Suscetibilidade dos vírus da gripe aos antivirais inibidores da neuraminidase em Portugal, 2009-2014

Os antivirais têm também uma longa e extensa história no tratamento e prevenção da gripe, sendo hoje uma importante opção para o tratamento da doença, bem como a medida de prevenção de eleição numa fase inicial de uma pandemia. O reduzido número de medicamentos autorizados para o tratamento da gripe levanta algumas preocupações, particularmente no que diz respeito às resistências aos antivirais, sendo, por isso, fundamental o estudo dos mecanismos de resistência aos antivirais inibidores da neuraminidase. Este é o mais recente estudo retrospetivo sobre a resistência do vírus da gripe aos antivirais, conduzido no âmbito do Programa Nacional de Vigilância da Gripe, depois da pandemia de 2009, e reúne a informação de um elevado número de estirpes do vírus da gripe, detetados em doentes da comunidade e hospitalizados, de todo o território nacional e durante as últimas cinco épocas gripais. Neste trabalho pretendeu-se descrever o perfil de suscetibilidade dos vírus da gripe do tipo A e B aos antivirais inibidores da neuraminidase (NAI), oseltamivir e zanamivir, em doentes com quadro clínico de síndroma gripal (SG), diagnosticados e notificados no âmbito do Programa Nacional de Vigilância da Gripe entre 2009 e 2014. As notificações clínicas dos casos SG e as amostras biológicas foram enviadas ao INSA, entre 2009 e 2014, pela Rede de Médicos Sentinela, Rede de Serviços de Urgência/Obstetrícia, médicos participantes no projeto EuroEva/I-MOVE e Rede Portuguesa de Laboratórios para o Diagnóstico da Gripe, que integram o Programa Nacional de Vigilância da Gripe. A avaliação da suscetibilidade aos NAI foi realizada no Laboratório Nacional de Referência para o Vírus da Gripe e Outros Vírus Respiratórios, aplicando métodos de referência que incluem os testes fenotípicos para a determinação do IC50, ensaio de inibição da neuraminidase, utilizando um substrato fluorescente, [2´-(4-methyllumbelliferyl)-a-D-N-acetylneuraminic acid, (MUNANA)], e testes genotípicos, que incluíram a sequenciação genómica da região codificante do gene da neuraminidase (NA) e a pesquisa da substituição H275Y no gene da NA, no vírus influenza A(H1)pdm09, por RT-PCR em tempo real. Durante o período do estudo foram avaliadas 357 estirpes dos vírus da gripe (206 influenza A e 151 influenza B) pelo ensaio fenotípico para a determinação da suscetibilidade ao oseltamivir e zanamivir. Foram pesquisadas, em 170 estirpes virais, as substituições associadas à resistência aos NAI. Em 643 amostras positivas para o vírus influenza A(H1)pdm09 foi pesquisada a substituição H275Y, por RT-PCR em tempo real. Os vírus estudados refletem a prevalência do tipo/subtipo em cada inverno. Os vírus influenza do tipo A e B apresentam diferente suscetibilidade aos NAI. O vírus influenza A é mais suscetível aos NAI que o influenza B. Influenza A(H3) mais suscetíveis ao oseltamivir. Influenza B e A(H1)pdm09 são mais suscetveis ao zanamivir. Influenza B/Yamagata têm maior suscetibilidade ao oseltamivir que a linhagem B/Victoria. Entre 2009-2014, foram detetados 4 vírus A(H1)pdm09 com elevada redução da suscetibilidade ao oseltamivir (substituição H275Y no gene NA). Resistência ao oseltamivir esteve associada a doentes com terapêutica antiviral, doença imunossupressora e num dos casos verificou-se durante o período de gravidez. Os vírus da gripe do tipo A e B são na sua maioria suscetíveis ao oseltamivir e zanamivir. A percentagem de vírus influenza A(H1)pdm09 com elevada diminuição da suscetibilidade ao oseltamivir é reduzida e encontra-se dentro dos valores observados ao nível Europeu

Genetic diversity of influenza A(H1)pdm09 viruses, detected in Portugal since the 2009 pandemic

