EXOSSOMOS: ESTRUTURAS PROMISSORAS PARA O DIAGNÓSTICO E TRATAMENTO DE DOENÇAS E REGULAÇÃO DOS PROCESSOS DE INTERAÇÃO PARASITO-HOSPEDEIRO

Introdução: Os exossomos são pequenas vesículas com diâmetro que varia entre 40 e 100 nm, produzidas pelo sistema endocítico de diversos tipos celulares. O interesse recente nos exosssomos é atribuído ao seu papel na disseminação de organismos patogênicos, bem como na sua função em promover e regular a resposta imune. Destaca-se ainda o promissor uso dos exossomos como biomarcadores de doenças e como ferramentas terapêuticas. Além de mediarem a comunicação intercelular, os exossomos também estão envolvidos em enfermidades como câncer e doenças degenerativas. Objetivo: Levantar novas abordagens relacionadas aos exosossomos, sua formação, função e sua relevância para o uso de novas técnicas diagnósticas e terapêuticas, e durante a interação parasito-hospedeiro. Metodologia: Este é um estudo de revisão bibliográfica desenvolvido através de levantamento na literatura sobre o tema abordado. Resultados e discussão: Os exossomos tem sido atribuído a diferentes funções biológicas, entre elas estão a influência no sistema imune, transferência de receptores de uma célula para outra, assim como a entrega de mRNAs, miRNAs e proteínas específicas da célula de origem para o citoplasma da célula recipiente. Os exossomos facilitam também o transporte e disseminação de patógenos. Sua análise tem sido descrita em abordagens diagnósticas e terapêuticas. Conclusão: Componentes específicos dos exossomos tem mostrado serem uma ferramenta não invasiva no diagnóstico de doenças como câncer, além disso desempenham importantes papéis durante a interação parasito-hospedeiro.Palavras chave: exossomos, biomarcadores, terapias, patógenos, comunicação celular

EPIDEMIOLOGICAL ANALYSIS OF DENGUE'S INCIDENCE ON CERES-GO COUNTY BETWEEN 2012 AND 2015

Dengue is an infectious disease caused by a virus Flaviirus genus, transmitted by a vector, the Aedes aegypti. The aim of this study was promote an epidemiological study to identify the incidence of dengue cases reported in the city of Ceres, Goiás. Study was conducted epidemiological, descriptive, ecological type, cross-sectional, quantitative, accomplished by the data collection of the number of reported and confirmed cases of dengue, in the 2012 period to 2015, provided by municipal surveillance in the city of  Ceres, Goiás, and the site of the Goiás State Department of Health. Between 2012 to 2015 were reported 4556 dengue cases in the municipality of Ceres, and of these, 45.96% were confirmed by serological tests. Of the total cases reported during this period (n = 4.566), 50.53% (2.290) are the only cases reported in 2015. The incidence rate of the disease in 2015, in Ceres, was 11.051 cases / 100.000 inhabitants, values surpass the previous years (2012-2014). This result demonstrates the high burden of disease in the population of this municipality in 2015. The data also suggest the addition of a new serotype in the region. This increase of the risk of dengue hemorrhagic fever, which characterized as a complication of classic disease, however, data for cases of dengue hemorrhagic fever were not available. There was a considerable increase in the number of dengue cases in 2015 compared to previous years, 2012 to 2014. This growth suggests that serological studies focusing on serotypes detection should be conduct on region. KEY WORDS: Aedes aegypti; serogroup; epidemics

