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Commuting Time and Labour Supply: A Causal Effect?
We analyze the causal effect of the length of the worker’s commute on worker's productivity, by examining whether commuting time has any effect on worker's labour market supply. Using the Spanish Time Use Survey 2002-03, our GMM/IV estimation yields a positive causal impact of commuting time on the time devoted to the labour market, with one hour of commuting increasing the time devoted to the labour market by 35 minutes in a working day. Our results shed light on the relationship between commuting and workers behaviour, since daily labour supply should be considered in theoretical models to provide a comprehensive view of commuter behaviour.commuting, labour supply, productivity, causality, Time Use Survey
Development and validation of a new nephrotoxicity model mimicking cell physiology microenvironment
Los riñones son órganos muy eficientes que llevan a cabo múltiples funciones en el organismo. Una de las principales funciones que realizan es la eliminación de productos de desecho y exceso de fluido del cuerpo a través de la orina. La regulación de las sales y el contenido de ácido, son funciones desempeñados por estos órganos. En el riñón también tiene lugar la producción de diferentes hormonas. El riñón está constituido por las nefronas, que son las unidades estructurales y funcionales de estos órganos. Dentro de las nefronas podemos diferenciar las siguientes estructuras: El glomérulo, que es la primera parte de la nefrona donde el plasma es filtrado desde la sangre. Inmediatamente después, encontramos el túbulo, cuya estructura es semejante a un tubo largo y estrecho, donde el fluido filtrado desde la sangre es procesado y convertido en orina. A lo largo del túbulo, encontramos los siguientes segmentos: túbulo proximal, asa de Henle, túbulo distal y tubo colector.En esta Tesis Doctoral, nos centraremos en el estudio del segmento formado por el túbulo proximal (TP) [1]. La principal función desempeñada por el TP es la reabsorción y secreción de metabolitos y para realizar estas funciones las células del TP cuentan con un gran contenido de diferentes transportadores de membrana [2-5]. El túbulo proximal está formado por células epiteliales, las cuales están polarizadas, característica que nos permite distinguir entre dos zonas bien diferenciadas, la zona apical y la zona basolateral. Las células del TP contienen una estructura denominada borde en cepillo que aumenta el área de superficie de las células y este incremento es útil durante los procesos de reabsorción [6]. Conviene destacar que las células renales están continuamente expuestas al ultra filtrado del plasma y que el flujo luminal genera una fuerza de cizallamiento (shear stress, SS) sobre la superficie apical de las células. Las células del TP pueden detectar estas SS a través del cilio primario o de las microvellosidades del borde en cepillo. La señalización intracelular desencadenada por la SS luminal es un estímulo fisiológico clave para las células tubulares renales [7]. A pesar de la relevancia del flujo luminal en la nefrona, así como en el desarrollo de enfermedades, hay relativamente pocos estudios in vitro que incluyan este estímulo. El flujo luminal debería ser un requisito imprescindible para la generación de un modelo de función tubular in vitro, fisiológicamente más similar al que encontramos in vivo.Las células del TP in vivo presentan unas características dinámicas diferentes en ambos compartimentos. Cuando se trabaja in vitro, se alteran esas características dinámicas ya que las células son expuestas a la inmovilización de su compartimento basolateral, en contacto con la superficie donde las células crecen y en el lado apical se renueva el medio cada 2-4 días, eliminando el efecto que el SS ejerce en ambos compartimentos. La ausencia del flujo luminal, así como la alteración de las características dinámicas de las células en ambos compartimentos, son dos de los problemas que encontramos en las condiciones de cultivo convencional 2D, eliminando la posibilidad de reproducir la función tubular renal, la cual consiste en concentrar o diluir los solutos en el fluido luminal. Por tanto, es evidente que las técnicas de cultivo convencionales 2D, a pesar del gran conocimiento que nos han aportado sobre la función celular y molecular, no son capaces de reproducir el ambiente fisiológico de las células del TP. Esto a la vez, podría explicar la