Infección por Neospora caninum en ganado de carne mantenido en condiciones de pastoreo en el centro-norte de México

 Objetive. To determine the seroprevalence of N. caninum antibodies and prevalence of parasite DNA in blood, and estimate the association between seroprevalence and the potential risk of some factors in beef cattle under grazing conditions in north-central Mexico. Materials and methods. Blood samples from 139 cows and only 10 bulls belonging to 13 farms were collected and evaluated by ELISA test to detect antibodies against N. caninum. Furthermore, to determine the presence of parasite DNA, nested PCR probe was performed on blood samples. Association between potential risk factors and seroprevalence was estimated. Results. Overall seroprevalence was 23% (35/149 samples), while the prevalence of parasite DNA in blood was 28% (42/149 samples). Of the 149 animals examined 28 (19%) were positive to both tests (25 cows and 3 bulls). Concordance between tests was k = 0.63. All herds had seropositive animals with positive parasite DNA detection in blood. The only risk factor identified was the presence of dogs (OR= 2.65). Conclusions. This study showed that bovine neospososis should be considered as an important infectious disease in north-central Mexico herds. Therefore, an epidemiological control should be taken into consideration to avoid the negative effect of this disease on mexican beef industry.Objetivo. Determinar la seroprevalencia de anticuerpos contra N. caninum y la prevalencia de ADN del parásito en sangre y estimar la asociación entre la seroprevalencia y algunos potenciales factores de riesgo de ganado de carne mantenido bajo condiciones de pastoreo en el centro–norte de México. Materiales y métodos. Se seleccionaron trece hatos ganaderos, en los cuales se recolectaron muestras de suero sanguíneo de 139 vacas y de solo 10 sementales, que fueron evaluados mediante la prueba de ELISA para detectar anticuerpos contra N. caninum. Por otra parte, se realizó una prueba de PCR anidado en muestras de sangre para determinar la presencia de ADN del parásito. Se estimó la asociación entre la seroprevalencia y algunos potenciales factores de riesgo. Resultados. La seroprevalencia general fue de 23%, mientras que la prevalencia a la presencia de ADN del parásito en sangre fue de 28%. Veintiocho muestras de 149 fueron positivas en ambas pruebas, mientras que 3/10 sementales fueron positivos en las dos pruebas. La concordancia entre las pruebas fue k=0.63. Todos los hatos tuvieron animales seropositivos y con presencia de ADN del parásito en sangre. El único factor de riesgo identificado fue la presencia de perros (OR=2.65). Conclusiones. La infección por N. caninum determinada en este estudio es importante, y deberá de ser más documentada; del mismo modo, algunas medidas de control deberán de considerarse para limitar sus efectos negativos en la industria mexicana de la carne

Factores de riesgo asociados a la seroprevalencia de anticuerpos a Neospora caninum en ganado lechero de Aguascalientes, México

The purpose of this research was to study potential risk factors, including possible contamination of drinking water with parasite oocysts, associated with the seroprevalence of N. caninum antibodies in dairy herds in Aguascalientes, Mexico. Serum samples from 150 cows were analyzed using the ELISA technique.El objetivo del presente trabajo fue identificar potenciales factores de riesgo, incluyendo la posible presencia de contaminación del agua de bebida con ooquistes del parásito, asociados con la seroprevalencia de anticuerpos a N. caninum en hatos lecheros de Aguascalientes, México

General esterase activity variation in the cattle tick Boophilus microplus and its relationship with organophosphate resistance

importante señal bioquímica de resistencia a pesticidas. En Boophilus microplus las esterasas han sido asociadas con resistencia a compuestos organofosforados y piretroides. El objetivo de este estudio fue analizar la resistencia a ixodicidas en cinco cepas de B. microplus con diferentes niveles de susceptibilidad, medida por la cuantificación de la actividad de esterasas y su correlación con los Indices de resistencia (IR) de las mismas cepas. El análisis toxicológico se llevó a cabo mediante el bioensayo de paquete de larvas, utilizando una dosis discriminante equivalente a dos veces la DL99 determinada por el análisis Probit, a partir de los cuales se estimaron los IR para cada cepa. Los extractos proteicos de larvas de cada una de las cinco cepas se realizaron macerando 100 mg de larvas de 10 días de edad, en 2 ml de solución amortiguadora de fosfatos. Los macerados, fueron analizados mediante espectrofotometría para la detección de esterasas. La actividad específica de esterasas, mostró una correlación significativa (PIncreased esterase activity in arthropods is considered as an important biochemical marker of pesticide resistance. In Boophilus microplus, esterases have been associated with resistance to both organophosphate and pyrethroid families. The purpose of this study was to analyze ixodicide resistance in five B. microplus strains with different levels of susceptibility as measured by esterase activity and its correlation with resistance indexes (RI). Toxicological analysis was performed using the larval package bioassay with one discriminating dose equivalent to 2X the LD99 as determined by the Probit analysis, from which the RI for each strain was estimated. Larval protein extracts from each of the five strains were obtained by homogenizing 100 mg of 10-day-old larvae in 2 ml of phosphate buffer solution. The larval protein homogenates were spectrophotometrically analyzed for esterase detection. Specific esterase activity showed a significant (

