Effet anti-tumoral du GTN +/- doxorubicine dans le cancer du sein triple négatif : implication du système immunitaire

Breast cancer (BC) is a highly complex, heterogeneous and multifactorial disease. Compared to other subtypes, triple negative (TNBC) represents one of the most advanced stages of the disease, and is characterized by a strong inter- and intra-tumor heterogeneity and a high mutational burden, making treatments very difficult and inefficient. The absence of estrogen and progesterone receptors expression, and the absence of HER2 receptor overexpression, makes chemotherapy (example: doxorubicin), the prior treatment in patients with this type of BC. Unfortunately, the complete anatomopathological response rate, in response to these chemotherapies, rarely exceeds 50% with a long-term benefit affecting only 30 to 50% of patients. The LIIC laboratory in which I did my thesis aims to show that a donor of nitric oxide (NO), glyceryl trinitritrate (GTN), a drug used in cardiology, can improve the therapeutic efficacy of anti-cancerous chemotherapy. The aim of my thesis project was therefore to determine whether the association of GTN with doxorubicin could potentiate the antitumor activity of this chemotherapy in TNBC, and to determine the mechanism by which this combination acts by emphasizing the immune microenvironment in general, and more particularly on immunosuppressive myeloid cells, MDSCs.The results showed that the association of GTN with doxorubicin significantly improved the anti-tumor efficacy of this chemotherapy, in a TNBC model induced by the injection of 4T1 breast cells. This effect is due, in part, to the ability of GTN to increase the differentiation of LTCD4 + in the anti-tumor linage Th1, to increase the intra-tumor recruitment of CD8 + / PD-1 + cells and of G-MDSCs down-expressing PD-L1. Nevertheless, the main mechanism by which GTN acts is essentially based on its ability to reprogram, in the presence of ROS, these G-MDSCs towards a less immunosuppressive phenotype. Indeed, the results revealed that GTN, via the S-nitrosylation of STAT5, was able to modulate the lipid metabolism of these cells, which is dependent on the protein FATP2 (Fatty Acid Transport Protein 2). Thus, a decrease in FATP2, as well as all the upstream (STAT5) and downstream (PGE2) components of this signaling pathway was observed in response to GTN +/- doxorubicin. All of these effects were inhibited in the presence of an ROS inhibitor, the N-acetyl cysteines (NAC). NAC also significantly delayed tumor progression when used in combination with doxorubicin / GTN.This work, based on the use of two molecules commonly used in the clinic, undoubtedly opens up a new treatment perspective for patients with TNBC and this combination can quickly be offered to clinicians.Le cancer du sein (CS) est une maladie hautement complexe, hétérogène et multifactorielle. Comparé aux autres sous-types, le cancer du sein triple négatif (CSTN) représente l'un des stades les plus avancés de la maladie, et se caractérise par une forte hétérogénéité inter et intra-tumorale et une charge mutationnelle élevée, rendant les traitements très difficiles et inefficaces. L’absence d’expression des récepteurs aux œstrogènes, à la progestérone, et l’absence de surexpression du récepteur HER2, fait des chimiothérapies (exemple : la doxorubicine) adjuvantes ou néo adjuvantes, le traitement de référence chez les patients atteints de ce type de cancer. Malheureusement, le taux de réponse anatomopathologique complète en réponse à ces chimiothérapies, dépasse rarement les 50 % avec un bénéfice à long terme qui touche uniquement 30 à 50% des malades. Le laboratoire LIIC dans lequel j’ai effectué ma thèse a comme objectif de montrer qu’un donneur de monoxyde d’azote (NO), le glycéryl trinitritrate (GTN), médicament utilisé en cardiologie, peut améliorer l’efficacité thérapeutique des chimiothérapies anti-cancéreuses. Le but de mon projet de thèse consistait donc à déterminer si l’association du GTN à la doxorubicine pouvait potentialiser l’activité anti-tumorale de cette chimiothérapie dans le CSTN, et de déterminer le mécanisme par lequel cette combinaison agit en mettant l’accent sur le microenvironnement immunitaire en général, et plus particulièrement sur les cellules myéloïdes immunosuppressives, les MDSCs.Les résultats ont montré que l’association du GTN à la doxorubicine améliorait significativement l'efficacité anti-tumorale de cette dernière, dans un modèle de CSTN induit par l’injection de cellules mammaires 4T1. Cet effet est dû, en partie, à la capacité du GTN à augmenter la différenciation des LTCD4+ vers le sous-type anti-tumorale Th1, à augmenter le recrutement intra-tumoral des cellules CD8+/PD-1+ et des G-MDSCs sous-exprimant PD-L1. Cependant, le mécanisme principal par lequel le GTN agit repose essentiellement sur sa capacité à reprogrammer, en présence des ROS, ces G-MDSCs en faveur d’une diminution de leur activité immunosuppressive. En effet, les résultats ont révélé que le GTN, via la S-nitrosylation de STAT5, était capable de moduler le métabolisme lipidique, dépendant de la protéine FATP2 (Fatty Acid Transport Protein 2) de ces cellules. Ainsi une diminution de FATP2, ainsi que de tous les composants faisant partie de la voie de signalisation de cette protéine, en amont (STAT5) et en aval (PGE2), a été observée en réponse au GTN +/- doxorubicine. Tous ces effets étaient inhibés en présence d’un inhibiteur de ROS, la N-acétyl cystéines (NAC). La NAC retardait également considérablement la progression tumorale lorsqu’elle est associée à la combinaison doxorubicine / GTN.Ce travail, basé sur l’utilisation de deux molécules couramment utilisées en clinique, ouvre sans conteste une nouvelle perspective de traitement pour les patientes atteintes d’un cancer TN et cette combinaison pourra être rapidement proposée aux cliniciens

