Purificación y efectos funcionales de los anticuerpos anti-β2 glicoproteína

71 p.El síndrome antifosfolípido (SAF), también conocido como síndrome de Hughes, es un trastorno autoinmune multisistémico, clínicamente caracterizado por eventos de trombosis venosa y / o trombosis arterial, o por la pérdida fetal recurrente (muerte fetal, parto prematuro, o recurrentes pérdidas embrionarias) y trombocitopenia, asociada con títulos persistentemente elevados de anticuerpos antifosfolípidos (aFl), anticoagulante lúpico (aL) y/o anticuerpos anticardiolipinas (aCl). Dichos anticuerpos se ligan al complejo formado por fosfolípidos aniónicos, principalmente cardiolipina, y proteínas plasmáticas que se ligan a estos fosfolípidos, principalmente una apolipoproteína denominada β2GPI. El propósito de esta tesis es obtener anticuerpos anti- β2GPI a partir de ratones C57BL/6 previamente inmunizados con la proteína purificada desde plasma humano normal, y probar su actividad en diferentes ensayos funcionales. Para su purificación se usó cromatografía de afinidad en columna, una primera para el aislamiento de Inmunoglobulina G (IgG), y una segunda con afinidad β2GPI, las alícuotas resultantes producto de esta purificación fueron evaluadas por técnicas de ELISA y Western Blot.Es posible inducir la producción de anticuerpos antifosfolípidos con especificidad anti- β2GPI en ratones C57BL/6 inmunizados con la proteína purificada desde plasma humano normal. El método de purificación de anticuerpos anti- β2GPI donde se utilizaron estas dos columnas de afinidad, logra un eficaz aislamiento de estos anticuerpos. Se llegó a estas conclusiones por medio de los resultados obtenidos en los ensayos de ELISA- β2GPI e inmunoelectroforesis, Western Blot y Agregación plaquetaria para detección de los anticuerpos inducidos y comprobando actividad trombótica, la que a su vez puede ser inhibida por compuestos naturales antitrombóticos

Grape cane extracts: an opportunity for the development of novel additives for food Chilean industry

Podeu consultar el III Workshop anual INSA-UB complet a: http://hdl.handle.net/2445/118993Sessió 2. Pòster núm. 1

Phenolic Profile of Grape Canes: Novel Compounds Identified by LC-ESI-LTQ-Orbitrap-MS

Grape canes (Vitis vinifera L.) are a viticulture industry by-product with an important content of secondary metabolites, mainly polyphenols with a broad spectrum of demonstrated health benefits. Grape canes, therefore, have considerable economic potential as a source of high-value phytochemicals. In this work, liquid chromatography coupled with electrospray ionization hybrid linear trap quadrupole-Orbitrap mass spectrometry (LC-LTQ-Orbitrap) was used for the comprehensive identification of polyphenolic compounds in grape canes. Identification of polyphenols was performed by comparing their retention times, accurate mass measured, and mass fragmentation patterns with those of reference substances or available data in the literature. A total of 75 compounds were identified, including phenolic acids, flavanols, flavonols, flavanonols, flavanones, and stilbenoids. The most abundant polyphenols were proanthocyanidins and stilbenoids and their oligomers. Moreover, the high-resolution mass spectrometry analysis revealed the occurrence of 17 polyphenols never described before in grape canes, thereby providing a more complete polyphenolic profile of this potentially valuable by-product

Bench-scale extraction of stilbenoids and other phenolics from stored grape canes (Vitis vinifera): Optimization process, chemical characterization, and potential protection against oxidative damage