Infectividad de Metarhizium anisopliae en contra de cepas de garrapata Boophilus microplus sensible y resistente a los organofosforados

The infectivity of the entomopathogenic fungus Metarhizium anisopliae (Metschnikoff) was tested against one organophosphate (OP)-resistant and one susceptible Boophilus microplus (Canestrini) strains, by an in vitro assay with engorged B. microplus adult females recently detached from cattle, using the ECS1 strain of M. anisopliae. M. anisopliae micromycete showed to be highly infective against both the susceptible and the OP-resistant strains at the concentration of 108 spores/ml, resulting in 100% mortality for both B. microplus strains at 20 d postinfection. Tick mortality varied considerably depending on spore concentration, with LC50 values of 103 and 102 spores/ml for the susceptible and the OP-resistant strains respectively. B.microplus reproductive parameters decreased after infection but variability existed between the two ticks at different spore concentrations. M. anisopliae can be considered as a potential acaricide for the biological control of both OP-resistant and susceptible strains of the B. microplus tick.La infectividad del hongo entomopatogénico Metarhizium anisopliae (Metschnikoff) fue probada en contra de una cepa de Boophilus microplus (Canestrini) sensible, y otra resistente a los organofosforados, por medio de un ensayo in vitro con hembras ingurgitadas de B. microplus recién desprendidas del bovino, utilizando la cepa ECS1 de M. anisopliae. El micromiceto M. anisopliae demostró ser altamente infectivo, tanto para la cepa sensible como para la resistente a los organofosforados a la concentración de 108 esporas/ml, resultando en 100 % de mortalidad para ambas cepas de B. microplus a los 20 días posteriores a la infección. La mortalidad de las garrapatas varió considerablemente de acuerdo a la concentración de las esporas, con valores CL50 de 103 esporas/ml para la cepa sensible, y 102 esporas/ml para la resistente. Los parámetros reproductivos de B. microplus fueron reducidos después de la infección, pero se observó sobre las dos cepas de garrapatas una variabilidad a las diferentes concentraciones de esporas. Metarhizium anisopliae mostró que puede ser considerado como un acaricida potencial para el control biológico de garrapatas B. microplus resistentes y susceptibles a los organofosforados

Infectividad de Metarhizium anisopliae en contra de cepas de garrapata Boophilus microplus sensible y resistente a los organofosforados

La infectividad del hongo entomopatogénico Metarhizium anisopliae (Metschnikoff) fue probada en contra de una cepa de Boophilus microplus (Canestrini) sensible, y otra resistente a los organofosforados, por medio de un ensayo in vitro con hembras ingurgitadas de B. microplus recién desprendidas del bovino, utilizando la cepa ECS1 de M. anisopliae. El micromiceto M. anisopliae demostró ser altamente infectivo, tanto para la cepa sensible como para la resistente a los organofosforados a la concentración de 108 esporas/ml, resultando en 100 % de mortalidad para ambas cepas de B. microplus a los 20 días posteriores a la infección. La mortalidad de las garrapatas varió considerablemente de acuerdo a la concentración de las esporas, con valores CL50 de 103 esporas/ml para la cepa sensible, y 102 esporas/ml para la resistente. Los parámetros reproductivos de B. microplus fueron reducidos después de la infección, pero se observó sobre las dos cepas de garrapatas una variabilidad a las diferentes concentraciones de esporas. Metarhizium anisopliae mostró que puede ser considerado como un acaricida potencial para el control biológico de garrapatas B. microplus resistentes y susceptibles a los organofosforados

Detección inmunoquímica de esterasas en dos cepas de la garrapata Boophilus microplus (acarii: ixodidae)resistentes a ixodicidas

