0169 : Segregated calcium stores are important for stretch-induced calcium signaling in smooth muscle cells: Implication in pulmonary hypertension

Pulmonary arterial smooth muscle cells (PASMC) are submitted to stretch forces exerted by the blood pressure. They can transduce a mechanical stimulus of stretch into a biological response of contraction, a mechanism called myogenic tone which involves Ca2+ influx through stretch-activated channels (SAC). We investigate how the subcellular organization of Ca2+ stores in PASMC (sarcoplasmic reticulum (SR), lysosomes and mitochondria) is important for the Ca2+ response to stretch during PH.Studies were performed in freshly isolated PASMC from control rats and rats with a pulmonary hypertension induced by an injection of monocrotaline (MCT). Inward currents from SAC were recorded after a negative pressure applied by a patch-clamp pipette. Cytosolic Ca2+ was also measured with the fluo4 probe and mitochondrial Ca2+ with the rhod2 probe after an osmotic shock. A pharmacological approach coupled with different coimmunolabelings of ryanodine receptors (RyR) and SERCA2 pumps was used to investigate which RyR subtype is involved in Ca2+ response to stretch.PASMC exhibit segregated Ca2+ stores: a subplasmalemnal SR store with RyR1 and SERCA2b, associated to mitochondria and a perinuclear SR store with RyR3 and SERCA2a. We showed that a stretch of PASMC induces an inward Ca2+ influx through SAC that is amplified by a Ca2+ release by RyR1, which is buffered by mitochondria. In MCT rats, the subcellular organization of RyR subtypes is modified: RyR3 and SERCA2a are not only expressed in a perinuclear area but also in a subplasmalemnal level. This is correlated with a different organization of mitochondria. In MCT rats, this new organisation leads to a greater amplification by all RyR subtypes and to a higher Ca2+ increase induced by stretch. Furthermore, the Ca2+ response to stretch is enhanced by a mechanism independent on extracellular Ca2+, involving caveolae.The spatial organization of Ca2+ stores in PASMC is important for cell signaling and plays a causal role in PH

Consequences of PPARα Invalidation on Glutathione Synthesis: Interactions with Dietary Fatty Acids

Glutathione (GSH) derives from cysteine and plays a key role in redox status. GSH synthesis is determined mainly by cysteine availability and γ-glutamate cysteine ligase (γGCL) activity. Because PPARα activation is known to control the metabolism of certain amino acids, GSH synthesis from cysteine and related metabolisms were explored in wild-type (WT) and PPARα-null (KO) mice, fed diets containing either saturated (COCO diet) or 18 : 3 n-3, LIN diet. In mice fed the COCO diet, but not in those fed the LIN diet, PPARα deficiency enhanced hepatic GSH content and γGCL activity, superoxide dismutase 2 mRNA levels, and plasma uric acid concentration, suggesting an oxidative stress. In addition, in WT mice, the LIN diet increased the hepatic GSH pool, without effect on γGCL activity, or change in target gene expression, which rules out a direct effect of PPARα. This suggests that dietary 18 : 3 n-3 may regulate GSH metabolism and thus mitigate the deleterious effects of PPARα deficiency on redox status, without direct PPARα activation

Consequences of PPARα Invalidation on Glutathione Synthesis: Interactions with Dietary Fatty Acids

Glutathione (GSH) derives from cysteine and plays a key role in redox status. GSH synthesis is determined mainly by cysteine availability and γ-glutamate cysteine ligase (γGCL) activity. Because PPARα activation is known to control the metabolism of certain amino acids, GSH synthesis from cysteine and related metabolisms were explored in wild-type (WT) and PPARα-null (KO) mice, fed diets containing either saturated (COCO diet) or 18 : 3 n-3, LIN diet. In mice fed the COCO diet, but not in those fed the LIN diet, PPARα deficiency enhanced hepatic GSH content and γGCL activity, superoxide dismutase 2 mRNA levels, and plasma uric acid concentration, suggesting an oxidative stress. In addition, in WT mice, the LIN diet increased the hepatic GSH pool, without effect on γGCL activity, or change in target gene expression, which rules out a direct effect of PPARα. This suggests that dietary 18 : 3 n-3 may regulate GSH metabolism and thus mitigate the deleterious effects of PPARα deficiency on redox status, without direct PPARα activation

