Sugarcane (Saccharum sp. Hybrid) propagated in headspace renovating systems shows autotrophic characteristics and develops improved anti-oxidative response

Previous results have shown that sugarcane plantlets micropropagated in Temporary Immersion Bioreactors (TIB) demonstrated a better morphology and physiological behaviour when compared to plantlets propagated in Gelled Medium (GM). The present work focuses on the onset of oxidative stress symptoms at transfer to ex vitro and during acclimatization. The specific ROS being produced were identified and tissue-located by infiltrating leaves with specific O2 −.and H2O2 staining dyes, respectively NBT and DAB. TIB plantlets showed trichomes stained with NBT and DAB, their density decreasing with time. Stomata were coloured with NBT and DAB in GM and, at the end of acclimatization, plantlets from both systems presented the lowest level of staining of both stomata and trichomes. The response of the anti-oxidative system was also analysed through in vitro and in gel enzyme activities and transcription levels of genes for key response enzymes. At the end of the in vitro phase, GM plantlets showed higher activities of APX and MDHAR, while CAT, GR, GT and DHAR activities increased in TIB. At the end of acclimatization SOD and CAT increased mainly in TIB, while GM induced the increase of APX. The immunobloting of peroxiredoxins showed that Prxs were expressed at higher levels in TIB plantlets, some showing polymerization. The transcription of genes coding for key response enzymes was strongly upregulated in GM plantlets. In conclusion and comparing with GM, TIB produced plantlets closer to autotrophy and with improved mobilization of the anti-oxidative response

Multiplicación in vitro de Paeonias sp. variedad Sesu en Sistemas de Inmersión Temporal

Paeonia are considered among the most important perennial ornamentals. The influence of three culture methods (semi-solid culture medium, static liquid culture medium and liquid culture medium by temporary immersion) as well as the type and concentration of cytokinins was investigated to improve the coefficients of in vitro multiplication of Paeonia sp. var. ‘SeSu’. Results demonstrated that temporary immersion increased significantly the multiplication coefficient by increasing the concentration of benzyladenine. A maximum concentration value of 6.66 mmol l-1 was reached. Both, type and concentration of cytokinins had effect on the multiplication of Paeonia var. SESu in its temporary immersion. The highest rates of multiplication were achieved with concentrations of 4.44 and 6.66 mmol l-1 meta-topolin and 6.66 mmol l-1 BA, without significant differences between them. Both cytokinins enhanced the shoot length. Hyperhydric shoots were not found.Key words: cytokinins, ornamentals, proliferationLas Paeonias son consideradas entre las ornamentales perennes más importantes. Con vistas a aumentar los coeficientes de multiplicación in vitro de Paeonias sp. var. SeSu, se determinó la influencia de tres métodos de cultivo (en medio de cultivo semi-sólido, medio de cultivo líquido estático y en medio de cultivo líquido por inmersión temporal) así como tipo y concentración de citoquininas. Se comprobó que el cultivo en inmersión temporal incrementó significativamente el coeficiente de multiplicación a medida que aumentó la concentración de benciladenina y se alcanzó el máximo valor a la concentración de 6.66 μmol l-1. Se demostró que tanto el tipo como la concentración de citoquininas tuvieron efecto en la multiplicación de Paeonia var. SeSu en inmersión temporal. Los mayores coeficientes de multiplicación se encontraron con las concentraciones de 4.44 y 6.66 μmol l-1 de meta-topolina y 6.66 μmol l-1 de BA, sin diferencias significativas entre ellos. Ambas citoquininas mejoraron la longitud del brote principal y no se observaron brotes hiperhídricos.Palabras clave: citoquininas, ornamentales, proliferació

Efecto de la concentración de sacarosa y de reguladores del crecimiento en la tuberización in vitro de Dioscorea alata L. variedad Cartagena

