Acción de diferentes derivados de compuestos naturales sobre Trypanosoma dionissi

RESUMEN DE PROYECTO: La familia Tripanosomátidos comprende a un gran grupo de protozoos flagelados que poseen la capacidad de parasitar a diversos huéspedes, tales como animales, plantas y otros protistas. Los parásitos del género Trypanosoma sp. son responsables de enfermedades de gran importancia médica y veterinaria, tales como la enfermedad de Chagas (T. cruzi) y la enfermedad del sueño (T. brucei), entre otras. Trypanosoma (Schizotrypanum) dionisii es un tripanosoma no patógeno para el ser humano, aunque es parásito común en murciélagos. Se encuentra estrechamente relacionado con Trypanosoma cruzi, por lo que ambos parásitos presentan etapas morfológicas similares y son capaces de infectar células de mamífero en cultivo. Se conoce que en condiciones de estrés nutricional la infección de cultivos celulares por parte de ambos microorganismos se encuentra favorecida. A diferencia de T. cruzi, los tripomastigotes metacíclicos de T. dionisii no utilizan L-prolina como fuente de energía necesaria para la internalización. A pesar de ello, las dos especies de Trypanosoma invaden células a través de un mecanismo común que implica la movilización de lisosomas hacia el sitio de entrada del parásito. Esta similitud en el comportamiento se debe probablemente a la proximidad filogenética entre Trypanosoma cruzi y Trypanosoma (Schizotrypanum) dionisii y nos sugiere que estos parásitos pueden explorar estrategias similares para completar otras etapas de su ciclo biológico. (Marcili A1, J Parasitol. 2013). Es por este motivo que emplearemos T. dionissi como modelo para el estudio de efecto de drogas sobre T. cruzi. Es importante el hallazgo de nuevas terapias contra la enfermedad de Chagas, ya que las actuales no son efectivas contra todas las cepas de T. cruzi, sólo son efectivas en la etapa aguda de la enfermedad y producen severos efectos secundarios que obliga a los pacientes a abandonar el tratamiento. Es por esto que a lo largo de este proyecto evaluaremos el efecto de compuestos naturales sobre este microorganismo

Close Encounters: Pathogenic Protists-Host Cell Interactions

In this chapter, we summarize the highlights of the early events in the interaction of parasitic protists and the host cell. Pathogenic protists are a group of eukaryotic organisms, responsible for causing different human diseases, such as malaria, Chagas disease, leishmaniasis, and toxoplasmosis. These pathogens display complex life cycles and go through different cellular transformations to adapt to the different hosts in which they live. Part of these life cycles takes place in mammals, inside the host cell. Host cell entry ends with the formation of phagosomes or parasitophorous vacuoles, which differ from each parasite and each type of host cell. While canonical phagocytosis involves the fusion of phagosomes with compartments of the endocytic pathway to produce normal maturation through the phagocytic route, pathogenic microorganisms have developed Different evasion mechanisms to resist the intracellular defense systems. These strategies, including phagosome maturation arrest, resistance to the harsh lysosomal environment, or exit to the host cell cytoplasm, will be also presented in this work

Acción de diferentes drogas reposicionadas (17-aag) y derivados de compuestos naturales (aceite esencial de ajenjo) sobre Trypanosoma rangeli.

Tripanosoma rangeli y Trypanosoma cruzi son las dos únicas especies de tripanosomas que infectan al hombre. Presentan un ciclo biológico similar, pero a diferencia de Trypanosoma cruzi, agente causal de la enfermedad de Chagas, Trypanosoma rangeli es un parásito infectivo y no patógeno para el humano, pero sí para los vectores del género Rhodnius. El trabajar con un microorganismo similar pero no patógeno, nos brinda la posibilidad de entrenar a las becarias reduciendo los riesgos, para luego cuando hayan alcanzado experiencia poder reproducir los ensayos en Trypanosoma cruzi que es el patógeno de nuestro interés. El objetivo general de este trabajo es probar nuevos agentes terapéuticos, con baja toxicidad para la células de mamíferos y efectivos en diferentes puntos del ciclo biológico de Tripanosoma rangeli que sean reproducibles posteriormente a Trypanosoma cruzi

La vida que quiero: proyectos de vida aplicando psicología positiva y metodologías visuales

Podeu consultar el document complet a: http://hdl.handle.net/2445/58585Éxito y fracaso escolar conviven diariamente en la escuela. Uno es oportunidad para el otro y viceversa. Combinando la teoría de las fortalezas del carácter, identidad narrativa, teoría de la autodeterminación y otros constructos con metodologías audiovisuales, el programa invita a jóvenes a descubrir sus recursos personales y reescribir su biografía a partir de ellos, de modo de finalmente proyectarlos hacia el futuro en un Proyecto de Vida positivo y realista. Para lograrlo, los alumnos son invitados a auto-observarse, observar a sus compañeros y a entrevistar a sus familiares, aprovechando siempre las representaciones visuales. Esta nueva versión de la propia vida queda plasmada en un relato digital, una secuencia de imágenes que retrata la propia vida pasada, presente y futura, sincronizada con un guion que da cuenta del proceso de convertirse en Persona con Fortalezas del Carácter. Se discuten las dificultades, las oportunidades y los desafíos de su implementación en escuelas en Barcelona, Castelldefels y Viladecans

