Pyrosequencing-based analysis reveals a novel capsular gene cluster in a KPC-producing Klebsiella pneumoniae clinical isolate identified in Brazil

Background: An important virulence factor of Klebsiella pneumoniae is the production of capsular polysaccharide (CPS), a thick mucus layer that allows for evasion of the host's defense and creates a barrier against antibacterial peptides. CPS production is driven mostly by the expression of genes located in a locus called cps, and the resulting structure is used to distinguish between different serotypes (K types). in this study, we report the unique genetic organization of the cps cluster from K. pneumoniae Kp13, a clinical isolate recovered during a large outbreak of nosocomial infections that occurred in a Brazilian teaching hospital.Results: A pyrosequencing-based approach showed that the cps region of Kp13 (cps(Kp13)) is 26.4 kbp in length and contains genes common, although not universal, to other strains, such as the rm/BADC operon that codes for L-rhamnose synthesis. cpsKp13 also presents some unique features, like the inversion of the wzy gene and a unique repertoire of glycosyltransferases. in silico comparison of cps(Kp13) RFLP pattern with 102 previously published cps PCR-RFLP patterns showed that cpsKp13 is distinct from the C patterns of all other K serotypes. Furthermore, in vitro serotyping showed only a weak reaction with capsular types K9 and K34. We confirm that K9 cps shares common genes with cps(Kp13) such as the rm/BADC operon, but lacks features like uge and Kp13-specific glycosyltransferases, while K34 capsules contain three of the five sugars that potentially form the Kp13 CPS.Conclusions: We report the first description of a cps cluster from a Brazilian clinical isolate of a KPC-producing K. pneumoniae. the gathered data including K-serotyping support that Kp13's K-antigen belongs to a novel capsular serotype. the CPS of Kp13 probably includes L-rhamnose and D-galacturonate in its structure, among other residues. Because genes involved in L-rhamnose biosynthesis are absent in humans, this pathway may represent potential targets for the development of antimicrobial agents. Studying the capsular serotypes of clinical isolates is of great importance for further development of vaccines and/or novel therapeutic agents. the distribution of K-types among multidrug-resistant isolates is unknown, but our findings may encourage scientists to perform K-antigen typing of KPC-producing strains worldwide.LNCC, Rio de Janeiro, BrazilUniv Fed Rio de Janeiro, Inst Microbiol Paulo de Goes, Rio de Janeiro, BrazilUniv Estadual Londrina, Dept Patol Clin Anal Clin & Toxicol, Londrina, BrazilUniversidade Federal de São Paulo, Lab ALERTA, Div Doencas Infecciosas, São Paulo, BrazilUniversidade Federal de São Paulo, Lab ALERTA, Div Doencas Infecciosas, São Paulo, BrazilWeb of Scienc

Bacteremia causada por Staphylococcus aureus: Uma análise de quinze anos da sensibilidade a antimicrobianos em um hospital terciário do Brasil

Justificativa e Objetivo: Infecções da corrente sanguínea por Staphylococcus aureus constituem uma das principais causas de morbidade e mortalidade em todo mundo. O tratamento de infecções por S. aureus é complicado pela elevada prevalência de resistência a antimicrobianos. Compreender a epidemiologia e os padrões de resistência deste microrganismo é um ponto crítico para a prescrição empírica adequada de antimicrobianos. Desta maneira, este estudo teve por objetivo avaliar a evolução de resistência antimicrobiana de S. aureus num período de quinze anos. Metodologia: Foram analisados os testes de sensibilidade aos antimicrobianos de 720 S. aureus isolados de hemoculturas de um hospital terciário do sul do Brasil. Os dados foram obtidos do Sistema de Informação AGTA Healthcare, módulo LABHOS®. Resultados: A frequência média de S. aureus resistentes a meticilina foi de 43,74%. Com exceção de penicilina, ocorreu variação significativa da resistência para todos os antimicrobianos no período avaliado (< 0,001). Ciprofloxacina, Eritromicina e Clindamicina apresentaram os maiores índices de resistência com tendência de aumento. Surpreendentemente, Gentamicina e Sulfametoxazol-Trimetoprim apresentaram queda significativa nos percentuais de resistência. Analisando-se vancomicina do ano 2011 a 2015 pode-se evidenciar um aumento das concentrações inibitórias mínimas. Conclusão: Embora a resistência a antimicrobianos tenha aumentado nos quinze anos para a maioria dos antimicrobianos, para Sulfametoxazol-Trimetoprim e Gentamicina ocorreu redução significativa, indicando uma possível alteração clonal. Este estudo evidenciou, ainda, a emergência do fenótipo S. aureus intermediário a vancomicina