Among the species of Dioscorea which tubers are used as human food, D. alata L. is one of the most productive and important economically. In this work the effect of sucrose (0, 2, 4, 6, 8,10%) and growth regulators concentration (ANA 0, 0.27, 2.7, 27, 54 μM y 6-BAP 0, 0.22, 2.2, 22, 44 μM) on in vitro tuberization of yam (Dioscorea alata L.) var. Cartagena were evaluated. The nodal segments were established in a MS culture medium supplemented with thiamine 1mg.l-1, myo-inositol 100 mg.l-1, L-cysteine 20 mg.l-1, agar 6 %. The pH was adjusted to 5.7. The cultures were kept under conditions of artificial light (37μM.m-2.s-1). The sucrose concentrations 6 and 8 % favored the production of major number of microtubers and of a lager size compared to the lower concentrations (0, 2 ,4%). The weight of the microtubers increased with the increasing of the concentrations of sucrose and declined with the highest concentration used (10%). The same trend was observed in the total tuber biomass. On the other hand, an evolvement in size and the total tuber biomass on microtuber was observed at highest concentrations of ANA tested (27 y 54 μM). Both, the number and weight of microtubers declined when high concentrations of 6-BAP in the culture medium were used (2.2, 22 y 44).Key words: microtuberization, tissue culture, yamEntre las especies de Dioscorea de las que se utilizan sus tubérculos para el consumo humano, D. alata L. es una de las más productivas e importantes económicamente. En el presente trabajo se evaluó el efecto de la concentración de sacarosa (0, 2, 4, 6, 8,10%) y de reguladores del crecimiento (ANA 0, 0.27, 2.7, 27, 54 μM y 6-BAP 0, 0.22, 2.2, 22, 44 μM) en la tuberización in vitro de ñame (Dioscorea alata L.) variedad Cartagena. Los segmentos nodales se colocaron en medio de cultivo MS suplementado con tiamina 1 mg.l-1, mio-inositol 100 mg.l-1, L-cisteína 20 mg.l-1, 6% agar y pH 5.7. Los cultivos fueron mantenidos en cámara de luz artificial (37 μM.m-2.s-1). Las concentraciones de sacarosa de 6 y 8% favorecieron la producción de mayor número de microtubérculos y de mayor tamaño comparados con las bajas concentraciones (0, 2 y 4%). El peso de los mismos se incrementó con el aumento de las concentraciones de sacarosa y disminuyó con la concentración más alta empleada (10%). De forma similar ocurrió con la biomasa total del tubérculo. Por otro lado, se observó un incremento en el tamaño de los microtubérculos y en la biomasa total a las más altas concentraciones de ANA probadas (27 y 54 μM). Tanto el número como el peso de los microtubérculos disminuyeron cuando se utilizó 6-BAP en el medio de cultivo.Palabras clave: cultivo de tejidos, microtuberización, ñam

El juego lingüístico como procedimiento didáctico para el desarrollo de la expresión oral en inglés en el Sistema Educativo Cubano

La sociedad cubana está inmersa en una Revolución Educacional para que el pueblo alcance una cultura general integral. El Sistema Nacional de Educación protagoniza acciones desplegadas a través de numerosos programas dirigidos al logro de aprendizajes de calidad a todos los ciudadanos a lo largo de toda la vida. Constituye un enorme reto que las Ciencias de la Educación conduzcan el desarrollo y las transformaciones en cada institución escolar a partir de la actividad de cada maestro. De ahí que el presente artículo centra su atención en un sistema de juegos lingüísticos, como procedimiento didáctico, que contribuye al desarrollo de la expresión oral en inglés en la Enseñanza Primaria a través de las clases. El mismo es el resultado de una investigación, cuya importancia radica en su contribución al desarrollo del proceso de enseñanza aprendizaje de las habilidades orales en este nivel, o sea, se aportan juegos lingüísticos que favorecen de manera efectiva la ejercitación de material lingüístico, de forma tal que los alumnos desarrollan habilidades práctica, dinámica y conscientemente, favoreciendo el proceso de comunicación en la lengua extranjera y por ende, la calidad de las clases.&nbsp