The antigenic drift of circulating influenza viruses requires a continuous monitoring of their antigenic and genetic properties in order to detect any changes that may justify the selection of different vaccine candidates, as well as changes in antiviral recommendations. Since its emergence in 2009, A(H1)pdm09 viruses show a constant antigenic pattern. However, genetically, in the post pandemic seasons these viruses revealed an increasing diversity. From the 2009 pandemic until the end of the 2013/2014 season, the Portuguese NIC has detected 1214 influenza A(H1)pdm09 viruses in the scope of the Portuguese Influenza Surveillance Programme. 416 viruses were isolated and characterised antigenically by HI assays. The HA1 genetic characterisation was performed for 135 viruses. All A(H1)pdm09 revealed no antigenic diversity, being antigenically similar to the vaccine strain A/California/7/2009. In the pandemic season viruses showed a very small genetic diversity belonginig to genetic group 1 (A/Hong Kong/2212/2010). In the 2010/2011 season, Portuguese pandemic viruses showed some genetic diversity, being distributed by 3 genetic groups: 4 (A/Christchurch/16/2010), 5 (A/Astrakhan/1/2011) and 6 (A/St. Petersburg/27/2011). In the following 2011/2012 season, the only one A(H1)pdm09 virus detected, belonged to group 7 (A/St. Petersburg/100/2011). The pandemic viruses circulating in 2012/2013 belonged to this group and to the group 6 (subgroup 6C). Viruses detected in 2013/2014 clustered also into the group 6 (but into the subgroup 6B). Since its emergence in 2009, the majority of pandemic H1 viruses, was antigenically similar to the vaccine strain A/California/7/2009, however, in the studied period, the H1 pandemic viruses revealed an increasing genetic diversity. In Portugal, A(H1)pdm09 viruses represented different genetic groups in circulation over the 5 last seasons. The virological surveillance of influenza A(H1)pdm09 highlights the importance of the genetic characterisation to understand possible pathways of evolution and antigenic drift of these viruses

A efetividade do oxigénio nasal de alto fluxo na insuficiência respiratória: revisão sistemática

Background: respiratory insufficiency is a syndrome with a great impact on hospital admissions, morbidity and mortality. The applicability of High-flow nasal oxygen has been the subject of interest in critically ill patients. Objective: to know the effectiveness of High-flow nasal oxygen as a treatment for respiratory insufficiency in adult patients admitted to the intensive care units. Methods: systematic reviews of effectiveness using the PICO strategy and recommendations from the Joanna Briggs Institute. The survey was carried out in august 2021 using the PubMed and EBSCOhost access platforms. Results: 583 results were identified. Six randomized clinical trials were analyzed. The selection was made after elimination of duplicates; title reading, abstract reading and full text reading according to the Preferred Reporting Items for Systematic Reviews and Meta-Analyses diagram. Conclusion: high-flow nasal oxygen proved to be comfortable, tolerable and effective in the treatment of hypoxemic and hypercapnic respiratory insufficiency. It was effective when compared with conventional oxygen therapy in the post-extubation of hypoxemic patients and in reducing partial pressure of carbon dioxide when compared with Non-Invasive Ventilation in hypercapnic patients.Marco contextual: la insuficiencia respiratoria es un síndrome que tiene un gran impacto en los ingresos hospitalarios, la morbilidad y mortalidad. La aplicabilidad del oxígeno nasal de alto flujo ha sido objeto de interés en pacientes críticos. Objetivo: conocer la efectividad del oxígeno nasal de alto flujo en el tratamiento de la insuficiencia respiratoria en adultos en unidades de cuidados intensivos. Métodos: revision sistemática de efectividad utilizando la estrategia PICO y recomendaciones del Instituto Joanna Briggs. La búsqueda se llevó a cabo en agosto de 2021 utilizando las plataformas de acceso PubMed y EBSCOhost. Resultados: se identificaron 583 resultados. Se analizaron seis ensayos clínicos aleatorios. La selección se realizó después de la eliminación de duplicados; lectura de títulos, de resúmenes y de texto completo siguiendo el diagrama Preferred Reporting Items for Systematic Reviews and Meta-Analyses. Conclusión: el Oxígeno nasal de alto flujo demostró ser cómodo, tolerable y eficaz en el tratamiento de la insuficiencia respiratoria hipoxémica e hipercápnica. Fue eficaz en comparación con la oxigenoterapia convencional en la postextubación de pacientes hipoxémicos y en la reducción de la presión parcial de dióxido de carbono en comparación con la Ventilación No Invasiva en pacientes hipercápnicos.Enquadramento: a insuficiência respiratória é uma síndrome com grande impacto nos internamentos, na morbilidade e mortalidade. A aplicabilidade do oxigénio nasal de alto fluxo tem sido alvo de interesse no doente crítico. Objetivo: conhecer a efetividade do oxigénio nasal de alto fluxo no tratamento da insuficiência respiratória no adulto em unidades de cuidados intensivos. Métodos: revisão sistemática de efetividade que utiliza a estratégia PICO e recomendações do Joanna Briggs Institute. A pesquisa foi realizada em agosto de 2021 com recurso às plataformas de acesso PubMed e EBSCOhost. Resultados: identificaram-se 583 resultados. Foram analisados seis ensaios clínicos randomizados. A seleção foi feita após eliminação de duplicados; leitura do título, resumos e textos integrais de acordo com o diagrama Preferred Reporting Items for Systematic Reviews and Meta-Analyses. Conclusão: o oxigénio nasal de alto fluxo revelou-se confortável, tolerável e eficaz no tratamento da insuficiência respiratória hipoxémica e hipercápnica. Foi eficaz quando comparado com oxigenoterapia convencional na pós-extubação de doentes hipoxémicos e na redução da pressão parcial de dióxido de carbono quando comparado com a Ventilação Não Invasiva nos doentes hipercápnicos