BIOENSAIO CITOGENÉTICO PARA A CARACTERIZAÇÃO DA MUTAGENICIDADE E CITOTOXICIDADE DA ESPÉCIE CHOCLHOSPERMUM REGIUM

Introdução: A espécie Cochlospermum regium (Mart. & Schr.) Pilger é consideravelmente utilizada na medicina popular para o tratamento de doenças infectoparasitárias e carcinogênicas, porém ainda não se tem conhecimento do risco em utiliza-la, sendo necessário avaliações de mutagenicidade. A espécie vegetal Allium cepa tem sido amplamente observada e utilizada para avaliar o potencial de mutagenicidade e citotoxicidade de plantas medicinais e isolados devido sua alta sensibilidade e sua excelente correlação com variados marcadores farmacogenéticos. Com a utilização crescente de plantas medicinais pela população, é de grande importância a avaliação dos efeitos de mutagenicidade e citotoxicidade dessas substâncias para manter a integridade da saúde das pessoas. Objetivo: O objetivo deste trabalho foi de avaliar o potencial mutagênico e citotóxico de diferentes concentrações do extrato de C. regium. Metodologia: Para a análise foi utilizado o sistema teste Allium cepa (Asparaginales, Alliaceae). Para realização da técnica de Allium cepa utilizou-se o protocolo segundo Fieskejo & Grant (1985). Resultados e discussão: O extrato de C. regium, nas concentrações utilizadas, exibiu efeito citotóxico paralisando as células em profáse e não mostrou efeito mutagênico. Conclusão: Concluindo que a planta C. regium utilizada como planta medicinal pela comunidade, apresenta efeito citotóxico, podendo causar efeitos colaterais e maléficos para quem fizer o uso indiscriminado do extrato para o tratamento de alguns tipos de doenças, porém para a confirmação destes efeitos necessita-se de maior investigação.Palavras- chave: Allium cepa, Mutagenicidade, Citotoxicidade, Alterações cromossômicas

Identification and immunogenic potential of glycosylphosphatidylinositol-anchored proteins in Paracoccidioides brasiliensis

In fungal pathogens the cell wall plays an important role in host-pathogen interactions because its molecular components (e.g., polysaccharides and proteins) may trigger immune responses during infection. GPI-anchored proteins represent the main protein class in the fungal cell wall where they can perform several functions, such as cell wall remodeling and adhesion to host tissues. Genomic analysis has identified the complement of GPI-anchored proteins in many fungal pathogens, but the function has remained unknown for most of them. Here, we conducted an RNA expression analysis of GPI-anchored proteins of Paracoccidioides brasiliensis which causes paracoccidioidomycosis (PCM), an important human systemic mycosis endemic in Latin America. The expression of the GPI-anchored proteins was analyzed by quantitative PCR in both the mycelium and yeast forms. qPCR analysis revealed that the transcript levels of 22 of them were increased in hyphae and 10 in yeasts, respectively, while 14 did not show any significant difference in either form. Furthermore, we cloned 46 open reading frames and purified their corresponding GPI-anchored proteins in the budding yeast. Immunoblot and ELISA analysis of four purified GPI-anchored proteins revealed immune reactivity of these proteins against sera obtained from PCM patients. The information obtained in this study provides valuable information about the expression of many GPI-anchored proteins of unknown function. In addition, based on our immune analysis, some GPI-anchored proteins are expressed during infection and therefore, they might serve as good candidates for the development of new diagnostic methods

Metabolic Peculiarities of Paracoccidioides brasiliensis Dimorphism as Demonstrated by iTRAQ Labeling Proteomics

Paracoccidioidomycosis (PCM), a systemic mycosis with a high incidence in Latin America, is caused by thermodimorphic fungi of the Paracoccidioides genus. The contact with host occurs by the inhalation of conidia or mycelial propagules which once reaching the pulmonary alveoli differentiate into yeast cells. This transition process is vital in the pathogenesis of PCM allowing the fungus survival in the host. Thus, the present work performed a comparative proteome analysis of mycelia, mycelia-to-yeast transition, and yeast cells of Paracoccidioides brasiliensis. For that, tryptic peptides were labeled with iTRAQ and identified by LC–MS/MS and computational data analysis, which allowed the identification of 312 proteins differentially expressed in different morphological stages. Data showed that P. brasiliensis yeast cells preferentially employ aerobic beta-oxidation and the tricarboxylic acid cycle accompanied by oxidative phosphorylation for ATP production, in comparison to mycelia and the transition from mycelia-to-yeast cells. Furthermore, yeast cells show a metabolic reprogramming in amino acid metabolism and in the induction of virulence determinants and heat shock proteins allowing adaptation to environmental conditions during the increase of the temperature. In opposite of that, the alcoholic fermentation found to P. lutzii, at least under laboratory conditions, is strongly favored in mycelium compared to yeast cells. Thereby, the data strongly support substantial metabolic differences among members of the Paracoccidioides complex, when comparing the saprobiotic mycelia and the yeast parasitic phases