Canaux ioniques et canalopathies cardiaques

BORDEAUX2-BU Santé (330632101) / SudocSudocFranceF

Du naevus mélanocytaire au mélanome cutané

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Hyperfonctionnement de la thyroïde et conséquences cardiaques

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L'utilisation abusive des benzodiazepines en France (causes et conséquences)

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The Ellagitannin Metabolite Urolithin C is a Glucose‐Dependent Regulator of Insulin Secretion through activation of L‐type Calcium Channels

International audienc

L'inflammation postprandiale à bas bruit n'implique pas la voie TLR4 chez le rat

International audiencedu syndrome métabolique, en particulier par l'installation d'une inflammation à bas bruit. Au plan expérimental, un repasriche en AGS et en sucre induit transitoirement un ensemble de réactions inflammatoires postprandiales vasculaires etsystémiques (ERIPP). L’ERIPP est associé à une activation de la voie inflammatoire NF-kB dans le tissu adipeux (TA)viscéral. Le récepteur TLR4, connu pour être activé par les AGS, pourrait jouer un rôle important dans cette activation,mais il n’existe pas à ce jour de preuve directe en période postprandiale (PP). Cette étude vise à déterminer l'implicationde l’activation de TLR4 dans la survenue de l’ERIPP.Matériel et méthodes: Etude 1. Cinétique PP plasmatique. Selon un dispositif croisé, 12 rats mâles à jeun ont reçu pari.v. soit un inhibiteur spécifique de TLR4 (INH) soit le véhicule de l'inhibiteur comme témoin (VEH), puis un repas decharge gras et sucré par gavage 5 min après. Du sang a été prélevé à jeun, puis 1, 2, 3, 4 et 6 h après gavage. Unesemaine a séparé les deux explorations sur chaque rat. Les marqueurs plasmatiques métaboliques (glucose,triglycérides), inflammatoires systémiques (IL-6, IL-1β, MCP-1, PAI-1) et vasculaires (ICAM-1, E-sélectine) ont étémesurés à chaque temps. Statistiques : modèle mixte pour données répétées.Etude 2. Inflammation PP tissulaire. Selon un dispositif en parallèle, 20 rats mâles à jeun ont reçu l'INH ou le VEH par i.v.(10 rats par groupe), puis le même repas de charge. Du sang a été prélevé avant et 3h après le repas, puis le foie et leTA épididymaire ont été prélevés. L'activation de NF-kB a été mesurée dans le TA, et l'expression génique (IL-6, IL-1β,TNFα, PAI-1, MCP-1, TLR4 et TLR2) a été mesurée dans le TA et le foie. Statistiques : test t de Student aprèsnormalisation.Résultats et Analyse statistique: Etude 1. Cinétique PP plasmatique. Le pic de glycémie est atteint 1h après gavage, etles triglycérides atteignent un plateau au bout de 3h. Les marqueurs inflammatoires augmentent significativement pour IL-6 (x5) et PAI-1 (x4), avec des maximums 3-4h après gavage, mais pas pour les autres marqueurs. Comparé au VEH,l'INH ne modifie aucune des cinétiques PP. Les prélèvements de l'Etude 2, ont donc été faits 3 heures après gavage.Etude 2. Inflammation PP tissulaire. Trois heures après gavage, le taux d'ARNm dans le TA est beaucoup plus élevédans le groupe INH vs VEH pour IL-1β (x130), IL-6 (x55), TNFα (x45), MCP-1 (x25) et PAI-1 (x2). L’INH n’a pas eu d’effetsur TLR4, mais a accru l’expression de TLR2 (x9) avec une tendance à l’augmentation de la translocation de NF-kB (x3,NS). Dans le foie, l'INH a accru l'expression de IL-1β (x3), TNFα (x3), et MCP-1 (x3) et TLR2 (x2), mais pas d’IL-6 ou dePAI-1, et sans effet significatif sur les TLR. Cette augmentation paradoxale de la transcription de gènes-ciblesinflammatoires pourrait donc s’expliquer par une activation compensatoire de TLR2.Conclusion: Dans nos conditions, en réponse à un inhibiteur spécifique de TLR4, l'inflammation postprandiale à basbruit, mesurée au niveau circulant, se maintient au niveau de celui du groupe témoin. Elle reposerait donc sur desmécanismes autres que l’activation de TLR4