COMPARAÇÃO ENTRE MÉTODOS DE DIAGNÓSTICO DE Cryptosporidium spp. EM AMOSTRAS FECAIS DE BOVINOS

Cryptosporidiosis is an enteric disease with varied clinical manifestations and eventual mortality, mainly in young animals, causing impairment in development. This study aimed to compare staining techniques for the detection of Cryptosporidium spp. oocysts in dairy calf feces from 22 municipalities of the southern region of Rio Grande do Sul, Brazil. Fecal samples were collected directly from the rectum of 359 calves of different breeds, male and female, up to twelve months old. Cryptosporidium spp. oocysts were observed using the colorimetric methods of Kinyoun, Safranina and Ziehl-Neelsen and were visualized under optical microscopy and by fluorescence with auramine stain. Cryptosporidium spp. oocysts were observed in 6.69% (24/359) of the analyzed samples. From these results it can be inferred that the four colorimetric methods were effective in the detection of Cryptosporidium spp., being able to reveal this parasite even in samples   with a reduced number of oocysts. There was no statistically significant difference between the methods for diagnosis, even though, the Auramine staining fluorescence method presented the best result in comparison with the colorimetric techniques used in this study.Criptosporidiose é uma doença entérica com manifestações clínicas variadas e eventual mortalidade, principalmente em animais jovens, causando prejuízos ao desenvolvimento. Este estudo objetivou comparar técnicas de coloração para a detecção de oocistos de Cryptosporidium spp. em fezes de bezerros leiteiros, provenientes dos 22 municípios da região Sul do Rio Grande do Sul, Brasil. Amostras fecais foram colhidas diretamente do reto de 359 bezerros de diferentes raças, machos e fêmeas, com até doze meses de idade. Oocistos de Cryptosporidium spp. foram observados por meio dos métodos colorimétricos de Kinyoun, Safranina e Ziehl-Neelsen e visualizados sob microscopia ótica e por fluorescência com coloração de Auramina. Oocistos de Cryptosporidium spp. foram observados em 6,69% (24/359) das amostras analisadas. A partir destes resultados pode-se inferir que os quatros métodos colorimétricos, foram eficazes na detecção de Cryptosporidium spp., sendo capaz de revelar este parasito mesmo em amostras com reduzido número de oocistos. Não houve diferença estatisticamente significante entre os métodos para o diagnóstico, apesar do método de fluorescência com coloração de Auramina ter apresentado o melhor resultado em comparação com as técnicas colorimétricas utilizadas neste estudo

Avaliação das atividades antifúngica, antimicobacteriana e larvicida de Duroia macrophylla e D. saccifera