Bacteremia causada por Staphylococcus aureus: Uma análise de quinze anos da sensibilidade a antimicrobianos em um hospital terciário do Brasil

Background and Objective: Bloodstream infections caused by Staphylococcus aureus are a major cause of morbidity and mortality worldwide. Treatment of S. aureus infections is complex, in part, due to the high prevalence of antimicrobial resistance. Understanding the epidemiology and resistance patterns of this microorganism is a critical point for the proper empirical prescription of antimicrobials. Thus, this study aimed to evaluate the evolution of antimicrobial resistance of S. aureus in a period of fifteen years. Methods: Antimicrobial susceptibility profiles was determined for cefoxitin (30μg), penicillin (10 U), erythromycin (15 μg), clindamycin (2 μg), gentamycin (10 μg),ciprofloxacin (5μg), sulfamethoxazole-trimethoprim (23.75/1.25 μg), rifampicin (5 μg), and tetracycline (30μg) in 720 S. aureus isolated from blood cultures in a tertiary hospital in southern Brazil were analyzed. Sensiblity values was determined according to Clinical Laboratory Standards Institute (CLSI, 2018).The data were obtained from the AGTA Healthcare Information System, LABHOS ® module. Results: The mean frequency of methicillin-resistant S. aureus was 43.74%. Except for penicillin, there was a significant variation of resistance for all antimicrobials in the period evaluated (ρJustificación y Objetivo: Infecciones del flujo sanguíneo por Staphylococcus aureus constituyen una de las principales causas de morbilidad y mortalidad en todo el mundo. El tratamiento de las infecciones por S. aureus es complejo, en parte debido a la elevada prevalencia de resistencia a los antimicrobianos. Comprender la epidemiología y los patrones de resistencia de este microorganismo es un punto crítico para la prescripción empírica adecuada de antimicrobianos. Así, este estudio tuvo por objetivo evaluar la evolución de resistencia antimicrobiana de S. aureus en un período de quince años. Metodología: Se analizaron los perfiles de sensibilidad a los antimicrobianos ciprofloxacino (5μg); clindamicina (2μg); eritromicina (15μg); gentamicina (10μg); oxacilina (30μg); penicilina (10U); rifampicina (5μg); sulfametoxazol-trimetoprima (23.75 / 1.25 μg) y tetraciclina (30μg) de 720 S. aureus aislados de hemocultivos de un hospital terciario del sur de Brasil. Losvalores de sensibilidad adoptados fueron aquellos contenidos en el Clinical Laboratory Standards Institute (CLSI, 2018). Los datos fueron obtenidos del Sistema de Información AGTA Healthcare, módulo LABHOS ® . Resultados: La frecuencia media de S. aureus resistente a meticilina fue de 43,74%. Con excepción de la penicilina, hubo variación significativa de la resistencia para todos los antimicrobianos en el período evaluado (Justificativa e Objetivo: Infecções da corrente sanguínea por Staphylococcus aureus constituem uma das principais causas de morbidade e mortalidade em todo mundo. O tratamento de infecções por S. aureus é complicado pela elevada prevalência de resistência a antimicrobianos. Compreender a epidemiologia e os padrões de resistência deste microrganismo é um ponto crítico para a prescrição empírica adequada de antimicrobianos. Desta maneira, este estudo teve por objetivo avaliar a evolução de resistência antimicrobiana de S. aureus num período de quinze anos. Metodologia: Foram analisados os testes de sensibilidade aos antimicrobianos de 720 S. aureus isolados de hemoculturas de um hospital terciário do sul do Brasil. Os dados foram obtidos do Sistema de Informação AGTA Healthcare, módulo LABHOS®. Resultados: A frequência média de S. aureus resistentes a meticilina foi de 43,74%. Com exceção de penicilina, ocorreu variação significativa da resistência para todos os antimicrobianos no período avaliado (< 0,001). Ciprofloxacina, Eritromicina e Clindamicina apresentaram os maiores índices de resistência com tendência de aumento. Surpreendentemente, Gentamicina e Sulfametoxazol-Trimetoprim apresentaram queda significativa nos percentuais de resistência. Analisando-se vancomicina do ano 2011 a 2015 pode-se evidenciar um aumento das concentrações inibitórias mínimas. Conclusão: Embora a resistência a antimicrobianos tenha aumentado nos quinze anos para a maioria dos antimicrobianos, para Sulfametoxazol-Trimetoprim e Gentamicina ocorreu redução significativa, indicando uma possível alteração clonal. Este estudo evidenciou, ainda, a emergência do fenótipo S. aureus intermediário a vancomicina