Long-Term Systemic Expression of a Novel PD-1 Blocking Nanobody from an AAV Vector Provides Antitumor Activity without Toxicity

Immune checkpoint blockade using monoclonal antibodies (mAbs) able to block programmed death-1 (PD-1)/PD-L1 axis represents a promising treatment for cancer. However, it requires repetitive systemic administration of high mAbs doses, often leading to adverse effects. We generated a novel nanobody against PD-1 (Nb11) able to block PD-1/PD-L1 interaction for both mouse and human molecules. Nb11 was cloned into an adeno-associated virus (AAV) vector downstream of four different promoters (CMV, CAG, EF1α, and SFFV) and its expression was analyzed in cells from rodent (BHK) and human origin (Huh-7). Nb11 was expressed at high levels in vitro reaching 2–20 micrograms/mL with all promoters, except SFFV, which showed lower levels. Nb11 in vivo expression was evaluated in C57BL/6 mice after intravenous administration of AAV8 vectors. Nb11 serum levels increased steadily along time, reaching 1–3 microgram/mL two months post-treatment with the vector having the CAG promoter (AAV-CAG-Nb11), without evidence of toxicity. To test the antitumor potential of this vector, mice that received AAV-CAG-Nb11, or saline as control, were challenged with colon adenocarcinoma cells (MC38). AAV-CAG-Nb11 treatment prevented tumor formation in 30% of mice, significantly increasing survival. These data suggest that continuous expression of immunomodulatory nanobodies from long-term expression vectors could have antitumor effects with low toxicity

Repurposing Carvedilol as a Novel Inhibitor of the Trypanosoma cruzi Autophagy Flux That Affects Parasite Replication and Survival

T. cruzi, the causal agent of Chagas disease, is a parasite able to infect different types of host cells and to persist chronically in the tissues of human and animal hosts. These qualities and the lack of an effective treatment for the chronic stage of the disease have contributed to the durability and the spread of the disease around the world. There is an urgent necessity to find new therapies for Chagas disease. Drug repurposing is a promising and cost-saving strategy for finding new drugs for different illnesses. In this work we describe the effect of carvedilol on T. cruzi. This compound, selected by virtual screening, increased the accumulation of immature autophagosomes characterized by lower acidity and hydrolytic properties. As a consequence of this action, the survival of trypomastigotes and the replication of epimastigotes and amastigotes were impaired, resulting in a significant reduction of infection and parasite load. Furthermore, carvedilol reduced the whole-body parasite burden peak in infected mice. In summary, in this work we present a repurposed drug with a significant in vitro and in vivo activity against T. cruzi. These data in addition to other pharmacological properties make carvedilol an attractive lead for Chagas disease treatment.Fil: Rivero, Cynthia Vanesa. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Mendoza. Instituto de Histología y Embriología de Mendoza Dr. Mario H. Burgos. Universidad Nacional de Cuyo. Facultad de Ciencias Médicas. Instituto de Histología y Embriología de Mendoza Dr. Mario H. Burgos; Argentina. Bernhard Nocht Institute For Tropical Medicine.; AlemaniaFil: Martinez, Santiago Jose. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Mendoza. Instituto de Histología y Embriología de Mendoza Dr. Mario H. Burgos. Universidad Nacional de Cuyo. Facultad de Ciencias Médicas. Instituto de Histología y Embriología de Mendoza Dr. Mario H. Burgos; Argentina. Cedars Sinai Medical Cente; Estados UnidosFil: Novick, Paul. University Of Stanford. Departament Of Chemistry; Estados UnidosFil: Cueto, Juan Agustin. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Mendoza. Instituto de Histología y Embriología de Mendoza Dr. Mario H. Burgos. Universidad Nacional de Cuyo. Facultad de Ciencias Médicas. Instituto de Histología y Embriología de Mendoza Dr. Mario H. Burgos; ArgentinaFil: Salassa, Betiana Nebaí. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Mendoza. Instituto de Histología y Embriología de Mendoza Dr. Mario H. Burgos. Universidad Nacional de Cuyo. Facultad de Ciencias Médicas. Instituto de Histología y Embriología de Mendoza Dr. Mario H. Burgos; ArgentinaFil: Vanrell, María Cristina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Mendoza. Instituto de Histología y Embriología de Mendoza Dr. Mario H. Burgos. Universidad Nacional de Cuyo. Facultad de Ciencias Médicas. Instituto de Histología y Embriología de Mendoza Dr. Mario H. Burgos; ArgentinaFil: Li, Xiaomo. Bernhard Nocht Institute For Tropical Medicine.; AlemaniaFil: Labriola, Carlos Alberto. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Parque Centenario. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Buenos Aires. Fundación Instituto Leloir. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Buenos Aires; ArgentinaFil: Polo Ilacqua, Luis Mariano. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Mendoza. Instituto de Histología y Embriología de Mendoza Dr. Mario H. Burgos. Universidad Nacional de Cuyo. Facultad de Ciencias Médicas. Instituto de Histología y Embriología de Mendoza Dr. Mario H. Burgos; ArgentinaFil: Engman, David M.. Cedars Sinai Medical Center; Estados UnidosFil: Clos, Joachim. Bernhard Nocht Institute For Tropical Medicine.; AlemaniaFil: Romano, Patricia Silvia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Mendoza. Instituto de Histología y Embriología de Mendoza Dr. Mario H. Burgos. Universidad Nacional de Cuyo. Facultad de Ciencias Médicas. Instituto de Histología y Embriología de Mendoza Dr. Mario H. Burgos; Argentin