Dietary supplements have become the key to complement deficiencies in the occidental diet and therefore to reduce the incidence of oxidative stress related diseases. A bench-scale extraction procedure was studied to obtain a valuable product rich in phenolic compounds and antioxidant capacity from Pinot Noir grape cane enhanced by storage. Extraction solvent, cane-size, solid:liquid ratio, temperature, and extraction time, were systematically evaluated in order to obtain a natural functional product. Complete chemical characterization of a Pinot Noir grape cane extract produced under bench scale process is presented for the first time. Phenolic profiles of the extracts were characterized by HPLC-PDA-MS/MS and minerals by ICP-OES. Proteins, carbohydrates and lignins were also evaluated. The main phenolic compounds in the final product were stilbenoids, flavan-3-ols, procyanidins, and flavonols, with 6.53%, 4.84%, 2.11%, and 0.25%, respectively on a dry matter basis. Other chemical constituents were carbohydrates (27%), minerals (1%) and lignins (38.7%). The antioxidant capacity of the product was demonstrated using chemical assays (TEACABTS/CUPRAC and ORAC-FL) and endothelial cells model. The extract produced under the described bench scale process using grape cane enhanced by storage have a chemical composition and protecting capacities to be used in functional foods industry

USO DE ACEITES ESENCIALES PARA LA CONSERVACIÓN POSTCOSECHA DE FRUTA DE PEPITA

La manzana es una de las frutas de mayor producción y consumo en España. Tras su recolección, se producen grandes pérdidas económicas debido a la acción de diferentes hongos como Monilinia fructicola, Botrytis cinerea, Alternaria alternata, Rhizopus stolonifer y Penicilliumexpansum. El empleo de técnicas alternativas a la aplicación de fungicidas tradicionales es necesario en la actualidad, evitando efectos negativos sobre el medio ambiente y el rechazo por parte del consumidor.Para ello, en este trabajo se propone la utilización de aceites esenciales (AEs) de las especies Origanum virens, Salvia officinalis, Valeriana officinalis y Mentha rotundifolia, junto con sus hidrolatos, un subproducto obtenido de las destilaciones de los AEs que está constituidoprincipalmente por compuestos hidrosolubles, y algunos de los compuestos activos presentes en estos AEs (Linalool, Timol, β-pineno, Acetato de bornilo, Canfeno y Carvacrol).Los métodos empleados para su aplicación fueron la difusión de AEs en disco, la dilución de AEs e hidrolatos en Agar Dextrosa Patata (PDA), dilución de AEs e hidrolatos en Caldo de Patata Dextrosa (PBD), actividad volátil, generación de esporas en Agar Dicloran Rosa de BengalaCloranfenicol (DRBD), y difusión de compuestos activos en PDA.El método de difusión de AEs en PDA, junto con el de difusión de los compuestos activos en PDA, fueron los que proporcionaron los mejores niveles de inhibición del crecimiento. En el primer caso, todos los AEs tuvieron gran eficacia contra los microorganismos, con excepción de S.officinalis que solo género inhibición frente a M. fructicola. En el caso de difusión de compuestos activos en PDA, los compuestos que presentaron una mayor capacidad antifúngica de forma general fueron linalool, timol y carvacrol, dando lugar a inhibiciones totales en el crecimiento detodos los hongos, teniendo en cuenta las diferentes concentraciones aplicadas.<br /

Efectos de un entrenamiento concurrente de fuerza y resistencia sobre carreras de media distancia

