A influência do secretoma de adipócitos e resposta imune no crescimento bacteriano

Obesity is characterized by excessive fat in adipose tissue and continues to be described as a public health problem. In addition, it is associated with the development and worsening of comorbidities such as type II diabetes, cardiovascular diseases, hypertension and metabolic syndrome. Another public health problem focuses on antimicrobial resistance (AMR). Over time, they have been gaining alarming proportions worldwide, due to the ability to acquire new mechanisms of resistance threatening the treatment of infections acquired in the community and in hospitals, resulting in a prolonged illness, disability, and death. The state of obesity entails an imbalance in the production of proinflammatory and anti-inflammatory factors that contributes to infections’ susceptibility. This susceptibility translates into respiratory and skin barrier impairment, obesity-related comorbidities, slower healing and inefficient antimicrobial therapy. Bacteria’s alarming ability to gain resistance has raised concerning obstacles in antimicrobial therapies in patients with chronic inflammation, such as obese individuals. This study aimed to understand the influence of an inflammatory obesity-mimicking environment in the growth of Staphylococcus aureus, Mycobacterium smegmatis, Klebsiella pneumoniae, Escherichia coli and Pseudomonas aeruginosa strains with different antibiotic resistance. For this, the cell lines Raw 264.7 (macrophages) and 3T3-L1 (adipocytes) were collected to serve as a conditioned medium for bacterial growth. All strains were exposed to a variety of conditioned media (DMEM, DMEM enriched with 10% and 50% adipocyte secretome (SA), macrophage secretome (SM) and macrophage secretome enriched with 10% and 50% SA). Results showed Methicillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA) and Klebsiella pneumoniae Carbapenem/ESBL are of greater risk factor in a SM environment. On the other hand, S.aureus, M. smegmatis, wild-type K.pneumoniae, K.pneumoniae ESBL, K.pneumoniae Carbapenem, E. coli and P. aeruginosa only seems to depend more on SA environment. Additionally, bacterial strains with AmpC resistance showed high risk to bacterial growth in environment enriched with SA. Overall, this study demonstrates that the kind of resistance and the environment in which each bacteria strain is present can contribute to the state of chronic inflammation.A obesidade é caraterizada pelo excesso de gordura no tecido adiposo, continuando a ser descrita como um problema à saúde pública. Além disso, está associada ao desenvolvimento e agravamento de comorbidades como diabetes tipo II, doenças cardiovasculares, hipertensão e síndrome metabólica. Outro problema à saúde pública incide nas resistências antimicrobianas (AMR). Ao longo do tempo, têm vindo a ganhar proporções alarmantes à escala Mundial, devido à capacidade de adquirir novos mecanismos de resistência, ameaçando o tratamento de infeções adquiridas na comunidade e nos hospitais, do qual resulta numa doença prolongada, incapacidade e morte. O estado de obesidade acarreta um desequilíbrio na produção de fatores pró-inflamatórios e anti-inflamatórios que contribuem para a suscetibilidade das infeções. Essa suscetibilidade traduz-se em comprometimento respiratório e da barreira cutânea, comorbidades relacionadas à obesidade, cicatrização mais lenta e terapia antimicrobiana ineficiente. A capacidade alarmante das bactérias em adquirir resistência tem levantado obstáculos à terapia antimicrobiana em pacientes com inflamação crônica, como indivíduos obesos. Este estudo teve como objetivo compreender a influência de um ambiente inflamatório que mimetiza a obesidade, no crescimento de Staphylococcus aureus, Mycobacterium smegmatis, Klebsiella pneumoniae, Escherichia coli e Pseudomonas aeruginosa com diferentes resistências a antibióticos. Para tal, as linhagens celulares Raw 264.7 (macrófagos) e 3T3-L1 (adipócitos) foram escolhidas para servir como meio condicionado para o crescimento bacteriano. As estirpes bacterianas foram expostas a uma variedade de meios condicionados (DMEM, DMEM enriquecido com 10% e 50% de secretoma de adipócitos (SA), secretoma de macrófagos (SM) e secretoma de macrófagos enriquecido com 10% e 50% de SA). Os resultados mostraram que S.aureus com resistência a meticilina (MRSA) e K. pneumoniae Carbapenem/ESBL contribuem para um maior fator de risco num ambiente de SM. Por outro lado, S.aureus, M. smegmatis, K. pneumoniae “estirpe-selvagem”, K. pneumoniae ESBL, K. pneumoniae Carbapenem, E. coli e P. aeruginosa parecem depender mais de um ambiente enriquecido em SA. Ainda, as estirpes bacterianas com resistência a AmpC apresentam crescimento bacteriano elevado num ambiente enriquecido em SA. No geral, os resultados mostraram que a estirpe e painel de resistência, podem contribuir para o estado de inflamação crónico de forma diferenciada.Mestrado em Microbiologi

