Supplementation with low molecular weight peptides from fish protein hydrolysate reduces acute mild stress-induced corticosterone secretion and modulates stress responsive gene expression in mice

First evidence started to demonstrate the anxiolytic effects of low molecular weight peptides extracted from natural products, such as fish hydrolysate, but their underlying mechanisms remain to be elucidated. The objective of this study was to evaluate the effect of a chronic administration of fish hydrolysate on stress reactivity and to understand the mechanisms involved. Stress response (corticosterone secretion, expression of stress-responsive genes) was measured in Balb/c mice supplemented with fish hydrolysate (300 mg/kg body weight) or vehicle daily for 7 days before being submitted to an acute mild stress protocol. Our results demonstrated that 30 min after stress induction, fish hydrolysate decreased corticosterone level compared to control mice. Moreover, fish hydrolysate supplementation modulated expression of stress responsive genes involved in hypothalamic pituitary adrenal axis regulation, circadian rhythm and aging process. These findings suggest that fish hydrolysate represents an innovative strategy to prevent stress-induced aversive effects and participate in stress management

5-oxoETE triggers nociception in constipation-predominant irritable bowel syndrome through MAS-related G protein-coupled receptor D.

Irritable bowel syndrome (IBS) is a common gastrointestinal disorder that is characterized by chronic abdominal pain concurrent with altered bowel habit. Polyunsaturated fatty acid (PUFA) metabolites are increased in abundance in IBS and are implicated in the alteration of sensation to mechanical stimuli, which is defined as visceral hypersensitivity. We sought to quantify PUFA metabolites in patients with IBS and evaluate their role in pain. Quantification of PUFA metabolites by mass spectrometry in colonic biopsies showed an increased abundance of 5-oxoeicosatetraenoic acid (5-oxoETE) only in biopsies taken from patients with IBS with predominant constipation (IBS-C). Local administration of 5-oxoETE to mice induced somatic and visceral hypersensitivity to mechanical stimuli without causing tissue inflammation. We found that 5-oxoETE directly acted on both human and mouse sensory neurons as shown by lumbar splanchnic nerve recordings and Ca2+ imaging of dorsal root ganglion (DRG) neurons. We showed that 5-oxoETE selectively stimulated nonpeptidergic, isolectin B4 (IB4)-positive DRG neurons through a phospholipase C (PLC)- and pertussis toxin-dependent mechanism, suggesting that the effect was mediated by a G protein-coupled receptor (GPCR). The MAS-related GPCR D (Mrgprd) was found in mouse colonic DRG afferents and was identified as being implicated in the noxious effects of 5-oxoETE. Together, these data suggest that 5-oxoETE, a potential biomarker of IBS-C, induces somatic and visceral hyperalgesia without inflammation in an Mrgprd-dependent manner. Thus, 5-oxoETE may play a pivotal role in the abdominal pain associated with IBS-C.BBSRC BB/R006210/1 to James R F Hockley and Ewan St John Smith Rosetrees 834 Postdoctoral Grant (A1296) awarded to James R F Hockley and Ewan St John Smit