Effet anti-tumoral du GTN +/- doxorubicine dans le cancer du sein triple négatif : implication du système immunitaire

Breast cancer (BC) is a highly complex, heterogeneous and multifactorial disease. Compared to other subtypes, triple negative (TNBC) represents one of the most advanced stages of the disease, and is characterized by a strong inter- and intra-tumor heterogeneity and a high mutational burden, making treatments very difficult and inefficient. The absence of estrogen and progesterone receptors expression, and the absence of HER2 receptor overexpression, makes chemotherapy (example: doxorubicin), the prior treatment in patients with this type of BC. Unfortunately, the complete anatomopathological response rate, in response to these chemotherapies, rarely exceeds 50% with a long-term benefit affecting only 30 to 50% of patients. The LIIC laboratory in which I did my thesis aims to show that a donor of nitric oxide (NO), glyceryl trinitritrate (GTN), a drug used in cardiology, can improve the therapeutic efficacy of anti-cancerous chemotherapy. The aim of my thesis project was therefore to determine whether the association of GTN with doxorubicin could potentiate the antitumor activity of this chemotherapy in TNBC, and to determine the mechanism by which this combination acts by emphasizing the immune microenvironment in general, and more particularly on immunosuppressive myeloid cells, MDSCs.The results showed that the association of GTN with doxorubicin significantly improved the anti-tumor efficacy of this chemotherapy, in a TNBC model induced by the injection of 4T1 breast cells. This effect is due, in part, to the ability of GTN to increase the differentiation of LTCD4 + in the anti-tumor linage Th1, to increase the intra-tumor recruitment of CD8 + / PD-1 + cells and of G-MDSCs down-expressing PD-L1. Nevertheless, the main mechanism by which GTN acts is essentially based on its ability to reprogram, in the presence of ROS, these G-MDSCs towards a less immunosuppressive phenotype. Indeed, the results revealed that GTN, via the S-nitrosylation of STAT5, was able to modulate the lipid metabolism of these cells, which is dependent on the protein FATP2 (Fatty Acid Transport Protein 2). Thus, a decrease in FATP2, as well as all the upstream (STAT5) and downstream (PGE2) components of this signaling pathway was observed in response to GTN +/- doxorubicin. All of these effects were inhibited in the presence of an ROS inhibitor, the N-acetyl cysteines (NAC). NAC also significantly delayed tumor progression when used in combination with doxorubicin / GTN.This work, based on the use of two molecules commonly used in the clinic, undoubtedly opens up a new treatment perspective for patients with TNBC and this combination can quickly be offered to clinicians.Le cancer du sein (CS) est une maladie hautement complexe, hétérogène et multifactorielle. Comparé aux autres sous-types, le cancer du sein triple négatif (CSTN) représente l'un des stades les plus avancés de la maladie, et se caractérise par une forte hétérogénéité inter et intra-tumorale et une charge mutationnelle élevée, rendant les traitements très difficiles et inefficaces. L’absence d’expression des récepteurs aux œstrogènes, à la progestérone, et l’absence de surexpression du récepteur HER2, fait des chimiothérapies (exemple : la doxorubicine) adjuvantes ou néo adjuvantes, le traitement de référence chez les patients atteints de ce type de cancer. Malheureusement, le taux de réponse anatomopathologique complète en réponse à ces chimiothérapies, dépasse rarement les 50 % avec un bénéfice à long terme qui touche uniquement 30 à 50% des malades. Le laboratoire LIIC dans lequel j’ai effectué ma thèse a comme objectif de montrer qu’un donneur de monoxyde d’azote (NO), le glycéryl trinitritrate (GTN), médicament utilisé en cardiologie, peut améliorer l’efficacité thérapeutique des chimiothérapies anti-cancéreuses. Le but de mon projet de thèse consistait donc à déterminer si l’association du GTN à la doxorubicine pouvait potentialiser l’activité anti-tumorale de cette chimiothérapie dans le CSTN, et de déterminer le mécanisme par lequel cette combinaison agit en mettant l’accent sur le microenvironnement immunitaire en général, et plus particulièrement sur les cellules myéloïdes immunosuppressives, les MDSCs.Les résultats ont montré que l’association du GTN à la doxorubicine améliorait significativement l'efficacité anti-tumorale de cette dernière, dans un modèle de CSTN induit par l’injection de cellules mammaires 4T1. Cet effet est dû, en partie, à la capacité du GTN à augmenter la différenciation des LTCD4+ vers le sous-type anti-tumorale Th1, à augmenter le recrutement intra-tumoral des cellules CD8+/PD-1+ et des G-MDSCs sous-exprimant PD-L1. Cependant, le mécanisme principal par lequel le GTN agit repose essentiellement sur sa capacité à reprogrammer, en présence des ROS, ces G-MDSCs en faveur d’une diminution de leur activité immunosuppressive. En effet, les résultats ont révélé que le GTN, via la S-nitrosylation de STAT5, était capable de moduler le métabolisme lipidique, dépendant de la protéine FATP2 (Fatty Acid Transport Protein 2) de ces cellules. Ainsi une diminution de FATP2, ainsi que de tous les composants faisant partie de la voie de signalisation de cette protéine, en amont (STAT5) et en aval (PGE2), a été observée en réponse au GTN +/- doxorubicine. Tous ces effets étaient inhibés en présence d’un inhibiteur de ROS, la N-acétyl cystéines (NAC). La NAC retardait également considérablement la progression tumorale lorsqu’elle est associée à la combinaison doxorubicine / GTN.Ce travail, basé sur l’utilisation de deux molécules couramment utilisées en clinique, ouvre sans conteste une nouvelle perspective de traitement pour les patientes atteintes d’un cancer TN et cette combinaison pourra être rapidement proposée aux cliniciens

