Lentinus villosus Klotzsch (1833) AM 169: a natural and renewable source of alkaline protease / Lentinus villosus Klotzsch (1833) AM 169: uma fonte natural e renovável de protease alcalina

Mushrooms have stood out as sources of proteases with industrial applicability. The objective of this work was to evaluate the parameters that influence the synthesis of proteases by Lentinus villosus Klotzsch (1833) AM 169 and to characterize these enzymes. The matrix culture, prepared on potato dextrose agar supplemented with yeast extract, was maintained for 8 days at 25 ° C. Submerged fermentation was carried out in GYPG (glucose, yeast extract, peptone and gelatin). Azocasein solution (1%, w/v) was used as an enzyme substrate. The best conditions for protease production were: initial pH of the culture medium (6), fermentation time (12 days), age of the inoculum (6 days) and size of the inoculum (10%). The proteases were active at pH 8, at 60 ° C, stable at pH (5 to 9) and temperature (30 °C to 60 °C). These enzymes were classified as cysteine proteases, stimulated by Fe2+ and Mn2+. Lentinus villosus synthesizes proteases with potential for application in the detergent, textile, leather processing and bioremediation processes

Quality Attributes of Cupuaçu Juice in Response to Treatment with Crude Enzyme Extract Produced by Aspergillus japonicus 586

Cupuaçu (Theobroma grandiflorum Schum) is an Amazonian Basin native fruit whose fruit pulp is consumed as a juice which presents high density, viscosity, and turbidity. Pectic enzymes, usually yielded by microorganisms, are used to reduce the juice viscosity and turbidity. The present study aims to evaluate the use of pectic enzymes when processing cupuaçu juice. The cupuaçu juice was obtained by using Aspergillus japonicus 586 crude enzyme extract and incubation at 50°C with agitation (140 rpm) for one hour. Enzyme activities were determined, and the juices were evaluated as to their yield, turbidity, viscosity, and chemical composition. The juice produced by using crude enzyme extract presented higher soluble solids, reducing sugars, and lower viscosity and turbidity

Nutritional value and proteases of Lentinus citrinus produced by solid state fermentation of lignocellulosic waste from tropical region

AbstractThis paper examined the growth and yield performance of Lentinus citrinus on cupuaçu exocarp (Theobroma grandiflorum) mixed with litter (CE+LI) or rice bran (Oryza sativa) (CE+RB) in the ratio of 2:1 (800g:200g) to investigate the nutritional composition and proteolytic potential of the fruiting body produced. Significance values of yield were determined on substrate combinations. In CE+LI the biological efficiency of the mushrooms was 93.5% and the content of fat (4.5%), fiber (11.0%), protein (27.0%) and amino acids were higher when compared with CE+RB. Among the amino acids, the amount of glutamic acid, aspartic acid, alanine, arginine and leucine was high. The biological efficiency on CE+RB reduced to 84.2% and based on the nutritional value, carbohydrates (53.59%), energy (324.33kcal) and minerals such as zinc, iron, copper, potassium and phosphorus were higher in this substrate combination. Protease activity from fruiting body was significant in CE+LI (463.55U/mL). This protease showed an optimal activity at 50°C in neutral and alkaline pH with maximum stability at 30°C at alkaline pH. This is the first report of L. citrinus fruiting body nutritional composition with potential for human food and application in industrial processes

Viabilidade da produção de proteases por espécies de Aspergillaceae e triagem de coagulantes do leite bovino / Feasibility of protease production by Aspergillaceae species and screening of coagulants from bovine milk

Proteases são enzimas de elevada importância econômica e com ampla aplicabilidade industrial. Enzimas proteolíticas com atividade coagulante do leite bovino, sintetizadas por Aspergillus sp., vêm demonstrando características bioquímicas com potencial para uso na produção de queijos. O objetivo deste trabalho foi avaliar a produção de proteases por treze culturas de Aspergillus provenientes da coleção de culturas DPUA da Universidade Federal do Amazonas. A avaliação da viabilidade das espécies e pureza das colônias foi realizada com base nas características macro, micromorfológicas e forma de reprodução. Após autenticação, as espécies de Aspergillus foram submetidas ao cultivo em meio líquido para produção de enzimas proteolíticas. A determinação da atividade proteolítica foi realizada em meio sólido e por colorimetria, utilizando como substratos ágar leite e solução de azocaseína 1% (p/v), respectivamente.  As proteases do fungo que apresentou atividade proteolítica significativa pela análise colorimétrica foram submetidas à caracterização bioquímica. A produção de proteases coagulantes do leite bovino pelas espécies de Aspergillus também foi determinada. Nos testes de autenticação foi verificada a viabilidade de 100% das espécies de Aspergillus. As proteases das espécies de Aspergillus demonstraram diferentes perfis de degradação do substrato, formando halos translúcidos e opacos em meio sólido. Os halos de hidrólise significativa foram determinados nos extratos brutos de A. niger DPUA 399 (39,67 mm) e A. japonicus DPUA 1727 (34,27 mm). Na avaliação da síntese de protease utilizando técnica colorimétrica foi verificada produção significativa por A. oryzae DPUA 541 (32,00 U/mL). Este fungo sintetiza serinoproteases e metaloproteases que demonstram atividade catalítica ótima em pH 5, a 50 °C, mantendo estabilidade na faixa de pH 7 a 10, até 40 °C. Atividade coagulante significativa foi determinada nos extratos de A. melleus DPUA (19,84 U) e A. oryzae DPUA 541 (19,74 U). Entretanto, A. oryzae DPUA 541 e A. oryzae DPUA 1624 sintetizaram enzimas proteolíticas com forte coagulação do leite bovino. Os resultados indicam o potencial das espécies de Aspergillus avaliadas como forte de proteases com aplicabilidade industrial na área de alimentos, em especial para a produção de queijos