dificultad en la traslación de los resultados in vitro a aplicaciones in vivo [8].En los últimos años y con el objetivo de aproximarse a la creación in vitro de microambientes fisiológicamente más similares a los encontrados in vivo, han surgido colaboraciones entre las áreas de Ingeniería y las áreas de Biología [9] interesadas en el desarrollo de dispositivos microfluídicos [10] para su uso en estudios de epitelio renal. Los dispositivos mencionados anteriormente, son estructuras situadas en la escala micro y nano, que han posibilitado el desarrollo de los microchips, dispositivos miniaturizados capaces de imitar sistemas naturales de forma precisa si se acoplan a sistemas continuos de perfusión en los canales que componen estos dispositivos, los cuales son habitados por las células sembradas en ellos. Estos dispositivos ofrecen ventajas como la reproducción de la arquitectura multicelular o de la interfaz tejido-tejido, la recreación del microambiente físico-químico y la perfusión vascular, originando niveles de tejidos funcionales, que no pueden obtenerse con los métodos de cultivo 2D o 3D. Otra ventaja, es que al trabajar en escala micro-nanométrica, el ahorro de las soluciones necesarias paras el mantenimiento de las células, o para la ejecución de experimentos, se ve drásticamente reducido. A nivel experimental, este tipo de dispositivos presentan gran potencial en el área de la organogénesis y la fisiología y, en el contexto del descubrimiento y desarrollo de nuevos fármacos, tiene especial valor en el estudio de los mecanismos de acción, toxicidad e identificación de biomarcadores.A partir de la información expuesta anteriormente, se detectó un problema y se propuso una hipótesis: las herramientas de cultivo convencionales no recrean con precisión el ambiente fisiológico donde crecen las células y por tanto, esto puede originar la pérdida de reproducibilidad de la respuesta celular contra agentes tóxicos y mecanismos de reparación unidos a daño renal. Con el objetivo de aceptar o rechazar la hipótesis propuesta se propone la creación de un modelo de nefrotoxicidad, usando dispositivos de cultivo biomiméticos que tendrán acoplados las herramientas necesarias para poder usar flujo, y de esta manera reproducirán mejor el microambiente de las células del TP.La elección del TP para desarrollar esta Tesis, se basa en que en este segmento de la nefrona se procesa la mayoría de tóxicos y fármacos y tiene lugar el daño agudo y crónico renal. Por tanto, desde el punto de vista clínico y con el objetivo de estudiar nefrotoxicidad, el TP representa un segmento cuyos estudios pueden aportar mucho conocimiento. Con el objetivo de crear un modelo de nefrotoxicidad, el uso de cultivos primarios de células del TP humanas (hPTPC), daría lugar a una fácil traslación de los resultados a la clínica.La molécula elegida para la creación del modelo de nefrotoxicidad es el cisplatino, un compuesto antitumoral usado en el tratamiento contra diversos tipos de cánceres, entre los que destacan pulmón, testículo y cérvix. Uno de los principales efectos secundarios de este compuesto es la nefrotoxicidad [11] en el TP. Los mecanismos de acción del cisplatino incluyen su paso al interior de las células del TP mediante los transportadores basolaterales OCT2 y CTR-1, así como la enzima GGT1, encargada de la conversión del cisplatino en una molécula mucho más reactiva tras entrar en contacto con esta enzima [12]. A partir de las hPTPC y del modelo de nefrotoxicidad que se desarrolló, se estudió el efecto de la estimulación mecánica proporcionado por el flujo, sobre la sensibilidad al cisplatino, permitiendo recrear un ambiente más semejante al que encontramos in vivo. Los resultados obtenidos a lo largo de esta tesis nos sugieren que:1. El protocolo de aislamiento empleado para la obtención de células primarias de TP procedentes de nefrectomías humanas, hPTPC, y la posterior caracterización de las células, nos permitió obtener un cultivo formado mayoritariamente por células de TP que expresaban los principales marcadores de este segmento de la nefrona.2. El uso combinado del ensayo de actividad enzimática de GGT1 y el ensayo de viabilidad, nos permitió distinguir los efectos del cisplatino. La combinación de estos ensayos se validó como una herramienta útil a la hora de monitorizar la función celular y viabilidad celular.3. El modelo de nefrotoxicidad empleando cisplatino fue consistente para su uso en células creciendo en dispositivos fluídicos.4. El