ESTABELECIMENTO IN VITRO DE SEMENTES DE GOJI BERRY COM USO DE ÁCIDO GIBERÉLICO

O Goji Berry (Lycium barbarum L.) é uma pequena fruta vermelha amplamente consumida no mundo. Possui propriedades medicinais benéficas, vitaminas do complexo B, ácido ascórbico, carotenóides e polifenóis. Diante dessa importância comercial, a propagação in vitro dela é fundamental para a obtenção de mudas de qualidade. O objetivo deste trabalho foi avaliar a influência de quatro doses de ácido giberélico (GA3) na germinação de sementes de Goji Berry. As sementes foram desinfestadas em câmara de fluxo laminar, imersas em álcool 70%, agitadas por 30 segundos, e posteriormente em hipoclorito de sódio, em concentração de 2,5% de cloro ativo, adicionado de duas gotas de Tween 20, durante 15 minutos. Na sequência, as sementes foram colocadas em tubos de ensaio, contendo 7 mL dos sais e vitaminas do meio de cultura MS, tendo como tratamentos as doses 0 mg.L-1, 0,2 mg.L-1, 0,4 mg.L-1 e 0,6 mg.L-1 de ácido giberélico, todas adicionadas de 100 mg.L-1 mio-inositol e 30 mg.L-1 sacarose. O pH foi ajustado em 5,8 antes da inclusão do ágar, na concentração de 6,5 mg.L-1 e, posteriormente, foram autoclavadas a 121 °C e 1,5 atm, durante 20 minutos. Em seguida, as sementes foram mantidas em sala de crescimento, em condições controladas de 27 μmol.m-2.s-1 de intensidade luminosa, temperatura de 25 ± 2 °C e fotoperíodo de 16 horas. O delineamento experimental foi inteiramente casualizado e os dados submetidos à análise de variância e as médias dos tratamentos pelo teste de Tukey a 5%, por meio do programa WinStat. Os valores provenientes de contagem foram transformados pela raiz quadrada de x+0,5, em que x é a média obtida de cada variável. Conclui-se que as doses utilizadas de ácido giberélico não influenciam a germinação das sementes, obtendo um alto índice de germinação in vitro para os tratamentos. Não houve diferença para as variáveis germinação de sementes, contaminação fúngica e bacteriana.Palavras-chave: Lycium barbarum L. micropropagação. Meio de Cultura. Pequenas fruta

Salmonella clinical isolates from Brazilian pig herds: genetic relationship and antibiotic resistance profiling

In Brazil, since 2011 clinical cases of salmonellosis has been increasing substantially. Nevertheless, few information is available about the antimicrobial profile, distribution, serotypes and genetic relationship among the strains. The objectives of this study were: to identify the Salmonella serotypes, to characterize the in vitro antimicrobial resistance profiles and to determine the genetic relationship of clinical isolates in Brazil. During 2016, clinical isolates of Salmonella (111) from nine States were sent to Embrapa Swine and Poultry for complementary analysis. First, isolates were serotyped by Kauffmann White Scheme. In parallel, the strains were tested against fifteen antimicrobials by disk diffusion method and genotyping was performed by Pulsed Field Gel Electrophoresis (PFGE) using the XbaI restriction enzyme. As expected, the main serovars found were Typhimurium and Choleraesuis. Four strains showed resistance to only one antimicrobial and 76.5% (85/111) were considered multi-resistant. The highest level of resistance was found against to tetracycline. More than 80% of the strains were susceptible to fosfomycin, lincomycin/spectinomycin and norfloxacin. It was possible to identify one major Choleraesuis clonal group present in different Brazilian States. Further, several small clonal groups were obtained for Typhimurium. In conclusion, clinical salmonellosis caused by Typhimurium and Choleraesuis is endemic in pig production areas and the majority of the strains are multi-resistant

Pesquisa de Listeria monocytogenes, Salmonella enterica and Yersinia enterocolitica em carcaças de suínos no sul do Brasil

