?2-Microglobulin Amyloid Fibril-Induced Membrane Disruption Is Enhanced by Endosomal Lipids and Acidic pH

Although the molecular mechanisms underlying the pathology of amyloidoses are not well understood, the interaction between amyloid proteins and cell membranes is thought to play a role in several amyloid diseases. Amyloid fibrils of ?2-microglobulin (?2m), associated with dialysis-related amyloidosis (DRA), have been shown to cause disruption of anionic lipid bilayers in vitro. However, the effect of lipid composition and the chemical environment in which ?2m-lipid interactions occur have not been investigated previously. Here we examine membrane damage resulting from the interaction of ?2m monomers and fibrils with lipid bilayers. Using dye release, tryptophan fluorescence quenching and fluorescence confocal microscopy assays we investigate the effect of anionic lipid composition and pH on the susceptibility of liposomes to fibril-induced membrane damage. We show that ?2m fibril-induced membrane disruption is modulated by anionic lipid composition and is enhanced by acidic pH. Most strikingly, the greatest degree of membrane disruption is observed for liposomes containing bis(monoacylglycero)phosphate (BMP) at acidic pH, conditions likely to reflect those encountered in the endocytic pathway. The results suggest that the interaction between ?2m fibrils and membranes of endosomal origin may play a role in the molecular mechanism of ?2m amyloid-associated osteoarticular tissue destruction in DRA

Loss of Niemann-Pick C1 or C2 Protein Results in Similar Biochemical Changes Suggesting That These Proteins Function in a Common Lysosomal Pathway

Niemann-Pick Type C (NPC) disease is a lysosomal storage disorder characterized by accumulation of unesterified cholesterol and other lipids in the endolysosomal system. NPC disease results from a defect in either of two distinct cholesterol-binding proteins: a transmembrane protein, NPC1, and a small soluble protein, NPC2. NPC1 and NPC2 are thought to function closely in the export of lysosomal cholesterol with both proteins binding cholesterol in vitro but they may have unrelated lysosomal roles. To investigate this possibility, we compared biochemical consequences of the loss of either protein. Analyses of lysosome-enriched subcellular fractions from brain and liver revealed similar decreases in buoyant densities of lysosomes from NPC1 or NPC2 deficient mice compared to controls. The subcellular distribution of both proteins was similar and paralleled a lysosomal marker. In liver, absence of either NPC1 or NPC2 resulted in similar alterations in the carbohydrate processing of the lysosomal protease, tripeptidyl peptidase I. These results highlight biochemical alterations in the lysosomal system of the NPC-mutant mice that appear secondary to lipid storage. In addition, the similarity in biochemical phenotypes resulting from either NPC1 or NPC2 deficiency supports models in which the function of these two proteins within lysosomes are linked closely

Activation Mobilizes the Cholesterol in the Late Endosomes-Lysosomes of Niemann Pick Type C Cells

A variety of intercalating amphipaths increase the chemical activity of plasma membrane cholesterol. To test whether intracellular cholesterol can be similarly activated, we examined NPC1 and NPC2 fibroblasts, since they accumulate large amounts of cholesterol in their late endosomes and lysosomes (LE/L). We gauged the mobility of intracellular sterol from its appearance at the surface of the intact cells, as determined by its susceptibility to cholesterol oxidase and its isotope exchange with extracellular 2-(hydroxypropyl)-β-cyclodextrin-cholesterol. The entire cytoplasmic cholesterol pool in these cells was mobile, exchanging with the plasma membrane with an apparent half-time of ∼3–4 hours, ∼4–5 times slower than that for wild type human fibroblasts (half-time ∼0.75 hours). The mobility of the intracellular cholesterol was increased by the membrane-intercalating amphipaths chlorpromazine and 1-octanol. Chlorpromazine also promoted the net transfer of LE/L cholesterol to serum and cyclodextrin. Surprisingly, the mobility of LE/L cholesterol was greatly stimulated by treating intact NPC cells with glutaraldehyde or formaldehyde. Similar effects were seen with wild type fibroblasts in which the LE/L cholesterol pool had been expanded using U18666A. We also showed that the cholesterol in the intracellular membranes of fixed wild-type fibroblasts was mobile; it was rapidly oxidized by cholesterol oxidase and was rapidly replenished by exogenous sterol. We conclude that a) the cholesterol in NPC cells can exit the LE/L (and the extensive membranous inclusions therein) over a few hours; b) this mobility is stimulated by the activation of the cholesterol with intercalating amphipaths; c) intracellular cholesterol is even more mobile in fixed cells; and d) amphipaths that activate cholesterol might be useful in treating NPC disease

RÉTINITE À CYTOMÉGALOVIRUS CHEZ LES PATIENTS SOUS THÉRAPIE ANTIRÉTROVIRALE HAUTEMENT ACTIVE (HAART)