cultivo de hPTPC aislado y caracterizado durante esta tesis, no mostró diferencia en la sensibilidad al modelo de cisplatino en dispositivos fluídicos en presencia de la estimulación mecánica proporcionada por el flujo y comparado con células en condiciones estáticas.The kidneys are very efficient organs that perform multiple functions in the body. One of the main functions performed by the kidneys is the elimination of waste products and excess fluid from the body through the urine. The regulation of body salts and acid content are functions played by these organs. In the kidney also takes place the production of different hormones. The kidney is made up of nephrons, which are the structural and functional units of these organs. The nephrons are composed by the following structures: The glomerulus, which is the first part of the nephron, where the plasma is filtered from the blood. Immediately afterward, we find the tubule, which structure is like a long narrow tube, where the filtered fluid from the blood is processed into the urine. The tubule is divided into different segments: proximal tubule, loop of Henle, distal tubule and collecting tube. In this Thesis, we focused on the study of the segment formed by the proximal tubule (PT). The main role played by the PT is the reabsorption and secretion of metabolites and to perform these functions, PT cells have a high content of different membrane transporters. The PT is formed by epithelial cells, which are polarized, a feature that allows us to distinguish between two distinct areas, the apical zone, and the basolateral zone. PT cells contain a structure called brush border that increases the surface area of the cells, and this increase is useful during the reabsorption processes. It should be noted that renal cells are continually exposed to ultrafiltration of the plasma and that the luminal flux generates a shear stress (SS) on the apical surface of the cells. PT cells can detect this SS through the primary cilium or the brush border. The intracellular signaling triggered by the luminal SS is a physiological stimulus essential for renal tubular cells. Despite the relevance of luminal flow in the nephron, as well as in the development of diseases, there are relatively few in vitro studies including this stimulus. Luminal flow should be a prerequisite for the generation of an in vitro physiological model to study tubular function, similar to what is found in in vivo environment. PT cells in vivo exhibit different dynamic characteristics in both compartments. When we are working with these cells in vitro, these dynamic characteristics are altered since the cells are exposed to the immobilization of their basolateral compartment, in contact with the surface where the cells grow, and on the apical side, the medium is renewed every 2-4 days, eliminating the effect that the SS exerts on both compartments. The absence of luminal flow, as well as the alteration of the dynamic characteristics of the cells in both compartments, are two of the problems found in conventional 2D culture conditions, eliminating the possibility of reproducing renal tubular function, which consists of concentrating or diluting the solutes present in the luminal fluid. Therefore, it is evident that conventional 2D culture techniques, despite the high knowledge that they have provided us on the cellular and molecular function, are not able to reproduce the physiological environment of the PT cells. This could explain the difficulty we have in translating in vitro results into in vivo applications. In the last years, with the aim of creating in vitro microenvironments physiologically similar to those found in vivo, we observe an increase in the number of collaborations between the areas of Engineering and Biology interested in the development of microfluidic devices for use in renal epithelial studies. The devices mentioned above are structures in the micro and nano scale, which have enabled the development of microchips, miniaturized devices capable of accurately mimicking natural systems since they contain continuous infusion systems in the channels that make up these devices, covered by the cells seeded in them. These devices offer advantages such as reproduction of the multicellular architecture or the tissue-tissue interface, the recreation of the physicochemical microenvironment and the vascular perfusion, resulting in levels of functional tissues, which cannot be obtained with 2D or 3D culture