Planting tradition and harvesting innovation : a case study of how a Portuguese family winery achieved international reputation

Although small family-owned businesses populate the wine industry, they encounter greater barriers when trying to promote their wines, especially at an international level. The purpose of this thesis is to investigate how small wineries can stand out from competitors. The level of rivalry in the market is lessened when producers can differentiate their products. While an innovation strategy is crucial for wine producers to compete, research on how they approach such practices is scarce. This work seeks to complement the existing literature by illustrating the analysis with a case study of Ervideira, a Portuguese family-run winery. The company’s international success relies on the production of high-end wines and innovation both in the production methods applied and the services provided. The company has invested in promoting the wines through direct contact with clients via the wine club, its stores, and its website, as well as attempting to attract potential customers through wine tourism and trade fair participation. I conclude that small wineries can differentiate themselves in the market by managing innovation and quality while nurturing tradition and adjusting to global consumer trends.Embora os pequenos produtores familiares sejam comuns no setor vinícola, enfrentam maiores obstáculos ao tentar promover os seus vinhos, especialmente ao nível internacional. O objetivo desta tese é investigar como é que eles se podem demarcar dos seus concorrentes. O nível de competitividade no mercado é minorado quando os produtores conseguem diferenciar os seus produtos. Embora uma estratégia assente na inovação seja crucial para os produtores de vinho competirem no mercado, a pesquisa existente explora pouco sobre como eles abordam estas práticas. Este trabalho procura complementar a literatura existente ao ilustrar a análise com um estudo de caso da Ervideira, uma empresa vitivinícola portuguesa. O sucesso internacional da empresa passa pela produção de vinhos de alta qualidade e pela inovação tanto nos métodos de produção aplicados como nos serviços prestados. A empresa tem apostado na promoção dos vinhos através do contacto direto com os clientes por meio do clube de vinhos, das suas lojas e do seu website, bem como na procura de potenciais clientes através do enoturismo e da participação em feiras. Concluo que os pequenos produtores de vinhos podem diferenciar-se no mercado aliando inovação à qualidade, enquanto cultivam a tradição e se adaptam às tendências de consumo globais

an experimental approach

The job market works under asymmetric information, making it hard for firms to know the real capabilities of the workers they hire. Workers can help overcome this asymmetry by signaling their productivity with investments in education. However, it’s fair to assume that workers sometimes miscalculate their own abilities, which disturbs the functioning of the signal. This study intends to analyze the effects of overconfidence amongst workers on the various parameters of the game by conducting an experiment. The results from the experiment suggest that the profits of both workers and firms will be greatly impaired as a consequence

Melanocortin signalling in fat cells

[resumo]Melanocortin peptides and their receptors have long been known to affect the central control of food intake and body weight, thus playing a critical role in the development of obesity [1]. The melanocortin 5 receptor (MC5R) has been directly linked with lipid metabolism in peripheral tissues: MC5R deletion in mouse generates defects in sebaceous gland secretion [1] and MC5R stimulation increases fatty acid oxidation in muscle cells [2]. In this study, we tackled the role of MC5R in lipolysis and adipocyte function using the well established model of differentiated mouse 3T3-L1 adipocytes. Cell-signalling based experiments were performed after adipocyte treatment with alpha-melanocyte-stimulating hormone (alpha-MSH) and compared with the MC5R specific activation previously described in HEK293 [3] and HeLa cells stably transfected with MC5R-GFP. Adipocyte response to alpha-MSH resulted in a loss of cytoplasmatic lipid content and release of glycerol into the cell medium by an ERK1/2 dependent mechanism. Moreover, downstream of ERK1/2, alpha-MSH induces p90RSK and CREB phosphorylation and c-Fos expression. The correlation between alpha-MSH action in 3T3-L1 adipocytes and the specific signalling pathways underlying MC5R activation, strongly suggests that lipolysis is mediated by this receptor.[1] Cone RD (2006) Endocr Rev 27(7):736:49[2] An et al (2007) J Biol Chem 282(5):2862-70[3] Rodrigues et al (2009) Mol Cell Endocrinol 303:74-8

Structural insights on melanocortin 5 receptor targeting to cell surface

[resumo

Unravelling the Melanocortin 5 Receptor signalling pathway.

