Promene u stepenu galaktozilacije IgG kunića tokom dugotrajne imunizacije goveđim serumskim albuminima

The galactose content of isolated IgG was analyzed before immunization and at intervals during prolonged immunization over 16 months. It was found that IgGs from non-immunized and immunized animals differed in galactose content and that the galactose content of serum IgG varied during the course of the immune response. These results suggest possible intraclonal variations or the emergence of subclones of cells secreting IgG that is differently galactosylated relative to the IgG of non-immunized animals. Since isotypic polymorphism of IgG (subclasses), which determines the effector potential(s) of IgG antibodies, does not exist in rabbits, glycosylation may be what defines functional subsets of isotypically uniform antibodies produced during an immune response in these animals.Ugljeni hidrati su strukturni element imunoglobulina G (IgG), bitan za konformaciju i efektorne funkcije molekula. Ugljenohidratni sadržaj čine oligosaharidni lanci (glikani) vezani kovalentno za konzervirani Asn 297 u svakom CH2 domenu Fc regiona IgG molekula. Sadržaj pojedinih šećera koji ulaze u sastav glikana nije isti u svim molekulima IgG. Imunoglobulini G su populacija različitih glikoformi čiji sadržaj varira pod fiziološkim, a naročito pod raznim patološkim uslovima. Pretpostavlja se da su te varijacije odraz promena u distribuciji specifičnih antitela IgG klase tokom tekućeg često hroničnog, imunog odgovora na neki antigen. O dinamici tih promena se međutim, malo zna, a posebno o pojavi glikoformi tokom imunog odgovora koje bi mogle imati patogenetski značaj. U ovom radu su analizirane promene u glikozilaciji serumskih IgG tokom imunog odgovora kunića dugotrajno imunizovanih goveđim serumskim albuminima. Rezultati su ukazali da je taj odgovor praćen permanentnim promenama u sadržaju terminalne galaktoze. S obzirom da su molekuli IgG kunića, za razliku od drugih sisara, izotipski uniformni, tj. nemaju podklase (kojima je determinisana brojnost efektornih funkcija IgG), razlike u galaktozilaciji bi mogle determinisati pojavu funkcionalnih subsetova IgG antitela stvorenih tokom imunog odgovora kod ove vrste

Integracija profesionalizma u srednje medicinsko obrazovanje – od teorije do prakse