methods. Another advantage is the size of these devices, in the micro-nanometric scale. This supposes to save solutions for the maintenance of the cells, or for the execution of experiments because their volume is drastically reduced. At the experimental level, this type of device has great potential in the area of organogenesis and physiology and, in the context of discovery and development of new drugs, it has a special value in the study of the mechanisms of action, toxicity, and identification of biomarkers. From the above information, a problem was detected and a hypothesis was proposed: the conventional culture tools do not accurately recreate the physiological environment where the cells grow and therefore, this can cause the lack of reproducibility of cellular response to toxic agents and repair mechanisms linked to renal damage. With the objective of accepting or rejecting the proposed hypothesis, it was proposed to create a model of nephrotoxicity using biomimetic culture devices that will have the necessary tools coupled to be able to use flow. This will help to reproduce the microenvironment of PT cells more accurately. The choice of PT to develop this Thesis is based on the fact that in this segment of the nephron the majority of toxins and drugs are processed and here is where acute and chronic renal damage take places. Therefore, from the clinical point of view and with the aim of studying nephrotoxicity, PT represents the segment of choice. In order to create a model of nephrotoxicity, the use of human primary cultures of PT cells (hPTPC), would lead to an easy translation of the results to the clinic. The molecule chosen to create the nephrotoxicity model is cisplatin, an antitumor compound used in the treatment of various types of cancers, including lung, testis and cervix. However, one of the major side effects of this compound is nephrotoxicity in PT. The mechanism of action of cisplatin includes the entrance of the molecule to the hPTPC through the basolateral transporters OCT2 and CTR-1, as well as the enzyme GGT1, responsible for the conversion of cisplatin into a much more reactive molecule after entering in contact with this enzyme. From the hPTPC and the nephrotoxicity model developed, we proposed to study the effect of mechanical stimulation on cisplatin sensitivity produced under flow. This allowed us to recreate a more physiological environment, closer to what we find in vivo. The results obtained along this Doctoral Thesis suggest: 1. The isolation protocol employed to obtain primary PT cells from human nephrectomies, hPTPC, and the posterior cell characterization, allowed us to obtain a highly enriched culture of PT cells, expressing the main PT markers. 2. Combined use of GGT1 activity and cell viability assays allowed us to distinguish different cisplatin effects and were validated as useful assays to monitor cell function and cellular status. 3. The cisplatin nephrotoxicity model was consistent and amenable for its use on cells grown in microfluidic devices. 4. The hPTPC isolated and characterized along this Thesis did not present any difference in the sensitivity to cisplatin model in fluidic devices in the presence of the mechanical stimulation created by flow and compared with cells growing in static condition.<br /
Advances in Subspace-based Solutions for Diarization in the Broadcast Domain
La motivación de esta tesis es la necesidad de soluciones robustas al problema de diarización. Estas técnicas de diarización deben proporcionar valor añadido a la creciente cantidad disponible de datos multimedia mediante la precisa discriminación de los locutores presentes en la señal de audio. Desafortunadamente, hasta tiempos recientes este tipo de tecnologías solamente era viable en condiciones restringidas, quedando por tanto lejos de una solución general. Las razones detrás de las limitadas prestaciones de los sistemas de diarización son múltiples. La primera causa a tener en cuenta es la alta complejidad de la producción de la voz humana, en particular acerca de los procesos fisiológicos necesarios para incluir las características discriminativas de locutor en la señal de voz. Esta complejidad hace del proceso inverso, la estimación de dichas características a partir del audio, una tarea ineficiente por medio de las técnicas actuales del estado del arte. Consecuentemente, en su lugar deberán tenerse en cuenta aproximaciones. Los esfuerzos en la tarea de modelado han proporcionado modelos cada vez