L’infection à cytomégalovirus (CMV) représente l’infection opportuniste la plus fréquente et la plus grave qui survient au cours de la phase tardive de l’infection rétrovirale. L’atteinte rétinienne est de loin la plus fréquente des localisations. Depuis l’introduction de la trithérapie antirétrovirale hautement active en 1996, l’incidence de la rétinite à CMV a diminué de plus de 80%. L’utilisation du Ganciclovir par voie générale a largement amélioré le pronostic vital et fonctionnel de ces patients.Le but du travail est de rapporter les données épidémiologiques, cliniques et thérapeutiques de notre série, ainsi qu’une revue détaillée des protocoles thérapeutiques récemment adoptés dans la littérature.Matériel et méthodes : Etude rétrospective non comparative d’une série de cas menée au service des maladies infectieuses du CHU Ibn Rochd et au service d’ophtalmologie adulte de l’hôpital 20 Août 1953. L’étude a inclus 9 patients VIH positifs, présentantune rétinite à cytomégalovirus confirmée par l’aspect clinique des lésions rétiniennes, la sérologie CMV (Ig M, Ig G) et la recherche positive du CMV par la technique d’amplification génique (PCR) dans le sang. Le traitement d’attaque à base de Ganciclovir par voie intraveineuse à la dose de 10mg/kg/j pendant 21 jours en association avec la trithérapie antirétrovirale hautement active a été instauré chez tous les patients suivi d’un traitement d’entretien.Résultats : L’âge moyen des patients était de 35,4 ans. L’acuité visuelle initiale était inférieure à 1/10 chez 7 patients. L’atteinte rétinienne était unilatérale chez tous les patients. Le taux moyen initial de CD4 + était de 40 cellules/mm3. L’évolution était favorable chez 67% des cas (6 patients) avec une amélioration de l’acuité visuelle finale, une diminution de l’inflammation vitréenne et la cicatrisation des lésions rétiniennes. Trois patients sont décédés au cours du traitement.Discussion : Dans notre série, le taux de guérison après traitement intraveineux de Ganciclovir seul était de 67% ce qui rejoint les données de la littérature. Le Ganciclovir par voie intraveineuse est actuellement la molécule de référence dans le traitement des rétinites à CMV. Il permet d’arrêter la progression de l’infection, de diminuer le risque de récidive et de bilatéralisation. Plusieurs études randomisées ont évalué les implants intravitréens de Ganciclovir, ces derniers semblent offrir une bonne compliance et un contrôle satisfaisant des récidives à long terme.Conclusion : La rétinite à CMV est la principale cause de la baisse sévère de l’acuité visuelle chez les patients au stade SIDA maladie. Son pronostic a été largement amélioré par l’association de la trithérapie antirétrovirale hautement active et du Ganciclovir

Cataracte et dystrophie de Fuchs : Conduite à tenir dans l’état actuel des connaissances

La dystrophie de Fuchs (cornea guttata) est une pathologie primitive et progressive de l’endothélium cornéen. Il s’agit d’une pathologie ubiquitaire. Le diagnostic est posé en biomicroscopie devant l’aspect d’excroissances pathologiques de la membrane de Descemét (cornea guttata). Habituellement elle évolue en passant par des stades de cornea guttata, puis d’oedème cornéen, suivi de dystrophie bulleuse et enfin de néovascularisation et d’opacification cornéenne. L’objectif de l’évaluation préopératoire, avant la chirurgie de cataracte en présence de la dystrophie de Fuchs, est de guider le choix de la décision chirurgicale afin d’optimiser le résultat chirurgical, que ce soit une chirurgie de cataracte isolée ou une chirurgie combinée avec kératoplastie transfixiante ou endothéliale. Ainsi, l’ophtalmologiste doit faire la part entre la baisse d’acuité visuelle liée à la dystrophie de Fuchs et celle liée à la cataracte, et apprécier la capacité de l’endothélium à supporter le stress chirurgical. La greffe de cornée peut être proposée d’emblée, associée à la phacoémulsification. Actuellement, la greffe endothéliale est devenue l’intervention de référence, permettant d’éviter les écueils de la greffe transfixiante