Influenza A(H3) whole genome analysis: searching causes for vaccine failure in 2011/2012

Background: The 2011/2012 season in Portugal, was characterized by an excess mortality and influenza vaccine failures. Predominant influenza A(H3) viruses with new antigenic properties were associated with potential host immune evasion. The aim of this study was to determine possible viral genetic causes that may be associated with cases of vaccine failure by performing a whole genome-based comparison of viruses detected in vaccinated (vacc) and unvaccinated (unvacc) individuals in 2011/2012 season. Methods: In 2011/12 season, 678 nasopharyngeal swabs from ILI cases were analyzed by the Portuguese NIC. Were detected 260 influenza A(H3) and 6 B/Yamagata viruses. For whole genome sequencing (WGS) 25 A(H3) positive samples, 20 from vacc and 5 from unvacc individuals, were selected. Each of the influenza genomic segments was submitted to standard or multiplex PCR amplification. WGS was performed on a MiSeq platform. Multiple alignments, phylogenetic and mutational analysis were performed using MEGA software 6.0. Results: Influenza A(H3) viruses clustered into different genetic clades, reflecting the clades circulating in Portugal, in2011/2012. 20 viruses belonged to clade 6 (reference strain A/Iowa/19/2010) and 5 viruses have clustered in the clade 3: 1 from clade 3A (A/Stockholm/18/2011), a second from clade 3B (A/England/259/2011) and 3 viruses from clade 3C (A/Victoria/361/2011). Viral genomes were highly similar at nucleotide level, ranging 98.2% – 100.0% of similarity. Matrix and nucleoprotein genomic segments were the most conserved, whereas the highest number of substitutions leading to amino acid changes was observed in hemagglutinin and neuraminidase segments (comparisons performed against the vaccine strain A/Perth/16/2009). The deduced amino acid sequences of viral proteins did not reveal any particular feature assigned to the group of vacc or unvacc individuals. Conclusions: In all 8 genomic segments of studied viruses no particular amino acid substitution was found to be associated with the vacc or unvacc cases. The observed differences were associated with the genetic distances between the clades to which viruses belong rather than with vaccine failure. Still, WGS in influenza surveillance is a powerful tool for monitoring the overall evolution of viral genome and establishment of molecular markers for, disease severity and drug resistance. This study points that a full evaluation of influenza vaccine failures should integrate not only data on virus characteristics, but also on host genetic polymorphisms related to immunity and serosurveys in order to better evaluate interindividual variation in influenza vaccine-induced immune responses.info:eu-repo/semantics/publishedVersio

Vigilância da Gripe em Portugal no inverno 2013/2014

Introdução: O Programa Nacional de Vigilância da Gripe tem como objetivos: recolha, análise e divulgação da informação sobre a atividade gripal em Portugal. A vigilância clínica e laboratorial possibilita a determinação semanal das taxas de incidência de síndroma gripal (SG), identificação/ caracterização do vírus influenza, deteção de surtos, vírus emergentes com potencial pandémico e risco para a saúde pública. Foi analisada e descrita a atividade gripal em Portugal, na época de 2013/2014. Materiais e Métodos: Em 2013/2014, colaboraram: a Rede de Médicos-Sentinela (Rede MS), possibilitando o cálculo da taxa de incidência da síndroma gripal. Na componente laboratorial, colaboram Rede MS, Rede de Serviços-Urgência, médicos projeto-EuroEVA e Rede Portuguesa Laboratórios Diagnóstico Gripe com envio de amostras respiratórias para pesquisa/caraterização do vírus influenza. Resultados: Em 2013/2014, a atividade gripal foi moderada. O período epidémico ocorreu entre as semanas 1/2014 e 8/2014, valor máximo 80,7 casos SG / 100000 habitantes na semana 4/2014. A análise laboratorial a 869 exsudados-nasofaringe permitiu a identificação do vírus influenza em 467 (54%) casos de SG. Destes, 460 (98,5%) do tipo A: 279 (32%) do subtipo A(H1)pdm09 e 181 (21%) do subtipo AH3. Foram detetados 7 vírus influenza do tipo B. Discussão e Conclusão: Na época 2013/2014, a atividade gripal foi moderada com taxas de incidência semelhantes às 2012/2013. O período epidémico ocorreu mais cedo em relação a 2012/2013 e foi de menor duração. O vírus influenza do tipo A foi predominante com co-circulação dos dois subtipos: A(H1)pdm09 e A(H3). Os vírus detetados são genética e antigenicamente semelhantes às estirpes vacinais e sensíveis ao oseltamivir e zanamivir

