Padrões de acúmulo de proteínas e carboidratos durante a embriogênese somática de Acca sellowiana

The aim of this work was to quantify the protein, starch and total sugars levels during histodifferentiation and development of somatic embryos of Acca sellowiana Berg. For histological observations, the samples were dehydrated in a battery of ethanol, embedded in historesin and stained with toluidine blue (morphology), coomassie blue (protein bodies) and periodic acid-Schiff (starch). Proteins were extracted using a buffer solution, precipitated using ethanol and quantified using the Bradford reagent. Total sugars were extracted using a methanol-chloroform-water (12:5:3) solution and quantified by a reaction with anthrone at 0.2%. Starch was extracted using a 30% perchloric acid solution and quantified by a reaction with anthrone at 0.2%. During the somatic embryogenesis' in vitro morphogenesis and differentiation processes, the total protein levels decreased and the soluble sugars levels increased during the first 30 days in culture and remained stable until the 120th day. On the other hand, total protein levels increased according to the progression in the developmental stages of the somatic embryos. The levels of total sugars and starch increased in the heart and cotyledonary stages, and decreased in the torpedo and pre-cotyledonary stages. These compounds play a central role in the development of somatic embryos of Acca sellowiana. © 2009 Embrapa Informação Tecnológica.O objetivo deste trabalho foi quantificar os teores de proteína, amido e açúcares totais durante a histodiferenciação e desenvolvimento dos embriões somáticos em Acca sellowiana Berg. Para as observações histológicas, as amostras foram desidratadas em uma bateria de etanol, emblocadas em historesina e coradas com azul de toluidina (morfologia), azul de coomassie (corpos proteicos) e reativo ácido periódico de Schiff (amido). As proteínas foram extraídas usando uma solução tampão, precipitadas usando etanol e quantificadas por meio do reativo de Bradford. Os açúcares totais foram extraídos usando uma solução metanol-clorofórmioágua (12:5:3) e quantificados pela reação com antrona a 0,2%. O amido foi extraído usando uma solução de ácido perclórico a 30% e quantificado pela reação com antrona a 0,2%. Durante a diferenciação e morfogênese in vitro da embriogênese somática, os teores de proteínas totais decresceram e os açúcares solúveis aumentaram durante os 30 primeiros dias em cultura e permaneceram constantes até os 120 dias. Por outro lado, os teores das proteínas totais apresentaram incremento de acordo com a progressão nos estádios de desenvolvimento dos embriões somáticos. Os teores de açúcares totais e de amido aumentaram nos estádios cordiforme e cotiledonar e diminuíram nos estádios torpedo e pré-cotiledonar. Esses compostos exercem papel central no desenvolvimento de embriões somáticos de Acca sellowiana.Fil: Cangahuala-Inocente, Gabriela Claudia. Universidade Federal de Santa Catarina; BrasilFil: Steiner, Neusa. Universidade Federal de Santa Catarina; BrasilFil: Maldonado, Sara Beatriz. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Ciudad Universitaria. Instituto de Biodiversidad y Biología Experimental y Aplicada. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Instituto de Biodiversidad y Biología Experimental y Aplicada; ArgentinaFil: Guerra, Miguel Pedro. Universidade Federal de Santa Catarina; Brasi

Transgenic tobacco plants expressing the Potato virus X open reading frame 3 gene develop specific resistance and necrotic ring symptoms after infection with the homologous virus