Bachground and objective: The wide Amazonian biodiversity has been identified as a source of natural product candidates to various pharmacological activities, particularly in combating infectious diseases. Some species, such as the genus Duroia, belonging to the Rubiaceae family, has been characterized by the production of secondary metabolites with important biological properties, but there are few studies with species of this genus. Thus, the objective of this study was to evaluate the antimycobacterial, antifungal and antiparasitic activity of D. macrophylla and D. saccifera extracts by determining the minimum inhibitory concentration and minimum larvicide concentration. Methods: Were collected plant materials of the D. macrophylla and D. saccifera in Forest Reserve A. Ducke in Manaus AM, from which were prepared dichloromethane, methanol and aqueous extracts and determined the minimum inhibitory concentration and larvicidal concentration. Results: With regard to D. saccifera¸ extracts the dichloromethane extract of the branches was the most active against the fungal species and mycobacterial strains evaluated. On the other hand, the methanol and dichloromethane extract of the D. macrophylla leaves, were most active against Candida sp. and Mycobacterium tuberculosis, respectively, but none of the six evaluated extracts showed antiparasitic activity against Toxocara canis. Conclusion: These results demonstrate the antimicrobial properties of these Amazonian plants for the development of new therapies in the treatment of infectious diseases such as tuberculosis and candidiasis.Justificativa e objetivos: A vasta biodiversidade amazônica tem sido apontada como uma fonte de produtos naturais candidatos a diversas atividades farmacológicas, principalmente no combate a doenças infecciosas. Algumas espécies, tais como as pertencentes ao gênero Duroia, da família Rubiaceae, têm sido caracterizadas pela produção de metabólitos secundários com propriedades biológicas importantes, porém são escassos os estudos com espécies deste gênero. Desta forma, o objetivo deste estudo foi avaliar a atividade antimicobacteriana, antifúngica e antiparasitária de extratos de D. macrophylla e D. saccifera. Métodos: Foram coletados materiais vegetais de D. macrophylla e D. saccifera na Reserva Florestal A. Ducke em Manaus- AM, a partir dos quais foram preparados extratos diclorometânico, metanólico e aquoso e determinada a concentração inibitória e concentração larvicida mínima. Resultados: No que diz respeito aos extratos de D. saccifera¸ o extrato diclorometânico dos galhos foi o mais ativo frente às espécies fúngicas e as cepas micobacterianas avaliadas. Por outro lado, o extrato metanólico e o diclorometânico das folhas de D. macrophylla, foram os mais ativos frente a Candida sp. e Mycobacterium tuberculosis, respectivamente, porém, nenhum dos seis extratos avaliados apresentaram atividade antiparasitária frente a Toxocara canis. Conclusão: Esses resultados demonstram as propriedades antimicrobianas dessas plantas amazônicas para o desenvolvimento de novas alternativas terapêuticas no tratamento de doenças infecciosas, tais como a tuberculose e candidíase

Avaliação das atividades antifúngica, antimicobacteriana e larvicida de Duroia macrophylla e D. saccifera

Justificativa e objetivos: A vasta biodiversidade amazônica tem sido apontada como uma fonte de produtos naturais candidatos a diversas atividades farmacológicas, principalmente no combate a doenças infecciosas. Algumas espécies, tais como as pertencentes ao gênero Duroia, da família Rubiaceae, têm sido caracterizadas pela produção de metabólitos secundários com propriedades biológicas importantes, porém são escassos os estudos com espécies deste gênero. Desta forma, o objetivo deste estudo foi avaliar a atividade antimicobacteriana, antifúngica e antiparasitária de extratos de D. macrophylla e D. saccifera. Métodos: Foram coletados materiais vegetais de D. macrophylla e D. saccifera na Reserva Florestal A. Ducke em Manaus- AM, a partir dos quais foram preparados extratos diclorometânico, metanólico e aquoso e determinada a concentração inibitória e concentração larvicida mínima. Resultados: No que diz respeito aos extratos de D. saccifera¸ o extrato diclorometânico dos galhos foi o mais ativo frente às espécies fúngicas e as cepas micobacterianas avaliadas. Por outro lado, o extrato metanólico e o diclorometânico das folhas de D. macrophylla, foram os mais ativos frente a Candida sp. e Mycobacterium tuberculosis, respectivamente, porém, nenhum dos seis extratos avaliados apresentaram atividade antiparasitária frente a Toxocara canis. Conclusão: Esses resultados demonstram as propriedades antimicrobianas dessas plantas amazônicas para o desenvolvimento de novas alternativas terapêuticas no tratamento de doenças infecciosas, tais como a tuberculose e candidíase

