Synergistische Aktivierung von dendritischen Zellen durch Kombination von TLR Liganden und Untersuchung von Dextranbasierenden Nanopartikeln als Carrier in der Immuntherapie

Die adäquate Aktivierung von dendritischen Zellen (DC) stellt eine Voraussetzung für den Einsatz dieser Zellen in der antitumoralen Immuntherapie dar. Toll-like Rezeptor (TLR) Liganden haben sich als potente Aktivatoren erwiesen und zeigen in Kombination teilweise synergistische Effekte. In der vorliegenden Arbeit wurde die synergistische Aktivierung von DC durch Kombination verschiedener TLR Liganden anhand der Freisetzung von IL-12 und der TH1-polarisierenden Wirkung der Zellen untersucht. Es konnte gezeigt werden, daß die Kombination CpG + Poly (I:C) sowohl in vitro als auch in vivo einen starken Effekt zeigt, der durch steigende Mengen von Peptidoglykan, vermutlich über die Freisetzung von IL-10 reduziert wird. Daneben wurde in einem Nebenprojekt untersucht, ob Dextran-basierende Nanopartikel für die Aktivierung von DC und Beladung mit Antigen in situ geeignet sind. Es konnte gezeigt werden, daß die Partikel von DC aufgenommen und prozessiert werden. Eingeschlossenes Antigen wird von den Zellen präsentiert und LPS-beladene Partikel führen zu einer Aktivierung der Zellen

Priming CD8+ T cells with dendritic cells matured using TLR4 and TLR7/8 ligands together enhances generation of CD8+ T cells retaining CD28

TLRs expressed on dendritic cells (DCs) differentially activate DCs when activated alone or in combination, inducing distinct cytokines and costimulatory molecules that influence T-cell responses. Defining the requirements of DCs to program T cells during priming to become memory rather than effector cells could enhance vaccine development. We used an in vitro system to assess the influence of DC maturation signals on priming naive human CD8+ T cells. Maturation of DCs with lipopolysaccharide (LPS; TLR4) concurrently with R848 (TLR7/8) induced a heterogeneous population of DCs that produced high levels of IL12 p70. Compared with DCs matured with LPS or R848 alone, the DC population matured with both adjuvants primed CD8+ T-cell responses containing an increased proportion of antigen-specific T cells retaining CD28 expression. Priming with a homogenous subpopulation of LPS/R848–matured DCs that were CD83Hi/CD80+/CD86+ reduced this CD28+ subpopulation and induced T cells with an effector cytokine signature, whereas priming with the less mature subpopulations of DCs resulted in minimal T-cell expansion. These results suggest that TLR4 and TLR7/8 signals together induce DCs with fully mature and less mature phenotypes that are both required to more efficiently prime CD8+ T cells with qualities associated with memory T cells