Etude des cellules souches musculaires dans la dermatomyosite et les autres myosites

Les myopathies inflammatoires idiopathiques (MII) constituent un groupe hétérogène de maladies musculaires acquises. Parmi elles, la dermatomyosite (DM) est la plus fréquente, survenant à tous les âges de la vie, et pouvant engager le pronostic vital. Le diagnostic repose sur l'association d'une faiblesse musculaire, d'infiltrats inflammatoires sur la biopsie musculaire et d'auto-anticorps dans le sérum. La pathogenèse apparaît multifactorielle, avec de nombreuses études concentrées sur l'immunité adaptative, et reste à ce jour incomplètement comprise. Dans le muscle de DM, la régénération ne compense pas la nécrose, et ceci induit une évolution chronique. Néanmoins, la capacité de régénération musculaire a été très peu étudiée dans ces pathologies. Dans le muscle normal, la régénération du muscle lésé se fait par un processus de myogenèse initié par les cellules souches musculaires (CSM) et permet une réparation ad integrum du tissu lésé. L’objectif de ce projet est d'évaluer la capacité des CSM dérivés de DM à réaliser le processus de myogenèse. Patients et méthodes : Une sélection de patients DM (sévère [n = 5] et légère [n = 3]) et des contrôles sains (CT [n = 5]) (appariés sexe et âge) a été effectuée dans la base de données des Hospices Civils de Lyon dont les échantillons étaient disponibles en biobanque. Une étude complémentaire a été réalisés sur d’autres patients IIM : myopathie nécrosante auto-immune (MNAI) (n = 3), myosite à inclusions (IBM) (n = 3) et syndrome des anti-synthétases (SAS) (n = 3). La myogenèse a été explorée in vitro par la culture de CSM pour l'évaluation de leur prolifération, de leur différenciation en myocytes et la fusion des myocytes en myotubes. La prolifération a été évaluée par incorporation d'un analogue de la thymidine dans l'ADN. La différenciation myogénique terminale a été évaluée par l'expression cellulaire de la myogénine. La fusion cellulaire a été quantifiée comme le nombre de noyaux incorporés dans les myotubes. L’étude de la sénescence a été faite par cytométrie en flux avec un substrat fluorescent de SA-βGalactosidase, marqueur spécifique de la sénescence. Enfin, l’impact de l'inhibition de la signalisation interféron sur la myogénèse in vitro a été évalué avec un inhibiteur des kinases JAK et un anticorps bloquant. Résultats : La prolifération des CSM de DM est significativement plus faible que celle des CSM de CT (p = 0,0020). La différenciation myogénique terminale est également très altérée dans les CSM de DM sévères, et à moindre niveau dans les cellules de DM légères (p = 0,001). La fusion est significativement diminuée dans les DM avec une diminution majeure pour les DM sévères et à un degré moindre pour les CSM de DM légères (p <0,0001 pour chacun). Ces résultats ont été reproduits pour les autres IIM, sauf les ASS. Grâce à des investigations cellulaires et moléculaires complémentaires, nous avons trouvé une sénescence accrue dans les CSM de DM in vitro, et une implication potentielle de l'interféron de type I dans l'altération de la myogenèse. En effet, la myogenèse des CSM de DM a été améliorée voire restaurée par l’adjonction des inhibiteurs de la signalisation interféron. Conclusions : Ces résultats montrent que la régénération du muscle squelettique est altérée dans la DM en raison de la capacité altérée des CSM à réaliser le processus de myogenèse. Cela peut expliquer en partie les altérations musculaires et la faiblesse musculaire observées chez les patients Ces résultats soutiennent l'hypothèse d'altérations intrinsèques des propriétés des CSM dans la DM, potentiellement liées à la voie de l'interféron et participant à la pathogenèse de la maladieIdiopathic inflammatory myopathies (IIM) constitute a heterogeneous group of diseases defined by non-infectious nor toxic acquired myopathies. Amongst them, dermatomyositis (DM) is the most frequent IIM, occurring during child and adulthood, and is potentially life-threatening. Its diagnosis is based on the association of muscle weakness, inflammatory infiltrates on histological muscle sections and auto-antibodies in the serum. Etiopathogenesis, that has mainly focused on adaptative immunity, remains largely unknown. In DM, the necrosis/regeneration balance is detrimental to muscle integrity, with a chronic course and poor clinical outcome for some patients. Nevertheless, the capacity of muscle regeneration has been barely studied. In normal injured muscle, regeneration is achieved by myogenic precursor cells (MPCs) that undergo myogenesis process to build new myofibers. The aim of our project was to evaluate DM-derived MPC capacity to undertake myogenesis. Methods. After establishing specific selection criteria, I selected DM (severe [n=5] and mild [n=3]), and healthy controls (HC [n=5], sex and age paired) from the Hospices Civils de Lyon database and obtained corresponding samples from the hospital biobank. Supplemental investigation was performed on other IIM derived-MPCs: immune-mediated necrotizing myopathy (IMNM) (n=3), inclusion body myositis (IBM) (n=3), and anti-synthetase syndrome (ASS) (n=3). Myogenesis was explored in vitro using specific MPC culture for the evaluation of proliferation, differentiation and fusion. Proliferation was evaluated as the incorporation of a thymidine analog into DNA during proliferation. Terminal myogenic differentiation was evaluated by myogenin expression, an essential transcription factor of myogenic differentiation. Cell fusion was quantified as the number of nuclei incorporated into myotubes. Quantitative analysis was performed using Image J software, and statistical analysis was performed by mean comparison (t test or ANOVA). Similar methods were used to evaluate the impact of interferon blockers (JAK / STAT inhibitor) on myogenesis. Senescence was analyzed by flow cytometry with fluorogenic substrate of SA-βGalactosidase, a senescence-specific marker. Results. Analysis of MPC proliferation indicates that DM-derived MPCs exhibited a significantly lower proliferation than HC-derived MPCs (p=0.0020). Terminal myogenic differentiation was also strongly impaired in severe DM-derived MPCs while less altered in mild-DM-derived cells (p=0.001). MPC fusion was significantly altered in DM-derived MPCs with a dramatic decreased observed in severe DM and to a lesser degree in mild DM (p<0.0001 for each). These results were recapitulated for other IIM, with altered myogenesis identified for IMNM (n=3), IBM (n=3), but not for ASS (n=3). Through cellular and molecular investigations, we found increased senescence in DM derived-MPCs, and potential involvement of interferon type I in myogenesis impairment. Indeed, sDM and mDM derived-MPCs myogenesis was improved even restored when culture was performed with JAK/STAT inhibitor, a downstream interferon pathway blocker or IFN receptor blocking antibody. Conclusion. These results show that skeletal muscle regeneration is impaired in DM due to altered capacities of MPCs to proliferate, to differentiate and to fuse. This may explain in part the muscle alterations and muscle weakness that are observed in patients. These results support the hypothesis of intrinsic alterations of MPC properties in DM, potentially linked with interferon pathway, and participating to the pathogenesis of the diseas