ANTHELMINTIC ACTIVITY OF LAPACHOL, β-LAPACHONE AND ITS DERIVATIVES AGAINST Toxocara canis LARVAE

Anthelmintics used for intestinal helminthiasis treatment are generally effective; however, their effectiveness in tissue parasitosis (i.e. visceral toxocariasis) is moderate. The aim of this study was to evaluate the in vitro activity of lapachol, β-lapachone and phenazines in relation to the viability of Toxocara canis larvae. A concentration of 2 mg/mL (in duplicate) of the compounds was tested using microculture plates containing Toxocara canis larvae in an RPMI-1640 environment, incubated at 37 °C in 5% CO2 tension for 48 hours. In the 2 mg/mL concentration, four phenazines, lapachol and three of its derivatives presented a larvicide/larvistatic activity of 100%. Then, the minimum larvicide/larvistatic concentration (MLC) test was conducted. The compounds that presented the best results were nor-lapachol (MLC, 1 mg/mL), lapachol (MLC 0.5 mg/mL), β-lapachone, and β-C-allyl-lawsone (MLC, 0.25 mg/mL). The larvae exposed to the compounds, at best MLC with 100% in vitro activity larvicide, were inoculated into healthy BALB/c mice and were not capable of causing infection, confirming the larvicide potential in vitro of these compounds.Os anti-helmínticos empregados no tratamento das helmintoses intestinais, de modo geral, são eficazes, porém nas parasitoses teciduais, como é o caso da toxocaríase visceral, a eficácia é moderada. Este estudo teve como objetivo avaliar in vitro a atividade do lapachol, β-lapachona e fenazinas derivadas da β-lapachona sobre a viabilidade de larvas de Toxocara canis. Os compostos foram testados na concentração de 2 mg/mL (em duplicata) em placas de microcultivo, contendo larvas de T. canis em meio RPMI-1640, sendo incubados, a 37 °C, em tensão de CO2 de 5%, por 48 horas. Na concentração de 2 mg/mL, quatro fenazinas, o lapachol e três derivados, apresentaram atividade larvicida/larvostática de 100%. A seguir, foi realizado o teste de concentração larvicida/larvostártica mínima (CLM). Os compostos que apresentaram os melhores resultados foram o nor-lapachol (CLM, 1 mg/mL), lapachol (CLM, 0,5 mg/mL), a β-lapachona e a β-C-alil-lausona (CLM, 0,25 mg/mL). As larvas expostas aos compostos, na melhor CLM 100% in vitro foram inoculadas em camundongos BALB/c saudáveis não sendo capazes de causar infecção, confirmando o potencial larvicida in vitro desses compostos

Avaliação das atividades antifúngica, antimicobacteriana e larvicida de Duroia macrophylla e D. saccifera

Justificativa e objetivos: A vasta biodiversidade amazônica tem sido apontada como uma fonte de produtos naturais candidatos a diversas atividades farmacológicas, principalmente no combate a doenças infecciosas. Algumas espécies, tais como as pertencentes ao gênero Duroia, da família Rubiaceae, têm sido caracterizadas pela produção de metabólitos secundários com propriedades biológicas importantes, porém são escassos os estudos com espécies deste gênero. Desta forma, o objetivo deste estudo foi avaliar a atividade antimicobacteriana, antifúngica e antiparasitária de extratos de D. macrophylla e D. saccifera. Métodos: Foram coletados materiais vegetais de D. macrophylla e D. saccifera na Reserva Florestal A. Ducke em Manaus- AM, a partir dos quais foram preparados extratos diclorometânico, metanólico e aquoso e determinada a concentração inibitória e concentração larvicida mínima. Resultados: No que diz respeito aos extratos de D. saccifera¸ o extrato diclorometânico dos galhos foi o mais ativo frente às espécies fúngicas e as cepas micobacterianas avaliadas. Por outro lado, o extrato metanólico e o diclorometânico das folhas de D. macrophylla, foram os mais ativos frente a Candida sp. e Mycobacterium tuberculosis, respectivamente, porém, nenhum dos seis extratos avaliados apresentaram atividade antiparasitária frente a Toxocara canis. Conclusão: Esses resultados demonstram as propriedades antimicrobianas dessas plantas amazônicas para o desenvolvimento de novas alternativas terapêuticas no tratamento de doenças infecciosas, tais como a tuberculose e candidíase