The intensification of pig production and advances in the sanitary control of herds profoundly changed the profile of risk attributed to pork consumption. In the actual scenario, most microorganisms related to macroscopic lesions observed in the post mortem inspection are not transmitted by food, while foodborne bacteria of importance to consumer health do not cause macroscopic lesions. In Brazil, the “Ministério da Agricultura, Pecuária e Abastecimento” requested a scientific opinion on the prioritizing of pathogens potentially transmitted by unprocessed pork. After conducting a qualitative risk assessment, only Salmonella enterica was classified as of high risk to consumers. The present study was part of the validation step of the risk assessment and aimed to investigate the frequency of S. enterica, Yersinia enterocolitica and Listeria monocytogenes and hygienic-sanitary indicators in pig carcasses of pigs rose under intensive production and slaughtered under the Federal Inspection System in three slaughterhouses located in Southern Brazil. Additionally, the antimicrobial resistance profile of the isolated pathogens was also investigated. A total of 378 carcasses were sampled by superficial sponges before the chilling step in three slaughterhouses. Samples were investigated for the presence of the three aforementioned pathogens and subjected to enumeration of Colony Formation Units (log CFU.cm-1) of total aerobic mesophiles (TAM) and Enterobacteriaceae. Salmonella strains were tested by disc diffusion test for resistance to eleven antimicrobials. There were significantly statistical differences (p<0.0001) on the median counts of both indicators between the slaughterhouses. The median of TAM was very close for Slaughterhouses A and B: 1.573 log CFU.cm-1 and 1.6014 log CFU.cm-1, respectively. While in Slaughterhouse C, a higher TAM median was detected (2.216 log CFU.cm-1). A similar profile was observed regarding to Enterobacteriaceae, and medians were calculated as follow: -0.426 log CFU.cm-1 in Slaughterhouse A; 0.2163 log CFU.cm-1 in B; and 0.633 log CFU.cm-1 in C. Regarding the pathogens investigated, L. monocytogenes was not detected and only one carcass from Slaughterhouse C was positive for Y. enterocolitica. Thus, the results suggest a very low prevalence of L. monocytogenes and Y. enterocolitica in the sampled population. A total of 65 (17.2%) carcasses were positive for S. enterica, with a difference in frequencies between slaughterhouses and slaughter days. The prevalence of Salmonella positive carcasses was higher in the Slaughterhouse C (25.4%; CI 95% 19-32%) in comparison with A (9.5%; CI 95% 9-14%) and B (18.3%; CI 95% 12-24%). There was no significantly statistical association between Enterobacteriaceae counts and Salmonella isolation on carcass surface (p=0.69). The slaughtering day, nested within the slaughterhouse, explains 31.3% of Salmonella prevalence variability. S. Typhimurium (38.1%) was the most prevalent, followed by S. Infantis (30.1%). Among the 61 Salmonella strains tested for resistance to antimicrobials, 18 (31.6%) were full-susceptible. No strain displayed resistance to azithromycin, ceftazidime, cefotaxime and meropenem. The highest resistance frequency was displayed to tetracycline (54.1%), followed by ampicillin (50.82%), nalidixic acid (42.62%) and chloramphenicol (42.62). Multiresistance was detected in 52.54% of the, strains. In conclusion, S. enterica is more prevalent in pre-chill pig carcasses than Y. enterocolitica and L. monocytogenes and thus should be prioritized in monitoring and control programs at slaughter. Salmonella serovars varied among slaughterhouses and present significant differences in their resistance to antimicrobials. Slaughterhouses that present higher medians of TAM or Enterobacteriaceae in a monitoring period may have higher S. enterica prevalences as well. However, there is a high variation of S. enterica prevalence among slaughter days, which cannot be always related to the hygienic indicators counts observed on a given day.A intensificação da produção de suínos e os avanços no controle sanitário dos rebanhos alterou de forma importante