Etude des cellules souches musculaires dans la dermatomyosite et les autres myosites

Idiopathic inflammatory myopathies (IIM) constitute a heterogeneous group of diseases defined by non-infectious nor toxic acquired myopathies. Amongst them, dermatomyositis (DM) is the most frequent IIM, occurring during child and adulthood, and is potentially life-threatening. Its diagnosis is based on the association of muscle weakness, inflammatory infiltrates on histological muscle sections and auto-antibodies in the serum. Etiopathogenesis, that has mainly focused on adaptative immunity, remains largely unknown. In DM, the necrosis/regeneration balance is detrimental to muscle integrity, with a chronic course and poor clinical outcome for some patients. Nevertheless, the capacity of muscle regeneration has been barely studied. In normal injured muscle, regeneration is achieved by myogenic precursor cells (MPCs) that undergo myogenesis process to build new myofibers. The aim of our project was to evaluate DM-derived MPC capacity to undertake myogenesis. Methods. After establishing specific selection criteria, I selected DM (severe [n=5] and mild [n=3]), and healthy controls (HC [n=5], sex and age paired) from the Hospices Civils de Lyon database and obtained corresponding samples from the hospital biobank. Supplemental investigation was performed on other IIM derived-MPCs: immune-mediated necrotizing myopathy (IMNM) (n=3), inclusion body myositis (IBM) (n=3), and anti-synthetase syndrome (ASS) (n=3). Myogenesis was explored in vitro using specific MPC culture for the evaluation of proliferation, differentiation and fusion. Proliferation was evaluated as the incorporation of a thymidine analog into DNA during proliferation. Terminal myogenic differentiation was evaluated by myogenin expression, an essential transcription factor of myogenic differentiation. Cell fusion was quantified as the number of nuclei incorporated into myotubes. Quantitative analysis was performed using Image J software, and statistical analysis was performed by mean comparison (t test or ANOVA). Similar methods were used to evaluate the impact of interferon blockers (JAK / STAT inhibitor) on myogenesis. Senescence was analyzed by flow cytometry with fluorogenic substrate of SA-βGalactosidase, a senescence-specific marker. Results. Analysis of MPC proliferation indicates that DM-derived MPCs exhibited a significantly lower proliferation than HC-derived MPCs (p=0.0020). Terminal myogenic differentiation was also strongly impaired in severe DM-derived MPCs while less altered in mild-DM-derived cells (p=0.001). MPC fusion was significantly altered in DM-derived MPCs with a dramatic decreased observed in severe DM and to a lesser degree in mild DM (p<0.0001 for each). These results were recapitulated for other IIM, with altered myogenesis identified for IMNM (n=3), IBM (n=3), but not for ASS (n=3). Through cellular and molecular investigations, we found increased senescence in DM derived-MPCs, and potential involvement of interferon type I in myogenesis impairment. Indeed, sDM and mDM derived-MPCs myogenesis was improved even restored when culture was performed with JAK/STAT inhibitor, a downstream interferon pathway blocker or IFN receptor blocking antibody. Conclusion. These results show that skeletal muscle regeneration is impaired in DM due to altered capacities of MPCs to proliferate, to differentiate and to fuse. This may explain in part the muscle alterations and muscle weakness that are observed in patients. These results support the hypothesis of intrinsic alterations of MPC properties in DM, potentially linked with interferon pathway, and participating to the pathogenesis