Значај медицинског образовања и његове импликације на брже запошљавање кадрова лежи у чињеници да оно подстиче појединце да се проактивно суоче с приликама које су око њих. Пракса и практични начин размишљања нису довољно интегрисани у систем средњег медицинског образовања у Србији. Предмет истраживања представља утицај праксе на образовање у средњим стручним школама и запошљавање по стицању дипломе.  Истраживање на узорку од 475 ученика и 45 сестара/техничара који раде у медицинским установама у којима ученици обављају праксу имало је за циљ да оцени квалитет теоријске наставе у средњим медицинским школама, као и праксу коју ученици обављају у здравственим институцијама. Резултати су показали да се често у школама дешава да наставници држе предавања методом усменог излагања без коришћења наставних средстава, уџбеници су оцењени углавном као застарели, постоји потреба за више часова практичне наставе, док је опремљеност кабинета за практичну наставу само делимична (зависи од града где се истраживање спроводило). Резултати показују разлике у оценама о примени теоријских знања између ученика и медицинских сестара/техничара на наставним базама. У циљу унапређења професионализма, потребно је направити бољу организацију практичне наставе са мањим групама ученика, што подразумева реформисање наставних планова и курикулума у средњим стручним школама. Неопходно је да се изрши оптимизација наставног кадра и времена проведеног на наставној бази, као и да се менторство адекватно награди, да се регрутују кадрови који могу бити ментори. Школа за 21. век подразумева интегрисано савремено академско учење, које захтева оргнизован континуирани дијалог између пословних људи и стручњака за образовање о томе шта ученици треба да знају да би могли да раде. Značaj medicinskog obrazovanja i njegove implikacije na brže zapošljavanje kadrova leži u činjenici da ono podstiče pojedince da se proaktivno suoče s prilikama koje su oko njih. Praksa i praktični način razmišljanja nisu dovoljno integrisani u sistem srednjeg medicinskog obrazovanja u Srbiji. Predmet istraživanja predstavlja uticaj prakse na obrazovanje u srednjim stručnim školama i zapošljavanje po sticanju diplome.  Istraživanje na uzorku od 475 učenika i 45 sestara/tehničara koji rade u medicinskim ustanovama u kojima učenici obavljaju praksu imalo je za cilj da oceni kvalitet teorijske nastave u srednjim medicinskim školama, kao i praksu koju učenici obavljaju u zdravstvenim institucijama. Rezultati su pokazali da se često u školama dešava da nastavnici drže predavanja metodom usmenog izlaganja bez korišćenja nastavnih sredstava, udžbenici su ocenjeni uglavnom kao zastareli, postoji potreba za više časova praktične nastave, dok je opremljenost kabineta za praktičnu nastavu samo delimična (zavisi od grada gde se istraživanje sprovodilo). Rezultati pokazuju razlike u ocenama o primeni teorijskih znanja između učenika i medicinskih sestara/tehničara na nastavnim bazama. U cilju unapređenja profesionalizma, potrebno je napraviti bolju organizaciju praktične nastave sa manjim grupama učenika, što podrazumeva reformisanje nastavnih planova i kurikuluma u srednjim stručnim školama. Neophodno je da se izrši optimizacija nastavnog kadra i vremena provedenog na nastavnoj bazi, kao i da se mentorstvo adekvatno nagradi, da se regrutuju kadrovi koji mogu biti mentori. Škola za 21. vek podrazumeva integrisano savremeno akademsko učenje, koje zahteva orgnizovan kontinuirani dijalog između poslovnih ljudi i stručnjaka za obrazovanje o tome šta učenici treba da znaju da bi mogli da rade.

See Also : Auto Generated Recommendations

Wikipedia is one of the most used encyclopedias today. It earned its status for more than one reason: easy accessibility, regular and quick updates and useful hyperlinks within the articles. Apart from linking to the other articles within the main body of an article, Wikipedia also uses a section called “See also” in which similar or related articles are listed. The main idea behind this research is the creation of automatic recommendation for the “See also” section based on soft clustering of document similarities with the addition of the hyperlinks within the main body of an article as the observed objects. The research is conducted on the Croatian version of Wikipedia, with short articles omitted. In the article it was concluded that the procedure cannot be regarded as being successful enough for an unsupervised implementation on articles in Croatian Wikipedia

