em fêmeas cíclica e acíclicas, utilizando 215 fêmeas multíparas da raça Nelore onde, após a avaliação da dinâmica folicular, foram classificadas como cíclicas (presença de corpo lúteo) e acíclicas (ausência de corpo lúteo). Verificou-se que as fêmeas cíclicas tiveram maior taxa de prenhez em relação aos animais que se encontravam em anestro pós-parto, tanto no protocolo de IATF quanto ao final da estação de monta com repasse com touros. 

Hormonioterapia com o uso de desmame temporário em bovinos de corte / Hormone therapy with the use of temporary weaning in beef cattle

O Objetivo deste estudo foi verificar a taxa de prenhez em protocolos de IATF do desmame temporário e utilizando 300UI de eCG, em vacas paridas da raça Nelore. Foram utilizados 168 animais com ECC médio de 3.0, com período pós parto médio de 60 dias, submetidas ao protocolo de IATF. No D9 do protocolo de IATF, em 75 animais realizou-se o desmame temporário, enquanto no segundo grupo aplicou-se 300UI de eCG em 93 animais. Verificou-se que o DT e uso de eCG não apresentou diferença significativa. 

Stress distribution around short implants with different frictional joint designs: a photoelastic colorimetric analysis / Distribuição de tensão em torno de implantes curtos com diferentes designs de fricção: uma análise colorimétrica

Aim: To compare, biomechanically, two types of short implants with different frictional implant/abutment joint designs. Methods: Two groups (n = 10) were divided in straight platform (DSP, 5 x 5.5 mm) and angled platform (30°) (Kopp, 5 x 6.0 mm). The loads applied axially were 100 N, 200 N and 400 N. A photoelastic colorimetric analysis around the implants was performed, based on the magenta fringes, measured in pixels. The data were analyzed by the One-Way ANOVA with repeated measures, Tukey and Mann-Whitney U tests (p < 0.05). Results: The short implants demonstrated similar biomechanical behavior, but statistical difference occurred in the group Kopp, under the axial load of 400 N (p < 0.05). Conclusion: The implant design showed influence on the stress distribution around the locking taper short dental implants. In both groups, the area of greatest stress distribution was at the apical region.