The aim of this study was to assess the effects of concurrent strength and endurance training on middle distance races in young athletes with moderate levels of performance. An organized work divided into different strength phases, also known as bloc periodization, was applied. Fifteen healthy and physically active university participants volunteered for the study. Individuals were randomly organized into two groups: resistance training group (RG: Age=21.3±2.3 years; Body Mass=66.8±1.9 kg; Height=172.0±2.3 cm; Fat Mass=10.8±1.1%) and strength training group (SG: Age=20.9±1.2 years; Body Mass=69.8±1.3 kg; Height=172.8±3.9 cm, Fat Mass=11.4±0.6%) who performed a strength protocol during 9 weeks (2 days/week). No significant differences were observed at the end of the nine weeks training. Both groups improved significantly their performance in the medium and long distance races, strength, resistance strength and their aerobic capacity (VO2max). Few changes were appreciable in the rest of the evaluated tests (60 and 300 meters). The greatest benefits were observed in the 2000 meters race. These improvements were detected from the first mesocycle and were especially evident at the end of the nine weeks. However, no significant differences were detected between groups (6.5±3.7 vs. 3.7±2.1 ml/kg/min; F=0.534; CI95%= -0.198, 5.932; p=0.65; ES=0.434). In conclusion, we can affirm that in this sample, incorporating strength training does not lead to greater benefits in comparison to just training the running performanceEl objetivo de este estudio fue evaluar los efectos del entrenamiento concurrente (fuerza y resistencia) sobre las carreras de media distancia en sujetos jóvenes de moderado nivel de rendimiento. Se aplicó un trabajo organizado en fases de diferente orientación de fuerza, lo que se conoce como periodización por bloques. Quin-ce universitarios sanos y físicamente activos participa-ron voluntariamente en el estudio. Fueron organizados aleatoriamente en dos grupos: uno que entrenaba solo resistencia (Grupo Resistencia: GR): Edad=21.3±2.3 años; Peso Corporal=66.8±1.9 kg; Estatura=172.0±2.3 cm; Gra-sa Corporal=10.8±1.1%) y otro (Grupo Fuerza-Resisten-cia: GFR): Edad=20.9±1.2 años; Peso Corporal=69.8±1.3 kg; Estatura=172.8±3.9 cm, Grasa Corporal=11.4±0.6%) al que se le añadió un protocolo de entrenamiento de fuerza de 9 semanas (2 días/semana) de duración. No se detectaron grandes diferencias en los cambios observa-dos en ambos grupos al final de las nueve semanas. Los dos grupos mejoraron significativamente su rendimien-to en las carreras de media y larga duración, la fuerza, la resistencia de fuerza y su capacidad aeróbica (VO2max). Los cambios fueron poco apreciables en el resto de las pruebas evaluadas (60 y 300 metros). Los mayores be-neficios se encontraron en la carrera de 2000 metros. Dichas mejoras se detectaron desde el primer mesociclo de entrenamiento y fueron especialmente evidentes al final de las nueve semanas. No obstante, no se detecta-ron diferencias relevantes entre ambos grupos (6.5±3.7 vs. 3.7±2.1 ml/kg/min; F=0.534; IC95%= -0.198, 5.932; p=0.65; ES=0.434). En conclusión, podemos afirmar que en esta muestra incorporar un trabajo de fuerza no con-lleva mayores beneficios que entrenar solo la carreraActividad Física y Deport

Encapsulation of Phenolic Compounds from a Grape Cane Pilot-Plant Extract in Hydroxypropyl Beta-Cyclodextrin and Maltodextrin by Spray Drying

Grape canes, the main byproducts of the viticulture industry, contain high-value bioactive phenolic compounds, whose application is limited by their instability and poorly solubility in water. Encapsulation in cyclodextrins allows these drawbacks to be overcome. In this work, a grape cane pilot-plant extract (GCPPE) was encapsulated in hydroxypropyl beta-cyclodextrin (HP-β-CD) by a spray-drying technique and the formation of an inclusion complex was confirmed by microscopy and infrared spectroscopy. The phenolic profile of the complex was analyzed by LC-ESI-LTQ-Orbitrap-MS and the encapsulation efficiency of the phenolic compounds was determined. A total of 42 compounds were identified, including stilbenes, flavonoids, and phenolic acids, and a complex of (epi)catechin with β-CD was detected, confirming the interaction between polyphenols and cyclodextrin. The encapsulation efficiency for the total extract was 80.5 ± 1.1%, with restrytisol showing the highest value (97.0 ± 0.6%) and (E)-resveratrol (32.7 ± 2.8%) the lowest value. The antioxidant capacity of the inclusion complex, determined by ORAC-FL, was 5300 ± 472 µmol TE/g DW, which was similar to the value obtained for the unencapsulated extract. This formulation might be used to improve the stability, solubility, and bioavailability of phenolic compounds of the GCPPE for water-soluble food and pharmaceutical applications