LACTONASE MEDIATED QUORUM QUENCHING OF PSEUDOMONAS AERUGINOSA VIRULENCE

Solving the problem of the antimicrobial resistance crisis is one of the primary challenges currently confronting the healthcare system. One of the most promising new strategies to combat antimicrobial resistance is the antivirulence therapy, based on silencing bacterial cell-to-cell communication (quorum quenching - QQ). QQ enzymes lactonases represent a diverse group of enzymes capable of inactivating signaling molecules of bacterial communication – N-acyl homoserine lactones (AHLs), resulting in alterations ofbacterial virulence. The numerous virulence factors and resistance to most conventional antibiotics have led to Pseudomonas aeruginosa being listed as one of the top-priority pathogens on the ESCAPE pathogen list, highlighting the urgent need for the development of new therapies to combat this pathogen. P. aeruginosauses cell-to-cell communication known as quorum sensing (QS) that allows bacteria to monitor their own population density via signal molecules and subsequently control bacterial pathogenesis. Our hypothesis was that bacterial pathogens which share the same ecological niche with P. aeruginosa during infection have developed a system to disrupt its QS system, in order to survive in polymicrobial communities alongside this successful pathogen. In our research we identified QQ enzymes lactonases originating from two Gramnegative bacterial pathogens Burkholderiacepacia and Stenotrophomonas maltophilia. The genes encoding for the enzymes were cloned and expressed in pQE30 expression vector. B. cepacia BCC4135 synthesizes two lactonases YtnP and Y2-aiiA, that have the different cellular localization, but also different substrate specificity, which could imply the difference in their biological roles. S. maltophilia 6960 YtnP lactonase has several advantageous biotechnological properties, such as high thermostability, activity in a wide pH range, and no cytotoxic microscopy analysis showed a strong effect of analyzed lactonases on preventing biofilm formationand initiating the decomposition of the preformed biofilm of P. aeruginosa MMA83. Functional assays showed that lactonases have the ability to significantly reduce extracellular virulence factors production – elastase, pyocyanin and rhamnolipid. Additionally, the results obtained by real-time quantitative PCR showed that analyzed recombinant enzymes significantly downregulated all three analyzed P. aeruginosa QS networks at the transcriptional level. Finally, S. maltophilia 6960 YtnP lactonase significantly prolonged survival of Caenorhabditis elegans by reducing virulence of P. aeruginosa using fastkilling liquid assay. The described properties make B. cepacia and S. maltophilia lactonases the promising therapeutic candidates for the development of nextgeneration antivirulence agents.Book of abstracts and conference proceedings / 3rd International Conference Antimicrobial Resistance - Current State and Perspectives, 16-18. May 2024, Novi Sad, Serbia

Molecular characterization of semi-hard homemade cheese microflora

U poslednjoj deceniji zabeležen je nagli razvoj molekularnih tehnika baziranih na 16S i 23S rRNK, koje se koriste u izučavanju biodiverziteta mikroorganizama. U ovom radu ispitivana je mikroflora polutvrdog sira pripremljenog u domaćinstvu. Zbog visokog sadržaja masti u ovom siru razvili smo novu tehniku za izolaciju totalne DNK iz sira (metod je baziran na bead beating-u). Brza izolacija DNK iz mikroflore sira omogućila nam je molekularnu identifikaciju BMK (BAKTERIJE MLEČNE KISELINE) na osnovu umnožavanja gena za 16S rRNK PCR metodom. Za umnožavanje su korišćeni prajmeri specifični za gene 16S rRNK lakto-bacila, ali su uslovi PCR reakcije bili takvi da su omogućavali i umnožavanje gena 16S rRNK laktokoka. Rezultati RFLP analize pokazali su da mikrofloru sira pripremljenog u domaćinstvu čine predominantno laktokoke.This decade has shown an impressive development in the application of molecular techniques based on 16S and 23S rRNA genes to study the microbial diversity in various ecosystems. Microflora of semi-hard homemade cheese was examined in this work. We developed a novel technique for DNA extraction (a bead beating based method) due to high fat content of this cheese. Rapid extraction of DNA from cheese microflora enabled a molecular identification of the LAB (Lactic Acid Bacteria) strains based on PCR amplification of 16S RNA coding sequences. The specific primers for 76S RNA gene of lactobacilli were used for amplification. The PCR reaction was performed at lower temperature, where the specificity of the annealing reaction was reduced and lactococcal sequences of 16S RNA genes were also amplified. The results of RFLP analysis revealed that the microflora of Doboj homemade cheese encompases mostly lactococci

Imunokompleksi u krvnom serumu teladi u neonatalnom periodu i kod odraslih goveda

