Estudio y diagnóstico de nuevas virosis emergentes en vid (Vitis vinifera L.)

La vid (Vitis vinifera L.) es una de las especies vegetales más susceptibles de padecer infecciones virales. En Europa y España, solo cinco especies virales (GFLV, ArMV, GLRaV-1, GLRaV-3 y GFkV), de las treinta y una patógenas de la vid, se encuentran bajo restricción legislativa. Algunos de estos son virus emergentes no contemplados en la legislación, siendo GPGV, GAMaV, GRLDaV, GVE, GVF, GVT, GRBV y GVCV las principales especies de virus emergentes que pueden constituir una amenaza para los cultivos españoles. Por tanto, el objetivo general de la presente tesis es conocer la situación de las principales virosis emergentes de vid en España y desarrollar herramientas de diagnóstico que puedan implementar programas de prevención temprana, selección sanitaria, certificación y erradicación. Los resultados de la búsqueda de virosis emergentes, realizada en diferentes años, denominaciones de origen y variedades de vid, muestran que: (1) virus como GLRaV-1, GLRaV-2, GLRaV-3, GFkV, GFLV y GRSPaV siguen teniendo una presencia destacada en los viñedos españoles; (2) se han detectado, con prevalencias bajas, y solo en las denominaciones de origen (D.O.) Utiel-Requena y Manchuela, los virus emergentes GPGV y GAMaV, habiendo sido este último detectado por primera vez en España en este estudio; (3) no ha sido detectada la presencia de los virus GVT, GVE, GVF, GRBV, GVCV y GRLDaV. La caracterización genética de los virus emergentes detectados en España ha demostrado que: (1) algunos aislados españoles de GPGV presentan un nuevo polimorfismo, no descrito hasta ahora, que afecta a la proteína de movimiento (MP); (2) existe una alta diversidad genética en los aislados españoles, lo cual sugiere la introducción por múltiples vías de este virus en las D.O. Utiel-Requena y Manchuela; y (3) la caracterización genética de los asilados GAMaV españoles evidencia que estos difieren del resto de los aislados virales descritos en otras partes del mundo, sugiriendo por tanto que la introducción de este virus en España no es reciente. Adicionalmente, se han desarrollado tres nuevos métodos de detección, uno basado en PCR convencional para la detección de GAMaV y dos basados en PCR en tiempo real para la detección y cuantificación absoluta de GRLDaV y GPGV, los cuales han sido aplicados con éxito para el diagnóstico de los tres virus tanto en plantas de vid como en sus posibles vectores de transmisión. Estos nuevos métodos de detección constituyen herramientas útiles para abordar futuros estudios epidemiológicos y prevenir la dispersión de estos patógenos en España y en otros territorios del mundo. Y, por último, se ha identificado por primera el genoma completo del micovirus penicillimonavirus gammaplasmopara, asociado a una nueva sintomatología de vid de etiología desconocida. Los estudios de caracterización molecular y aislamiento de partículas virales de esta especie viral sugieren que podría tratarse del primer virus bipartito de la familia Mymonaviridae

Estudio y diagnóstico de nuevas virosis emergentes en vid (Vitis vinifera L.)

La vid (Vitis vinifera L.) es una de las especies vegetales más susceptibles de padecer infecciones virales. En Europa y España, solo cinco especies virales (GFLV, ArMV, GLRaV-1, GLRaV-3 y GFkV), de las treinta y una patógenas de la vid, se encuentran bajo restricción legislativa. Algunos de estos son virus emergentes no contemplados en la legislación, siendo GPGV, GAMaV, GRLDaV, GVE, GVF, GVT, GRBV y GVCV las principales especies de virus emergentes que pueden constituir una amenaza para los cultivos españoles. Por tanto, el objetivo general de la presente tesis es conocer la situación de las principales virosis emergentes de vid en España y desarrollar herramientas de diagnóstico que puedan implementar programas de prevención temprana, selección sanitaria, certificación y erradicación. Los resultados de la búsqueda de virosis emergentes, realizada en diferentes años, denominaciones de origen y variedades de vid, muestran que: (1) virus como GLRaV-1, GLRaV-2, GLRaV-3, GFkV, GFLV y GRSPaV siguen teniendo una presencia destacada en los viñedos españoles; (2) se han detectado, con prevalencias bajas, y solo en las denominaciones de origen (D.O.) Utiel-Requena y Manchuela, los virus emergentes GPGV y GAMaV, habiendo sido este último detectado por primera vez en España en este estudio; (3) no ha sido detectada la presencia de los virus GVT, GVE, GVF, GRBV, GVCV y GRLDaV. La caracterización genética de los virus emergentes detectados en España ha demostrado que: (1) algunos aislados españoles de GPGV presentan un nuevo polimorfismo, no descrito hasta ahora, que afecta a la proteína de movimiento (MP); (2) existe una alta diversidad genética en los aislados españoles, lo cual sugiere la introducción por múltiples vías de este virus en las D.O. Utiel-Requena y Manchuela; y (3) la caracterización genética de los asilados GAMaV españoles evidencia que estos difieren del resto de los aislados virales descritos en otras 12 Resumen Resumen partes del mundo, sugiriendo por tanto que la introducción de este virus en España no es reciente. Adicionalmente, se han desarrollado tres nuevos métodos de detección, uno basado en PCR convencional para la detección de GAMaV y dos basados en PCR en tiempo real para la detección y cuantificación absoluta de GRLDaV y GPGV, los cuales han sido aplicados con éxito para el diagnóstico de los tres virus tanto en plantas de vid como en sus posibles vectores de transmisión. Estos nuevos métodos de detección constituyen herramientas útiles para abordar futuros estudios epidemiológicos y prevenir la dispersión de estos patógenos en España y en otros territorios del mundo. Y, por último, se ha identificado por primera el genoma completo del micovirus penicillimonavirus gammaplasmopara, asociado a una nueva sintomatología de vid de etiología desconocida. Los estudios de caracterización molecular y aislamiento de partículas virales de esta especie viral sugieren que podría tratarse del primer virus bipartito de la familia Mymonaviridae

