Macromedusae of Southern Brazil: temporal variation, population structure and biochemical composition

O objetivo do presente estudo foi realizar um levantamento das espécies de macromedusas ocorrentes no Litoral Norte de Santa Catarina, avaliar sua dinâmica populacional e as variações na composição bioquímica, por meio de saídas de campo mensais, ocorridas entre janeiro de 2012 até outubro de 2014. As análises bioquímicas das umbrelas incluiram seu conteúdo em água, carboidratos, proteínas, lipídeos, cinzas, e, destas, sua composição. Foram encontradas seis espécies de macromedusas: Chiropsalmus quadrumanus e Tamoya haplonema (Cubozoa); Olindias sambaquiensis e Rhacostoma atlanticum (Hydrozoa); Chrysaora lactea e Lychnorhiza lucerna (Scyphozoa). As espécies de maior ocorrência e típicas da região foram Olindias sambaquiensis e Rhacostoma atlanticum. Ambas apresentaram alta variabilidade entre os anos, sendo que as maiores densidades foram obtidas entre o outono e o inverno de 2014, associadas a um inverno menos rigoroso e águas mais salgadas. As Cubozoas apresentam maior conteúdo em matéria orgânica, sendo as cinzas ricas em metais. R. atlanticum apresentou sazonalidade na composição química, estando as proteínas relacionadas com o pico reprodutivo da espécie.The objectives of this study were to record the macromedusae species on the north coast of Santa Catarina, and to estimate their population dynamics and variations in their biochemical composition, based on the specimens obtained in the by-catch of artisanal shrimp fishing between January 2012 and October 2014. Cohort analysis was performed to evaluate the population dynamic of the most frequent species. Biochemical analyses of the umbrellas were conducted on their water, carbohydrate, protein, lipid, ash and metals contents. Six species of macromedusae were found: Chiropsalmus quadrumanus and Tamoya haplonema (Cubozoa); Olindias sambaquiensis and Rhacostoma atlanticum (Hydrozoa), and Chrysaora lactea and Lychnorhiza lucerna (Scyphozoa). The species with the highest occurrence, and typical of the region, were Olindias sambaquiensis and Rhacostoma atlanticum. These species showed high inter-year variability, the highest densities being observed between autumn and winter 2014, associated with a less severe winter and coastal water with higher salinity. The distribution of size classes of O. sambaquiensis suggests two well-defined cohorts in spring/summer and in autumn/winter. R. atlanticum showed continuous reproduction and inter-year variation but a high value for protein content related to the reproductive peak in autumn. However, the Cubozoa species showed higher organic matter and metal content than the other classes