In this work immune complexes (IC) in the sera of healthy calves from birth to four months of age, heifers and cows were investigated. Polyethylen glycol (PEG) precipitation assay was applied after previous standardization. Optical density (OD) of redissolved precipitates, formed after adding PEG to serum samples, was a measure of IC level. The upper-limit values for normal IC levels were established using isolated cattle IgG in different amounts and aggregated by heat as an IC model in vitro, in the same assay. In newborn calves before colostrum intake, OD of 0.047±0.024 was registered in redissolved PEG precipitates, far below the values obtained for native monomeric IgG. Therefore, these values can not be considered to refer to immune complexes. After colostrum intake, OD values for normal IC levels were higher, with significant interindividual differences: in calves at 6 24 and 48 hours after birth the mean OD values of solubilized PEG precipitates were 0.069±0.025, 0.148±0.079, and 0.136±0.062 respectively. In the sera of calves 10 days after birth mean OD value was slightly lower 0.089±0.053, whereas in the serum of 1, 2, 3 and 4 month old calves normal levels of IC rose to 0.165±0.067, 0.157±0.080, 0,231±0,124 and 0.261±0.092 respectively. OD values for IC levels for adult animals were found to be 0,456±0,150 for heifers, and 0,183±0,031 for cows. Together, the obtained data may be included in a reference values system for normal levels of IC at different ages, in relation to which the IC levels under pathological conditions could be estimated.U radu je ispitivan nivo imunokompleksa (IC) u krvnom serumu teladi od rođenja do četiri meseca starosti, kao i kod junica i krava. Za analize je posle predhodne standardizacije korišćen polietilenglikol precipitacioni test (direktan PEG test). Meru nivoa IC predstavljale su vrednosti optičke gustine (OD) rastvorenog precipitata dobijenog nakon taloženja imunokompleksa iz seruma PEG-om. Gornja granica normalnih vrednosti za nivo IC utvrđena je prema vrednostima dobijenim za izolovane i toplotom agregirane kravlje IgG, u istom testu, gde su takvi IgG korišćeni kao modeli IC in vitro. U grupi novorođene teladi pre uzimanja kolostruma vrednosti OD su bile ekstremno niske (OD 0,047±0.024) i nisu mogle biti pripisane imunokompleksima. Vrednosti OD za normalan nivo IC u serumu teladi nakon uzimanja kolostruma su bile više: za telad 6, 24 i 48 sati nakon rođenja taj nivo je iznosio 0,069±0,025, 0,148±0,079 i 0,136±0,062 respektivno. U odnosu na ove vrednosti, nivo IC u serumu teladi 10 dana od rođenja je bio nešto niži i iznosio 0,089±0,053, da bi se, zatim, kontinuirano povećavao kod teladi uzrasta od 1 do 4 meseca i iznosio 0,165±0,067 za telad od 1-og meseca, 0,157±0,080 za telad od 2 meseca, 0,231±0,124 za telad od 3 meseca i 0,261±0,092 za telad od 4 meseca starosti. Nivo imunokompleksa u serumu odraslih goveda iznosio je kod junica 0,456±0,150 i krava 0,183±0,031. Dobijeni rezultati mogu biti uključeni u kontrolni sistem vrednosti za normalan nivo IC u raznim starosnim grupama goveda, koji se može koristiti pri određivanju nivoa IC PEG testom pod patološkim uslovima kod teladi junica i krava

Supplementary data for the article: Vatić, S.; Mirković, N.; Milošević, J. R.; Jovčić, B.; Polović, N. Đ. Broad Range of Substrate Specificities in Papain and Fig Latex Enzymes Preparations Improve Enumeration of Listeria Monocytogenes. International Journal of Food Microbiology 2020, 334, 108851. https://doi.org/10.1016/j.ijfoodmicro.2020.108851

Supplementary material for: [https://doi.org/10.1016/j.ijfoodmicro.2020.108851]Related to published version: [https://cherry.chem.bg.ac.rs/handle/123456789/4090

Elektroforetske i imunoelektroforetske karakteristike IgG kao konstituenata peg precipitabilnih imunokompleksa seruma kod teladi do četvrtog meseca starosti