Rosario-Cruz R, García-Vázquez Z, Edward JG. Téc Pecu Méx 2000,38(3)203-210. An esterase from Boophilus microplus tick strain resistant to organophosphates was detected after SDS-PAGE. The protein showing activity was separated and used as an antigen to produce a polyclonal antibody. The polyclonal antibody was tested in a western blot for specific binding and three different Boophilus microplus tick strains were electrophoretically analyzed. The active protein showed differences in activity favoring the resistant tick strains but did not show any difference in a Western-Blot analysis when the same amount of protein was electrophoretically separated. The isoelectrofocussing however, showed differences in expression of esterase isozymes within a range of isoelectric point from 4.5 to 5.0. The evidences suggest that differences in activity are due to the participation of isoforms which are not immunologically differentiated, since, the Western blot did not show any difference between strains. The presence of isozymes with different physicochemical features, will be of great interest in the diagnosis of resistance to ixodicides, since they can be used as molecular markers for acaricide resistance detection.Rosario-Cruz R, García-Vázquez Z, Edward JG. Téc Pecu Méx 2000,38(3)203-210. Se encontró una esterasa en Boophilus microplus con actividad incrementada, en dos cepas de garrapatas resistentes a acaricidas de la familia de los piretroides y organofosforados, que fue detectada después de ser separadas electroforéticamente. La proteína fue separada y utilizada en la preparación de un anticuerpo policlonal monoespecífico. La especificidad de este anticuerpo fue probada mediante un ensayo de inmunoelectrotransferencia, en extractos totales de dos cepas de garrapatas resistentes, una a coumafos y otra a flumetrina, y una cepa susceptible a ambos compuestos. Las cepas de garrapatas resistentes mostraron una actividad de esterasa incrementada en relación con la cepa susceptible. El ensayo de isoelectroenfoque mostró diferencias en la expresión de varias isoformas con actividad de esterasa, que fueron detectadas en forma de escalera dentro del rango 4.5 a 5.0 de punto isoeléctrico. Los resultados sugieren que existen diferencias en la actividad enzimática que no son detectadas inmunológicamente, ya que en el ensayo de inmunoelectrotransferencia, no se encuentran diferencias entre los extractos. La presencia de isoformas con diferentes caracteristicas fisicoquímicas, será de gran interés en el diagnóstico de la resistencia, ya que pueden ser utilizadas como blancos moleculares para el diagnóstico de resistencia a ixodicidas

Desarrollo de un programa en hoja de cálculo para obtener el umbral económico de acaricidas como apoyo en el control de la garrapata Rhipicephalus microplus

The aim of the study was to develop a simulation program in spreadsheets using Excel® to estimate the economic thresholds of acaricides used in the Rhipicephalus microplus tick control. The economic threshold is the population density of the parasite with which the decision is made to initiate a control action that prevents a loss greater than the cost of the intervention.  Parameters used by the program are: number, price and weight of cattle, number of people applying the treatment and their income, number of applications per year and the supplies of each product. A total of 10,000 simulations were carried out with five different families of acaricides to obtain economic thresholds using losses of 1.37 and 1.18 kg per tick for two genetic types of cattle and i = 1,2,3 ..., 500 ticks, resistance (30 %) and without resistance. The thresholds obtained by the program, with 100 % and 70 % effectiveness of the acaricides were 46 and 158 ticks respectively, the average difference of live weight loss between B. taurus and its cross with zebu was 1.33 g. When the effectiveness of the product decreases, and acaricide is applied to a population of ticks before reaching the economic threshold, there are monetary losses, so it is desirable to know the resistance of R. microplus and the economic threshold in each farm.El objetivo fue desarrollar un programa de simulación en hojas de cálculo utilizando Excel®, que estima los umbrales económicos de acaricidas usados en el control de garrapata Rhipicephalus microplus. El umbral económico (UE) es la densidad de población del parásito, para tomar la decisión de iniciar una acción de control que impida una pérdida mayor al costo de la intervención. Los parámetros que utiliza el programa son: cantidad de cabezas en la explotación, precio en el mercado por kilo en canal de bovino, y peso promedio de los bovinos, número de personas que aplican el tratamiento y su salario, número de aplicaciones al año y los insumos de cada producto.  Se ejecutaron 10,000 simulaciones con cinco familias de acaricidas diferentes para obtener umbrales económicos utilizando pérdidas de 1.37 y 1.18 kg por garrapata para dos tipos genéticos de bovinos e i=1,2,3…,500 garrapatas, resistentes (30 %) y sin resistencia. Los umbrales obtenidos, con 100 % y 70% de efectividad de los acaricidas fueron 46 y 158 garrapatas respectivamente, la diferencia promedio de pérdida de peso vivo entre B. taurus y su cruza con cebú fue de 1.33 g por garrapata ingurgitada. Al aplicarse un acaricida a una población de garrapatas antes de alcanzar el umbral económico se tienen pérdidas monetarias, por lo que es deseable conocer la resistencia de R. microplus y el umbral económico en cada explotación