Tobacco plants were transformed with the open reading frame 3 gene from Potato virus X (PVX) coding for the p12 protein. Although the transgenic plants exhibited a normal morphological aspect, microscopic examination revealed extensive alterations in leaf tissue structure. After being challenged with PVX, the transgenic plants showed resistance to PVX infection and formation of specific leaf symptoms consisting of concentric rings encircled by necrotic borders. These novel symptoms were accompanied by biochemical changes normally associated with the hypersensitive response (HR) and were absent in noninfected transgenic plants or in PVX-infected nontransgenic plants. No equivalent virus resistance was observed after inoculation with Tobacco mosaic virus or Potato virus Y, suggesting the presence of a specific resistance mechanism. Despite development of HR-like symptoms, systemic acquired resistance was not induced in PVX-infected p12 transgenic plants. No evidence of an RNA-mediated resistance mechanism was found.Fil: Kobayashi, Ken. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Investigaciones en Ingeniería Genética y Biología Molecular "Dr. Héctor N. Torres"; ArgentinaFil: Cabral, Silvia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Investigaciones en Ingeniería Genética y Biología Molecular "Dr. Héctor N. Torres"; ArgentinaFil: Calamante, Gabriela. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro Nacional de Investigaciones Agropecuarias Castelar. Centro de Investigación en Ciencias Veterinarias y Agronómicas. Instituto de Biotecnología; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales; ArgentinaFil: Maldonado, Sara Beatriz. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales; ArgentinaFil: Mentaberry, Alejandro Nestor. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Investigaciones en Ingeniería Genética y Biología Molecular "Dr. Héctor N. Torres"; Argentin

Storage lipids and proteins of Euterpe edulis seeds

Comparative studies on fatty acid and protein composition of the endosperm and embryo of palmito (Euterpe edulis Martius) were conducted using gas-liquid chromatography and sodium dodecyl sulfate–polyacrylamide gel electrophoresis. On a dry weight basis, the embryo contained extremely lower amounts of lipids and proteins than did the endosperm, which was associated with the scarce lipid and protein bodies previously reported in axis and cotyledon. The fatty acid composition also exhibited differences between both tissues: (I) the fatty acid diversity was greater in embryo than in endosperm; (II) embryo and endosperm contained predominantly linoleic, palmitic, oleic and stearic acids even though the relative values were different for each tissue. As compared to other palm species, the higher fatty acid unsaturation in Euterpe edulis seed could be involved in the previously reported short longevity and recalcitrant behavior during storage. Proteins of both tissues were heterogeneous in molecular mass. Some proteins were tissue-specific, but other were common, among them a highly glycosylated protein which migrated at about 55 kDa. We hypothesize that the latter, also reported in all previously studied palm species, is one of the proteins characterizing the Arecaceae family.Fil: Panza, Víctor. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación de Recursos Naturales. Instituto de Recursos Biológicos; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Departamento de Biodiversidad y Biología Experimental; ArgentinaFil: Pighín, Darío Gabriel. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Ciudad Universitaria. Instituto de Biodiversidad y Biología Experimental y Aplicada. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Instituto de Biodiversidad y Biología Experimental y Aplicada; Argentina. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria; ArgentinaFil: Lainez, Veronica. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Ciudad Universitaria. Instituto de Biodiversidad y Biología Experimental y Aplicada. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Instituto de Biodiversidad y Biología Experimental y Aplicada; ArgentinaFil: Pollero, Ricardo Jose. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - La Plata. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de La Plata "Prof. Dr. Rodolfo R. Brenner". Universidad Nacional de la Plata. Facultad de Ciencias Médicas. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de La Plata "Prof. Dr. Rodolfo R. Brenner"; ArgentinaFil: Maldonado, Sara Beatriz. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Ciudad Universitaria. Instituto de Biodiversidad y Biología Experimental y Aplicada. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Instituto de Biodiversidad y Biología Experimental y Aplicada; Argentina. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación de Recursos Naturales. Instituto de Recursos Biológicos; Argentin