Preruminant calves encounter numerous antigens, and formation of immune complexes is necessary for antigens elimination. The capability of immunologically immature calves to form immune complexes has not yet been studied in detail. For immune complexes studies, selective precipitation by PEG was performed, in combination with agarose gel electrophoresis and immunoelectrophoresis, with an aim to determine some properties of IgG, as constituents of immune complexes. In our previous work it was shown that the level of PEG precipitable immune complexes increased in the period from birth to 48-hours of life, decreased at day 10, increased in one month old animals, and after that, stayed unchanged until 4th month of age. Electrophoretic and immunoelectrophoretic analysis showed that until one month of age, calves' sera and PEG precipitates contained only one part of IgG molecules which corresponded to fast, anionic γ globulins. Although at the age of one month, preruminant calves' sera contained all molecular forms of IgG molecules present in the sera of adult cattle, only one part of serum IgG (fast, anionic IgG) was precipitated by PEG. In older calves, all molecular forms of serum IgG had the capacity to form PEG precipitable immune complexes. Presented data, as well as the results of our previous work, can be used as parameters with reference to physicochemical and immunochemical characteristics of IgG immune complexes of preruminant calves under pathological conditions.Telad od rođenja dolazi u kontakt sa velikim brojem antigena za čije je efikasno uklanjanje neophodno formiranje imunokompleksa. Sposobnost ovih, još uvek imunološki nezrelih, životinja da formiraju iminokomplekse, kao i sastav njihovih konstituenata, nisu detaljno ispitivani. U ovom radu smo imunokomplekse iz seruma teladi izolovali precipitacijom polietilen glikolom (PEGom), a osobine IgG, kao potencijalnih konstituenata imunokompleksa, analizirali metodama elektroforeze i imunoelektroforeze. U našem prethodnom radu dokazali smo da se nivo PEG precipitabilnih imunokompleksa menja sa uzrastom teladi. On raste od rođenja do 48. sata, opada desetog dana, ponovo raste u prvom mesecu, nakon čega ostaje nepromenjen do četvrtog meseca starosti. Elekroforetske i imunoelektroforetske analize su ukazale da se u serumu i PEG precipitatima seruma teladi do mesec dana starosti nalazi samo jedna molekulska frakcija IgG koja odgovara brzim, anjonskim IgG. Iako se u serumima teladi već u prvom mesecu starosti nalaze sve molekulske forme IgG koje se nalaze i u serumu odraslih krava, samo jedan njihov deo (brzi, anjonski γ globulini) ima sposobnost da formira imune komplekse. Kod starijih teladi, kao i kod odraslih krava, sve molekulske forme serumskih IgG mogu da formiraju imune komplekse. Ovi rezultati, zajedno sa rezultatima našeg predhodnog rada, se mogu koristiti za dobijanje referentnog sistema vrednosti nivoa i sastava imunokompleksa kod zdravih teladi, a koji bi se mogao koristiti za određivanje nivoa i sastava imunokompleksa kod teladi u patološkim uslovima

Effect of methionine and cysteine deprivation on growth of different natural isolates of Lactobacillus spp. in chemically defined media

Cilj ovog rada je bio da se utvrdi sposobnost prirodnih izolata laktobacila,izolovanih iz različitih ekoloških niša da rastu u hemijski definisanom medijumu sa ili bez prisustva aminokiselina koje sadrže sumpor, metionin i/ili cistein. Dobijeni rezultati su pokazali da je esencijalna aminokiselina za rast izolata L. paracasei subsp. paracasei BGHN14 i BGSJ2-8 cistein, dok je za izolate BGHN40, BGCG31, BGHV54T, koji pripadaju vrsti L. plantarum-metionin. Metionin je esencijalna aminokiselina za rast soja L. rhamnosus BGHV58T. Ostali analizirani sojevi,kao što su L. plantarum BGSJ3-18,BGZB19,BGHV52Ta i BGHV43T za svoj rast zahtevaju prisustvo obe aminokiseline u medijumu.The purpose of this study was to determine the ability of natural isolates of lactobacilli from different ecological niches to grow in a chemically defined medium in the presence or absence of sulphur-containing amino acids, methionine and/or cysteine. The obtained results indicate that cysteine is essential for growth of L. paracasei subsp. paracasei BGHN14 and BGSJ2-8, while methionine is essential for isolates BGHN40, BGCG31, and BGHV54T of the species L. plantarum. Methionine is also essential for growth of L. rhamnosus BGHV58T. Other analyzed strains, such as L. plantarum BGSJ3-18, BGZB19, BGHV52Ta, and BGHV43T, require the presence of both amino acids for their growth