o perfil de risco do consumo de carne suína. No cenário atual, a maioria dos microrganismos causadores de lesões macroscópicas detectáveis na inspeção post mortem não são transmissíveis por alimentos, enquanto bactérias de importância como causadoras de doenças transmitidas por alimentos não causam lesões macroscópicas. No Brasil, o Ministério da Agricultura, Pecuária e Abastecimento solicitou uma opinião científica sobre a priorização de patógenos potencialmente transmitidos pela carne suína in natura. Após conduzir uma avaliação de risco qualitativa, apenas Salmonella enterica foi classificada como de alto risco para o consumidor. O presente estudo foi parte da etapa de validação da avaliação de risco e objetivou: investigar a frequência de S. enterica, Yersinia enterocolitica e Listeria. monocytogenes; e enumerar indicadores higiênico-sanitários em carcaças de suínos abatidos sob inspeção federal em frigoríficos dedicados ao abate de suínos sob sistema intensivo de criação no sul do Brasil. Além disso, o perfil de resistência a antimicrobianos dos patógenos isolados foi investigado. A superfície de um total de 378 carcaças foi amostrada por esponjas, na etapa de pré-resfriamento em três matadouros frigoríficos (A, B, C). As amostras foram investigadas quanto à presença dos três patógenos acima mencionados e quanto à enumeração de Unidades Formadoras de Colônia (log UFC.cm-1) de mesófilos aeróbios totais (MAT) e Enterobacteriaceae. As cepas isoladas de Salmonella foram testadas quanto à resistência a onze antimicrobianos pela técnica de disco difusão. As medianas de contagem de ambos os indicadores apresentaram diferença significativa (p<0,0001) entre matadouros-frigoríficos. A mediana de MAT foi bastante próxima para A e B (1,573 log UFC.cm-1 e 1,6014 log UFC.cm-1, respectivamente), enquanto em C uma mediana de MAT mais elevada foi determinada (2,216 log CFU.cm-1). Um perfil semelhante foi observado em relação a Enterobacteriaceae, sendo as medianas calculadas para A, B e C, respectivamente: -0,426 log CFU.cm-1; 0,2163 log UFC.cm-1; e 0,633 log UFC.cm-1. Em relação aos patógenos investigados, L. monocytogenes não foi detectada e apenas uma carcaça, do Matadouro C, foi positiva para Y. enterocolitica. Portanto, os resultados sugerem uma prevalência muito baixa desses patógenos na população amostrada. Em um total de 65 (17,2%) carcaças houve isolamento de S. enterica, com diferença nas frequências observadas entre matadouros e dias de abate. A prevalência de carcaças positivas para S. enterica foi maior no Matadouro C (25,4%; IC95% 19-32%) em comparação com A (9,5%; IC95% 9-14%) e B (18,3%; IC95% 12-24%). Não houve associação estatística entre o número de Enterobacteriaceae e o isolamento de S. enterica na superfície das carcaças (p=0,69). O dia de abate agrupado por frigorífico explica 31,3% da variação na prevalência de Salmonella. O sorovar mais frequente de S. enterica foi Typhimurium (38,1%) seguido de S. Infantis (30,1%). Entre as 61 cepas de S. enterica testadas quanto à resistência a antimicrobianos, 18 (31,6%) foram totalmente suscetíveis aos antimicrobianos testados. Nenhuma cepa apresentou resistência a azitromicina, ceftazidima, cefotaxima e meropenem. As maiores frequências de resistência foram demonstradas contra tetraciclina (54,1%), ampicilina (50,8%), ácido nalidíxico (42,62%) e cloranfenicol (42,62%). Em 52,54% das cepas foi detectada multi-resistência. Em conclusão, S. enterica é mais prevalente em carcaças suínas no pré-resfriamento do que Y. enterocolitica e L. monocytogenes. Portanto, S. enterica deve ser priorizada em programas de monitoramento e controle ao abate. Os sorovares de Salmonella variam entre matadouros e apresentam diferenças significativas na resistência a antimicrobianos. Matadouros de suínos que apresentam medianas de MAT e Enterobacteriaceae num período de monitoramento podem apresentar também prevalências mais de altas de presença de S. enterica. Entretanto, há uma alta variabilidade na frequência de S. enterica entre dias de abate, e nem sempre há relação entre essa frequência e a contagem de indicadores higiênico-sanitários determinados num determinado dia

