Novel platforms for vascularization in skin wound healing

Tese de doutoramento em Engenharia de Tecidos, Medicina Regenerativa e Células EstaminaisIn cutaneous wounds, neovascularization is critical for tissue repair, influencing the healing cascade from the early onset to the remodeling phase. When vascularization is affected by alterationsin angiogenic signaling, the healing process is impaired and the quality of the neotissue formed is affected. Several strategies have been explored to promote neovascularization in cutaneous wounds; however, their clinical translation is still to be achieved. Therefore, this thesis aimed to explore innovative strategies to promote in vitro vascularization of tissue engineered (TE) constructs for wound healing. To this end, we took advantage of gellan gum-based spongy-like hydrogels to explore i) the modulation of a fibroblast-driven angiogenic microenvironment fostering endothelial cell (ECs) potential, and ii) the ability of the stromal vascular fraction (SVF) from adipose tissue to generate a self-regulatory angiogenic microenvironment in the absence of extrinsic growth factors. To minimize batch-to-batch variability associated to the processing of dried polymeric networks/spongy-like hydrogels, we designed two freezing devices and mapped the effect of the thermal parameters on the properties of the obtained structures. We were then able to fabricate highly reproducible materials with fine-tuned microarchitecture according to our specific needs. A bilayered structure was used as a template to explore the distinct functions of the dermal fibroblast’s subpopulations, providing evidence that pre-selection of papillary and reticular fibroblasts is relevant for promoting the in vitro prevascularization of skin TE constructs. We further explored the delivery of genes encoding angiogenic factors to fibroblasts, generating a microenvironment prone to vascularization while the spongy-like hydrogel offered structural support for new matrix deposition. Finally, we exploited specific integrins found in ECs present in SVF by designing integrin-specific spongy-like hydrogels to retain those cells, to ultimately triggering vasculogenesis. This in vitro vasculogenesis platform benefited neovascularization upon implantation by fostering inosculation with the host vasculature, but negatively impacted the healing of cutaneous wounds. Overall, the works herein reported provide valuable contributions in the field of vascularization of TE constructs, proposing complementary and alternative approaches to the use of ECs, taking a step towards the development of better therapies for cutaneous wounds.Em feridas cutâneas, a neovascularização é crítica para a reparação do tecido, influenciando a cicatrização do início à fase de remodelação. Quando a vascularização é afetada por alterações na sinalização angiogénica, o processo de cicatrização é prejudicado, afetando a qualidade do neotecido formado. Várias estratégias têm sido exploradas para promover a neovascularização em feridas cutâneas; no entanto, vários fatores dificultam a sua translação para a clínica. Esta tese, teve como objetivo explorar estratégias inovadoras de vascularização in vitro de estruturas de engenharia de tecidos (ET) para cicatrização de feridas. Para tal, tirámos partido dos hidrogéis esponjosos à base de goma gelana para explorar i) a modulação do microambiente angiogénico mediado por fibroblastos para promover o potencial das células endoteliais (CEs), e ii) a capacidade da fração vascular estromal (FVE) do tecido adiposo em gerar um microambiente autorregulador angiogénico sem fatores de crescimento extrínsecos. Para minimizar a variabilidade associada ao processo de preparação de redes poliméricas secas/hidrogéis esponjosos, desenvolvemos dois dispositivos de congelamento e mapeamos o efeito dos parâmetros térmicos nas propriedades das estruturas obtidas. Isto permitiu fabricar materiais com características altamente reprodutíveis com microarquitetura ajustada de acordo com nossas necessidades específicas. Uma estrutura baseada em bicamada foi utilizada como modelo para explorar as funções típicas de cada subpopulação de fibroblastos da derme, demonstrando que a pré-seleção dos fibroblastos papilares e reticules promove a pré-vascularização in vitro de estruturas de ET de pele. Explorámos ainda a entrega de genes codificadores de fatores de crescimento angiogénicos aos fibroblastos para gerar um microambiente propenso à vascularização, enquanto o hidrogel esponjoso ofereceu suporte estrutural para a deposição de nova matriz. Finalmente, explorámos integrinas específicas encontradas nas CEs presentes na FVE e desenhámos hidrogéis esponjosos integrina específicos capazes de reter essas células e desencadear a vasculogénese in vitro. Esta plataforma de vasculogénese in vitro beneficiou a neovascularização in vivo após a implantação, promovendo a inosculação com a vasculatura hospedeira, mas teve um impacto negativo na cicatrização de feridas cutâneas. Em suma, os trabalhos relatados fornecem contribuições valiosas no campo da vascularização de estruturas de ET, propondo abordagens complementares e alternativas ao uso de CEs e contribuindo para o desenvolvimento de terapias para feridas cutâneas.Fundo Social Europeu através do Programa Operacional do Capital Humano under the scope of the PD/169/2013, for giving me the financial support to develop this thesis (NORTE-08-5369-FSE-000037