Proteomic analysis in yeast cells Paracoccidioides sp. on copper overload

Submitted by Marlene Santos ([email protected]) on 2016-12-21T15:53:06Z No. of bitstreams: 2 Dissertação - Igor Godinho Portis - 2015.pdf: 1381751 bytes, checksum: 82c1841407115b20ec4e6f5d2f786b17 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5)Approved for entry into archive by Luciana Ferreira ([email protected]) on 2016-12-26T14:18:16Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Dissertação - Igor Godinho Portis - 2015.pdf: 1381751 bytes, checksum: 82c1841407115b20ec4e6f5d2f786b17 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5)Made available in DSpace on 2016-12-26T14:18:16Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Dissertação - Igor Godinho Portis - 2015.pdf: 1381751 bytes, checksum: 82c1841407115b20ec4e6f5d2f786b17 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Previous issue date: 2015-02-24Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPESParacoccidioidomycosis is the most prevalent systemic mycosis in Latin America, caused by fungi of the genus Paracoccidioides. The fungus grows as mycelium in the saprophytic environment, with the infection caused mycelium propagules and/or conidia, that will differentiate into the yeast form. Copper is an essential micronutrient for eukaryotes and bacteria, is extremely important to various proteins, and cofactor of many enzymes and used in many biochemical processes. However, excessive, copper can cause damage to proteins, lipids and nucleic acids, inferring the importance of this metal homeostasis. The objective of this study was to evaluate the fungus Paracoccidioides sp behavior in the presence of copper excess, through proteomics analysis. In the presence of copper excess, the yeast colonies of Paracoccidioides sp. depicted brown color. Expression of transcripts encoding CTR3, a copper transporter and the copper chaperone ATX1 showed inhibition and induction, respectively in the presence of excess copper, as verified by qRT-PCR. Proteins related to stress responses, with melanin production and pathways for energy, are regulated, suggesting that Paracoccidioides sp. responds to copper excess with detoxification strategies, protection and induction of various pathways of obtaining energy.Paracoccidioidomicose é a micose sistêmica mais prevalente da América Latina, causada por fungos do gênero Paracoccidioides spp. O fungo cresce como micélio no ambiente saprofítico, sendo a infecção causada por propágulos de micélio e ou conídios, que se diferenciam na forma leveduriforme no hospedeiro. O cobre é um micronutriente essencial para eucariotos e bactérias, de extrema importância a várias proteínas, sendo cofator de muitas enzimas e utilizado em diversos processos bioquímicos. Entretanto em excesso, o cobre pode provocar danos a proteínas, lipídeos e ácidos nucléicos, por isso a importância da homeostase desse metal. O objetivo deste estudo foi avaliar o comportamento do fungo Paracoccidioides sp. em presença de excesso de cobre, através de análise proteômica. Na presença de excesso de cobre, as colônias leveduriformes de Paracoccidioides sp. apresentaram coloração marrom. A expressão dos transcritos codificantes do transportador de cobre Ctr3 e da chaperona Atx1, apresentaram inibição e indução, respectivamente na presença de excesso de cobre, como verificado através de qRT-PCR. Proteínas relacionadas a respostas ao estresse, com produção de melanina e com vias para obtenção de energia, foram reguladas, o que sugere que Paracoccidioides sp. responde ao estresse de excesso de cobre com estratégias de desintoxicação celular, proteção e indução de várias vias de obtenção de energia