Deterioration of willow seeds during storage

Willow (Salix spp.) seeds are able to tolerate desiccation, but differ from typical orthodox seeds in that they lose viability in a few days at room temperature, and in that the chloroplasts in embryo tissues do not dedifferentiate during maturation drying, thus retaining chlorophyll and maintaining intact their thylakoid membranes. In the present study, we investigated the damage generated in willow seeds during storage under appropriate conditions to exclude the eventual generation of reactive oxygen species by photooxidation. To this end, we measured different indicators of molecular damage, such as changes in the fatty acid profile, protein degradation, nuclease activities, and DNA damage, and evaluated normal germination and total germination in seeds stored for one, ten and sixteen years. We found: (i) a decrease in the fraction of unsaturated fatty acids; (ii) changes in the protein profile due to a decrease in protein solubility; (iii) activation of nucleases; and (iv) DNA fragmentation. Taken together, our findings identified programmed cell death as a key mechanism in seed deterioration during storage. We also found that, although the seeds maintained high percentages of total germination, the death program had already started in the seeds stored for ten years and was more advanced in those stored for sixteen years.Fil: Lopez Fernandez, Maria Paula. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Ciudad Universitaria. Instituto de Biodiversidad y Biología Experimental y Aplicada. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Instituto de Biodiversidad y Biología Experimental y Aplicada; ArgentinaFil: Moyano, Laura. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Ciudad Universitaria. Instituto de Biodiversidad y Biología Experimental y Aplicada. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Instituto de Biodiversidad y Biología Experimental y Aplicada; ArgentinaFil: Correa, María Daniela. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Departamento de Biodiversidad y Biología Experimental; ArgentinaFil: Vasile, Franco Emanuel. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Universidad Nacional del Chaco Austral. Departamento de Industrias Alimentarias; ArgentinaFil: Burrieza, Hernán Pablo. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Ciudad Universitaria. Instituto de Biodiversidad y Biología Experimental y Aplicada. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Instituto de Biodiversidad y Biología Experimental y Aplicada; ArgentinaFil: Maldonado, Sara Beatriz. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Ciudad Universitaria. Instituto de Biodiversidad y Biología Experimental y Aplicada. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Instituto de Biodiversidad y Biología Experimental y Aplicada; Argentin

Evidence on the discrimination of quinoa grains with a combination of FT-MIR and FT-NIR spectroscopy

Quinoa is considered as a valuable re-emergent crop due to its nutritional composition. In this study, five quinoa grains from different geographical origin (Real, CHEN 252, Regalona, BO25 and UDc9) were discriminated using a combination of FT-MIR and FT-NIR spectra as input for principal component analysis (PCA), cluster analysis (CA) and soft independent modelling class analogy (SIMCA). The results obtained from PCA and CA show a great power of discrimination, with an average silhouette width value of 0.96. Moreover, SIMCA showed an error rate and accuracy values of 0 and 1 respectively with only 4% misclassified samples. A relationship between each principal component and the most important variables for the discrimination were mainly due to vibrations of several oleofins groups (C–H, C–H2, C–H3), alkene group (–CH=CH–), hydroxyl group (O–H) and Amides I and II vibrational modes.Fil: Rodríguez, Silvio David. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Ciudad Universitaria. Instituto de Biodiversidad y Biología Experimental y Aplicada. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Instituto de Biodiversidad y Biología Experimental y Aplicada; ArgentinaFil: Lopez Fernandez, Maria Paula. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Ciudad Universitaria. Instituto de Biodiversidad y Biología Experimental y Aplicada. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Instituto de Biodiversidad y Biología Experimental y Aplicada; ArgentinaFil: Maldonado, Sara Beatriz. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Ciudad Universitaria. Instituto de Biodiversidad y Biología Experimental y Aplicada. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Instituto de Biodiversidad y Biología Experimental y Aplicada; ArgentinaFil: Buera, Maria del Pilar. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Departamento de Industrias. Instituto de Tecnología de Alimentos y Procesos Quimicos. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Ciudad Universitaria. Instituto de Tecnología de Alimentos y Procesos Quimicos.; Argentin