más elaborados, aunque no buscando la explicación última de naturaleza fisiológica de la señal de voz. En su lugar estos modelos aprenden relaciones entre la señales acústicas a partir de un gran conjunto de datos de entrenamiento. El desarrollo de modelos aproximados genera a su vez una segunda razón, la variabilidad de dominio. Debido al uso de relaciones aprendidas a partir de un conjunto de entrenamiento concreto, cualquier cambio de dominio que modifique las condiciones acústicas con respecto a los datos de entrenamiento condiciona las relaciones asumidas, pudiendo causar fallos consistentes en los sistemas.Nuestra contribución a las tecnologías de diarización se ha centrado en el entorno de radiodifusión. Este dominio es actualmente un entorno todavía complejo para los sistemas de diarización donde ninguna simplificación de la tarea puede ser tenida en cuenta. Por tanto, se deberá desarrollar un modelado eficiente del audio para extraer la información de locutor y como inferir el etiquetado correspondiente. Además, la presencia de múltiples condiciones acústicas debido a la existencia de diferentes programas y/o géneros en el domino requiere el desarrollo de técnicas capaces de adaptar el conocimiento adquirido en un determinado escenario donde la información está disponible a aquellos entornos donde dicha información es limitada o sencillamente no disponible.Para este propósito el trabajo desarrollado a lo largo de la tesis se ha centrado en tres subtareas: caracterización de locutor, agrupamiento y adaptación de modelos. La primera subtarea busca el modelado de un fragmento de audio para obtener representaciones precisas de los locutores involucrados, poniendo de manifiesto sus propiedades discriminativas. En este área se ha llevado a cabo un estudio acerca de las actuales estrategias de modelado, especialmente atendiendo a las limitaciones de las representaciones extraídas y poniendo de manifiesto el tipo de errores que pueden generar. Además, se han propuesto alternativas basadas en redes neuronales haciendo uso del conocimiento adquirido. La segunda tarea es el agrupamiento, encargado de desarrollar estrategias que busquen el etiquetado óptimo de los locutores. La investigación desarrollada durante esta tesis ha propuesto nuevas estrategias para estimar el mejor reparto de locutores basadas en técnicas de subespacios, especialmente PLDA. Finalmente, la tarea de adaptación de modelos busca transferir el conocimiento obtenido de un conjunto de entrenamiento a dominios alternativos donde no hay datos para extraerlo. Para este propósito los esfuerzos se han centrado en la extracción no supervisada de información de locutor del propio audio a diarizar, sinedo posteriormente usada en la adaptación de los modelos involucrados.<br /
Analysis of Two Polyhydroxyalkanoate Synthases in Bradyrhizobium japonicum USDA 110
Bradyrhizobium japonicum USDA 110 has five polyhydroxyalkanoate (PHA) synthases (PhaC) annotated in its genome: bll4360 (phaC1), bll6073 (phaC2), blr3732 (phaC3), blr2885 (phaC4), and bll4548 (phaC5). All these proteins possess the catalytic triad and conserved amino acid residues of polyester synthases and are distributed into four different PhaC classes. We obtained mutants in each of these paralogs and analyzed phaC gene expression and PHA production in liquid cultures. Despite the genetic redundancy, only phaC1 and phaC2 were expressed at significant rates, while PHA accumulation in stationary-phase cultures was impaired only in the phaC1 mutant. Meanwhile, the phaC2 mutant produced more PHA than the wild type under this condition, and surprisingly, the phaC3 transcript increased in the phaC2 background. A double mutant, the phaC2 phaC3 mutant, consistently accumulated less PHA than the phaC2 mutant. PHA accumulation in nodule bacteroids followed a pattern similar to that seen in liquid cultures, being prevented in the phaC1 mutant and increased in the phaC2 mutant in relation to the level in the wild type. Therefore, we used these mutants, together with a phaC1 phaC2 double mutant, to study the B. japonicum PHA requirements for survival, competition for nodulation, and plant growth promotion. All mutants, as well as the wild type, survived for 60 days in a carbon-free medium, regardless of their initial PHA contents. When competing for nodulation against the wild type in a 1:1 proportion, the phaC1 and phaC1 phaC2 mutants occupied only 13 to 15% of the nodules, while the phaC2 mutant occupied 81%, suggesting that the PHA polymer is required for successful competitiveness. However, the bacteroid content of PHA did not affect the shoot dry weight accumulation.Fil: Quelas, Juan Ignacio. