Hes3 regulates cell number in cultures from glioblastoma multiforme with stem cell characteristics

Tumors exhibit complex organization and contain a variety of cell populations. The realization that the regenerative properties of a tumor may be largely confined to a cell subpopulation (cancer stem cell) is driving a new era of anti-cancer research. Cancer stem cells from Glioblastoma Multiforme tumors express markers that are also expressed in non-cancerous neural stem cells, including nestin and Sox2. We previously showed that the transcription factor Hes3 is a marker of neural stem cells, and that its expression is inhibited by JAK activity. Here we show that Hes3 is also expressed in cultures from glioblastoma multiforme which express neural stem cell markers, can differentiate into neurons and glia, and can recapitulate the tumor of origin when transplanted into immunocompromised mice. Similar to observations in neural stem cells, JAK inhibits Hes3 expression. Hes3 RNA interference reduces the number of cultured glioblastoma cells suggesting a novel therapeutic strategy

Microbiomics in collusion with the nervous system in carcinogenesis : diagnosis, pathogenesis and treatment

The influence of the naturally occurring population of microbes on various human diseases has been a topic of much recent interest. Not surprisingly, continuously growing attention is devoted to the existence of a gut brain axis, where the microbiota present in the gut can affect the nervous system through the release of metabolites, stimulation of the immune system, changing the permeability of the blood–brain barrier or activating the vagus nerves. Many of the methods that stimulate the nervous system can also lead to the development of cancer by manipulating pathways associated with the hallmarks of cancer. Moreover, neurogenesis or the creation of new nervous tissue, is associated with the development and progression of cancer in a similar manner as the blood and lymphatic systems. Finally, microbes can secrete neurotransmitters, which can stimulate cancer growth and development. In this review we discuss the latest evidence that support the importance of microbiota and peripheral nerves in cancer development and dissemination.The South African Medical Research Council (SAMRC).https://www.mdpi.com/journal/microorganismsam2022Surger

ELUCIDATION OF THE MOLECULAR AND CELLULAR MECHANISM OF FUNCTION OF THE PKHD1L1 GENE IN VERTEBRATES

Ph.DDOCTOR OF PHILOSOPHY (SOM

Η διευκρίνιση του μοριακού και κυτταρικού μηχανισμού λειτουργίας του γονιδίου Pkhd1l1 στα σπονδυλωτά

This study examines the molecular and cellular mechanism of function of the Pkhd1l1 gene in vertebrates. Foxj1a, a master transcription factor of motile ciliogenesis, upregulates both pkhd1l1 zebrafish genes (pkhd1l1α and pkhd1l1β). Structurally, zebrafish Pkhd1l1 proteins resemble the human PKHD1 protein, which causes autosomal recessive polycystic kidney disease. We hypothesized that both pkhd1l1 zebrafish genes are involved in motile ciliogenesis. To examine our hypothesis, we generated double pkhd1l1 zebrafish knockouts. We also examined Pkhd1l1 knockout mice for motile cilia defects. Double pkhd1l1 zebrafish knockouts show otolith defects 24 hpf, but they do not show any other motile-cilia defects. Double pkhd1l1 zebrafish knockouts show upregulation of the B-cell marker cd79a and the T-cell marker lck. Pkhd1l1 knockout mice also do not show motile cilia defects.Η διδακτορική εργασία εξετάζει τον μοριακό και κυτταρικό μηχανισμό λειτουργίας του γονιδίου Pkhd1l1 στα σπονδυλωτά. Ο κύριος μεταγραφικός παράγοντας Foxj1a της δημιουργίας μικροσκοπικων βλεφαρίδων (cilia), επάγει την έκφραση των γονιδίων pkhd1l1 (pkhd1l1α και pkhd1l1β) του zebrafish (Danio rerio). Δομικά, οι πρωτεΐνες Pkhd1l1 του zebrafish μοιάζουν με την ανθρώπινη πρωτεΐνη PKHD1 που προκαλεί αυτοσωμική υποτελή πολυκυστική ασθένεια των νεφρών. Υποθέσαμε πως τα γονίδια pkhd1l1 του zebrafish εμπλέκονται στην δημιουργία βλεφαρίδων. Για να εξετάσουμε την υπόθεση μας, δημιουργήσαμε διπλα pkhd1l1 zebrafish knockouts. Εξετάσαμε επίσης Pkhd1l1 knockout ποντίκια για πιθανές διαταραχές των κινούμενων βλεφαρίδων. Τα pkhd1l1 zebrafish knockouts έδειξαν μη φυσιολογικούς ωτόλιθους 24 ώρες μετά την γονιμοποίηση, αλλά κανένα άλλο σύμπτωμα που να σχετίζεται με προβλήματα κινούμενων βλεφαρίδων. Τα double pkhd1l1 zebrafish knockouts εμφάνισαν υπερέκφραση του βιοδείκτη cd79a των Β-λεμφοκυττάρων και του lck των Τ-λεμφοκυττάρων. Τα Pkhd1l1 knockout ποντίκια δεν εμφανίζουν κανένα σύμπτωμα στις κινούμενες βλεφαρίδες