Antitumor effect of GTN +/- doxorubicin in triple negative breast cancer : involvement of the immune system

Le cancer du sein (CS) est une maladie hautement complexe, hétérogène et multifactorielle. Comparé aux autres sous-types, le cancer du sein triple négatif (CSTN) représente l'un des stades les plus avancés de la maladie, et se caractérise par une forte hétérogénéité inter et intra-tumorale et une charge mutationnelle élevée, rendant les traitements très difficiles et inefficaces. L’absence d’expression des récepteurs aux œstrogènes, à la progestérone, et l’absence de surexpression du récepteur HER2, fait des chimiothérapies (exemple : la doxorubicine) adjuvantes ou néo adjuvantes, le traitement de référence chez les patients atteints de ce type de cancer. Malheureusement, le taux de réponse anatomopathologique complète en réponse à ces chimiothérapies, dépasse rarement les 50 % avec un bénéfice à long terme qui touche uniquement 30 à 50% des malades. Le laboratoire LIIC dans lequel j’ai effectué ma thèse a comme objectif de montrer qu’un donneur de monoxyde d’azote (NO), le glycéryl trinitritrate (GTN), médicament utilisé en cardiologie, peut améliorer l’efficacité thérapeutique des chimiothérapies anti-cancéreuses. Le but de mon projet de thèse consistait donc à déterminer si l’association du GTN à la doxorubicine pouvait potentialiser l’activité anti-tumorale de cette chimiothérapie dans le CSTN, et de déterminer le mécanisme par lequel cette combinaison agit en mettant l’accent sur le microenvironnement immunitaire en général, et plus particulièrement sur les cellules myéloïdes immunosuppressives, les MDSCs.Les résultats ont montré que l’association du GTN à la doxorubicine améliorait significativement l'efficacité anti-tumorale de cette dernière, dans un modèle de CSTN induit par l’injection de cellules mammaires 4T1. Cet effet est dû, en partie, à la capacité du GTN à augmenter la différenciation des LTCD4+ vers le sous-type anti-tumorale Th1, à augmenter le recrutement intra-tumoral des cellules CD8+/PD-1+ et des G-MDSCs sous-exprimant PD-L1. Cependant, le mécanisme principal par lequel le GTN agit repose essentiellement sur sa capacité à reprogrammer, en présence des ROS, ces G-MDSCs en faveur d’une diminution de leur activité immunosuppressive. En effet, les résultats ont révélé que le GTN, via la S-nitrosylation de STAT5, était capable de moduler le métabolisme lipidique, dépendant de la protéine FATP2 (Fatty Acid Transport Protein 2) de ces cellules. Ainsi une diminution de FATP2, ainsi que de tous les composants faisant partie de la voie de signalisation de cette protéine, en amont (STAT5) et en aval (PGE2), a été observée en réponse au GTN +/- doxorubicine. Tous ces effets étaient inhibés en présence d’un inhibiteur de ROS, la N-acétyl cystéines (NAC). La NAC retardait également considérablement la progression tumorale lorsqu’elle est associée à la combinaison doxorubicine / GTN.Ce travail, basé sur l’utilisation de deux molécules couramment utilisées en clinique, ouvre sans conteste une nouvelle perspective de traitement pour les patientes atteintes d’un cancer TN et cette combinaison pourra être rapidement proposée aux cliniciens.Breast cancer (BC) is a highly complex, heterogeneous and multifactorial disease. Compared