“BULLYING HOMOFÓBICO” NO PRIMEIRO CICLO DE ENSINO

“BULLYING HOMOFÓBICO” NO PRIMEIRO CICLO DE ENSIN

A panel of urinary volatile biomarkers for differential diagnosis of prostate cancer from other urological cancers

Our group recently developed a urinary 6-biomarker panel for the diagnosis of prostate cancer (PCa) which has a higher level of accuracy compared to the serum prostate specific antigen (PSA) test. Herein, urine from an independent cohort of PCa patients and cancer-free controls was analyzed to further validate the discriminative power of that panel. Additionally, urine from patients diagnosed with bladder cancer (BC) and renal cancer (RC) were included to evaluate the site-specificity of the panel. Results confirmed the ability of the 6-biomarker panel to discriminate PCa patients from controls, but not from other urological cancers. To overcome this limitation, an untargeted approach was performed to unveil discriminant metabolites among the three cancer types. A 10-biomarker panel comprising the original panel plus four new metabolites was established to discriminate PCa from controls, BC, and RC, with 76% sensitivity, 90% specificity, and 92% accuracy. This improved panel also disclosed better accuracy than serum PSA test and provides the basis for a new non-invasive early detection tool for PCa.info:eu-repo/semantics/publishedVersio

O panorama do diabetes gestacional em uma maternidade dereferência: Informação e prevenção

Introduction: Gestational Diabetes Mellitus is a disease that offers complications to the mother/baby binomial. In order to deal with this it's necessary a multidisciplinary approach capable of including the mother when promoting health education. Objective: Conduct an action research in health education on the theme of gestational diabetes, quantify the prevalence of the disease, observe the degree of knowledge of pregnant women and collect opinions of the multidisciplinary health team on the subject. Methods: This is an observational study, with a qualitative and quantitative method, based on interviews with professionals and pregnant women, in addition to medical records analysis. Results: 6051 medical records were analyzed, of which 2254 were classified as “High risk” and 3797 as “Low risk”. There were 89 diagnoses of gestational diabetes, 88 classified as high-risk; therefore, the prevalence of the disease was 1.47% of all hospital admissions, with 3.9% being from the High-Risk sector. The average age diagnosed patients was 33.33 years, mainly within the age group of 30 to 39 years. After statistical calculation, a sample of 136 patients was defined for the application of questionnaires, in which it was found that 74.26% of these patients did not know how to answer any information in relation to the context of the disease, showing the need for the process of health education for these pregnant women. . Conclusion: The hospital's multidisciplinary team showed commitment to the context of gestational diabetes today, reinforcing the importance of patient care before and after delivery.Introdução: A Diabetes Mellitus Gestacional é uma doença que oferta complicações ao binômio mãe/bebê e que para seu acompanhamento necessita de uma atuação multiprofissional capaz de incluir a mãe ao promover educação em saúde. Objetivo: Realizar uma pesquisa-ação em educação em saúde acerca do tema diabetes gestacional, quantificar a prevalência da doença, observar o grau de conhecimento das gestantes e coletar opiniões da equipe multiprofissional em saúde sobre o tema. Métodos: Este é um estudo observacional, com método quali-quantitativo, a partir de entrevistas com os profissionais e com gestantes, além dos prontuários Resultados: Foram analisados 6051 prontuários, sendo 2254 classificados como “Alto risco” e 3797 como “Baixo risco”. Encontrou-se 89 diagnósticos de diabetes gestacional, sendo 88 inclusos em prontuários de alto risco; portanto, a prevalência da doença foi de 1,47% de todas as internações no hospital, sendo 3,9% do setor de Alto risco. A idade média de todas as pacientes diagnosticadas foi de 33,33 anos, sendo a maioria dentro da faixa etária de 30 a 39 anos. Após cálculo estatístico a partir dos prontuários, definiu-se amostra de 136 pacientes para aplicação de questionários, nos quais verificou-se que 74,26% dessas pacientes não sabiam responder quaisquer informações em relação ao contexto da doença, evidenciando a necessidade do processo de educação em saúde voltado para essas gestantes. Conclusão: A entrevista com a equipe multiprofissional do hospital mostrou engajamento ao contexto do diabetes gestacional na atualidade, reforçando a importância do cuidado ao paciente antes e após o parto