Study of protein modification induced by cigarette smoke

La fumée de cigarette, reconnue comme étant carcinogène, est un aérosol complexe composé de plusieurs milliers de substances chimiques susceptibles de réagir avec les biomolécules. Aussi l’identification des modifications post-traductionnelles des protéines induites par la fumée de cigarette s’avère être un enjeu majeur à la compréhension de certaines pathologies telles que les cancers ou les maladies cardiovasculaires.L’objectif de ce travail a été de développer une méthode d’analyse basée sur la spectrométrie de masse à haute résolution afin d’identifier et de localiser les modifications des protéines exposées à la phase gazeuse de la fumée de cigarette. Deux techniques ont été utilisées : l’analyse MALDI-TOF-TOF et l’analyse nanoESI-FT-ICR couplée à la nano chromatographie liquide. Dans le but d’optimiser la réaction avec la fumée de cigarette, des modèles de réactions ont été développés sur des peptides et protéines standards. Ainsi des réactions d’oxydation et de nitration ont été effectués à partir des radicaux libres HO° et NO2° tandis que des réactions de formation d’adduits ont été réalisées à partir d’un équivalent d’aldéhyde (formaldéhyde, acétaldehyde, malonaldéhyde, acroléine, crotonaldéhyde et glyoxal). Les mêmes standards protéiques ont ensuite été exposés à la fumée de cigarette à l’aide d’une machine à fumer. Par comparaison avec les modèles de réaction, des adduits provenant de l’acétaldéhyde, de l’acroléine et du crotonaldéhyde ont pu être identifiés et localisés sur des résidus lysines spécifiques. Ces résultats ont permis de mettre en évidence que les protéines étaient majoritairement modifiées par les aldéhydes contenus dans la fumée de cigarette.Cigarette smoke, well known to be carcinogen, is a high complex aerosol composed of further thousands of chemicals able to react with biomolecules. Also the identification of post-translational protein modifications induced by cigarette smoke is a major stake for the understanding of some pathology like cancer and cardiovascular disease. The aim of this work was to develop an analytical method based on high resolution mass spectrometry in order to identify and localize protein modifications induced by cigarette smoke. Two techniques were used: a MALDI-TOF-TOF analysis and a on line nano liquid chromatography nanoESI-FT-ICR analysis. In order to optimize reaction with cigarette smoke, model reactions were developed on standard peptides and protein. Thus oxidation and nitration were realized using HO° and NO2° free radicals while formation of adducts was performed using 1 eq of aldehydes (formaldehyde, acetaldehyde, malonaldehyde, acrolein, crotonaldehyde and glyoxal). Same proteins were then exposed to cigarette smoke using a smoking machine.By comparison with model reactions, adduct coming from acetaldehyde, acrolein and crotonaldehyde were identified and localized on specific lysine amino acids. These results allowed highlighting that proteins are principally modified by aldehydes contained in cigarette smoke

Caractérisation géochimique (déséquilibres 230Th/238U, isotopes Sr, Nd et Pb, éléments en traces) du volcanisme de dorsale en contexte d'interaction point chaud dorsale (Cas des bassins marginaux du Sud Ouest Pacifique et de la dorsale Centrale Indienne)

L'utilisation d analyses précises des déséquilibres radioactifs (230Th/238U), en association avec les éléments en traces et les isotopes radiogéniques du Sr, du Nd et du Pb, permet la caractérisation et la compréhension des mécanismes d interactions entre les points chauds et les dorsales. Ces interactions résultent du transfert de matière enrichie en éléments en traces et avec des rapports isotopiques radiogéniques depuis un point chaud jusqu'à la zone de fusion sous-jacente à une dorsale. Un tel transfert peut se produire via deux mécanismes : un transfert de manteau à l'état solide ou à l'état liquide. La dorsale Centrale Indienne et les multiples dorsales des bassins marginaux Nord Fidjien et Lau ont été étudiées ici pour caractériser ces éventuels transferts de matière. L'analyse des laves très récentes (<10Ka) des segments d'accrétions par la méthode des déséquilibres (230Th/238U) permet de caractériser la présence d'une interaction entre un point chaud et une dorsale. Cette étude est probablement la première à démontrer l'importance de cette méthode pour caractériser ce type d interactions. Cette méthode permet à la fois de quantifier les mélanges et de caractériser les paramètres de fusion. De plus elle est la seule permettant d'apporter des contraintes physiques sur les mécanismes de transfert de matériel enrichi, indispensable à la compréhension du contexte géodynamique.Studying U series disequilibria in young lavas (<10kyr) is a powerful tool for understanding magma genesis and transfer such as time constraints of melt ascent or mantle porosity. Combined trace element geochemistry, isotope composition and U series data are able to indicate source heterogeneity due to the possible input of plume-derived enriched material. Input of additional mantle material can be carried out under two forms : melt or solid transport state. A major constrain to decipher between these two mechanisms is the duration of transport. Thus, U series disequilibria can provide information about the rate of the transfer process and therefore the transport mechanism of the process. The study presented here (on lavas from the North Fiji and Lau basins and the Central Indian Ridge) is probably one of the first to constrain ridge hotspot interaction using U series disequilibria and accentuates the peculiar interest of this method.BREST-BU Droit-Sciences-Sports (290192103) / SudocPLOUZANE-Bibl.La Pérouse (290195209) / SudocRENNES-Géosciences (352382209) / SudocSudocFranceF