El grano de quinua y las dehidrinas

El estrés hídrico que generan las condiciones de sequía, alta salinidad o bajas temperaturas, reduce tanto el crecimiento como el rendimiento de los cultivos, y representa un obstáculo agronómico significativo en grandes áreas del mundo. Sequía, salinidad y frío conducen a una merma en la disponibilidad de agua en tejidos y células, por lo que hay grandes similitudes en las características fisiológicas frente a estos tipos de estrés. Consistente con esto, la expresión de algunos genes varía tanto durante la aclimatación al frío y a la sal, como a la sequía. Frecuentemente, estos genes son expresados proporcionalmente en función de la tolerancia de la planta a cada tipo de estrés. Esto se puede demostrar de dos maneras: (i) cuando un único cultivar o genotipo es expuesto a diferentes intensidades de un factor ambiental y (ii) cuando genotipos o especies que difieren cuantitativamente en la aclimatación a un tipo de estrés son expuestos a un mismo factor estresante de idéntica intensidad.Fil: Burrieza, Hernán Pablo. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Departamento de Biodiversidad y Biología Experimental; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Martínez Tosar, Leandro Julián. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Ciudad Universitaria. Instituto de Biodiversidad y Biología Experimental y Aplicada. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Instituto de Biodiversidad y Biología Experimental y Aplicada; ArgentinaFil: Avella Grillia, María S.. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Departamento de Biodiversidad y Biología Experimental; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Kobayashi, Ken. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Ciudad Universitaria. Instituto de Biodiversidad y Biología Experimental y Aplicada. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Instituto de Biodiversidad y Biología Experimental y Aplicada; ArgentinaFil: Maldonado, Sara Beatriz. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Departamento de Biodiversidad y Biología Experimental; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Ciudad Universitaria. Instituto de Biodiversidad y Biología Experimental y Aplicada. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Instituto de Biodiversidad y Biología Experimental y Aplicada; Argentin

Low-Volume and High-Intensity Aerobic Interval Training May Attenuate Dysfunctional Ventricular Remodeling after Myocardial Infarction: Data from the INTERFARCT Study

Background: Aerobic high-intensity interval training (HIIT) has demonstrated benefits for ventricular remodeling after myocardial infarction (MI) through various mechanisms. Despite this, the optimal training volume is not well known. The present study aimed to assess the effects of different (low vs. high volume) aerobic HIIT compared to an attentional control (AC) group on echocardiographic and biochemical indicators of left ventricular (LV) remodeling in adults after MI. Methods: Randomized clinical trial conducted on post-MI patients with preserved ventricular function. Participants were assigned to three study groups. Two groups performed HIIT 2 d/week, one group with low-volume HIIT (20 min, n = 28) and another with high-volume HIIT (40 min, n = 28). A third group was assigned to AC (n = 24) with recommendations for unsupervised aerobic training. Left ventricular echocardiographic parameters and cardiac biomarker levels (N-terminal pro-b-type natriuretic peptide, NT-proBNP; soluble growth stimulation expressed gene 2, ST2; troponin T; and creatine kinase) were assessed at baseline and after the intervention (16 weeks). Results: Eighty participants (58.4 ± 8.3 yrs, 82.5% male) were included. Both low- and high-volume HIIT showed increases (p < 0.05) in left ventricular end-diastolic diameter (1.2%, 2.6%), and volume (1.1%, 1.3%), respectively. Interventricular septal and posterior walls maintained their thickness (p = 0.36) concerning the AC. Significant (p < 0.05) gain in diastolic function was shown with the improvements in E (–2.1%, –3.3%), e’ waves (2.2%, 5.5%), and the deceleration time (2.1%, 2.9%), and in systolic function with a reduction in global longitudinal strain (–3.2%, –4.7%), respectively. Significant (p < 0.05) reductions of N-terminal pro-B-type natriuretic peptide (NT-proBNP) (–4.8%, –11.1%) and of ST2 (–21.7%, –16.7%)were found in both HIIT groups respectively compared to the AC group. Creatine kinase elevation was shown only in high-volume HIIT (19.3%, p < 0.01). Conclusions: Low-volume HIIT is proposed as a clinically time-efficient and safer strategy to attenuate dysfunctional remodeling by preventing wall thinning and improving LV function in post-MI patients.This study has been carried out receiving funds from the Santiago Apostol Hospital (Miranda de Ebro, Spain) and the Department of Physical Education and Sport, University of the Basque Country (UPV/EHU)