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - La Plata. Instituto de Biotecnología y Biología Molecular. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Exactas. Instituto de Biotecnología y Biología Molecular; ArgentinaFil: Mongiardini, Elias Javier. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - La Plata. Instituto de Biotecnología y Biología Molecular. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Exactas. Instituto de Biotecnología y Biología Molecular; ArgentinaFil: Pérez Giménez, Julieta. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - La Plata. Instituto de Biotecnología y Biología Molecular. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Exactas. Instituto de Biotecnología y Biología Molecular; ArgentinaFil: Parisi, Gustavo Daniel. Universidad Nacional de Quilmes; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Lodeiro, Anibal. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - La Plata. Instituto de Biotecnología y Biología Molecular. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Exactas. Instituto de Biotecnología y Biología Molecular; Argentin
Health inequality and the uses of time for workers in Europe: policy implications
This paper analyses the relationship between health inequality and the time allocation decisions of workers in six European countries, deriving some important policy implications in the context of income tax systems, regulation of working conditions, and taxes on leisure activities. Using the Multinational Time Use Study, we find that a better perception of own health is associated with more time devoted to market work activities in all six countries and with less time devoted to housework activities for both men and women. However, the evidence for the associations between health and leisure is mixed. This study represents a first step in understanding cross-country differences in the relationship between health status and time devoted to a range of activities for workers, in contrast with other analyses that have mainly focused only on market work. A better understanding of these cross-country differences may help to identify the effects of public policy on inequalities in the uses of time
Green commuting and gasoline taxes in the United States
This paper analyzes how gasoline tax rates are related to the time workers in the United States spend commuting by private car, public transport, or with other physical modes of transport. Our identification strategy relies on both inter-state differences and time variations in gasoline taxes. Using the American Time Use Surveys for the years 2003–2015, we find that higher gasoline tax rates are related to less time spent in commuting. Furthermore, higher gasoline taxes are related to less commuting by private car, and more commuting by public transport and/or a physical mode of transport (walking or cycling). Our results highlight the importance of gasoline taxes in the consumption of energy for personal transport, as higher gasoline taxes are related to a greater use of “green” modes of transport, showing that fuel taxes are important for good environmental management
Efecto biológico de la FSH recombinante de codorniz común en la inducción del ciclo ovárico en aves
La reproducción ex situ es una de las medidas reconocidas por la comunidad científica y conservacionista para la conservación de especies amenazadas y su reintroducción en el medio natural. Sin embargo, la reproducción en cautividad de especies de aves amenazadas fracasa con frecuencia debido a la ausencia de estímulos ambientales asociada a la vida en cautividad. Esta circunstancia impide el desarrollo de los ciclos reproductivos fisiológicos en condiciones naturales y, por tanto, la obtención de progenie a partir de individuos valiosos desde el punto de vista de la diversidad genética y ecológica. De modo general y, en resumen, los estímulos ambientales, a través de un conjunto de eventos fisiológicos en el sistema nervioso central, desencadenan la liberación hipotalámica de la hormona liberadora de gonadotropinas (GnRH), que inducirá la síntesis y liberación de gonadotropinas (FSH y LH) en las células gonadotropas de la adenohipófisis. Tanto la FSH como la LH inducirán a nivel gonadal los cambios fisiológicos necesarios para la maduración de los gametos.
