High-level transgene expression by homologous recombination-mediated gene transfer

Gene transfer and expression in eukaryotes is often limited by a number of stably maintained gene copies and by epigenetic silencing effects. Silencing may be limited by the use of epigenetic regulatory sequences such as matrix attachment regions (MAR). Here, we show that successive transfections of MAR-containing vectors allow a synergistic increase of transgene expression. This finding is partly explained by an increased entry into the cell nuclei and genomic integration of the DNA, an effect that requires both the MAR element and iterative transfections. Fluorescence in situ hybridization analysis often showed single integration events, indicating that DNAs introduced in successive transfections could recombine. High expression was also linked to the cell division cycle, so that nuclear transport of the DNA occurs when homologous recombination is most active. Use of cells deficient in either non-homologous end-joining or homologous recombination suggested that efficient integration and expression may require homologous recombination-based genomic integration of MAR-containing plasmids and the lack of epigenetic silencing events associated with tandem gene copies. We conclude that MAR elements may promote homologous recombination, and that cells and vectors can be engineered to take advantage of this property to mediate highly efficient gene transfer and expressio

High-level transgene expression by homologous recombination-mediated gene transfer

Gene transfer and expression in eukaryotes is often limited by a number of stably maintained gene copies and by epigenetic silencing effects. Silencing may be limited by the use of epigenetic regulatory sequences such as matrix attachment regions (MAR). Here, we show that successive transfections of MAR-containing vectors allow a synergistic increase of transgene expression. This finding is partly explained by an increased entry into the cell nuclei and genomic integration of the DNA, an effect that requires both the MAR element and iterative transfections. Fluorescence in situ hybridization analysis often showed single integration events, indicating that DNAs introduced in successive transfections could recombine. High expression was also linked to the cell division cycle, so that nuclear transport of the DNA occurs when homologous recombination is most active. Use of cells deficient in either non-homologous end-joining or homologous recombination suggested that efficient integration and expression may require homologous recombination-based genomic integration of MAR-containing plasmids and the lack of epigenetic silencing events associated with tandem gene copies. We conclude that MAR elements may promote homologous recombination, and that cells and vectors can be engineered to take advantage of this property to mediate highly efficient gene transfer and expression

Un phénomène de grammaticalisation en arabe moderne : le passif périphrastique

Cet article prolonge "Passif grammatical, passif périphrastique et catégorie d'auxiliaire en arabe classique moderne”, paru dans Arabica 37-2 : 97-110, 1990Cet article passe en revue la littérature sur la question du passif périphrastique en arabe standard moderne, teste les hypothèses proposées par Larcher et Girod (1990) sur un corpus de presse égyptien et examine ce passif sous le rapport des relations entre catégories de diathèse et d'aspec

Passif grammatical, passif périphrastique et catégorie d'auxiliaire en arabe classique moderne

International audienceCet article propose d'appeler "passif périphrastique" la structure composée du verbe tamma (parfois aussi jarâ) et du nom d'action d'un verbe, que l'on rencontre fréquemment dans la presse arabe et qui a valeur de passif. Il propose également d'y voir un procès d'auxiliation au sens de Benveniste. Il propose enfin d'en lier l'apparition à la scriptio defectiva de l'arabe, qui ne permet pas de distinguer immédiatement actif et passif des verbes "sains"

Un phénomène de grammaticalisation en arabe moderne : le passif périphrastique

Cet article prolonge "Passif grammatical, passif périphrastique et catégorie d'auxiliaire en arabe classique moderne”, paru dans Arabica 37-2 : 97-110, 1990Cet article passe en revue la littérature sur la question du passif périphrastique en arabe standard moderne, teste les hypothèses proposées par Larcher et Girod (1990) sur un corpus de presse égyptien et examine ce passif sous le rapport des relations entre catégories de diathèse et d'aspec

Faits d'évolution récents en arabe moderne à travers un corpus de presse égyptien

AIX-MARSEILLE1-BU Lettres (130012101) / SudocSudocFranceF

Passif grammatical, passif périphrastique et catégorie d'auxiliaire en arabe classique moderne

International audienceCet article propose d'appeler "passif périphrastique" la structure composée du verbe tamma (parfois aussi jarâ) et du nom d'action d'un verbe, que l'on rencontre fréquemment dans la presse arabe et qui a valeur de passif. Il propose également d'y voir un procès d'auxiliation au sens de Benveniste. Il propose enfin d'en lier l'apparition à la scriptio defectiva de l'arabe, qui ne permet pas de distinguer immédiatement actif et passif des verbes "sains"