Maladie de Von Hippel-Lindau : A propos de 2 cas

INTRODUCTION : La maladie de Von Hippel-Lindau (VHL) est une maladie multi systémique, caractérisée par une multiplication anormale de vaisseaux sanguins, avec hémangioblastomes et kystes, de même que par d’autres néoformations dans plusieurs organes. Nous rapportons le cas de deux patients, à travers ces deux observations, nous essayons de mettre le point sur cette pathologie.Observations :Cas 1 : patiente de 33 ans, présente une baisse de l’acuité visuelle (BAV) bilatérale depuis 3 ans, l’examen a objectivé un décollement de rétine tractionnel à l’OD , et un hémangiome capillaire rétinien à l’OG; l’angiographie à la fluorescéine (AF) montre une hyper fluorescence précoce et une fuite tardive ; La TDM abdominale objective une angiomatose avec polykystose pancréatique. La patiente a bénéficié d’une IVT d’anti VEGF au niveau de l’OD et d’une photo coagulation au laser argon à l’OG. L’évolution a été marquée par la stabilisation de l’acuité visuelle lors des contrôles ultérieurs.Cas 2 : Garçon âgé de 15 ans, consulte pour une BAV de l’OD dont l’examen retrouve une hémorragie intra vitréenne inférieure, hémangiome capillaire juxta papillaire et un DR exsudatif inférieur. L’échographie abdominale montre un kyste rénal droit. Le patient a bénéficié d’une IVT d’anti VEGF dans un premier temps suivie d’une chirurgie endoculaire. L’acuité visuelle post opératoire n’a pas été améliorée avec un recul de six mois.Discussion :La définition clinique de la maladie de VHL repose sur la présence de deux lésions majeures dont un hémangioblastome en l’absence d’histoire familiale, ou d’une seule lésion en présence d’antécédents familiaux. L’examen complémentaire est basé sur l’angiographie à la fluorescéine. Les complications peuvent aller de simples exsudats au DR voire une phtyse du globe. Le traitement se base essentiellement sur la photo coagulation au laser argon, la cryothérapie, les anti-VEGF et la chirurgie rétinovitréenne au stade de complications.Conclusion : La maladie de VHL est une affection héréditaire avec atteinte multi systémique d’où l’intérêt d’un examen complémentaire complet, d’une surveillance régulière et du conseil génétique chez tout patient chez qui la maladie est suspectée ainsi que sa famille

LES DECOLLEMENTS DE RETINE POST TRAUMATIQUES : ASPECTS EPIDEMIOLOGIQUES CLINIQUES ET THERAPEUTIQUES

INTRODUCTION : Le décollement de rétine post traumatique (DRPT) est une source importante de cécité dans le monde. Survient le plus souvent dans la population jeune en pleine activité d’où son impact socioéconomique négatif. L’objectif de ce travail est d’évaluer les particularités cliniques et thérapeutiques de cette entité particulière de DR.Matériel et méthodes : Etude rétrospective de 82 patients soit 82 yeux , traités pour DRPT depuis janvier 2012 jusqu’à décembre 2013. Nous avons fait une étude comparative entre le groupes des DRPT perforants avec ou sans CEIO et celui des DRPT contusifs.RESULTATS : Notre série comportait 31 cas dans le DRPT perforant et 53 cas dans le DR contusif. L’âge moyen était de 28.5 ans dans les DRPT perforants, et de 30 ans dans les DR contusifs. 96.15% sont des hommes dans les DRPT perforants et 87.5% dans les traumatismes contusifs. La macula était décollée dans 98.3% des cas dans les DRPT perforants et dans 66.7% des cas dans les DR contusifs. Pour les étiologies, on retrouve une prédominance des accidents de travail et domestiques dans les DR perforants par rapport aux contusifs dominés par les agressions et les accidents sportifs.DISCUSSION : Le délai de survenue du DR est tributaires des mécanismes physiopathologiques des déchirures et des tractions rétino-vitréennes en cause, le DR post traumatique perforant est d’aspect tractionnel en rapport avec la prolifération vitréo-rétinienne (PVR) qui se forme au niveau de la plaie. Quant au DR post traumatiques contusifs, la compression antéropostérieure entraine une expansion équatoriale du globe et produit une avulsion de la base du vitré avec arrachement de rétine a l’ora (désinsertion). Sur le plan thérapeutique, les résultats anatomiques et fonctionnels de la chirurgie du DRPT perforant sont réputés médiocres, expliqués par la gliose sous rétinienne et la traction rétinienne, par contre, l’absence de PVR avancée était à l’origine de ce succès dans le DRPT contusif.CONCLUSION : Les DR post traumatiques sont relativement graves surtout dans les traumatismes perforants où le pronostic est d’emblée réservé. les progrès de la microchirurgie tentent à améliorer le pronostic de ce type de DR, cependant les résultats fonctionnels restent peu satisfaisants

Intérêt de la Mitomycine C en ophtalmologie

La mitomycine C(MMC) est un antibiotique anticancéreux, c’est un agent alkylant actif après réduction enzymatique intracellulaire. Elle a un effet anti cicatriciel sur les fibroblastes et les fibrocytes et cytostatique sur les cellules tumorales. Il est bien reconnu que les effets sur les tissus de la MMC peuvent persister pendant de nombreuses années après l’arrêt du traitement ce qui ressemble aux effets des rayonnements ionisants. Les indications de la MMC en ophtalmologie englobent les carcinomes cornéo-conjonctivaux, les ptérygions, la chirurgie filtrante du glaucome, la chirurgie réfractive et la dacryocystorhinostomie. Les concentrations de la MMC varient selon les auteurs et la nature de la pathologie, ainsi que la durée du traitement. Les complications sont fréquentes mais réversibles et sont liées à une toxicité oculaire locale