Amiláz-aktivitás mérésére alkalmas kromogén szubsztrát előállítása

Az amiláz-aktivitás mérésére alkalmas színes keményítő szubsztrátumot állítottak elő. Epiklorhidrin vegyülettel a keményítő molekula térhálósított, laza szerkezetét alakították ki és az aktivált keményítőhöz kovalens kötéssel „Cibacron kék” színezéket kapcsoltak. A módosított keményítőt foszfát-puffersó, nátrium-klorid és cellulóz hozzáadásával tablettázták. Az előállított új amilázteszt tablettával és a svéd Phadebas módszerrel mért enzimaktivitás értékek megegyeztek. A vizsgálatok eredményei arra utalnak, hogy a színezett keményítő szubsztrátum üzemi előállítása megvalósítható, a gyártástechnológia hazai feltételei adottak. Az új amilázteszt összetételén könnyen lehet változtatni az igényeknek megfelelően, ahogyan a vizsgálati minta eredete megköveteli, ezért a biotechnológiai analízisekben széles körben alkalmazható. The authors produced coloured starch substratum which is suitable to measuring of amylase-activity. They formed the loose structure of the starch molecule with epichlorohydrin compouned and connected the „Cibacron blue” colouring agent to the activated starch by means of covalent bond. They made tablets from the modified starch by means of mixing to phosphate-buffer, sodium chloride and cellulose. The measured values of enzyme activit were equivalent to the new amylase-test tablet and to the Swedish Phadebas method as well. According to the results of analysis is realizable the industrial producing of the coloured starch substratum because are given the domestic condition of technology. The compound of the new amylase-test is variable easily according to the source of the survey sample so it is useful in wide-spread in the biotechnological analysis. Für die Messung der Amylase-Aktivität wurde ein farbiges Stärkesubstrat hergestellt. Mit Epichlorhydrin wurde eine lockere Raumnetzstruktur der Stärke herausgebildet und zu der aktivierten Stärke „Cibacron blau” Farbstoff mit Kovalens-Bindung gebunden. Die modifizierte Stärke wurde durch Zusatz von Phosphat-Puffersalz, Natriumchlorid und Zellulose in Tablettenform gebracht. Die mit den neuen Amylasetest-Tabletten lzw. mit der schwedischen Phadebas-Methode gemessenen Enzymaktivitätswerte stimmten überein. Die Ergebnisse der Untersuchungen weisen darauf hin, daß die großtechnische Herstellung des gefälten Särkesubstrats verwirklicht werden kann und die technologischen Bedingungen dafür in Ungarn gegeben sind. Die Zusammensetzung des neuen Amylasetests kann einfach, je nach Bedarf und entsprechend dem Ursprung des Prüfmusters verändert werden, wodurch dieser Test in einem breiten Spektrum der biotechnologischen Analysen eingesetzt werden kann

Glükóztartalom enzimes meghatározása kísérleti mintákban

A glükóztartalom meghatározására biztonságosan mérhetõ enzimes módszert alkalmaztunk. A vizsgálati minták mérésére kísérleti úton egy megfelelõ összetételû glükózoxidáz, peroxidáz, orto-dianizidin reagensoldatot állítottunk elõ. A színintenzitás változását spektrofotométerrel határoztuk meg. A módszer pontosságát Boehringer teszt segítségével ellenõriztük. A glükóztartalom mérési módszerrel meghatároztuk a különbözõ kísérleti minták glükóamiláz-, transzglükozidáz-aktvitását. Nyomon követtük a keményítõtartalmú kísérleti fóliák lebontását, valamint a kukoricakeményítõ cukrosítási folyamatát. Ezenkívül az élelmiszeripari enzimek elõállítását szolgáló géntechnikai kísérletek mintáit vizsgáltuk. A reliable enzymatic method was applied to the determination of glucose content. For the measurement of experimental samples a relevant mixture of glucose oxidase, peroxidase and orto-dianisidine reagent solution was composed. The change in colour intensity was determined by spectrophotometry. The precision of the method was controlled by a Boehringer test. By the glucose measurement method, the glucoamylase and trans-glucosidase activity of the different experimental samples were determined. The decomposition of starch-based experimental foils as well as the saccharification process of corn starch were tracked. Samples of genetechnical experiments aiming the preparation of food industrial enzymes were also studied. Zur Bestimmung des Glucosegehaltes wurde eine zuverlässig meßbare enzymatische Methode angewandt. Für die Messung der Prüfmustern wurde auf dem Versuchswege eine Glucoseoxidase - Peroxidase - Orto - Dianizidin - Reagenzlösung hergestellt. Die Änderung der Farbintensität wurde mit Spektrophotometer bestimmt. Die Genauigkeit der Methode wurde mit Hilfe des Boehringer Tests überprüft. Mit der Glucosegehalt - Meßmethode wurde die Glucoamylase- und Trans - Glucosidase - Aktivität von verschiedenen Prüfmustern bestimmt. Der Abbau der stärkehaltigen Versuchsfolien und der Verzuckerungsprozess von Maisstärke wurden verfolgt. Außerdem wurden Prüfmuster von gentechnischen Versuchen untersucht, die zur Herstellung von Enzymen für die Lebensmittelindustrie dienten

Effects of Medium Composition and Process Parameters on the Production of Extracellular Inulinase by Thermomyces lanuginosus

The production of extracellular inulinase by eighteen Thermomyces lanuginosus strains was screened, and strain IMI 140524 was selected for further studies. The effects of various carbon and nitrogen sources on inulinase activity were investigated, and the best ones were found to be Jerusalem artichoke extract and peptone at the optimum fraction of 1.8 and 0.6 %, respectively. Effects of medium composition and fermentation conditions were also determined for the production of extracellular inulinase. The addition of 1 % (by volume) Tween 80 into fermentation medium enhanced the secretion of extracellular inulinase. In bench-scale fermentor, the age and amount of inoculum were also optimized andthey were determined to be 40-hour-old culture and 5.0 % (by volume), respectively. The initial pH of the medium was adjusted to 6.5 and no further pH control was needed. Optimal aeration and agitation were 0.75 L/min and 150 rpm, respectivel