Diseño de una política salarial a partir de la valoración por puntos de los cargos técnicos de una firma auditora en la ciudad de Quito, en el periodo 2019-2020

El presente trabajo de investigación tiene como finalidad la elaboración de una política salarial a partir de un modelo de valoración de cargos por puntos y conformación de una estructura salarial, de forma que el establecimiento de sueldos del personal auditor se lo realice de manera técnica a fin de que exista una equidad interna en todos los cargos y categorías en la Firma Auditora, para lo cual se propone elaborar una política salarial que contenga los lineamientos necesarios para el establecimiento de sueldos para el personal auditor. Los cargos que intervienen para el presente estudio incluyen: Asistentes, Seniors, Supervisores, Gerentes y Socios Técnicos de Auditoría de la ciudad de Quito como Guayaquil, es así que, aplicada la política salarial como resultado se espera que existe una adecuada administración salarial en la que la Firma Auditora mantiene un control del costo del personal y por otro lado el personal auditor se sienta retribuido de manera equitativa, considerando las exigencias del cargo y el desempeño mostrado. También es importante mencionar, que a fin de que la política salarial sea una herramienta eficaz, es necesario que la misma sea revisada y actualizada conforme lo determine el comité evaluador y la alta gerencia; y en todo proceso de renovación es importante que dichos cambios sean comunicados oportunamente al personal

Stoichiometric analysis of self-maintaining metabolisms

This paper presents an extension of stoichiometric analysis in systems where the catalytic compounds (enzymes) are also intermediates of the metabolic network (dual property), so they are produced and degraded by the reaction network itself. To take this property into account, we introduce the definition of enzyme-maintaining mode, a set of reactions that produces its own catalyst and can operate at stationary state. Moreover, an enzyme-maintaining mode is defined as elementary with respect to a given reaction if the removal of any of the remaining reactions causes the cessation of any steady state flux through this reference reaction. These concepts are applied to determine the network structure of a simple self-maintaining system

El estudio del viroma del olivo mediante secuenciación masiva permite el avance de la taxonomía viral y plantea nuevos interrogantes

Se ha descrito por primera vez la secuencia completa de 16700 nt del virus asociado al amarilleamiento de la hoja de olivo (OLYaV), un closterovirus que no estaba asignado a género y de cuyo genoma solo se conocían 4605 nt. El descubrimiento de la organización del genoma y las relaciones filogenéticas con todos los miembros de la familia Closteroviridae en las proteínas compartidas (ORF1a, ORF1b, HSP70h, HSP90h y CP) ha permitido la propuesta y creación del nuevo género Olivavirus compuesto por este virus y otras dos especies virales no asignadas a género, que comparten su proximidad filogenética en todas las proteínas, la codificación de una proteína de la familia de las taumatinas y la ausencia de la proteína menor de la cápsida (CPm)

Real-time on-site detection of the three ‘Candidatus Liberibacter’ species associated with HLB disease: a rapid and validated method