to other subtypes, triple negative (TNBC) represents one of the most advanced stages of the disease, and is characterized by a strong inter- and intra-tumor heterogeneity and a high mutational burden, making treatments very difficult and inefficient. The absence of estrogen and progesterone receptors expression, and the absence of HER2 receptor overexpression, makes chemotherapy (example: doxorubicin), the prior treatment in patients with this type of BC. Unfortunately, the complete anatomopathological response rate, in response to these chemotherapies, rarely exceeds 50% with a long-term benefit affecting only 30 to 50% of patients. The LIIC laboratory in which I did my thesis aims to show that a donor of nitric oxide (NO), glyceryl trinitritrate (GTN), a drug used in cardiology, can improve the therapeutic efficacy of anti-cancerous chemotherapy. The aim of my thesis project was therefore to determine whether the association of GTN with doxorubicin could potentiate the antitumor activity of this chemotherapy in TNBC, and to determine the mechanism by which this combination acts by emphasizing the immune microenvironment in general, and more particularly on immunosuppressive myeloid cells, MDSCs.The results showed that the association of GTN with doxorubicin significantly improved the anti-tumor efficacy of this chemotherapy, in a TNBC model induced by the injection of 4T1 breast cells. This effect is due, in part, to the ability of GTN to increase the differentiation of LTCD4 + in the anti-tumor linage Th1, to increase the intra-tumor recruitment of CD8 + / PD-1 + cells and of G-MDSCs down-expressing PD-L1. Nevertheless, the main mechanism by which GTN acts is essentially based on its ability to reprogram, in the presence of ROS, these G-MDSCs towards a less immunosuppressive phenotype. Indeed, the results revealed that GTN, via the S-nitrosylation of STAT5, was able to modulate the lipid metabolism of these cells, which is dependent on the protein FATP2 (Fatty Acid Transport Protein 2). Thus, a decrease in FATP2, as well as all the upstream (STAT5) and downstream (PGE2) components of this signaling pathway was observed in response to GTN +/- doxorubicin. All of these effects were inhibited in the presence of an ROS inhibitor, the N-acetyl cysteines (NAC). NAC also significantly delayed tumor progression when used in combination with doxorubicin / GTN.This work, based on the use of two molecules commonly used in the clinic, undoubtedly opens up a new treatment perspective for patients with TNBC and this combination can quickly be offered to clinicians

Complications endodontiques de l’Ostéotomie Le Fort I. À propos d’un cas clinique

L’ostéotomie Le Fort I est l’une des interventions chirurgicales orthognatique les plus fréquentes. Cette technique est facile à réaliser, et permet de résoudre un grand nombre de problèmes fonctionnels et esthétiques. Malgré tous les progrès réalisés dans le domaine de la chirurgie orthognatique une variété de complications a été documentée. Le clivage osseux au cours de l’acte chirurgical est associé à un risque particulièrement élevé d’ischémie. Cet article illustre un cas de nécroses pulpaires multiples du secteur incisivo canin et prémolaire maxillaire à la suite d’une osteotomie Le Fort I