of the diseaseLes myopathies inflammatoires idiopathiques (MII) constituent un groupe hétérogène de maladies musculaires acquises. Parmi elles, la dermatomyosite (DM) est la plus fréquente, survenant à tous les âges de la vie, et pouvant engager le pronostic vital. Le diagnostic repose sur l'association d'une faiblesse musculaire, d'infiltrats inflammatoires sur la biopsie musculaire et d'auto-anticorps dans le sérum. La pathogenèse apparaît multifactorielle, avec de nombreuses études concentrées sur l'immunité adaptative, et reste à ce jour incomplètement comprise. Dans le muscle de DM, la régénération ne compense pas la nécrose, et ceci induit une évolution chronique. Néanmoins, la capacité de régénération musculaire a été très peu étudiée dans ces pathologies. Dans le muscle normal, la régénération du muscle lésé se fait par un processus de myogenèse initié par les cellules souches musculaires (CSM) et permet une réparation ad integrum du tissu lésé. L’objectif de ce projet est d'évaluer la capacité des CSM dérivés de DM à réaliser le processus de myogenèse. Patients et méthodes : Une sélection de patients DM (sévère [n = 5] et légère [n = 3]) et des contrôles sains (CT [n = 5]) (appariés sexe et âge) a été effectuée dans la base de données des Hospices Civils de Lyon dont les échantillons étaient disponibles en biobanque. Une étude complémentaire a été réalisés sur d’autres patients IIM : myopathie nécrosante auto-immune (MNAI) (n = 3), myosite à inclusions (IBM) (n = 3) et syndrome des anti-synthétases (SAS) (n = 3). La myogenèse a été explorée in vitro par la culture de CSM pour l'évaluation de leur prolifération, de leur différenciation en myocytes et la fusion des myocytes en myotubes. La prolifération a été évaluée par incorporation d'un analogue de la thymidine dans l'ADN. La différenciation myogénique terminale a été évaluée par l'expression cellulaire de la myogénine. La fusion cellulaire a été quantifiée comme le nombre de noyaux incorporés dans les myotubes. L’étude de la sénescence a été faite par cytométrie en flux avec un substrat fluorescent de SA-βGalactosidase, marqueur spécifique de la sénescence. Enfin, l’impact de l'inhibition de la signalisation interféron sur la myogénèse in vitro a été évalué avec un inhibiteur des kinases JAK et un anticorps bloquant. Résultats : La prolifération des CSM de DM est significativement plus faible que celle des CSM de CT (p = 0,0020). La différenciation myogénique terminale est également très altérée dans les CSM de DM sévères, et à moindre niveau dans les cellules de DM légères (p = 0,001). La fusion est significativement diminuée dans les DM avec une diminution majeure pour les DM sévères et à un degré moindre pour les CSM de DM légères (p <0,0001 pour chacun). Ces résultats ont été reproduits pour les autres IIM, sauf les ASS. Grâce à des investigations cellulaires et moléculaires complémentaires, nous avons trouvé une sénescence accrue dans les CSM de DM in vitro, et une implication potentielle de l'interféron de type I dans l'altération de la myogenèse. En effet, la myogenèse des CSM de DM a été améliorée voire restaurée par l’adjonction des inhibiteurs de la signalisation interféron. Conclusions : Ces résultats montrent que la régénération du muscle squelettique est altérée dans la DM en raison de la capacité altérée des CSM à réaliser le processus de myogenèse. Cela peut expliquer en partie les altérations musculaires et la faiblesse musculaire observées chez les patients Ces résultats soutiennent l'hypothèse d'altérations intrinsèques des propriétés des CSM dans la DM, potentiellement liées à la voie de l'interféron et participant à la pathogenèse de la maladi