Activation of nucleases, pcd, and mobilization of reserves in the araucaria angustifolia megagametophyte during germination

The megagametophyte of mature seeds of Araucaria angustifolia consists of cells with thin walls, one or more nuclei, a central vacuole storing proteins, and a cytoplasm rich in amyloplasts, mitochondria and lipid bodies. In this study, we describe the process of mobilization of reserves and analyzed the dismantling of the tissue during germination, using a range of well-established markers of programmed cell death (PCD), including: morphological changes in nuclei and amyloplasts, DNA degradation, and changes in nuclease profiles. TUNEL reaction and DNA electrophoresis demonstrate that DNA fragmentation in nuclei occurs at early stages of germination, which correlates with induction of specific nucleases. The results of the present study add knowledge on the dismantling of the megagametophyte of genus Araucaria, a storage tissue that stores starch as the main reserve substance, as well as on the PCD pathway, by revealing new insights into the role of nucleases and the expression patterns of putative nuclease genes during germination.Fil: Moyano, Laura. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Departamento de Biodiversidad y Biología Experimental; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Ciudad Universitaria. Instituto de Biodiversidad y Biología Experimental y Aplicada. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Instituto de Biodiversidad y Biología Experimental y Aplicada; ArgentinaFil: Correa, María D.. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Departamento de Biodiversidad y Biología Experimental; ArgentinaFil: Favre, Leonardo Cristian. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Departamento de Industrias; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Departamento de Química Orgánica; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Rodríguez, Florencia S.. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Departamento de Biodiversidad y Biología Experimental; ArgentinaFil: Maldonado, Sara Beatriz. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Ciudad Universitaria. Instituto de Biodiversidad y Biología Experimental y Aplicada. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Instituto de Biodiversidad y Biología Experimental y Aplicada; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Departamento de Biodiversidad y Biología Experimental; ArgentinaFil: Lopez Fernandez, Maria Paula. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Departamento de Biodiversidad y Biología Experimental; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Ciudad Universitaria. Instituto de Biodiversidad y Biología Experimental y Aplicada. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Instituto de Biodiversidad y Biología Experimental y Aplicada; Argentin

Red light delays programmed cell death in non-host interaction between Pseudomonas syringae pv tomato DC3000 and tobacco plants

Light modulates almost every aspect of plant physiology, including plant-pathogen interactions. Among these, the hypersensitive response (HR) of plants to pathogens is characterized by a rapid and localized programmed cell death (PCD), which is critical to restrict the spread of pathogens from the infection site. The aim of this work was to study the role of light in the interaction between Pseudomonas syringae pv. tomato DC3000 (Pto DC3000) and non-host tobacco plants. To this end, we examined the HR under different light treatments (white and red light) by using a range of well-established markers of PCD. The alterations found at the cellular level included: i) loss of membrane integrity and nuclei, ii) RuBisCo and DNA degradation, and iii) changes in nuclease profiles and accumulation of cysteine proteinases. Our results suggest that red light plays a role during the HR of tobacco plants to Pto DC3000 infection, delaying the PCD process.Fil: Moyano, Laura. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Ciudad Universitaria. Instituto de Biodiversidad y Biología Experimental y Aplicada. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Instituto de Biodiversidad y Biología Experimental y Aplicada; ArgentinaFil: Lopez Fernandez, Maria Paula. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Ciudad Universitaria. Instituto de Biodiversidad y Biología Experimental y Aplicada. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Instituto de Biodiversidad y Biología Experimental y Aplicada; ArgentinaFil: Carrau, Analía. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Rosario. Instituto de Biología Molecular y Celular de Rosario. Universidad Nacional de Rosario. Facultad de Ciencias Bioquímicas y Farmacéuticas. Instituto de Biología Molecular y Celular de Rosario; ArgentinaFil: Nannini, Julian Maria. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Rosario. Instituto de Biología Molecular y Celular de Rosario. Universidad Nacional de Rosario. Facultad de Ciencias Bioquímicas y Farmacéuticas. Instituto de Biología Molecular y Celular de Rosario; ArgentinaFil: Petrocelli, Silvana. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Rosario. Instituto de Biología Molecular y Celular de Rosario. Universidad Nacional de Rosario. Facultad de Ciencias Bioquímicas y Farmacéuticas. Instituto de Biología Molecular y Celular de Rosario; ArgentinaFil: Orellano, Elena Graciela. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Rosario. Instituto de Biología Molecular y Celular de Rosario. Universidad Nacional de Rosario. Facultad de Ciencias Bioquímicas y Farmacéuticas. Instituto de Biología Molecular y Celular de Rosario; ArgentinaFil: Maldonado, Sara Beatriz. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Ciudad Universitaria. Instituto de Biodiversidad y Biología Experimental y Aplicada. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Instituto de Biodiversidad y Biología Experimental y Aplicada; Argentin