Abundance and distribution of sessile invertebrates under intertidal boulders (São Paulo, Brazil)

The encrusting communities under two boulder fields (Praia Grande and Ponta do Baleeiro) were monitored monthly during 1990 and 1991, in São Sebastião, on the northern coast of São Paulo State, Brazil. Two sizes of boulders were chosen: small (20-30 cm² underside area) and larger ones (160-220 cm²) located on the middle and lower levels of the intertidal. The community's components were mainly sessile animals either compound ones such as Bryozoa, Ascidiacea, Porifera and Cnidaria, in this order of abundance, or simple ones such as Polychaeta and Bivalvia, also in this order of abundance. All groups, except by serpulids (Polychaeta), had higher percent cover in the low intertidal region and under large boulders. Diversity was higher at Ponta do Baleeiro, and in the low intertidal region and on large boulders for both shores.Em São Sebastião, litoral norte do Estado de São Paulo, Brasil, foram monitorados mensalmente dois ambientes de matacões em costões rochosos. Praia Grande e Ponta do Baleeiro, ao longo de 1990 e 1991. As condições ambientais avaliadas foram: temperatura e salinidade da água, hidrodinâmica, capacidade de abrasão da areia acumulada, heterogeneidade ambiental e porosidade das pedras. Foi estudada a comunidade incrustante na superfície inferior de pedras pequenas (20-30 cm² de área na face inferior) e maiores (160-220 cm²) dispostas nos estratos médio e inferior da zona entremarés. Esta comunidade era constituída principalmente por organismos sésseis coloniais (Bryozoa, Ascidiacea, Porifera e Cnidaria, nesta ordem de abundância) ou solitários (Polychaeta e Bivalvia, nesta ordem de abundância). Todos os grupos, com exceção dos ser pulid cos (Polychaeta), apresentaram maior porcentagem de cobertura nos estratos inferiores e nas pedras grandes. A composição específica foi similar nos dois costões estudados, mas várias espécies ocorreram exclusivamente em um determinado nível de maré, ou tamanho de pedra, indicando que estes fatores têm maior influência na distribuição das espécies. A diversidade foi maior na Ponta do Baleeiro, nos estratos inferiores e em pedras grandes, nos dois costões, não havendo nenhum tipo de padrão sazonal de variação

Literature and Its Role in the Formation of The Nations

The history of any national literature mixes up with the history of its nation. One of the reasons lies in the fact that, during the process of building a nation, the issue of standard language emerges and literature plays a decisive role in the formation of both national state and standard language. Thus, this essay focus on the rise of English and American Literatures and their respective contributions to the formation of the identity of England and the U.S.A. A história de qualquer literatura nacional confunde com a história de sua nação. Uma das razões reside no fato de que, durante o processo de construção de uma nação, a questão da língua padrão emerge e literatura desempenha um papel decisivo na formação tanto do Estado nacional e língua padrão. Assim, este ensaio se concentrar no aumento de Inglês e Literaturas americanas e suas respectivas contribuições para a formação da identidade de Inglaterra e nos EUA                   

The macroeconomic effects of (different) oil shocks: a VAR approach

A Work Project, presented as part of the requirements for the Award of a Masters Degree in Economics from the NOVA – School of Business and EconomicsThis paper investigates the contribution of oil supply, global activity and precautionary oil-demand innovations for the major episodes of increasing oil prices and US macroeconomic fluctuations. The empirical approach employed is based on the recursively identified VAR model of the crude oil market proposed in Kilian (2008). The estimated results attribute the 2002-2008 oil price increase to global activity and to precautionary demand shocks (during the 2004-2006 period). Furthermore, based on the responses of US industrial production and producer prices, the distinct innovations are shown to produce different macroeconomic effects. Industrial production, in particular, is shown to respond positively and significantly to global activity shocks in the shortrun, complementing and reinforcing Kilian’s explanation for the thriving behavior of the US economy between 2002 and 2008. Finally, evidence supporting the relevance of Blanchard and Galí’s structural change hypothesis is provided