Les myosites à éosinophiles idiopathiques

Les myosites à éosinophiles appartiennent au groupe des myopathies inflammatoires idiopathiques et sont définies par un infiltrat inflammatoire musculaire composé de polynucléaires éosinophiles. Il n’existe pas à ce jour de consensus concernant le diagnostic et le traitement de ces patients. Grâce à une revue exhaustive de la littérature, les principales caractéristiques cliniques et histologiques, ainsi que le traitement et l’évolution des patients, ont été résumés dans cette synthèse. Cette revue a permis de distinguer trois sous-groupes de myosites à éosinophiles : la forme focale, la forme diffuse et les périmyosites à éosinophiles. Un algorithme de traitement et de prise en charge est proposé, et les principaux diagnostics différentiels sont discutés

Methods for scoping review: Protocol and methods

This scoping review was conducted using the Joanna Briggs Institute framework (1) and responds to PRISMA-ScR checklist (2). Methods were registered on HAL on the 24rth of July 2021. The review included the following six key phases: 1) identifying the research question, 2) identifying relevant studies, 3) study selection, 4) charting the data, 5) collating, summarizing, and reporting the results. 2.2 Research question This scoping review was guided by the following question: What is the spectrum of myositis associated with polyarthritis? 2.3 Screening for relevant studies : eligibility criteria Articles were included if they considered the association of polyarthritis and IIM. For practical reason, articles in other languages than English or French were excluded. Duplicate

Focal myositis

International audienceObjective To better define in a cohort study the clinical and pathologic features of focal myositis (FM). Methods With the use of the usual clinicopathologic definition, each confirmed case of FM in the Lyon University Hospital's myopathologic database between 2000 and 2016 was retrieved. Clinical, pathologic, imaging, serologic, and therapeutic data were collected. When data were missing but feasible, appropriate pathologic analyses were performed. Results Of the 924 patients included in the database, 37 (4%) had confirmed FM (14 female, 23 male patients). The main symptoms were pain (n = 30, 81%), muscular mass (n = 16, 43%), erythema at the site of FM (n = 12, 32%), and fever (n = 9, 24%). Serum creatine kinase was normal in most patients (81%); serum immune abnormalities were frequent (inflammatory syndrome in sera [39%], dysglobulinemia [52%], and anti-nuclear antibody positivity [29%]). In addition to confirming previously reported findings, pathologic analyses found significant rates of vasculitis (68%) and fasciitis (73%). Here, FM appeared frequently to be associated with other diseases such as immune-mediated inflammatory disease (IMID; 32%), neoplasia (24%), and radiculopathy (11%). Regarding outcomes, 64% of the cases had received immunosuppressive drugs, and the relapse rate was 41%. Conclusion The present study suggests that FM is not as innocuous as previously believed, particularly considering the associated disorders. Notably, patients with FM should receive careful IMID and neoplasia screening

The IgG2 isotype of anti-transcription intermediary factor 1-gamma autoantibodies is a biomarker of mortality and cancer in adult dermatomyositis

International audienc

Fourteen-day survival among older adults with severe infection with severe acute respiratory syndrome coronavirus 2 treated with corticosteroid: a cohort study

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