Characterization of sulfhydryl oxidase from Aspergillus tubingensis

Background: Despite of the presence of sulfhydryl oxidases (SOXs) in the secretomes of industrially relevant organisms and their many potential applications, only few of these enzymes have been biochemically characterized. In addition, basic functions of most of the SOX enzymes reported so far are not fully understood. In particular, the physiological role of secreted fungal SOXs is unclear. Results: The recently identified SOX from Aspergillus tubingensis (AtSOX) was produced, purified and characterized in the present work. AtSOX had a pH optimum of 6.5, and showed a good pH stability retaining more than 80% of the initial activity in a pH range 4-8.5 within 20 h. More than 70% of the initial activity was retained after incubation at 50 degrees C for 20 h. AtSOX contains a non-covalently bound flavin cofactor. The enzyme oxidised a sulfhydryl group of glutathione to form a disulfide bond, as verified by nuclear magnetic resonance spectroscopy. AtSOX preferred glutathione as a substrate over cysteine and dithiothreitol. The activity of the enzyme was totally inhibited by 10 mM zinc sulphate. Peptide-and protein-bound sulfhydryl groups in bikunin, gliotoxin, holomycin, insulin B chain, and ribonuclease A, were not oxidised by the enzyme. Based on the analysis of 33 fungal genomes, SOX enzyme encoding genes were found close to nonribosomal peptide synthetases (NRPS) but not with polyketide synthases (PKS). In the phylogenetic tree, constructed from 25 SOX and thioredoxin reductase sequences from IPR000103 InterPro family, AtSOX was evolutionary closely related to other Aspergillus SOXs. Oxidoreductases involved in the maturation of nonribosomal peptides of fungal and bacterial origin, namely GliT, HlmI and DepH, were also evolutionary closely related to AtSOX whereas fungal thioreductases were more distant. Conclusions: AtSOX (55 kDa) is a fungal secreted flavin-dependent enzyme with good stability to both pH and temperature. A Michaelis-Menten behaviour was observed with reduced glutathione as a substrate. Based on the location of SOX enzyme encoding genes close to NRPSs, SOXs could be involved in the secondary metabolism and act as an accessory enzyme in the production of nonribosomal peptides.Peer reviewe

Taloudellisten kannusteiden käyttö vähähiilisen rakentamisen ohjauksessa : TALO-hankkeen loppuraportti

Rakennetun ympäristön osuus Suomen energiankulutuksesta ja kasvihuonekaasupäästöistä on tällä hetkellä huomattavan suuri. Yleisen arvion mukaan rakennuksissa käytetään lähes 40 prosenttia kokonaisenergian kulutuksesta, ja rakentaminen, rakennusten lämmitys ja sähkönkäyttö aiheuttavat yli 30 prosenttia kasvihuonekaasupäästöistä Suomessa. Rakennusmateriaalien osuus rakennuksen elinkaaren aikaisesta hiilijalanjäljestä arvioitiin aiemmin vähäiseksi käytön aikaisiin päästöihin verrattuna. Rakennusmateriaalien tuotannosta aiheutuneiden päästöjen vaikutus on kuitenkin sitä merkittävämpi, mitä energiatehokkaampia rakennukset ovat ja mitä enemmän rakennuksissa hyödynnetään ympäristön uusiutuvia energialähteitä. Myös energiantuotannon päästöjen vähentyessä rakennusmateriaalien päästöjen vaikutus korostuu. Ympäristöministeriön tavoitteena on, että rakennuksen elinkaaren aikaisia kasvihuonekaasupäästöjä ohjataan lainsäädännöllä vuoteen 2025 mennessä. Tässä selvityksessä arvioidaan neljän taloudellisen ohjauskeinon vaikutuksia vähähiilisen rakentamisen edistämisessä. Ohjauskeinoja arvioidaan mahdollisen raja-arvo-ohjauksen rinnalla vähähiilisen uudisrakentamisen edistämisessä ja itsenäisinä keinoina vähähiilisen korjausrakentamisen edistämisessä. Rakennustyypeistä tässä selvityksessä arvioidut taloudelliset ohjauskeinot kohdistuisivat asuinkerrostaloihin. Uudisrakentamisen arvioidut ohjauskeinot ovat: (1) valtion avustus, (2) kiinteistöverosta vapauttaminen, ja (3) lisärakennusoikeuden myöntäminen. Tuen saamisen kriteerinä on erittäin vähähiilinen rakentaminen. Erittäin vähähiilisen asuinkerrostalon kriteeri määritettiin tässä tarkastelussa elinkaarisen hiilijalanjälkilaskennan perusteella. Korjausrakentamisen arvioitu ohjauskeino on avustus asuinkerrostalojen vähähiilisiin korjauksiin. Avustuksen kriteerinä olisi käytönaikaisen energiankulutuksen päästöjen voimakas lasku. Selvityksen tulosten perusteella valtion tuki erittäin vähähiiliselle uudisrakentamiselle ja asuinkerrosten vähähiilisten korjausten avustukset saisivat aikaan vähähiilisiä asuinkerrostaloja ja korjausrakentamisessa kohtuuhintaisia päästövähennyksiä. Sen sijaan kiinteistöverosta vapauttaminen viideksi vuodeksi ei ole riittävä kannuste rakentaa erittäin vähähiilisiä asuinkerrostaloja. Lisärakennusoikeuden myöntäminen puolestaan on tulosten mukaan riittävä kannuste rakentajalle, mutta sen käyttöönoton laajuus perustuisi kuntien halukkuuteen ottaa ohjauskeino käyttöön

Supplementary data for article: Djuric, A.; Gojgić-Cvijović, G. D.; Jakovljević, D. M.; Kekez, B.; Kojic, J. S.; Mattinen, M.-L.; Harju, I. E.; Vrvic, M. M.; Beškoski, V. Brachybacterium Sp CH-KOV3 Isolated from an Oil-Polluted Environment-a New Producer of Levan. International Journal of Biological Macromolecules 2017, 104, 311–321. https://doi.org/10.1016/j.ijbiomac.2017.06.034

Supplementary material for: [https://doi.org/10.1016/j.ijbiomac.2017.06.034]Related to published version: [http://cherry.chem.bg.ac.rs/handle/123456789/2538

Supplementary data for article: Djuric, A.; Gojgić-Cvijović, G. D.; Jakovljević, D. M.; Kekez, B.; Kojic, J. S.; Mattinen, M.-L.; Harju, I. E.; Vrvic, M. M.; Beškoski, V. Brachybacterium Sp CH-KOV3 Isolated from an Oil-Polluted Environment-a New Producer of Levan. International Journal of Biological Macromolecules 2017, 104, 311–321. https://doi.org/10.1016/j.ijbiomac.2017.06.034

Supplementary material for: [https://doi.org/10.1016/j.ijbiomac.2017.06.034]Related to published version: [http://cherry.chem.bg.ac.rs/handle/123456789/2538