Padrões de acúmulo de proteínas e carboidratos durante a embriogênese somática de Acca sellowiana

The aim of this work was to quantify the protein, starch and total sugars levels during histodifferentiation and development of somatic embryos of Acca sellowiana Berg. For histological observations, the samples were dehydrated in a battery of ethanol, embedded in historesin and stained with toluidine blue (morphology), coomassie blue (protein bodies) and periodic acid–Schiff (starch). Proteins were extracted using a buffer solution, precipitated using ethanol and quantified using the Bradford reagent. Total sugars were extracted using a methanol-chloroform-water (12:5:3) solution and quantified by a reaction with anthrone at 0.2%. Starch was extracted using a 30% perchloric acid solution and quantified by a reaction with anthrone at 0.2%. During the somatic embryogenesis’ in vitro morphogenesis and differentiation processes, the total protein levels decreased and the soluble sugars levels increased during the first 30 days in culture and remained stable until the 120th day. On the other hand, total protein levels increased according to the progression in the developmental stages of the somatic embryos. The levels of total sugars and starch increased in the heart and cotyledonary stages, and decreased in the torpedo and pre-cotyledonary stages. These compounds play a central role in the development of somatic embryos of Acca sellowiana.O objetivo deste trabalho foi quantificar os teores de proteína, amido e açúcares totais durante a histodiferenciação e desenvolvimento dos embriões somáticos em Acca sellowiana Berg. Para as observações histológicas, as amostras foram desidratadas em uma bateria de etanol, emblocadas em historesina e coradas com azul de toluidina (morfologia), azul de coomassie (corpos proteicos) e reativo ácido periódico de Schiff (amido). As proteínas foram extraídas usando uma solução tampão, precipitadas usando etanol e quantificadas por meio do reativo de Bradford. Os açúcares totais foram extraídos usando uma solução metanol-clorofórmio-água (12:5:3) e quantificados pela reação com antrona a 0,2%. O amido foi extraído usando uma solução de ácido perclórico a 30% e quantificado pela reação com antrona a 0,2%. Durante a diferenciação e morfogênese in vitro da embriogênese somática, os teores de proteínas totais decresceram e os açúcares solúveis aumentaram durante os 30 primeiros dias em cultura e permaneceram constantes até os 120 dias. Por outro lado, os teores das proteínas totais apresentaram incremento de acordo com a progressão nos estádios de desenvolvimento dos embriões somáticos. Os teores de açúcares totais e de amido aumentaram nos estádios cordiforme e cotiledonar e diminuíram nos estádios torpedo e pré‑cotiledonar. Esses compostos exercem papel central no desenvolvimento de embriões somáticos de Acca sellowiana