A perspetiva dos professores de educação especial sobre a importância da expressão dramática como técnica psicopedagógica no desenvolvimento da comunicação da criança com perturbação de Asperger

Os princípios pelos quais a escola inclusiva se rege defendem que os alunos não devem apenas estar juntos, mas acima de tudo, devem aprender juntos, de forma a perceberem que a escola é de todos e para todos, ainda que dentro das suas diferenças. Terá o professor capacidades, conhecimentos e estratégias suficientes para abraçar este desafio? Numa tentativa de aprofundarmos o nosso conhecimento acerca da Perturbação de Asperger propomo-nos a desenvolver um trabalho que defina a doença, dentro do já então conhecido, e evidencie tanto as “fragilidades” como as “capacidades” dos portadores, carinhosamente apelidados de “Aspies”. Trata-se de uma tentativa de reunir os conhecimentos necessários para começar a entender a essência dos Asperger. Porque é que na opinião do psicólogo clínico Tony Attwood, especialista mundial nesta Perturbação, precisamos de pessoas com Asperger, sugerindo que estes indivíduos possam ser, de alguma forma, especiais e capazes de grandes feitos. Neste sentido, surge este estudo para tentar perceber a perspetiva dos professores de Educação Especial sobre a importância da Expressão Dramática como técnica psicopedagógica no desenvolvimento da comunicação da criança com Perturbação de Asperger. Pretendemos perceber a influência que a utilização desta técnica pode ter no desenvolvimento comunicacional da criança com Perturbação de Asperger, pois talvez seja relevante sugerir a elaboração de um programa de treino de competências comunicacionais que utilize a Expressão Dramática. A Expressão Dramática vai além do seu papel de ferramenta lúdica e de distração, daí a importância de se conhecer as vantagens da sua utilização nesta área e tentar perceber se pode contribuir ou não para o sucesso de uma criança com esta problemática

Comparison of Vitek-2 automated identification system and PCR-ITS for species characterization of clinical isolates of Candida spp

Serious infections caused by genus Candida have become a challenge in the diagnostic question, in order to detect and identify the etiologic agent of agile, precise and standardized form in manner clinical laboratories. The prediction of susceptibility to antifungal agents, and the need to generate epidemiological data highlight the importance of routine identification of yeast species involved in infections. Among the 200 Candida species already described, C. albicans, C. parapsilosis, C. tropicalis, C. glabrata, C. guilliermondii, C. krusei and C. lusitaniae are most often related with infections in humans. All of the phenotypic methods of identification of Candida have limitations, especially the characterization of the species not C. albicans, however, the application of molecular methods may reflect the increased cost and spent time for obtain results on laboratory. In order to evaluate the implementation of the automated system Vitek 2 ID - YST (bioMerieux) combined with the use of chromogenic agar in the routine identification of Candida species were tested 44 isolates from invasive infection by inoculation of chromogenic agar and automated panel and realization DNA amplification for the internal transcribed spacer regions of rRNA 1 and 2 (ITS - PCR). Oligonucleotides specific species were used and the size of the amplified product was correlated to other results. The automated system identified 95.4 % of the isolates when in association with colonial features observed in chromogenic medium, however, the use of PCR -ITS or more sensitive methodologies would be needed to solve the other results, ambiguous and erroneous

First Report of NDM-1-Producing Acinetobacter baumannii Sequence Type 25 in Brazil