Huanglongbing (HLB) is a devastating disease that affects all commercial citrus species worldwide. The disease is associated with bacteria of three species of the genus ‘Candidatus Liberibacter’ transmitted by psyllid vectors. To date, HLB has no cure, so preventing its introduction into HLB-free areas is the best strategy to control its spread. For that, the use of accurate, sensitive, specific, and reliable detection methods is critical for good integrated management of this serious disease. This study presents a new real-time recombinase polymerase amplification (RPA) protocol able to detect the three ‘Ca. Liberibacter’ species associated with HLB in both plant and insect samples, validated according to European and Mediterranean Plant Protection Organization (EPPO) guidelines and tested on 365 samples from nine different geographic origins. This new protocol does not require nucleic acid purification or specialized equipment, making it ideal to be used under field conditions. It is based on specific primers and probe targeting a region of fusA gene, which shows a specificity of 94%–100%, both in silico and in vitro, for the ‘Ca. Liberibacter’ species associated with HLB. The analytical sensitivity of the new protocol is excellent, with a reliable detection limit in the order of 101 copies per microliter in HLB-infected plant and insect material. The repeatability and reproducibility of the new methods showed consistent results. Diagnostic parameters of the new RPA protocol were calculated and compared with the gold standard technique, a quantitative real-time PCR, in both crude extracts of citrus plants and insect vectors. The agreement between the two techniques was almost perfect according to the estimated Cohen’s kappa index, with a diagnostic sensitivity and specificity of 83.89% and 100%, respectively, and a relative accuracy of 91.59%. Moreover, the results are obtained in less than 35 min. All these results indicate the potential of this new RPA protocol to be implemented as a reliable on-site detection kit for HLB due to its simplicity, speed, and portability

Internalisation of externalities in the spanish power generation sector. Impact of the national plan of allocation of emissions in the cost of generation

The electric generation produces damages (externalities or environmental costs) that are not contemplated in the costs of this activity. A way to include these damages in the cost is based on the emission rights. In these instruments the total amount of allowed contamination is fixed. It is assigned to the polluting agents by means of emission permissions, creating a market of these, in which the agents can exchange them based on their interests. In 2005, Spain undertook the National Plan of Allocation of Emission Rights 2005-2007 (PNA 2005-2007). This plan has established an emission limit to the electrical sector and it has been translated in the allocation of emission rights. If this emissions limit is surpassed they must acquire rights that cover the exceeded. Thus, the companies must reduce their emissions without increasing their costs. What mix of generation is have to be implement in order to minimize the emissions, avoiding to charge the emission rights in the total generation cost?. If it is impossible to cover the demand without this extra cost, how to diminish it? These questions can be responded using optimization methods

Implementation of a voltage sag characterization based on a DSP platform

Voltage sags are nowadays the first power quality problem in the distribution power system. This work evaluates the real implementation of a voltage sag characterization based on a DSP platform. Several classification methods for voltage sags have been presented in the literature. Here the Bollen’s classification is tested. Automation of sag assessment is desirable because manual analysis may be quite difficult. Thus, the fuzzy logic technique is chosen for this aim. This logic system generalizes the classical two-valued logic for reasoning under uncertainty. The fuzzy algorithm was first tested by simulation and then it was translated into C code in order to be implemented in a DSP based measurement platform, obtaining a satisfactory result.The authors would like to thank the support of the Spanish Government under the CICYT research project DPI2002-04416-C04-01

Usabilidad y accesibilidad en sitios web de los Gobiernos Autónomos Descentralizados Municipales en la provincia de Manabí

Websites have become a necessary tool to obtain information, carry out some type of management and among other things. This inquiry reveals the usability and accessibility of the public interest websites of the Autonomous Decentralized Municipal Governments, using the usability standards and Web Content Accessibility Guidelines (WCAG) 2.0 with a level of compliance. To carry out the study and analysis of the websites, the automatic TAW online tool was used, on the content structure of HTML and CSS and laboratory technologies based on the usability and accessibility standards determined for web pages of this type. From the study, it was possible to obtain the results that made it possible to determine whether these web pages comply with accessibility standards and whether they are robust to be used by different types of users without any exception.Los sitios web se han convertido en una herramienta necesaria para obtener información, realizar algún tipo de gestión y entre otras cosas más. Esta indagación revela la usabilidad y accesibilidad de los sitios web de interés público de los Gobiernos Autónomos Descentralizados Municipales en la provincia de Manabí, empleando los estándares de usabilidad y Pautas de Accesibilidad para el Contenido Web (WCAG) 2.0 con un nivel de conformidad. Para realizar el estudio y análisis de los sitios web se utilizó la herramienta automática de TAW online, sobre la estructura de contenido de las tecnologías HTML Y CSS basados en los estándares de usabilidad y accesibilidad determinadas para las páginas web de este tipo. Del estudio se logró obtener los resultados que permitieron determinar si estas páginas web cumplen con los estándares de accesibilidad y si son robustas para ser utilizadas por diferentes tipos de usuarios sin excepción alguna

Nueva herramienta de diagnóstico para la detección rápida de las tres especies de Liberibacter asociadas al HLB: RPA-universal-HLB

El Huanglongbing (HLB) es la enfermedad más devastadora de los cítricos que se conoce, y compromete seriamente la supervivencia de la citricultura mundial. Se asocia a tres especies de bacterias fitopatógenas no cultivables: `Candidatus Liberibacter asiaticus´, `Ca. L. africanus´ y `Ca. L. americanus´, que son transmitidas por insectos vectores de la familia Psyllidae. El HLB se encuentra ampliamente distribuido en Asia, América y África, pero hasta el momento no se ha detectado en Europa, aunque sí uno de los vectores