Estrategias para disminuir la necrosis apical en la multiplicación y el enraizamiento in vitro del Pistacho

El pistacho (Pistacia sp.) es uno de los frutales menos explotados, entre las principales causas está el elevado costo del material vegetal por las dificultades de propagación de la especie. La propagación in vitro ofrece un gran potencial para la industria de esta especie por la multiplicación a gran escala de clones seleccionados. El objetivo del presente trabajo fue controlar la necrosis apical de los brotes en la propagación in vitro del pistacho. A partir de brotes jóvenes de plantas de esta especie mantenidas en casas de cultivo, se procedió a su desinfección con hipoclorito de sodio al 1% durante diferentes tiempos. Las yemas apicales y axilares se establecieron en el medio de cultivo Murashige and Skoog (1962) modificado y enriquecido con 1 mg/L de Metatopolina. Se evaluaron diferentes tipos de frascos, número y tipo de explantes y formulaciones de medios de cultivo durante dos subcultivos de multiplicación y en el enraizamiento. El frasco de cristal de 200 ml de capacidad, la línea prolifera y el medio de cultivo DKW lograron los valores más bajo de necrosis apical. En la fase de multiplicación se presentaron valores bajo en todos los tratamientos ensayados sin diferencia estadísticas entre ellos en comparación con el enraizamiento donde la necrosis apical alcanzó valores superiores. El medio DKW y las líneas prolíferas lograron los menores valores. El medio de cultivo MS modificado, favoreció el número de segmentos enraizados y el DKW (Driver and Kuniyuki, 1984) el número de segmentos que brotaron, presentando este último menor incidencia de necrosis apical.Palabras clave: forestales, medios de cultivo, nueces, propagación in vitro.The pistachio (Pistacia sp.) is one of the least exploited fruit among the main causes is the high cost of plant material by the difficulties of propagation of the species. The propagation in vitro offers great potential for the industry of this species by multiplication scale of selected clones. The aim of this study was to control the apical necrosis of outbreaks in the in vitro propagation Pistachio. From young shoots of plants of this species kept in growing houses, proceeded to disinfection with sodium hypochlorite 1% for different times. The apical and axillary buds were established in the culture medium Murashige and Skoog (1962) modified and supplemented with 1 mg/L Metatopolina. Different types of bottles, number and type of explants and culture media formulations for two subcultures multiplication and rooting were evaluated. Glass flask of 200 ml capacity, and line proliferates DKW medium achieved the lowest values apical necrosis. In the multiplication phase values were low in all treatments tested no statistical difference between them compared to rooting where apical necrosis reached higher values. The average DKW and prolific lines obtained lower values. MS medium modified crop, favored the number of segments rooted and DKW (Driver and Kuniyuki, 1984) the number of segments that sprouted, the latter having lower incidence of apical necrosis

Efecto del tiempo de cultivo y volumen de medio de cultivo por explante en la multiplicación de Gerbera jamesonii en Sistemas de Inmersión Temporal

In the world flower industry, Gerbera jamesonii is among the ten plants of cut flower more commercialized. The species can be propagated through seeds, vegetative and through biotechnological techniques. The latter is the most used. In order to determine the effect of culture time and volume of culture medium on the in vitro multiplication of gerbera in Temporary Immersion Systems, this work was performed. Four culture times (14, 21, 28 and 35 days) and three volume variants of culture medium per explant (20, 30 and 40 ml) were compared. A frequency of immersion was used every 8 hours with additional ventilation and as inoculum aggregates of three shoots. It was verified that the two studied variables influence the multiplication of gerbera in TIS. With 28 and 35 days of culture the gerbera shoots showed better morpho-physiological quality and a higher number of shoots per explant. The use of 40 ml culture medium per explant increased the number of shoots, fresh mass and water content of the explants. Key words: cut flower, immersion frequency, micropropagationEn la industria florícola mundial, Gerbera jamesonii se encuentra entre las diez plantas de flor de corte más comercializada. La especie puede propagarse a través de semillas, de forma vegetativa y mediante técnicas biotecnológicas. Esta última es la más utilizada. Con el objetivo de determinar el efecto del tiempo de cultivo y el volumen de medio de cultivo en la multiplicación in vitro de gerbera en Sistemas de Inmersión temporal se realizó este trabajo. Se compararon cuatro tiempos de cultivo (14, 21, 28 y 35 días) y tres variantes de volumen de medio de cultivo por explante (20, 30 y 40 ml). Se utilizó una frecuencia de inmersión cada 8 horas con ventilación adicional y como inóculo agregados de tres brotes. Se comprobó que las dos variables estudiadas influyen en la multiplicación de gerbera en SIT.  Con 28 y 35 días de cultivo los brotes de gerbera mostraron mejor calidad morfo-fisiológica y mayor número de brotes por explante. El uso de 40 ml de medio de cultivo por explante incrementó el número de brotes, la masa fresca y el contenido de agua de los explantes. Palabras clave: flor de corte, frecuencia de inmersión, micropropagació