Recherche de biomarqueurs tissulaires de la cancerogenèse hépatique par imagerie Maldi

PARIS7-Bibliothèque centrale (751132105) / SudocSudocFranceF

Étude des modifications des protéines induites par la fumée de cigarette

La fumée de cigarette, reconnue comme étant carcinogène, est un aérosol complexe composé de plusieurs milliers de substances chimiques susceptibles de réagir avec les biomolécules. Aussi l identification des modifications post-traductionnelles des protéines induites par la fumée de cigarette s avère être un enjeu majeur à la compréhension de certaines pathologies telles que les cancers ou les maladies cardiovasculaires.L objectif de ce travail a été de développer une méthode d analyse basée sur la spectrométrie de masse à haute résolution afin d identifier et de localiser les modifications des protéines exposées à la phase gazeuse de la fumée de cigarette. Deux techniques ont été utilisées : l analyse MALDI-TOF-TOF et l analyse nanoESI-FT-ICR couplée à la nano chromatographie liquide. Dans le but d optimiser la réaction avec la fumée de cigarette, des modèles de réactions ont été développés sur des peptides et protéines standards. Ainsi des réactions d oxydation et de nitration ont été effectués à partir des radicaux libres HO et NO2 tandis que des réactions de formation d adduits ont été réalisées à partir d un équivalent d aldéhyde (formaldéhyde, acétaldehyde, malonaldéhyde, acroléine, crotonaldéhyde et glyoxal). Les mêmes standards protéiques ont ensuite été exposés à la fumée de cigarette à l aide d une machine à fumer. Par comparaison avec les modèles de réaction, des adduits provenant de l acétaldéhyde, de l acroléine et du crotonaldéhyde ont pu être identifiés et localisés sur des résidus lysines spécifiques. Ces résultats ont permis de mettre en évidence que les protéines étaient majoritairement modifiées par les aldéhydes contenus dans la fumée de cigarette.Cigarette smoke, well known to be carcinogen, is a high complex aerosol composed of further thousands of chemicals able to react with biomolecules. Also the identification of post-translational protein modifications induced by cigarette smoke is a major stake for the understanding of some pathology like cancer and cardiovascular disease. The aim of this work was to develop an analytical method based on high resolution mass spectrometry in order to identify and localize protein modifications induced by cigarette smoke. Two techniques were used: a MALDI-TOF-TOF analysis and a on line nano liquid chromatography nanoESI-FT-ICR analysis. In order to optimize reaction with cigarette smoke, model reactions were developed on standard peptides and protein. Thus oxidation and nitration were realized using HO and NO2 free radicals while formation of adducts was performed using 1 eq of aldehydes (formaldehyde, acetaldehyde, malonaldehyde, acrolein, crotonaldehyde and glyoxal). Same proteins were then exposed to cigarette smoke using a smoking machine.By comparison with model reactions, adduct coming from acetaldehyde, acrolein and crotonaldehyde were identified and localized on specific lysine amino acids. These results allowed highlighting that proteins are principally modified by aldehydes contained in cigarette smoke.LILLE1-Bib. Electronique (590099901) / SudocSudocFranceF

Development of a method for quantitative profiling of the carnitine family by LC-HRMS