Impact of Lipid Metabolism on Antitumor Immune Response

Over the past decade, metabolic reprogramming has been defined as a hallmark of cancer. More recently, a large number of studies have demonstrated that metabolic reprogramming can modulate the differentiation and functions of immune cells, and thus modify the antitumor response. Increasing evidence suggests that modified energy metabolism could be responsible for the failure of antitumor immunity. Indeed, tumor-infiltrating immune cells play a key role in cancer, and metabolic switching in these cells has been shown to help determine their phenotype: tumor suppressive or immune suppressive. Recent studies in the field of immunometabolism focus on metabolic reprogramming in the tumor microenvironment (TME) by targeting innate and adaptive immune cells and their associated anti- or protumor phenotypes. In this review, we discuss the lipid metabolism of immune cells in the TME as well as the effects of lipids; finally, we expose the link between therapies and lipid metabolism

Impact of Lipid Metabolism on Antitumor Immune Response

Over the past decade, metabolic reprogramming has been defined as a hallmark of cancer. More recently, a large number of studies have demonstrated that metabolic reprogramming can modulate the differentiation and functions of immune cells, and thus modify the antitumor response. Increasing evidence suggests that modified energy metabolism could be responsible for the failure of antitumor immunity. Indeed, tumor-infiltrating immune cells play a key role in cancer, and metabolic switching in these cells has been shown to help determine their phenotype: tumor suppressive or immune suppressive. Recent studies in the field of immunometabolism focus on metabolic reprogramming in the tumor microenvironment (TME) by targeting innate and adaptive immune cells and their associated anti- or protumor phenotypes. In this review, we discuss the lipid metabolism of immune cells in the TME as well as the effects of lipids; finally, we expose the link between therapies and lipid metabolism

Miliary tuberculosis following intravesical Bacillus Calmette and Guérin therapy: A rare complication of a frequent procedure

The standard treatment for superficial vesical tumors is transurethral resection (TUR) followed by intravesical instillation of Bacillus Calmette and Guérin (BCG). Pulmonary complications of BCG-therapy are rare but could be life threatening. We report the case of a 54-year-old patient who received BCG-therapy after TUR. After the sixth session of BCG instillations, the patient was diagnosed with a miliary tuberculosis secondary to BCG-therapy. We observed a progressive clinical and radiological improvement under specific tuberculosis treatment. Early diagnosis of pulmonary side effects of BCG-therapy and prompt treatment are the keys to complete recovery and survival

Genes regulating oxidative-inflammatory response in circulating monocytes and neutrophils in septic syndrome

Despite significant progress in the past decades, sepsis still lacks a specific treatment. Under normal conditions, leucocytes play a critical role in controlling infection and it is suggested that their activity is impaired during sepsis which contribute to the dysregulation of immune reactions. Indeed, in response to infection, several intracellular pathways are affected mainly those regulating the oxidative- inflammatory axis. Herein, we focused on the contribution of NF-kB, iNOS, Nrf2, HO-1 and MPO genes in the pathophysiology of septic syndrome, by analyzing the differential expression of their transcripts in circulating monocytes and neutrophils, and monitoring the nitrosative/oxidative status in septic syndrome patients. Circulat- ing neutrophils of septic patients displayed a significant overexpression of NF-kB compared to other groups. In monocytes, patients with septic shock expressed the highest levels of iNOS and NF-kB mRNA. However, genes involved in cytoprotec- tive response had increased expression in patients with sepsis, in particular, the Nrf2 and its target gene HO-1. Moreover, patient monitoring indicates that the iNOS enzyme expression and NO plasma levels may play a role in assessing the severity of septic conditions. Overall, in either monocytes or neutrophils, we pointed out the major role of NF-κB and Nrf2 in the pathophysiological process. Therefore, therapies targeted to redox abnormalities may be useful for better management of septic patients

Engineered Synthetic STxB for Enhanced Cytosolic Delivery

Many molecular targets for cancer therapy are located in the cytosol. Therapeutic macromolecules are generally not able to spontaneously translocate across membranes to reach these cytosolic targets. Therefore a strong need exists for tools that enhance cytosolic delivery. Shiga toxin B-subunit (STxB) is used to deliver therapeutic principles to disease-relevant cells that express its receptor, the glycolipid Gb3. Based on its naturally existing membrane translocation capacity, STxB delivers antigens to the cytosol of Gb3-positive dendritic cells, leading to the induction of CD8+ T cells. Here, we have explored the possibility of further increasing the membrane translocation of STxB to enable other therapeutic applications. For this, our capacity to synthesize STxB chemically was exploited to introduce unnatural amino acids at different positions of the protein. These were then functionalized with hydrophobic entities to locally destabilize endosomal membranes. Intracellular trafficking of these functionalized STxB was measured by confocal microscopy and their cytosolic arrival with a recently developed highly robust, sensitive, and quantitative translocation assay. From different types of hydrophobic moieties that were linked to STxB, the most efficient configuration was determined. STxB translocation was increased by a factor of 2.5, paving the path for new biomedical opportunities