[resumo][abstract

A Casa do Futuro, hoje. [Re]visão contemporânea

A tensão entre dois tempos distintos como o passado e o futuro é algo complicado de entender e percecionar. Esse tempo intermédio que chamamos de presente é efémero e muito acelerado. Quando damos por nós a pensar no que se passa no momento, já este é passado e o tempo em que vivemos faz já parte do futuro. Com isto, em que momento este futuro e passado podem viver em sintonia, numa simbiose de tempos que faz esta tensão entre ambos ser equilibrada? É necessário entender que influência tem um no outro. Claramente, o passado tem uma grande influência no futuro e, no caso da arquitetura e na sua evolução ao longo dos anos, o passado está sempre presente, podendo dizer-se que este está na base do futuro. "A Tradição é um desafio à inovação".1 No caso concreto da Casa, como dispositivo do dia a dia do ser humano, a sua mudança é inevitável, acompanhando os novos hábitos que criamos. É, deste modo, necessário entender o que vai ser este futuro, próximo ou não, e que alterações tem de sofrer a casa, na sua disposição e composição entre espaços interiores e exteriores, e de que forma, mesmo tendo por base uma estrutura antiga, podemos chamá-la Casa do Futuro. Assim, e pegando no caso concreto de uma casa de família, pretende-se abordá-la e conseguir chegar a esse limite entre os dois tempos, para que ambos vivam em harmonia e se adaptem às necessidades pretendidas, passando, primeiramente, por uma fase de caraterização da casa e, posteriormente, a um projeto concreto de intervenção. Mas como nos podemos agarrar a essa estrutura antiga da Casa e transpô-la para o futuro? O que é uma Casa do Futuro? Este pensamento traz outras questões essenciais que são: Quem habita a casa? Qual o modo de vida de quem a habita? E que casa é essa na qual queremos intervir? Perceber um modo de intervenção invoca a importância que o tempo tem e o que está entre o que permanece e o que se transforma, uma nova dimensão entre as Coisas e as Pessoas. Cria-se, assim, uma tensão, um jogo de contrários, de opostos e roturas, em que é necessário encontrar no que está, o que precisa de ser feito. É preciso 'tratar com respeito, mas sem receio'. Para além disto, a influência dos arquitetos Alison e Peter Smithson é preponderante para o desenvolvimento do projeto, já que refletem sobre este assunto no Movimento Moderno, através do seu projeto Casa do Futuro.The tension between two different times such as the past and the future is rather complicated to realize and to perceive. That split time, which we call the present is ephemeral and very fast. Moreover, before we know it, the present is a fleeting moment, it is in the past already and the time we live in is within the future. Herewith, how can this future and this past be tuned, in a symbiosis of times that balances this tension? It is necessary to grasp how they influence each other. Clearly, the past has a great influence in the future; regarding architecture and how it has evolved throughout the years, the past is always present, and it is true to say that this is a basis for the future. "Tradition is a challenge to innovation".2 In the specific case of the House, as a day-by-day mechanism of the human being, its change is inevitable, as it follows the new ways we create. It is, therefore, necessary to understand what this future will be (near future or not) and what changes the house must endure, as far as indoor and outdoor spaces are made up and displayed, and in what way, even after being based in an old structure, it can be referred to as House of the Future. Accordingly, and taking the specific case of a family house, the objective is to approach it and to be able to reach that split time between those two times, so that both can adapt to the intended needs, the first of the steps being the profiling of the house and, subsequently, the developing of a concrete intervention project. However, how can one hold on to that House's old structure and transpose it to the future? What is a House of the Future? This notion raises other important issues, namely: Who inhabits the house? What is the lifestyle of its inhabitants? And what is that house on which we want to take action? Understanding a means of intervention refers to the importance of time and what remains between what continues and what is transformed, a new dimension between Things and People. It makes for a tension, a game of contraries, of opposites and ruptures, where it is necessary to find out what needs to be done within that that exists already. It is necessary to 'treat with respect, but with no fear'. Furthermore, the influence by architects Alison and Peter Smithson takes a leading role as regards the project's development since they address this matter in the Modern Movement, in their project House of the Future