Local delivery of optimized nanobodies targeting the PD-1/PD-L1 axis with a self-amplifying RNA viral vector induces potent antitumor responses

Despite the success of immune checkpoint blockade for cancer therapy, many patients do not respond adequately. We aimed to improve this therapy by optimizing both the antibodies and their delivery route, using small monodomain antibodies (nanobodies) delivered locally with a self-amplifying RNA (saRNA) vector based on Semliki Forest virus (SFV). We generated nanobodies against PD-1 and PD-L1 able to inhibit both human and mouse interactions. Incorporation of a dimerization domain reduced PD-1/PD-L1 IC50 by 8- and 40-fold for antiPD-L1 and anti-PD-1 nanobodies, respectively. SFV viral particles expressing dimeric nanobodies showed a potent antitumor response in the MC38 model, resulting in >50% complete regressions, and showed better therapeutic efficacy compared to vectors expressing conventional antibodies. These effects were also observed in the B16 melanoma model. Although a short-term expression of nanobodies was observed due to the cytopathic nature of the saRNA vector, it was enough to generate a strong proinflammatory response in tumors, increasing infiltration of NK and CD8+ T cells. Delivery of the SFV vector expressing dimeric nanobodies by local plasmid electroporation, which could be more easily translated to the clinic, also showed a potent antitumor effect

Influencia de la suplementación con licopeno sobre el antígeno prostático específico en pacientes de alto riesgo

El Cáncer es una de las causas más importantes de morbi-mortalidad en el mundo. La mayoría de los tumores malignos tienen un período latente de 10 a 20 años, el cual provee un tiempo amplio para realizar prevención. El Licopeno es un carotenoide que actúa como un potente antioxidante e inmunomodulador en la quimioprevención del adenocarcinoma de próstata. En este sentido, los objetivos de este trabajo han sido observar el efecto de la suplementación con licopeno sobre los niveles de PSA, en una población con alto riesgo de padecer cáncer de próstata (CaP)

Autophagy plays a protective role against Trypanosoma cruzi infection in mice

Autophagy is a catabolic pathway required for cellular and organism homeostasis. Autophagy participates in the innate and adaptive immune responses at different levels. Xenophagy is a class of selective autophagy that involves the elimination of intracellular pathogens. Trypanosoma cruzi is the causative agent of Chagas, a disease that affects 8 million individuals worldwide. Previously, our group has demonstrated that autophagy participates in the invasion of T. cruzi in non-phagocytic cells. In this work we have studied the involvement of autophagy in the development of T. cruzi infection in mice. Beclin-1 is a protein essential for autophagy, required for autophagosome biogenesis and maturation. We have performed an acute model of infection on the autophagic deficient Beclin-1 heterozygous knock-out mice (Bcln±) and compared to control Bcln+/+ animals. In addition, we have analyzed the infection process in both peritoneal cells and RAW macrophages. Our results have shown that the infection was more aggressive in the autophagy-deficient mice, which displayed higher numbers of parasitemia, heart´s parasitic nests and mortality rates. We have also found that peritoneal cells derived from Bcln± animals and RAW macrophages treated with autophagy inhibitors displayed higher levels of infection compared to controls. Interestingly, free cytosolic parasites recruited LC3 protein and other markers of xenophagy in control compared to autophagy-deficient cells. Taken together, these data suggest that autophagy plays a protective role against T. cruzi infection in mice, xenophagy being one of the processes activated as part of the repertoire of immune responses generated by the host

Un nuevo concepto en obesidad y cáncer de próstata: PSA Masa

Estudios recientes señalan que los hombres obesos tienen menores concentraciones plasmáticas de PSA que los hombres normopeso, probablemente debido a una menor actividad androgénica y/o a su mayor volumen plasmático (VP); esto retrasaría la detección y diagnóstico temprano de cáncer de prótata (CaP) en este grupo de pacientes