Propagación in vitro de Vriesea en sistemas de inmersión temporal

Bromeliads are ornamentals plants very attractive due to leaves coloration and the beautiful inflorescences. Vrieseas is a genus of a great commercial interest among them. Traditional propagation techniques are limited to introduce new hybrids to market. Then, in vitro propagation technique gains a great interest. Effect of paclobutrazol combined with Kinetin and BA to different immersion frequency in shoots proliferation and quality, using two concentrations of GA3 in shoots growth were evaluated to establish a protocol for in vitro propagation in Temporary Immersion Systems. Integration of these results is the elemental procedure for an in vitro propagation protocol of Vriesea using temporary immersion technique.Key words: bromeliads, ornamentals, paclobutrazolLas bromelias son plantas ornamentales muy atractivas por la coloración de sus hojas y la belleza de sus inflorescencias. Dentro de ellas Vrieseas es uno de los géneros de mayor interés comercial. Cuando se desean introducir nuevos híbridos en el mercado, las técnicas de propagación tradicional son insuficientes, por lo que resultan de gran interés las técnicas de propagación in vitro. Con el objetivo de establecer un protocolo para la propagación in vitro en Biorreactores de Inmersión Temporal se determinó el efecto del paclobutrazol combinado con Kinetina y BA a diferentes frecuencias de inmersión en la proliferación y calidad de los brotes, y dos concentraciones de AG3 en el crecimiento de los brotes. La integración de los resultados constituyen los procedimientos elementales para un protocolo de propagación de Vriesea con el empleo de la técnica de inmersión temporal.Palabras clave: bromelias, ornamentales, paclobutrazo

Efecto del Vitrofural® en la calidad morfofisiológica de brotes de caña de azúcar var. C 1051-73 propagados en Biorreactores de Inmersión Temporal