Fracionamento dos componentes bioativos do veneno de Bothrops cotiara

Orientadores: Profa. Dra. Madalena Baron, Prof. Dr. José Domingos FontanaDissertação (mestrado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências Biológicas, Curso de Pós-Graduação em BioquímicaInclui referências: p. 77-93Resumo: A composição de venenos de serpentes como sendo mistura complexa de enzimas e de compostos não enzimáticos, com diferentes atividades biológicas, foi confirmada para o veneno de Bothrops cotiara. Os efeitos locais decorrentes de um envenenamento por serpentes, como hemorragia e necrose estão, de alguma forma, relacionados com enzimas proteolíticas, as quais complementadas pelas L-aminoácido oxidases, determinam a degradação das proteínas e boa parte de seus monômeros. O veneno de Bothrops cotiara foi submetido a fracionamento por permeação em gel de Sephadex G-100 associada à cromatografia de troca iônica em DEAE-celulose. Como resultado destas técnicas de fracionamento, foram obtidas: a) nove frações hemorrágicas, sendo que dentre os componentes da fração de permeação de menor faixa de peso molecular (TH-3), o refracionamento por troca iônica permitiu recuperar na faixa de acidicidade média (TH-3b) a fração com maior atividade hemorrágica. O zinco (Zn2+) foi confirmado como cofator destas metalo-proteinases. b) oito frações proteolíticas sobre a caseína, sendo que o melhor fator de purificação (6.67) foi conseguido simplesmente por filtração em gel, na faixa mais elevada de peso molecular (PC-1). c) nove frações coagulantes "thrombin-like", sendo que as sub-frações de média acidicidade da troca iônica (AC-c e AC-e), derivadas inicialmente da população proteica de maior peso molecular da filtração em gel (AC-1), localizaram os componentes mais efetivos (IC = 41.7) bem superior portanto à aquela verificada para o veneno bruto (IC = 7.7). d) doze frações para L-aminoácido oxidase (LAO), por permeação em gel combinada com troca iônica, sendo que a sub-fração com a maior atividade encontrada, de pequeno conteúdo proteico (LAO-lc), foi mais sujeita a inativação enzimática se comparada com as demais. Uma maior resolução do conjunto de isoenzimas para LAO foi obtida com a metodologia de isoeletrofocalização em poliacrilamida (PAGE-IEF) acoplada ao zimograma, medido com L-metionina e L-leucina como substratos. Um perfil enzimático constituído de até 18 bandas para LAO sobre uma população proteica de 36 bandas foi, pioneiramente neste trabalho, encontrado no veneno de Bothrops cotiara. O FAD (flavina adenina dinucleotídeo) foi confirmado como coenzima do conjunto de LAOs. O perfil proteico complexo do veneno de Bothrops cotiara foi igualmente confirmado através de cromatografia líquida de alta resolução (HPLC) e por eletroforese capilar de alta resolução (CE).Abstract: The known complex of bioactive compounds comprising snake venoms was particularly examined in the Bothrops cotiara venom. Focus was set in the enzymatic activities closely related to the tissue damage following venom inoculation, such as hemorrhaging, proteases, and L-amino acid oxidases activities. The Bothrops cotiara venom was submitted to fractionation by gel-permeation in Sephadex G-100 and ion-exchange chromatography in DEAE-cellulose, and the results were: a) nine hemorrhagic fractions, the most active being found within the middle molecular weight (TH-3) and middle acidic charge protein subpopulation (TH-b). The zinc ion was confirmed as co-factor of these metalloproteinases. b) eight proteolytic fractions measured with casein, and among them, the highest purification factor (6.67) simply resulted from gel permeation as the component (s) of the highest molecular weight range (PC-1). c) nine thrombin-like fractions whose features displayed relatively high molecular weight (AC-1) and middle acidicity (AC-c and AC-d). The maximum enrichment obtained (CI=41.7) by far exceeded the basal activity of the crude venom (CI=7.7). d) twelve fractions for L-amino acid oxidases (LAO) resulted from combined gel permeation and ionic exchange. A remarkable resolution for the whole isoenzymes was obtained by polyacrylamide gel isoelectrofocusing (PAGE-IEF) coupled to LAO zymogram using L-methionine or L-leucine as substrates. This enzymatic profile, a pioneer research in Bothrops cotiara venom, consisted up to eighteen LAO bands amongst thirty six protein bands. FAD (flavin adenin dinucleotide) was confirmed as the enzymatic cofactor for LAO(s). The microheterogenity of Bothrops cotiara venom proteins was also assessed by high performance liquid chromatography (HPLC) and by high voltage capillary electrophoresis (CE)

Multixenobiotic resistance mechanism monitoring: standardization of fluorescence emmited by Rhodamine B

Many aquatic organisms express the multixenobiotic resistance mechanism (MXR) mediated by a membrane protein denominated P-glycoprotein (Pgp), which reduce the accumulation of xenobiotics by active transport to out of cells. In order to establish fluorescence microscopy as a quantitative method to monitor MXR activity, the kinetic of fluorescence decay emitted by rhodamine B (RB) was determined. Rhodamine B (1 at 1000 nmoles L-1) were spotted on silica gel plate and fluorescence decay recorded and determined as exposition time (ET, sec) using a fluorescence microscope’s photo sensor. The ET at zero time was obtained from a linear equation of plotting ET(s) against the respective rhodamine B concentrations. The resulting mathematical model (RB = (28/ET) -1 -Blank, r2 = 0.9945), allowed the quantitative determination of rhodamine B intracellular accumulation (nmoles L-1This transport activity quantitation is consequence of the MXR mechanism activity operating in viable sections of gills of the mussel Perna perna and allows its measurement as a molecular biomarker