La posibilidad de inducir farmacológicamente los ciclos reproductivos en aves podría resolver en gran medida las dificultades de la reproducción en cautividad en especies o individuos de alto valor ecológico. Por otra parte, la aportación de conocimiento a la fisiología reproductiva de las aves, y, concretamente, a los mecanismos hormonales que controlan estos procesos, sería relevante para la mejor comprensión tanto de los ciclos reproductivos en la naturaleza como para la aplicación de dicho conocimiento a la producción de aves y huevos para consumo humano.
Los trabajos de esta tesis incluyeron la obtención de una FSH recombinante de codorniz en un sistema de expresión heterólogo de células de mamífero (CHO) y la purificación de LH a partir de adenohipófisis de pavo. Por tanto, el desarrollo de anticuerpos específicos para FSH recombinante de codorniz y FSH y LH hipofisarias de pavo, fue considerado una herramienta imprescindible para el seguimiento de estas hormonas en los procesos de laboratorio: expresión en el medio de cultivo o lisados celulares, purificación, concentración y diálisis. La producción de anticuerpos específicos contra las subunidades beta de FSH y LH permitió la identificación de la FSH recombinante de codorniz (ccrFSH) expresada en células de ovario de hámster chino (CHO) y la identificación y purificación de LH de pavo.
En los ensayos biológicos in vitro realizados, ccrFSH indujo significativamente la secreción de progesterona en células de la granulosa de folículos F5. Sin embargo, no indujo la secreción de progesterona en células de la granulosa de folículos F1. Estos resultados demostraron la especificidad de acción de esta hormona.
En los experimentos in vivo, la administración exclusiva de ccrFSH durante quince días en codornices prepúberes indujo de manera consistente el desarrollo de folículos de diámetro ≥ 1 mm. Sin embargo, este tratamiento no indujo el desarrollo folicular completo. La administración combinada de ccrFSH y LH o eCG sí indujo desarrollo folicular completo, la ovulación y la formación de huevos en codorniz. En estos experimentos se demostró la actividad biológica in vivo de ccrFSH y la necesidad de la actividad conjunta de FSH y LH en la inducción del ciclo en esta especie. La FSH recombinante de codorniz también fue eficaz, administrada junto a eCG, en la inducción del desarrollo y maduración folicular ovárica. La administración de extracto glicoproteico de adenohipófisis de pavo en los individuos con folículos ováricos maduros indujo la ovulación y la puesta de huevos. La inseminación artificial en estos individuos y la incubación de los huevos puestos resultaron en desarrollo embrionario y eclosión.El control del ciclo inducido se realizó mediante exploración ecográfica de la cavidad celómica y permitió el seguimiento del desarrollo folicular hasta la ovulación. La ecografía se mostró un método eficaz para el seguimiento del ciclo ovárico inducido.
Estos resultados demuestran la eficacia de ccFSH en la inducción del ciclo ovárico en aves y la posibilidad de utilizar esta tecnología en los procesos de reproducción asistida en especies amenazadas para la obtención de progenie y su reintroducción en el medio natural.Ex situ reproduction is one of the measures recognized by the scientific and conservationist community for the conservation of threatened species and their reintroduction into the natural environment. However, captive breeding of endangered bird species often fails due to the absence of environmental stimuli associated with life in captivity. This circumstance prevents the development of physiological reproductive cycles in natural conditions and, therefore, the obtention of progeny from valuable individuals from the point of view of the genetic and ecological diversity. In general, and in summary, environmental stimuli, through a set of physiological events in the central nervous system, trigger the hypothalamic release of gonadotropin-releasing hormone (GnRH), which will induce the synthesis and release of gonadotropins (FSH) and LH) in gonadotropic cells of the adenohypophysis. Both FSH and LH will induce at the gonadal level the physiological changes for the maturation of gametes.
