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Desarrollo de vacunas basadas en bacterias lácticas : expresión de antígenos del VIH en Lactococcus lactis para inducir inmunidad en mucosas
Tesis (Maestría en Ciencias con Especialidad en Inmunobiología) UANLUANLhttp://www.uanl.mx
Magnetic Nanoparticles of Chitosan for Targeted Delivery System of Plasmids to the Lungs
One of the major problems of gene therapy is the efficient, specific, and targeted delivery as well as the safety of the materials used in such systems. The specific targeted delivery of genes to the lung offers the possibility to treat a variety of specific diseases.
We developed chitosan nanoparticles with the plasmid pCEM-Luc, which contains a promoter activated by magnetic field. Nanoparticles of 200–250 nm obtained by ionic gelation with a 99% retention rate were transfected in B16F10 cells and in vivo in the lungs of Balb/c mice by intratracheal administration. We observed that an external magnetic field increased the expression
of the luciferase reporter gene in B16F10 cells transfected with magnetic nanoparticles and inhomogenized lungs of mice which determined differences in levels of expression between different regions of the lungs (apical or distal and left or right). The highest levels of luciferase activity were observed in the apical left region. The magnetic nanoparticles prove an efficient delivery system to in vitro transfection of cells and lung tissue
Construcción y evaluación de un promotor eucariótico que controla la expresión de genes heterólogos en condiciones de hipoxia.
Desarrollo de vacunas basadas en bacterias lácticas : expresión de antígenos del VIH en Lactococcus lactis para inducir inmunidad en mucosas / por Itza Eloisa Luna Cruz
Inducción de inmunidad en mucosas contra el VIH mediante la secreción del Asa V3 y fusionada a la subunidad A2b de la toxina del cólera en lactococcus lactis.
El síndrome de inmunodeficiencia adquirida (SIDA) continúa siendo una
importante prioridad sanitaria en el mundo. Aunque existe un avance importante en la
prevención de nuevas infecciones por el virus de inmunodeficiencia humana (VIH) y en
la reducción del número anual de defunciones relacionadas con el SIDA, el número de
personas que viven con el VIH sigue en aumento. Si partimos de que el principal
mecanismo de infección viral es a través del contacto sexual, el cual involucra a la
mucosa genital, el propósito de esta investigación es el desarrollar una estrategia de
inmunización basada en bacterias lácticas, mediante el uso ingeniería molecular para
modificar genéticamente a la bacteria para que exprese antígenos virales en el sitio de
entrada del patógeno y genere inmunidad humoral y celular específica contra el VIH.
Para esta estrategia utilizamos Lactococcus lactis como vector bacteriano de expresión
del antígeno V3 del VIH, así como la fusión de éste a la subunidad A2B de la toxina del
cólera como un segmento con actividad adyuvante, para la generación de inmunidad
contra el virus infectante. Después de la construcción de las bacterias recombinantes,
inmunizamos ratones de 6 semanas por vía oral o genital, para demostrar la generación
de inmunidad humoral mediante anticuerpos específicos IgG e IgA anti-V3, así como
inmunidad celular mediante la inducción de la interleucina-2 (IL-2) e interferón-gamma
(INF- ) en linfocitos de bazo y de sangre periférica. Ambos tipos de inmunidad
específica contra el VIH se generaron a nivel sistémico en suero y a nivel local en
mucosas. Este vector bacteriano recombinante seguro para consumo humano representa
una nueva estrategia para el envío dirigido a las mucosas de antígenos del VIH asociado
o fusionado a un segmento proteico que aumenta la inmunogenicidad a la región V3 del
virus. Esta estrategia de inmunización puede ser optimizada y evaluada como una nueva
alternativa de vacuna segura y efectiva que genere inmunidad neutralizante a nivel de
las mucosas del VIH
Estudio de asociación de indicadores metabólicos con polimorfismos de un solo nucleótido en adolescentes con obesidad y sobrepeso en el estado de Nuevo León.
Detection of anti-HspX antibodies and HspX protein in patient sera for the identification of recent latent infection by Mycobacterium tuberculosis.
Mycobacterium tuberculosis is a pathogen causing tuberculosis (TB) a spectrum of disease including acute and asymptomatic latent stages. Identifying and treating latently-infected patients constitutes one of the most important impediments to TB control efforts. Those individuals can remain undiagnosed for decades serving as potential reservoirs for disease reactivation. Tests for the accurate diagnosis of latent infection currently are unavailable. HspX protein (α-crystallin), encoded by Rv2031c gene, is produced in vitro by M. tuberculosis during stationary growth phase and hypoxic or acidic culture conditions. In this study, using standard, and Luminex xMAP® bead capture ELISA, respectively, we report on detection of anti-HspX IgG and IgM antibodies and HspX protein in sera from acute and latent TB patients. For the antibody screen, levels of IgG and IgM antibodies were similar between non-infected and active TB patients; however, individuals classified into the group with latent TB showed higher values of anti-HspX IgM (p = 0.003) compared to active TB patients. Using the bead capture antigen detection assay, HspX protein was detected in sera from 56.5% of putative latent cases (p< 0.050) compared to the background median with an average of 9,900 pg/ml and a range of 1,000 to 36,000 pg/ml. Thus, presence of anti-HspX IgM antibodies and HspX protein in sera may be markers of latent TB