O uso de antimicrobianos Lippia para o aumento da competitividade de APL's em fruticultura: o caso da produção de morangos(Fragaria ananassa) em Minas Gerais

-Os APL’s são organizações que buscam novas tecnologias para sistematizar a produção e a comercialização entre pequenos produtores. O combate aos fungos que diminuem a produtividade de morangos é um importante problema a ser enfrentado por produtores de morango. Um dos principais patógenos que atacam esses frutos é o Botrytis cinerea. Nesse contexto sugere-se como nova forma de combate a esses microorganismos o uso de peptídeos antifúngicos biodegradáveis; podendo ser utilizados como produtos na lavagem do morango ou na produção de transgênicos. As plantas têm se mostrado como grandes fontes de peptídeos antimicrobianos, sendo estes parte de seu mecanismo de defesa. O gênero Lippia é composto por cerca de 254 espécies, sendo algumas utilizadas popularmente por suas ações antimicrobiana, antiespasmódica, antipirética, cicatrizante, antiinflamatória e sedativa. Entretanto, não há relatos sobre o isolamento de peptídeos antimicrobianos deste gênero. Dessa forma o presente trabalho contribuirá para o aumento da importância desse grupo de plantas, como fonte para defensivos utilizados na saúde humana, animal e vegetal; além de ser uma perspectiva no desenvolvimento de produtos e processos biotecnológicos que possam proteger o morango, aumentando seu valor comercial. As flores secas de Lippia sidoides foram trituradas com tampão Tris HCl 1 por cento NaCl 0,6M e as proteínas/peptídeos precipitados com (NH4)2SO4 50 por cento. O extrato foi dialisado e liofilizado. O peptídeo foi purificado por cromatografia em coluna hidrofóbica de Octyl-Sepharose e em cromatografia de fase reversa em coluna analítica de HPLC. O bioensaio contra Botrytis cinerea foi realizado através da inoculação de 300 microgramas da amostra em poço sobre meio sólido BDA, utilizando o Captan 0,5 por cento como controle positivo e água destilada como controle negativo. A concentração de peptídeos na amostra foi determinada através da reação de Bradford. A análise da massa molecular foi feita por eletroforese em gel de policramida (SDS-PAGE). Ocorreu formação de um halo inibitório em torno do poço do extrato bruto, comprovando atividade antifúngica quando comparada com o controle positivo. Das duas frações obtidas com a cromatografia em coluna hidrofóbica, uma demonstrou ação contra B. cinerea. Tal fração foi, por sua vez, aplicada em coluna de fase reversa em HPLC e os picos recolhidos para testes posteriores. A análise desses, em SDS-PAGE, revelou a presença de duas bandas com massa molecular de aproximadamente 10 a 15 kD, sugerindo que essa seja a massa do peptídeo de interesse

CAPES Periodicals: Perspective of the Dissertations and Theses about Social Anxiety Disorder / Social Phobia

The social anxiety disorder or social phobia is characterized by an exorbitant fear during social or performance situations. Considered as a mental health problem, it has a chronic course and it is often disabling. This study aimed to provide an overview of academic productions related to the CAPES Theses and Dissertations from 1987 to 2009, using as keywords the terms: “Social Phobia” or "Social Anxiety Disorder". The results found 27 works. The focus of study could be grouped into the following thematic categories: Treatment, Comorbidity, Validation/Psychometric Properties; Diagnosis/Prevalence, Critical and Theoretical Review. We highlight the importance of further studies about this subject to provide a better understanding of its development and wider dissemination among health professionals. Keywords: social anxiety disorder; social phobia; dissertations; theses.  O transtorno de ansiedade social ou fobia social é caracterizado pelo medo acentuado durante situações sociais ou de desempenho. Considerado um problema de saúde mental, possui curso crônico por vezes incapacitante. Este estudo objetiva fornecer um panorama das produções acadêmicas referentes a Teses e Dissertações da CAPES, defendidas entre 1987 e 2009, utilizando como descritores os termos “Fobia Social” e/ou “Transtorno de Ansiedade Social”. Os resultados encontraram 27 trabalhos. Os enfoques dos estudos foram agrupados nas seguintes categorias temáticas: Tratamento; Comorbidade; Validação/Propriedades Psicométricas; Diagnóstico/ Prevalência; Revisão Crítica e Teórica. Nota-se a importância de mais estudos sobre este tema, para fornecer uma melhor compreensão do seu desenvolvimento e maior divulgação entre os profissionais de saúde.  Palavras-chave: transtorno de ansiedade social; fobia social; dissertações; teses. 

Atividade antimicrobiana do Pg-AMP1 recombinante, um peptídeo rico em glicina, isolado de goiaba (Psidium guajava L.)