The possibility of pharmacologically inducing reproductive cycles in birds could resolve to a large extent the difficulties of captive breeding in species or individuals of high ecological value. On the other hand, the contribution of knowledge on the reproductive physiology of birds, and, specifically, to the hormonal mechanisms that control these processes, would be relevant for the better understanding both of the reproductive cycles in nature and the application of said knowledge to the production of birds and eggs for human consumption.
The work of this thesis included the expression of a recombinant quail FSH in a heterologous mammalian cell expression system (CHO) and the purification of LH from turkey adenohypophysis. Therefore, the development of specific antibodies for recombinant quail FSH and pituitary FSH and LH, was considered an essential tool for monitoring these hormones in laboratory processes: expression in the culture medium or cell lysates, purification, concentration and dialysis. The production of specific antibodies against the beta subunits of FSH and LH allowed the identification of recombinant quail FSH (ccrFSH) expressed in Chinese hamster ovary cells (CHO) and the identification and purification of turkey LH.
At the in vitro biological tests performed, ccrFSH significantly induced progesterone secretion in granulosa cells of F5 follicles. However, it did not induced progesterone secretion in granulosa cells of F1 follicles. These results demonstrated the specificity of action of this hormone.
At the in vivo experiments, the exclusive administration of ccrFSH for fifteen days in prepubertal quail consistently induced the development of follicles with a diameter ≥ 1 mm. However, this treatment did not induce complete follicular development. The combined administration of ccrFSH and LH or eCG did induce complete follicular development, ovulation and egg formation in quail. These experiments demonstrated the in vivo biological activity of ccrFSH and the need for the joint activity of FSH and LH in the induction of the cycle in this species. Recombinant quail FSH was also effective, administered together with eCG, in the induction of ovarian follicular development and maturation. The administration of turkey adenohypophysis glycoprotein extract in individuals with mature ovarian follicles induced ovulation and egg laying. The artificial insemination in these individuals and the incubation of the laid eggs resulted in embryonic development and hatching. The control of the induced cycle was performed by ultrasound exploration of the coelomic cavity and allowed the follow-up of the follicular development until ovulation. Ultrasound showed an effective method for monitoring the induced ovarian cycle.
These results demonstrate the efficacy of ccFSH in the induction of the ovarian cycle in birds and the possibility of using this technology in assisted reproduction processes in endangered species to obtain progeny and their reintroduction into the wild
Desarrollo de una aplicación web para un club de tenis aplicando la aproximación de Desarrollo Centrado en el Usuario
[ES] El Desarrollo centrado en el usuario (DCU) es una aproximación para el
desarrollo de software que se centra en resolver necesidades concretas de los usuarios
finales, consiguiendo la mayor satisfacción y mejor experiencia de uso posible. En los
últimos años esta metodología esta adquiriendo gran notoriedad. En este proyecto, se
pretende hacer uso de esta filosofía para realizar el diseño e implementación de una
aplicación web para un club de tenis, siendo su objetivo, aplicar las técnicas del DCU
para que la aplicación cubra las necesidades reales de los diferentes tipos de usuarios,
socios y gerente del club, dando prioridad a la usabilidad.Gimenez Botella, I. (2015). Desarrollo de una aplicación web para un club de tenis aplicando la aproximación de Desarrollo Centrado en el Usuario. http://hdl.handle.net/10251/55952.TFG
Citizen security and urban commuting in Latin America
Sustainable modes of transport, including both public transit and active transport, have been promoted as strategies to reduce greenhouse gas emissions. However, one factor that may influence their use is related to security concerns, although prior evidence on this topic is scarce and inconclusive. We explore whether perceived security in 10 large cities in Latin America is related to mode choice for commuting. We rely on the 2017 CAF Survey implemented by the Development Bank of Latin America, where individuals report their levels of satisfaction with neighbourhood security. Our results suggest that individuals who feel more satisfied with their neighbourhood security engage in more public transit commuting, although this result holds only for male commuters. Our results suggest that strategies aimed at increasing security can alleviate concerns about neighbourhood crime, increasing the use of public transit in Latin America
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