Sistema para avaliação da qualidade de pescados

Este trabalho descreve o funcionamento do software PAQPesc. Ele tem como funcionalidade principal avaliar a qualidade de pescados. O software utiliza técnicas de inteligência artificial e é construído na linguagem de programação PHP. Ele possui uma interface web, de forma que possa ser implantado em empresas produtoras ou em mercados pesqueiros, estando disponível aos clientes em estações ou pela Internet. Para o correto funcionamento do sistema, ele deve ser alimentado com os dados dos lotes produzidos e suas respectivas análises de qualidade: química, microbiológica e sensorial. O sistema permite ainda que o usuário solicite um diagnóstico geral da qualidade do pescado, apresentando-o na tela e possibilitando sua impressão. As análises químicas e microbiológicas são realizadas em laboratórios. Estas informações oriundas dos laboratórios são incluídas por usuários cadastrados com login e senha, permitindo que usuários cadastrados ou não ao utilizar o sistema possam ter acesso aos dados. As informações referentes às análises sensoriais podem ser incluídas por qualquer pessoa que deseje usar o sistema. Além do diagnóstico, também é possível utilizar o sistema para gerar estatísticas sobre a qualidade dos pescados disponibilizando-as para consulta e impressão.   Palavras-chave: Inteligência Artificial. Sistemas de Informação. Qualidade do Pescado

Macromedusae of Southern Brazil: temporal variation, population structure and biochemical composition

Abstract The objectives of this study were to record the macromedusae species on the north coast of Santa Catarina, and to estimate their population dynamics and variations in their biochemical composition, based on the specimens obtained in the by-catch of artisanal shrimp fishing between January 2012 and October 2014. Cohort analysis was performed to evaluate the population dynamic of the most frequent species. Biochemical analyses of the umbrellas were conducted on their water, carbohydrate, protein, lipid, ash and metals contents. Six species of macromedusae were found: Chiropsalmus quadrumanus and Tamoya haplonema (Cubozoa); Olindias sambaquiensis and Rhacostoma atlanticum (Hydrozoa), and Chrysaora lactea and Lychnorhiza lucerna (Scyphozoa). The species with the highest occurrence, and typical of the region, were Olindias sambaquiensis and Rhacostoma atlanticum. These species showed high inter-year variability, the highest densities being observed between autumn and winter 2014, associated with a less severe winter and coastal water with higher salinity. The distribution of size classes of O. sambaquiensis suggests two well-defined cohorts in spring/summer and in autumn/winter. R. atlanticum showed continuous reproduction and inter-year variation but a high value for protein content related to the reproductive peak in autumn. However, the Cubozoa species showed higher organic matter and metal content than the other classes

Chemosensitizer effect of the crude oil water solution fraction on multixenobiotic resistance mechanism of the mussel Perna perna exposed to tributyltin

Tributyltin (TBT) and Water-Soluble Fraction (WSF) of crude oil are usually present in estuarine coastal waters. The transport of rhodamine B by multixenobiotic resistance (MXR) mechanism and Scanning Electron Microscopy (SEM) analysis were used for the experimental evaluation of the individual and associated sublethal effects of TBT and WSF on the gills of Perna perna. The combined effects of WSF and TBT were studied. A set of experiments consisted in testing 25ng TBT/L and different WSF concentrations, whereas another set consisted in assays with 33% WSF and different TBT concentrations. The results showed an inhibition in the MXR transport activity of mussels exposed to 75 and 100% of WSF, while the concentration upper than 300 ng TBT/L induced the same mechanism. The results showed that TBT increases the effect of WSF when they are exposed together. Morphological analysis showed gills lesions only in the group of WSF. The observed disturbs were due to the organization of cilia on the surface of the lamellae with potential consequence to feed and gas exchange