The search for new antibiotics of broad spectrum of activity has increased in recent decades due to the increasing number of bacteria resistant to conventional antibiotics. The Pg-AMP1 recombinant peptide expressed in a heterologous system in Escherichia coli, strains showed antibacterial activity against Gram-positive and Gram-negative. From the sequence of amino acid peptide isolated from the seeds of guava (Psidium guajava L.) peptide corresponding to the gene was modified using the preferred codon for expression in E. coli and constructed a vector for expression. A region coding for the histidine tail was merged the gene-pg amp1 allowing purification by affinity chromatography with nickel ions immobilized on the column sepharose. Using SDS-PAGE and in silico analysis identified the molecular weight of Pg-AMP1 recombinant with 7.368 kDa and pI 8.93. The recombinant peptide was expressed mostly as insoluble form, adding up in inclusion bodies, which were treated with denaturants agents to solubilize the peptide. The purification of peptide by nickel sepharose column yielded 13 mg per liter of culture medium. The Pg-AMP1 recombinant peptide showed activity against Gram-negative bacteria Escherichia coli and Pseudomonas aeruginosa and against gram-positive Staphylococcus aureus and Staphylococcus epidermidis. The recombinant peptide Pg-AMP1 showed no activity against the phytopathogenic fungi tested. Due to its action against these strains of human pathogenic bacteria, the recombinant Pg-AMP1 is a promising antimicrobial for use in developing new antibiotics against strains resistant to commonly used drugs.A busca por novos antibióticos de amplo espectro de ação tem aumentado nas últimas décadas devido ao número crescente de bactérias resistentes aos antibióticos convencionais. O peptídeo recombinante Pg-AMP1, expresso em um sistema heterólogo em Escherichia coli, apresentou atividade antibacteriana contra linhagens Gram-positivas e Gram-negativas. A partir da seqüência de aminoácidos do peptídeo isolado de sementes de goiaba (Psidium guajava L.) o gene correspondente ao peptídeo foi modificado utilizando-se o códon preferencial para expressão em E. coli e construído um vetor de expressão. Uma região codificadora para cauda de histidina foi fusionada ao gene pg-amp1 permitindo a purificação por cromatografia de afinidade com íons de níquel imobilizados em coluna de sefarose. Utilizando SDS-PAGE e análise in sílico identificamos a massa molecular do PgAMP1 recombinante de 7,368 kDa e pI 8.93. O peptídeo recombinante foi expresso principalmente na forma insolúvel, agregando-se em corpos de inclusão que foram tratados com agentes desnaturantes obtendo o peptídeo solúvel. Após a purificação pela coluna de níquel obtivemos um rendimento de 13 mg por litro de meio de cultura. O peptídeo Pg-AMP1 recombinante apresentou atividade contra as bactérias Gram-negativas Escherichia coli e Pseudomonas aeruginosa e contra as Grampositivas Staphylococcus aureus e Staphylococcus epidermides. O peptídeo recombinante Pg-AMP1 não mostrou atividade contra os fungos fitopatogênicos testados. Devido a sua ação contra estas cepas de bactérias patogênicas humanas, o Pg-AMP1 recombinante torna-se um promissor antimicrobiano a ser utilizado no desenvolvimento de novos antibióticos contra cepas resistentes aos fármacos comumente usados

Desenvolvimento de peptídeos antimicrobianos a partir do transcriptoma foliar de Lippia alba e Lippia rotundifolia

Misuse of antibiotics has become, in recent years, worldwide problem according to the World Health Organization, since the number of resistant microorganisms for most commonly used drugs has increased. In contrast to this public health problem, new antibiotics with different courses of action have been researched. Many of these antibiotics have been discovered from the first line of plant and animal defense. This is a group of molecules called Antimicrobial Peptides (AMPs). In the present work three antimicrobial peptides showing bactericidal activity were developed from the transcriptome of Lippia rotundifolia and L. alba. The normalized RNA was sequenced in 454 GS platform and the RNA library was used for in silico searching and modeling peptides showing similar structure and action to AMP. The peptides were synthesized and their activity was validated by antimicrobial tests. The L.alb1 and L.rot3 peptides showed promising results and were modelled again by the use of rational design methodology to inbreed structure and activity. The L.rot3.5 and L.rot3.6 peptides showed the most promising results against the tested pathogens. The results reported here demonstrated that the discovery of new AMPs from transcriptome against Gram-positive and Gram-negative bacteria is an important tool for this purpose.O uso incorreto de antibióticos vem se tornando, nos últimos anos, um grande problema de acordo Organização Mundial da Saúde, uma vez que tem aumentado o número de microrganismos resistentes aos medicamentos mais frequentemente utilizados. Em contrapartida a este problema de saúde pública, novos antibióticos com diferentes vias de ação têm sido pesquisados. Muitos destes antimicrobianos têm sido descobertos a partir da primeira linha de defesa de vegetais e de animais. Estas moléculas são denominadas Peptídeos Antimicrobianos (AMPs). No intuito de encontrar novos compostos com atividade antimicrobiana foram desenvolvidos 3 peptídeos com ação bactericida a partir do transcriptoma de Lippia rotundifolia e L. alba. O RNA normalizado foi sequenciado utilizando-se a plataforma 454 GS e a partir do mesmo foram gerados e modelados in silico peptídeos com estrutura e ação semelhantes a AMPs. Em seguida os peptídeos foram sintetizados e sua atividade validada por testes antimicrobianos. Os peptídeos Lalb1 e Lrot3 apresentaram resultados promissores e foram remodelados a partir de um desenho racional visando obter a melhor estrutura e atividade dos mesmos. Os peptídeos L.rot3.5 e L.rot3.6 apresentaram os resultados mais promissores contra os patógenos testados. Os resultados aqui demonstrados sugerem que o uso de transcriptomas é uma importante ferramenta para a descoberta de novos AMPs com ação contra bactérias Gram-positivas e Gram-negativas.CAPES - Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superio

Análise Bibliométrica dos Estudos sobre Fobia Social e o Uso de Álcool

A Fobia Social ou o Transtorno de Ansiedade Social é defi nido como um medo excessivo e persistente de uma ou mais situações sociais dedesempenho. O presente estudo teve por objetivo realizar um levantamento bibliométrico de artigos indexados nas bases de dados Pubmed,PsycInfo e Web of Science, no período de 2006 a 2009, a partir do cruzamento dos descritores Social Phobia AND Alcohol. O resultado da análisede 37 artigos evidenciou diferentes tipos de instrumentos e participantes, além de maior produção advinda dos EUA. Algumas investigaçõesressaltaram também que a fobia social foi precedente ao uso de álcool. Verifi ca-se neste trabalho a importância de estudos na área para compreendermelhor o diagnóstico, tratamento e prognóstico presentes nesta associação