International audienceL-carnitine plays an essential role in tissue energy metabolism by transporting long-chain fatty acids (FAs) across the inner membrane of the mitochondria. The mitochondrial membrane is impermeable to long-chain fatty acids (12 to 20C) and L-carnitine is the only transporter that allows them to enter the mitochondria. The FAs, activated into Acyl-CoA, are converted into acylcarnitine and thus cross the mitochondrial membrane, with the action of three enzymes. Once in the mitochondria, the FAs, once again in the form of Acyl-CoA, undergo β-oxidation, the major role of which is to supply ATP to organs with high energy requirements. This metabolic pathway is a key player in metabolism.This poster presents the implementation of an extraction and quantitative analysis method specific to the carnitine family: from L-carnitine to C18:1 acylcarnitine, using liquid chromatography coupled to an orbitrap-type mass spectrometer (Thermo Exploris 240). Initial extraction tests were carried out on tissues and plasma, as well as a separation on a Waters Acquity HSS T3 column. Various deuterated internal standards (of varying chain lengths) were used for absolute quantification. The method will be validated.This new profiling will be offered as a service on MetaToul, but it will mainly be used to monitor these partially 13C-labelled compounds as part of metabolic labelling experiments. It will be an important complement to the profile of labelled FAs already on offer.La L-carnitine joue un rôle essentiel au niveau du métabolisme énergétique des tissus via le transport des acides gras (AG) à chaîne longue à travers la membrane interne de la mitochondrie. Cette dernière est imperméable aux AG à chaîne longue (12 à 20C) et la L-carnitine est l’unique transporteur leur permettant de pénétrer au sein de la mitochondrie. Les AG, activés en Acyl-CoA, sont convertis en acylcarnitine et traversent ainsi la membrane mitochondriale, avec l’action de trois enzymes. Une fois dans la mitochondrie, les AG, à nouveau sous forme d’Acyl-CoA, vont subir la β -oxydation, dont le rôle majeur est la fourniture d’ATP aux organes à forts besoins d’énergie. Cette voie métabolique est un acteur clé en métabolisme.Ce poster présente la mise en place d’une méthode d’extraction et d’analyse quantitative spécifiques de la famille des carnitines : de la L-carnitine jusqu’à l’acylcarntine C18:1, par chromatographie liquide couplée à un spectromètre de masse de type orbitrap (Thermo Exploris 240). Des premiers tests d’extraction ont été réalisés sur tissus et plasma ainsi qu’une séparation sur colonne Waters Acquity HSS T3. Différents étalons internes deutérés (de longueurs de chaines variés) ont été utilisés pour faire les quantifications absolues. Une validation de la méthode sera effectuée.Ce nouveau profilage sera proposé en prestations sur MetaToul mais il sera surtout décliné pour suivre ces composés partiellement marqués au 13C dans le cadre d’expérimentation de marquage métabolique. Il sera un complément important au profil d’AG marqués déjà proposé

210Po and 210Pb in the tissues of the deep-sea hydrothermal vent mussel Bathymodiolus azoricus from the Menez Gwen field (Mid-Atlantic Ridge)

The hydrothermal deep-sea vent fauna is naturally exposed to a highly specific environment enriched in potentially toxic species such as sulfides, metals and natural radionuclides due to the convective seawater circulation inside the oceanic crust and its interaction with basaltic or ultramafic host rocks. However, data on radionuclides in biota from such environment are very limited. An investigation was carried out on tissue partitioning of 210Po and 210Pb, two natural radionuclides within the 238U decay chain, in Bathymodiolus azoricus specimens from the Mid-Atlantic Ridge (Menez Gwen field). These two elements showed different distributions with high 210Pb levels in gills and high 210Po levels in both gills and especially in the remaining parts of the body tissue (including the digestive gland). Various factors that may explain such partitioning are discussed. However, 210Po levels encountered in B. azoricus were not exceptionally high, leading to weighted internal dose rate in the range 3 to 4?Gyh-1. These levels are slightly higher than levels characterizing coastal mussels (~1μGyh-1). © 2010 Elsevier B.V