Avaliação do potencial dos fungos do gênero Rhizopus spp na produção de substâncias bioativas com ação antioxidante utilizando diferentes substratos

Resumo: O objetivo principal deste trabalho foi testar diferentes linhagens fúngicas do gênero Rhizopus sp. em diferentes substratos, dentre eles a soja. 17 linhagens do gênero Rhizopus sp. foram selecionadas para estudos por fermentação no estado sólido. Durante o processo de fermentação no estado sólido utilizando as linhagens foram realizadas análises de quantificação de atividade antioxidante pelo método de DPPH, degradação de fator antinutricional pela determinação de atividade de fitases e atividade proteolítica. Dentre as 17 linhagens, duas linhagens Rhizopus LPB-R.5 e LPB-R.6 apresentaram grande potencial para a produção de substâncias antioxidantes durante a fermentação. Os processos de fermentação FES e FSm utilizando diferentes substratos foram estudados. Estudos cinéticos do processo de FES foram realizados com misturas de substratos: mistura de grãos de soja e arroz integral, mistura de soja e milho, as quais foram comparadas com os resultados das fermentações realizadas somente com a soja como substrato. A quantificação de compostos antioxidantes bem como a identificação da natureza destas substâncias produzidas durante a fermentação também foram realizadas. O maior incremento de compostos fenólicos foi observado após 60 horas de FES utilizando a linhagem Rhizopus LPB-R.05. As substâncias antioxidantes produzidas durante a fermentação no estado sólido foram identificadas: ácido gálico, ácido ferrúlico, rutina, miricetina, ácido trans-cinâmico, quercetina e caempferol. A substância antioxidante produzida em maior concentração foi o ácido trans-cinâmico (124,7 mg/L) em fermentação de soja e (103,3 mg/L) em FES utilizando mistura de soja e arroz por Rhizopus LPB-R.05. Além destas substâncias foram identificadas e quantificadas as isoflavonas genisteína e daidzeína

Inibição do crescimento de bactérias Gram-negativas em microdiluição por tratamento com Nisina e EDTA

The outer membrane composition of Gram-negative bacteria provides more resistance against the action of antimicrobial agents from the class of bacteriocins, in comparison to Gram-positive bacteria, naturally more susceptible. Aiming the control of proliferation Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa and Salmonella Typhimurium, antimicrobial assays were performed with nisin as biocidal agent (concentrations 123 to 1,111 AU mL-1) and EDTA as chelating agent, compared to a Gram-positive (Staphylococcus aureus ATCC25923). The susceptibility evaluations were performed in broth microdilution with Mueller-Hinton medium and inoculum with 106 CFU mL-1 of indicator bacterium, and the results were obtained by optical density readings (630 nm) at regular intervals during the incubation period. It was observed that EDTA is capable of reducing cell viability of P. aeruginosa. The bacteriocin nisin demonstrated effective antimicrobial action to four indicator bacteria, under different concentrations. The combined treatments of nisin+EDTA obtained high inhibition rates, and the presence of EDTA was significant only to Gram-negative bacteria. Thus, treatments accounted effective strategies to promote inhibition of cell growth during microdilution broth assays.A composição da membrana externa das bactérias Gram-negativas fornece mais resistência à ação dos agentes antimicrobianos da classe das bacteriocinas, em comparação às bactérias Gram-positivas, naturalmente mais suscetíveis. Com o objetivo de controlar a proliferação de Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa e Salmonella Typhimurium, foram realizados ensaios antimicrobianos com nisina como agente biocida (concentrações 123 a 1.111 AU mL-1) e EDTA como agente quelante, comparado a um Gram-positivo (Staphylococcus aureus ATCC25923) . As avaliações de suscetibilidade foram realizadas em microdiluição em caldo com meio Mueller-Hinton e inóculo com 106 UFC-1 de bactéria indicadora, e os resultados foram obtidos por leituras de densidade óptica (630 nm) em intervalos regulares durante o período de incubação. Observou-se que o EDTA é capaz de reduzir a viabilidade celular de P. aeruginosa. A bacteriocina nisina demonstrou ação antimicrobiana eficaz para quatro bactérias indicadoras, sob diferentes concentrações. Os tratamentos combinados de nisina + EDTA obtiveram altas taxas de inibição e a presença de EDTA foi significativa apenas para bactérias Gram-negativas. Assim, os tratamentos representaram estratégias eficazes para promover a inibição do crescimento celular durante ensaios de caldo de microdiluição

Selection of Bacillus thuringiensis Berliner strains to control Aedes aegypti Linnaeus

The present study aimed to select strains of Bacillus thuringiensis with insecticidal activity against Aedes aegypti. It was tested sixteen strains of bacteria, isolated from Paraná state, Brazil, that were used in laboratory assays with mosquito larvae. Tests were carried out in two stages, first one to select the most efficient strains (screening) and second to estimate LC50. The protein profile of the highest toxicity of strain was obtained by SDS-PAGE (sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis). The best performance of larval mortality was produced by BR-01 strain, which 96.7% mortality rate, significantly higher than others. In the second part, there was obtained a LC50 of 9.07 µL.L-1 fermented extract. The protein profile revealed many peptides between 15 and 140kDa, similar to that reported in Bacillus thuringiensis ser. israelensis strains which high toxicity to mosquito species.O presente trabalho buscou selecionar cepas de Bacillus thuringiensis com atividade inseticida contra Aedes aegypti. Foram testadas 16 estirpes da bactéria provenientes do estado do Paraná, Brasil, que foram utilizadas em ensaios laboratoriais com larvas do culicídeos. Os testes foram realizados em duas etapas, a primeira com a seleção de cepas e a segunda para estimar a CL 50 das cepas com melhores resultados. O perfil protéico do isolado de maior toxicidade foi obtido por SDS-PAGE (dodecil sulfato de sódio –eletroforese em gel de poliacrilamida). O melhor resultado de mortalidade foi produzido com a cepa BR-01, que produziu 96,7% de mortalidade de A. aegypti, valor significativamente superior aos demais. Na segunda fase, obteve-se CL50 de 9,07 μL.L -1 de extrato fermentado. O perfil protéico revelou peptídeos entre 15 e 140 kDa, resultado semelhante ao relatado nas cepas de Bacillus thuringiensis var. israelensis de maior toxicidade às espécies de culicídeo

Production biomolecule with inhibitory activity against Gram-negative bacteria isolated from faeces of broilers and swine

The aim of this study was to investigate the potential of lactic acid bacteria, bacilli and yeasts isolates to produce antimicrobial substances, especially against Gram-negative bacteria isolated from the animal faeces, searching for a new alternative to control the enteritis diseases in animal health. Evaluations were performed by microdilution in broth using crude extract obtained from the cultivation of 272 strains against Escherichia coli, S. Typhimurium, S. Enteritidis and Pseudomonas aeruginosa. Thirty-five lactic acid bacteria presented some antimicrobial action. One Lactobacillus isolate, named FLPB-1, was selected to studies the kinetics of the production. An important increase in the production was obtained when the producer strain had cell-to-cell contact with a Gram-positive inducer culture. Maximal production of antimicrobial compounds was obtained in the beginning of stationary phase and the addition of urea in the medium increased the inhibition rate