Nutritional composition of bioproducts generated from semi-solid fermentation of pineapple peel by edible mushrooms

Mushroom production is a very efficient alternative to agro-industrial residues recycling. The proximal composition, content of macro and micro minerals, amino acid and proteolytic activity were assessed in the pineapple peel and in the bioproducts generated from pineapple peel and mycelium of Pleurotus albidus, Lentinus citrinus and Pleurotus florida. The bioproducts were obtained by semi-solid fermentation and drying process. Nutritional analysis was performed following standard methodologies. The data showed that the percentage of protein and minerals of the bioproducts increased and the carbohydrate content reduced after the myceliation by the mushrooms. All essential amino acids were found in the bioproducts and no contamination was observed. There was significant difference between proteolytic activities of bioproducts samples, presenting L. citrinus’ bioproduct a higher value. These data show that the bioproducts produced have great nutritional value and can be used as an alternative food.Key words: By-production, fermentation, mushroom, pineapple, protease

Cultivo de cogumelo comestível em resíduos lignocelulósicos de floresta tropical para produção de proteases / Mushroom cultivation edible in lignocellulosic residues from rainforest for protease production

A demanda por enzimas nos setores industriais está aumentando nos últimos anos devido as diversas vantagens econômicas. Entre a variedade de enzimas, as proteases ganharam atenção especial nos setores industriais. Dentre as inúmeras fontes desses biocatalisadores estão os Basidiomycetes. Dessa forma, o objetivo desta pesquisa foi avaliar a produção e caracterizar as proteases sintetizadas por Pleurotus ostreatoroseus Singer. DPUA 1720. A cultura matriz, preparada em ágar batata dextrose, suplementado com 0,5% (p/p) de extrato de levedura, foi mantida por oito dias a 25 °C. Em seguida, o cogumelo foi cultivado em resíduo de mistura de Exocarpo de cupuaçu (Theobroma grandiflorum), açaí (Euterpe oleracea), abacaxi (Ananas comosus) e serragem, suplementados com farelo de arroz (Oryza sativa) ou farelo de trigo (Triticum aestivum) 0,5% (p/v) por 15 dias a 25 °C. As proteases foram extraídas em água destilada esterilizada e, no extrato bruto, foi determinada a atividade proteolítica, utilizando-se como substrato azocaseína 1 % (p/v). As proteases demonstraram as seguintes características bioquímicas: pH ótimo 5,0, temperatura ótima 40 °C, estabilidade em pH 5,0-6,0 e temperatura na faixa de 30-40 °C. A ação das enzimas proteolíticas é fortemente inibida por Fe+2 e Mn+2. Estes biocatalisadores indicam que P. ostreatoroseus tem alto potencial na indústria farmacêutica, têxtil, alimentícia e química

Processo eco-amigável para selecionar substrato Lignocelulósico para produção de peptidases ácidas / Eco-friendly process to select Lignocellulosic substrate for the production of acid peptidases

As  peptidases estão presentes em diversos processos industriais. Dentre as enzimas requeridas, as proteases de origem fúngica tem grande representatividade no comércio de enzimas, onde as suas numerosas fontes estão os cogumelos comestíveis. Esta pesquisa apresenta a atividade e caracterização parcial de peptidases de Pleurotus albidus, uma espécie de cogumelo comestível. O cogumelo foi cultivado cultivado em Ágar Sabouraud com extrato de levedura 0,5% (p/v), por oito dias, a 25 °C. A fermentação foi realizada em exocarpo de abacaxi (Ananas comosus), exocarpo de cupuaçu (Theobroma grandiflorum), semente de açaí (Euterpe oleracea) e serragem, suplementadas com farelo de trigo ou farelo de arroz, [80% +20% (p/v)] por 15 dias a 25 °C. A atividade das peptidases foi determinada utilizando como substrato solução de azocaseína 1% (p/v), em tampão tris- HCl, pH 7,2. A atividade de peptidases significativa (208,1 U/mL) foi determinada  no cultivo em exocarpo de cupuaçu suplementado com farelo de arroz. As enzimas apresentaram atividades ótimas em pH 6,0, a 40 ° C  e estabilidade de 40 a  60 ° C e pH 5,0 a 7,0. As proteases foram classificadas como metaloproteases e cisteínoproteases

CRESCIMENTO MICELIAL DE Ganoderma lucidum (Curt.: Fr.) P. Karst. EM RESÍDUOS LIGNOCELULÓSICOS DISPONÍVEIS NA AMAZÔNIA

Neste trabalho avaliou-se o crescimento micelial de Ganoderma lucidum DPUA 1694 sob a influência de diferentes concentrações de farelo de arroz em substratos lignocelulósicos da Amazônica. Os substratos foram formulados com casca de cupuaçu e serragem, suplementados com farelo de arroz nas concentrações de 10 e 20%. O crescimento vertical foi medido diariamente durante 15 dias de fermentação, avaliando-se o vigor micelial e crescimento em mm. G. lucidum apresentou crescimento em todas as condições experimentais e o micélio foi classificado como fortemente e mediamente adensado nos substratos a base de casca de cupuaçu e serragem suplementado com 10% e 20% de farelo de arroz, respectivamente. O crescimento micelial vertical de G. lucidum em casca de cupuaçu foi significativamente maior (α=5%) quando comparado ao substrato a base de serragem. Além disso, foi possível verificar que a adição do farelo de arroz como suplemento nutricional favoreceu o crescimento em ambos os substratos. A espécie estudada apresentou capacidade de colonizar os resíduos lignocelulósicos, evidenciando o potencial de utilização dos resíduos e da espécie em futuras aplicações biotecnológicas