Βελτιώσεις σε μα μεθοδολογία λειτουργικής απενεργοποίησης πρωτεασών στα ακροσυμπλεγματικά παράσιτα μέσω της χρησιμοποίησης φυσικών ή μοριακά τροποποιημένων σερπινών

Οι προσπάθειες για την λειτουργική απενεργοποίηση πρωτεασών στα ακροσυμπλεγματικά παράσιτα καθόρισαν μια καινοφανή στρατηγική δημιουργίας γενετικά εξασθενημένων παρασίτων, η οποία αυτήν την περίοδο επεκτείνεται σε δύο κατευθύνσεις στο εργαστήριο μας. Η πρώτη κατεύθυνση είναι η χρησιμοποίηση μοριακά κατασκευασμένων σερπινών με σκοπό να εμποδίσουμε την πρωτεόλυση στα οργανίδια των παρασίτων που σχετίζονται με την διείσδυση και η άλλη είναι να ελέγξουμε το ανασταλτικό δυναμικό επιπρόσθετων φυσικά προερχόμενων σερπινών ενάντια στους πρωτεολυτικούς μηχανισμούς ακροσυμπλεγματικών παρασίτων μέσω της χρησιμοποίησης οωκινετών του Plasmodium berghei ως ένα απλό σύστημα εξέτασης. Αποφασίσαμε να στοχεύσουμε μοριακά κατασκευασμένους μακρομοριακούς αναστολείς πρωτεασών στα μικρονήματα ταχυζωιτών του παρασίτου Toxoplasma gondii , με σκοπό να αναστείλουμε βασικές πρωτεολυτικές διεργασίες που λαμβάνουν χώρα σε αυτά τα οργανίδια και επιχειρήσαμε επίσης να αναπτύξουμε έναν φορέα διαμόλυνσης (transfection), ο οποίος θα διευκόλυνε την ενός βήματος υποκλωνοποίηση φυσικών η μοριακά κατασκευασμένων μακρομοριακών αναστολέων πρωτεασών (Μ.Α.Π) και την συνεπακόλουθη δημιουργία διαγονιδιακών παρασίτων Plasmodium berghei που θα εκφράζουν τους Μ.Α.Π στο στάδιο του οωκινέτη. Για αυτήν την περίπτωση, θα αναπτύξουμε μια γρήγορη και μαζική διαδικασία επιλογής που θα μας επιτρέψει να αναγνωρίζουμε σερπίνες που εμπλέκονται με την διαδικασία διείσδυσης του οωκινέτη στο μεσέντερο του κουνουπιού καθώς και με την μετάπτωση του οωκινέτη σε οωκύστη.The efforts to functionally inhibit proteases in apicomplexans by using NcPI-S serpin defined a novel strategy to generate genetically attenuated parasites, which is currently extended towards two directions in our laboratory. The first direction is to use molecularly engineered serpins in order to block proteolysis in invasion related organelles and the other is to test the inhibitory potential of additional naturally derived serpins against proteolytic machineries of apicomplexan parasites by using Plasmodium berghei ookinetes as a test tube system. We decided to target molecular engineered MPIs in the micronemes of Toxoplasma tachyzoites aiming to inhibit critical proteolytic steps that take place in those organelles and we also attempted to develop a one step cloning transfection vector, which would facilitate one step sub-cloning of natural or molecular engineered MPIs and the subsequent generation of transgenic P. berghei parasites expressing those MPIs at the ookinete stage. In this case a high throughput screen would develop allowing us to identify serpins interfering with ookinete midgut invasion and ookinete to oocyst transition

Microbiomics in Collusion with the Nervous System in Carcinogenesis : Diagnosis, Pathogenesis and Treatment

The influence of the naturally occurring population of microbes on various human diseases has been a topic of much recent interest. Not surprisingly, continuously growing attention is devoted to the existence of a gut brain axis, where the microbiota present in the gut can affect the nervous system through the release of metabolites, stimulation of the immune system, changing the permeability of the blood-brain barrier or activating the vagus nerves. Many of the methods that stimulate the nervous system can also lead to the development of cancer by manipulating pathways associated with the hallmarks of cancer. Moreover, neurogenesis or the creation of new nervous tissue, is associated with the development and progression of cancer in a similar manner as the blood and lymphatic systems. Finally, microbes can secrete neurotransmitters, which can stimulate cancer growth and development. In this review we discuss the latest evidence that support the importance of microbiota and peripheral nerves in cancer development and dissemination.Funding Agencies|South African Medical Research Council (SAMRC)UK Research &amp; Innovation (UKRI)Medical Research Council UK (MRC)</p