Genetic and Phenotypic Characterization of Indole-Producing Isolates of Pseudomonas syringae pv. actinidiae Obtained From Chilean Kiwifruit Orchards

In recent years, Chilean kiwifruit production has been affected by the phytopathogen Pseudomonas syringae pv. actinidiae (Psa), which has caused losses to the industry. In this study, we report the genotypic and phenotypic characterization of 18 Psa isolates obtained from Chilean kiwifruits orchards between 2012 and 2016 from different geographic origins. Genetic analysis by multilocus sequence analysis (MLSA) using four housekeeping genes (gyrB, rpoD, gltA, and gapA) and the identification of type III effector genes suggest that the Chilean Psa isolates belong to the Psa Biovar 3 cluster. All of the isolates were highly homogenous in regard to their phenotypic characteristics. None of the isolates were able to form biofilms over solid plastic surfaces. However, all of the isolates formed cellular aggregates in the air–liquid interface. All of the isolates, except for Psa 889, demonstrated swimming motility, while only isolate Psa 510 demonstrated swarming motility. The biochemical profiles of the isolates revealed differences in 22% of the tests in at least one Psa isolate when analyzed with the BIOLOG system. Interestingly, all of the isolates were able to produce indole using a tryptophan-dependent pathway. PCR analysis revealed the presence of the genes aldA/aldB and iaaL/matE, which are associated with the production of indole-3-acetic acid (IAA) and indole-3-acetyl-3-L-lysine (IAA-Lys), respectively, in P. syringae. In addition, IAA was detected in the cell free supernatant of a representative Chilean Psa strain. This work represents the most extensive analysis in terms of the time and geographic origin of Chilean Psa isolates. To our knowledge, this is the first report of Psa being able to produce IAA. Further studies are needed to determine the potential role of IAA in the virulence of Psa during kiwifruit infections and whether this feature is observed in other Psa biovars

Physical-Chemical Evaluation of Active Food Packaging Material Based on Thermoplastic Starch Loaded with Grape cane Extract

The aim of this paper is to evaluate the physicochemical and microbiological properties of active thermoplastic starch-based materials. The extract obtained from grape cane waste was used as a source of stilbene bioactive components to enhance the functional properties of thermoplastic starch (TPS). The biomaterials were prepared by the compression molding technique and subjected to mechanical, thermal, antioxidant, and microbiological tests. The results showed that the addition of grape cane extract up to 15 wt% (TPS/WE15) did not significantly influence the thermal stability of obtained biomaterials, whereas mechanical resistance decreased. On the other side, among all tested pathogens, thermoplastic starch based materials showed antifungal activity toward Botrytis cinerea and antimicrobial activity toward Staphylococcus aureus, suggesting potential application in food packaging as an active biomaterial layer

Relación entre los conocimientos de naturaleza de la ciencia, de evolución y la aceptación de la teoría evolutiva en profesores de biología luego de un programa de desarrollo profesional

Este estudio tiene como primer objetivo identificar el impacto de un programa de desarrollo profesional (PdP) en la comprensión de la Naturaleza de las Ciencia (NdC) y la evolución, y en la aceptación de esta teoría, así como analizar la relación (si existe) entre dichas variables. Se utilizaron tres instrumentos válidos y confiables para evaluar el conocimiento de NdC, la comprensión de la selección natural y la aceptación de la teoría evolutiva. Los resultados indican que el PdP tuvo un impacto positivo en los docentes, mejorando significativamente sus conocimientos de NdC y selección natural, así como su aceptación de la teoría de la evolución. Además, se encontró una correlación positiva entre la comprensión de NdC adquirida por los profesores en la primera parte del PdP, y la comprensión y aceptación de evolución que los profesores mostraron al finalizar el programa