In Vitro Screening of Non-Antibiotic Components to Mitigate Intestinal Lesions Caused by Brachyspira hyodysenteriae, Lawsonia intracellularis and Salmonella enterica Serovar Typhimurium

Swine dysentery, ileitis, and porcine salmonellosis are production-limiting diseases of global importance for swine production. They are caused by infection with Brachyspira hyodysenteriae, Lawsonia intracellularis, and Salmonella enterica serovar Typhimurium, respectively. Currently, the prevention, treatment, and control of these diseases still relies on antimicrobials. The goal of this study was to evaluate the effectiveness of four commercially available non-antimicrobial compounds in preventing lesions caused by the bacteria cited above using an in vitro intestinal culture model. A total of five pigs per pathogen were used and multiple compounds were evaluated. For compound F (a fungal fermented rye), S (a blend of short and medium chain fatty acids), and P (a synergistic blend of short and medium chain fatty acids, including coated butyrates), a total of four explants/pig for each treatment were used, while for compound D (an extract of carob and thyme) only 12 explants/pig for each treatment were used. Explants were exposed to a combination of pathogen only (n = 4/compound/pig), compound only (n = 4/compound/pig), or pathogen and compound (n = 4/compound/pig) and sampled at two time-points. Histopathology and gene expression levels were evaluated to investigate the treatment effect on explants. Short and medium-chain fatty acids, and an extract of carob and thyme, was found to mitigate lesions due to B. hyodysenteriae exposure. A fungal fermented prebiotic increased healthy epithelial coverage when explants were exposed to L. intracellularis or S. Typhimurium. These findings represent a step towards finding alternatives to antimicrobials usage and control of swine dysentery, ileitis, and salmonellosis in pork production

ESTABELECIMENTO IN VITRO DE SEMENTES DE GOJI BERRY COM USO DE ÁCIDO GIBERÉLICO

O Goji Berry (Lycium barbarum L.) é uma pequena fruta vermelha amplamente consumida no mundo. Possui propriedades medicinais benéficas, vitaminas do complexo B, ácido ascórbico, carotenóides e polifenóis. Diante dessa importância comercial, a propagação in vitro dela é fundamental para a obtenção de mudas de qualidade. O objetivo deste trabalho foi avaliar a influência de quatro doses de ácido giberélico (GA3) na germinação de sementes de Goji Berry. As sementes foram desinfestadas em câmara de fluxo laminar, imersas em álcool 70%, agitadas por 30 segundos, e posteriormente em hipoclorito de sódio, em concentração de 2,5% de cloro ativo, adicionado de duas gotas de Tween 20, durante 15 minutos. Na sequência, as sementes foram colocadas em tubos de ensaio, contendo 7 mL dos sais e vitaminas do meio de cultura MS, tendo como tratamentos as doses 0 mg.L-1, 0,2 mg.L-1, 0,4 mg.L-1 e 0,6 mg.L-1 de ácido giberélico, todas adicionadas de 100 mg.L-1 mio-inositol e 30 mg.L-1 sacarose. O pH foi ajustado em 5,8 antes da inclusão do ágar, na concentração de 6,5 mg.L-1 e, posteriormente, foram autoclavadas a 121 °C e 1,5 atm, durante 20 minutos. Em seguida, as sementes foram mantidas em sala de crescimento, em condições controladas de 27 μmol.m-2.s-1 de intensidade luminosa, temperatura de 25 ± 2 °C e fotoperíodo de 16 horas. O delineamento experimental foi inteiramente casualizado e os dados submetidos à análise de variância e as médias dos tratamentos pelo teste de Tukey a 5%, por meio do programa WinStat. Os valores provenientes de contagem foram transformados pela raiz quadrada de x+0,5, em que x é a média obtida de cada variável. Conclui-se que as doses utilizadas de ácido giberélico não influenciam a germinação das sementes, obtendo um alto índice de germinação in vitro para os tratamentos. Não houve diferença para as variáveis germinação de sementes, contaminação fúngica e bacteriana.Palavras-chave: Lycium barbarum L. micropropagação. Meio de Cultura. Pequenas fruta

Salmonella clinical isolates from Brazilian pig herds: genetic relationship and antibiotic resistance profiling