Submitted by sandra infurna ([email protected]) on 2015-10-12T23:19:18Z No. of bitstreams: 1 thiago_chagas_etal_IOC_2014.pdf: 134628 bytes, checksum: 4abd12234d4983ddb4c1d980540e5337 (MD5)Approved for entry into archive by sandra infurna ([email protected]) on 2015-10-12T23:19:49Z (GMT) No. of bitstreams: 1 thiago_chagas_etal_IOC_2014.pdf: 134628 bytes, checksum: 4abd12234d4983ddb4c1d980540e5337 (MD5)Approved for entry into archive by sandra infurna ([email protected]) on 2015-10-12T23:20:10Z (GMT) No. of bitstreams: 1 thiago_chagas_etal_IOC_2014.pdf: 134628 bytes, checksum: 4abd12234d4983ddb4c1d980540e5337 (MD5)Made available in DSpace on 2015-10-12T23:36:56Z (GMT). No. of bitstreams: 1 thiago_chagas_etal_IOC_2014.pdf: 134628 bytes, checksum: 4abd12234d4983ddb4c1d980540e5337 (MD5) Previous issue date: 2014Pontifical Catholic University.School of Health and Biosciences. Curitiba, PR, Brasil / State Central Public Health Laboratory. São José dos Pinhais, PR, Brasil.State Central Public Health Laboratory. São José dos Pinhais, PR, Brasil.University Hospital of Londrina. Londrina, PR, Brasil.University Hospital of Londrina. Londrina, PR, Brasil.Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Laboratório de Pesquisa em Infecção Hospitalar (LAPIH), Rio de Janeiro, RJ, Brasil.Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Laboratório de Pesquisa em Infecção Hospitalar (LAPIH), Rio de Janeiro, RJ, Brasil.Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Laboratório de Pesquisa em Infecção Hospitalar (LAPIH), Rio de Janeiro, RJ, Brasil.New Delhi metallo-β-lactamase 1 (NDM-1) was first identified in Brazil in Enterobacter hormaechei and Providencia rettgeri in 2013. Here, we describe the first case of NDM-1-producing Acinetobacter baumannii sequence type 25 isolated from the urinary tract of a 71-year-old man who died of multiple complications, including A. baumannii infection. The NDM-1 gene was detected by quantitative PCR, and its sequence confirmed its presence in an ∼100-kb plasmid

Pyrosequencing-based analysis reveals a novel capsular gene cluster in a KPC-producing <it>Klebsiella pneumoniae</it> clinical isolate identified in Brazil

Abstract Background An important virulence factor of Klebsiella pneumoniae is the production of capsular polysaccharide (CPS), a thick mucus layer that allows for evasion of the host's defense and creates a barrier against antibacterial peptides. CPS production is driven mostly by the expression of genes located in a locus called cps, and the resulting structure is used to distinguish between different serotypes (K types). In this study, we report the unique genetic organization of the cps cluster from K. pneumoniae Kp13, a clinical isolate recovered during a large outbreak of nosocomial infections that occurred in a Brazilian teaching hospital. Results A pyrosequencing-based approach showed that the cps region of Kp13 (cpsKp13) is 26.4 kbp in length and contains genes common, although not universal, to other strains, such as the rmlBADC operon that codes for L-rhamnose synthesis. cpsKp13 also presents some unique features, like the inversion of the wzy gene and a unique repertoire of glycosyltransferases. In silico comparison of cpsKp13 RFLP pattern with 102 previously published cps PCR-RFLP patterns showed that cpsKp13 is distinct from the C patterns of all other K serotypes. Furthermore, in vitro serotyping showed only a weak reaction with capsular types K9 and K34. We confirm that K9 cps shares common genes with cpsKp13 such as the rmlBADC operon, but lacks features like uge and Kp13-specific glycosyltransferases, while K34 capsules contain three of the five sugars that potentially form the Kp13 CPS. Conclusions We report the first description of a cps cluster from a Brazilian clinical isolate of a KPC-producing K. pneumoniae. The gathered data including K-serotyping support that Kp13’s K-antigen belongs to a novel capsular serotype. The CPS of Kp13 probably includes L-rhamnose and D-galacturonate in its structure, among other residues. Because genes involved in L-rhamnose biosynthesis are absent in humans, this pathway may represent potential targets for the development of antimicrobial agents. Studying the capsular serotypes of clinical isolates is of great importance for further development of vaccines and/or novel therapeutic agents. The distribution of K-types among multidrug-resistant isolates is unknown, but our findings may encourage scientists to perform K-antigen typing of KPC-producing strains worldwide.</p