Sugarcane (Saccharum spp.) is propagated by in vitro culture in both semi-solid and liquid culture media. The last one is used in temporary immersion bioreactors (BIT) and sterilized in autoclave. The objective of this work was to determine the effect of sterilization of the culture medium with Vitrofural® on the morphophysiological quality of sugarcane var. C 1051-73 shoots propagated in BIT. It was compared the sterilization of the culture media by autoclaving (control) and chemical sterilization (Vitrofural®) in the stages of multiplication, growth and rooting of the shoots in BIT. At the end of the rooting stage and prior to the ex vitro acclimatization stage, the shoots were individualized and the variables: number of shoots per explant, length of shoots (cm), number of leaves per shoot, number of roots , length of the longest root (cm), fresh and dry mass of shoots and leaves were evaluated. It was possible the in vitro propagation of sugarcane var. C1051-73 in BIT with the use of Vitrofural® for the chemical sterilization of the culture medium. No phytotoxicity symptoms of Vitrofural® were observed on the shoots. Significantly higher values were found for the variables evaluated in all the stages of the micropropagation developed in BIT where the culture medium containing Vitrofural® was used. The chemical sterilization with Vitrofural® of the culture media for in vitro propagation of sugarcane var. C1051-73 in temporary immersion bioreactors improve the morphophysiological quality of the shoots.Keywords: chemical sterilization, culture media, micropropagation, SaccharumLa caña de azúcar (Saccharum spp.) se propaga por cultivo in vitro tanto en medio de cultivo semisólido como líquido. Este último se emplea en Biorreactores de Inmersión temporal (BIT) y se esteriliza en autoclave. El objetivo del presente trabajo fue determinar el efecto de la esterilización del medio de cultivo con Vitrofural® en la calidad morfofisiológica de brotes de caña de azúcar var. C 1051-73 propagados en BIT. Se compararó la esterilización de los medios de cultivo por autoclave (control) y esterilización química (Vitrofural®) en las fases de multiplicación, crecimiento y enraizamiento de los brotes en BIT. Al finalizar la fase de enraizamiento y previo a la fase de la aclimatización ex vitro, los brotes se individualizaron y se evaluaron las variables: número de brotesporexplante, longitud de los brotes (cm), número de hojas por brote, número de raíces, longitud de la raíz más larga (cm), masa fresca y seca de los brotes y las hojas. La propagación in vitro de caña de azúcar var. C1051-73 fue posible en BIT con el uso de Vitrofural® para la esterilización química del medio de cultivo. No se observaron síntomas de fitotoxicidad del Vitrofural® sobre los brotes. Se encontraron valores significativamente superiores para las variables evaluadas en todas las fases de la micropropagación desarrolladas en BIT donde se utilizó el medio de cultivo que contenía Vitrofural®. La esterilización química con Vitrofural® de los medios de cultivo para la propagación in vitro de caña de azúcar var. C1051-73 en Biorreactores de Inmersión temporal favorece la calidad morfofisiológica de los brotes.Palabras clave: esterilización química, medios de cultivo, micropropagación, Saccharu

Inducción de callos y regeneración de plantas en Tectona grandis L.

The rescue of commercial species is a priority for biotechnology to increase multiplication rate and develop reforestation. Such programmes can be carried out simultaneously with the development of the country to mantain the ecosystem natural equilibrium. Teak (Tectona grandis L.) is a forest tree of high commercial and ecological value because of its rapid growth and wood quality. Teak is a specie with problems in the propagation as a result of its high genetic variability. For this reason, alternatives to produce propagules have been developed. With the aim to obtain plants regeneration from this were used shoot tips and flowers immature of mature tree explants and cotyledons from seed. Different thidiazuron concentrations was tested for callus formation and cytokinins for plants regeneration. Nodular calli was obtained from shoot tips, cotyledons and flowers immature. The shoots regeneration was achieved in calli from shoot tips.Key words: organogenesis, teak , tissue cultureEl trabajo con especies de interés comercial constituye una de las líneas prioritarias de la biotecnología, como herramienta básica en el apoyo al mejoramiento de árboles élites. La teca (Tectona grandis L.), es un forestal de alto interés comercial y ecológico por su rápido crecimiento y la calidad de su madera. Es una especie que tiene graves problemas para la propagación por la alta variabilidad genética de las plantas producidas por semillas. El objetivo de este trabajo fue establecer una metodología para la regeneración de plantas de esta especie forestal con vistas a utilizarla en los programas de mejoramiento genético. Se utilizaron como explantes ápices y botones florales de árboles adultos y cotiledones de semillas. Las semillas se desinfectaron con HgCl2 al 0.2% durante 10 minutos. para el establecimiento in vitro de los cotiledones. Se evaluaron diferentes concentraciones de Thidiazuron en los explantes antes señalados, con el objetivo de lograr la formación de callos y diferentes niveles de Bencilaminopurina y Kinetina para la emisión de brotes. Se logró la formación de callos en todos los explantes empleados. Se formaron callos nodulares a partir de los segmentos de ápices, cotiledones y botones florales y se regeneraron brotes en los callos provenientes de ápices.Palabras clave: cultivo de tejidos, organogénesis, tec