In Brazil, since 2011 clinical cases of salmonellosis has been increasing substantially. Nevertheless, few information is available about the antimicrobial profile, distribution, serotypes and genetic relationship among the strains. The objectives of this study were: to identify the Salmonella serotypes, to characterize the in vitro antimicrobial resistance profiles and to determine the genetic relationship of clinical isolates in Brazil. During 2016, clinical isolates of Salmonella (111) from nine States were sent to Embrapa Swine and Poultry for complementary analysis. First, isolates were serotyped by Kauffmann White Scheme. In parallel, the strains were tested against fifteen antimicrobials by disk diffusion method and genotyping was performed by Pulsed Field Gel Electrophoresis (PFGE) using the XbaI restriction enzyme. As expected, the main serovars found were Typhimurium and Choleraesuis. Four strains showed resistance to only one antimicrobial and 76.5% (85/111) were considered multi-resistant. The highest level of resistance was found against to tetracycline. More than 80% of the strains were susceptible to fosfomycin, lincomycin/spectinomycin and norfloxacin. It was possible to identify one major Choleraesuis clonal group present in different Brazilian States. Further, several small clonal groups were obtained for Typhimurium. In conclusion, clinical salmonellosis caused by Typhimurium and Choleraesuis is endemic in pig production areas and the majority of the strains are multi-resistant.</p

Jornadas sobre biosolarización, biofumigación, abonos verdes y cultivos de cobertura en cultivos intensivos. San Pedro, Buenos Aires, 8-9 de noviembre de 2022

Jornadas sobre biosolarización, biofumigación, abonos verdes y cultivos de cobertura en cultivos intensivos. INTA EEA San Pedro. San Pedro, Buenos Aires, 8-9 de noviembre de 2022El 8 y 9 de noviembre se realizaron en la Estación Experimental INTA San Pedro las Jornadas sobre biosolarización, biofumigación, abonos verdes y cultivos de cobertura en cultivos intensivos. El objetivo del encuentro fue difundir estas técnicas con vistas al próximo Simposio Internacional a realizarse en Argentina en 2024. El encuentro contó con 78 asistentes presenciales provenientes de las provincias de Jujuy, Salta, Corrientes, Mendoza, Buenos Aires, San Luis, La Pampa, Río Negro, Chubut, regiones con climas y suelos muy diversos.EEA San PedroFil: Mitidieri, Mariel Silvina. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Estación Experimental Agropecuaria San Pedro; ArgentinaFil: Piola, Mariana. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Estación Experimental Agropecuaria San Pedro; ArgentinaFil: Brambilla, María Virginia. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Estación Experimental Agropecuaria San Pedro; ArgentinaFil: Meneguzzi, Natalia. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Patología Vegetal; ArgentinaFil: Cuellas, Marisol Virginia. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Estación Experimental Agropecuaria Área Metropolitana de Buenos Aires. Agencia de Extensión Rural La Plata; ArgentinaFil: Obregón, Verónica Gabriela. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Estación Experimental Agropecuaria Bella Vista; ArgentinaFil: Puerta, Analía Verónica. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Floricultura; Argentin

Epidemiología del síndrome urémico hemolítico en dos regiones de la Provincia de Buenos Aires

Los objetivos de este estudio fueron describir y comparar la frecuencia del síndrome urémico hemolítico (SUH), registrada durante el periodo 2005-2010 en pobladores rurales y urbanos de la región centro-sur de la provincia de Buenos Aires y caracterizar la distribución de factores hipotéticos asociados al SUH en ambas poblaciones. Se caracterizaron 82 casos de SUH clínica y epidemiológicamente. Para el análisis estadístico de los datos se utilizó el test de Chi² o test exacto de Fisher cuando fue necesario, y el test de la mediana. La incidencia específica fue 12.7 casos cada 100 000 habitantes rurales (IC 0-23.5) y 7.1 casos cada 100 000 habitantes urbanos (IC 0-9.5). La mediana de la edad en el total de los pacientes estudiados fue de 27 meses (5-139 meses), siendo significativamente más baja en los niños del área rural. Estos resultados podrían explicarse por el contacto más frecuente con materia fecal de bovinos, el mayor consumo de leche sin pasteurizar y la mayor proporción de familiares que realizan actividades de riesgo, encontrados en la subpoblación rural. Aunque el SUH es una enfermedad que se asocia frecuentemente con el consumo de carne picada, la mayor parte de los niños que enfermaron no presentaron este antecedente. Las manifestaciones clínicas fueron semejantes en ambas subpoblaciones. Un tercio de los pacientes urbanos había recibido tratamiento con antibióticos previo al desarrollo del SUH