Cepas de Vibrio parahaemolyticus que causan necrosis hepatopancreática aguda en camarón cultivado de Sonora, México y su resistencia a antibióticos

Background: Shrimp farms in northwestern Mexico have had outbreaks since 2013 with losses of more than 80%. The only background is the acute hepatopancreatic necrosis diseases (AHPND) originated in Asia for a new strains of Vibrio parahaemolyticus (VP-AHPND+) that produce toxins PirA and PirB of the plasmid pVA1. Goals: To characterize the causative agent of epizootics in farms; to perform genomic comparisons of sequencing of the 16S rDNA region to identify the variability that occurs in the strains and evaluate the resistance developed against antibiotics in vitro. Methods: Estuaries, drains, and farms of southern Sonora were monitored; samples of water, sediment and shrimps were aseptically sampled. Bacterial cultures were performed in TCBS and the green colonies were streaked in the selective culture media CHROMagar Vibrio medium. Bacteria were identified by PCR-AP3 specific for the strains VP-AHPND+. Polymorphism of strains were analyzed by sequencing the 16S rDNA region and the rep-PCR (GTG)5 technique. Antibiotic resistance was examined for oxitetracicline, florfenicol, enrofloxacin, magnacin, sulfacloropiridacin trimetroprim and enrofloxacin. Results: Throughout 2013-2014, 444 strains were isolated (82 from 2013, and 362 from 2014). Eighty-three were selected, from which 16 were PCR-positives. Sequences from 16S rDNA region were compared with those deposited at GenBank, and a high homology was found with sequences from VP-AHPND+ from Sinaloa with differences of those from Thailand and China, polymorphism occur mainly in 15 nucleotide sequences. Regards to antibiotic resistance tests, strains with resistance to oxytetracycline and sulfachloropyridazine-trimethoprim were found. Conclusions: VP-AHPND+ was identified as the causative agent of AHPND in shrimp farms from Sonora and the polymorphism among the strains was confirmed, also antibiotic resistance was found against antibiotics, regularly applied to shrimp farms.Antecedentes: Los cultivos de camarón del noroeste de México han presentado epizootias desde el 2013 con pérdidas de más del 80%. Como único antecedente se conoce la enfermedad de la necrosis hepatopancreática aguda (AHPND), causada en Asia por una cepa nueva de Vibrio parahaemolyticus (VP-AHPND+) que produce las toxinas PirA y PirB del plásmido pVA1. Objetivos: Caracterizar al agente causal de epizootias en granjas, realizar comparaciones genómicas de secuenciación de la región 16S ADNr para identificar la variabilidad entre las cepas y evaluar la resistencia desarrollada contra antibióticos in vitro. Métodos: Se monitorearon esteros, drenes y granjas del sur de Sonora, colectándose asépticamente muestras de agua, sedimento y camarón. Se realizaron cultivos bacterianos en TCBS y las colonias verdes fueron resembradas en CHROMagar Vibrio. Los aislados patógenos se identificaron por PCR-AP3 específico para la cepa VP-AHPND+. El polimorfismo de las cepas se analizó mediante secuenciación de la región 16S ADNr y la técnica de rep-PCR (GTG)5. La resistencia a antibióticos se realizó con oxitetraciclina, florfenicol, enrofloxacina, magnacina y sulfacloropiridacina-trimetroprim. Resultados: Durante el 2013-2014 se aislaron 444 cepas (82 del 2013 y 362 del 2014). Se seleccionaron 83 de estas, de las cuales 16 fueron positivas por PCR. Las secuencias de la región 16S ADNr se compararon con las del banco de genes y se encontró que tienen elevada homología con las de VP-AHPND+ de Sinaloa con diferencias de las Tailandia y China, el polimorfismo ocurre principalmente en 15 secuencias nucleotídicas. Respecto a las pruebas de resistencia a antibióticos se identificaron cepas resistentes a oxitetraciclina y sulfacloropiridacina-trimetroprim. Conclusiones: El VP-AHPND+ se identificó como agente causal de la AHPND en granjas de Sonora y presentó polimorfismo entre las cepas las cuales fueron resistentes a antibióticos aplicados regularmente en las granjas

Prevalence of Trypanosoma cruzi infection in dogs and small mammals in Nuevo León, Mexico

La enfermedad de Chagas, causada por el protozoario Trypanosoma cruzi, es un problema importante para la salud pública en una vasta región que se extiende en dirección norte desde Sudamérica hasta el sur de los Estados Unidos de América. Aunque este hemoflagelado tiene muchos mamíferos silvestres y domésticos reportados como reservorios, los estudios sobre este tema son escasos en el estado de Nuevo León, localizado en el noreste de México. Se efectuó un relevamiento de la prevalencia de T. cruzi en pequeños mamíferos cubriendo 9 municipios del estado de Nuevo León y 3 tipos de asentamiento (rural, suburbano y urbano). Se observó una prevalencia general de la infección del 14,5% (35/241) usando PCR y diagnóstico tradicional para detectarla. No se determinó una asociación estadísticamente significativa entre las localidades relevadas y las especies de mamíferos infectados (2 = 6,098, p = 0,192); sin embargo, el número de animales infectados se correlacionó con la especie de mamífero (p = 0,009). La mayor prevalencia de T. cruzi se detectó en los zorrillos (Mephitis mephitis) (11/34; 32,3%); la menor (13/136; 9,5%), en los perros (Canis familiaris). La prevalencia de la infección por T. cruzi en pequeños mamíferos fue más baja en Nuevo León que en otros estados de México. Estos resultados proveen nuevos registros de localidad incluyendo zorrillos, zarigüeyas o tlacuaches (Didelphis marsupialis) y perros, y también amplían el área registrada para las ratas de campo (Neotoma micropus). ABSTRACT Chagas disease, caused by the protozoan Trypanosoma cruzi, is an important public health concern in areas extending from South America northward into the southern United States of America. Although this hemoflagellate has many wild and domestic mammalians reported as reservoir hosts, studies on this subject are scarce in Nuevo León state, a region located in northeastern Mexico. This cross-sectional study showed that the general prevalence of T. cruzi infection in Nuevo León state was 14.5% (35/241), this percentage matching the ones determined by PCR and traditional diagnostics. Localities and infected mammals did not significantly differ (2 = 6.098, p = 0.192); however the number of infected animals was highly correlated with mammalian species (p = 0.009). Striped skunks (Mephitis mephitis) were found to be the most infected overall (11/34, 32.3%), while dogs (Canis familiaris) had the lowest prevalence. In conclusion, although the prevalence of T. cruzi infection in small mammals was lower in Nuevo León than in other states of Mexico, our results provide new locality records, including striped skunks, opossums (Didelphis marsupialis) and dogs, and extend the recorded area to woodrats (Neotoma micropus)

Prevalencia de Borrelia burgdorferi sensu lato en garrapatas de venado cola blanca (Odocoileus virginianus), venado bura (Odocoileus hemionus) y borrego cimarrón (Ovis canadiensis) en dos localidades de Sonora

Las garrapatas son vectores de una gran cantidad de agentes infecciosos que se pueden transmitir a una amplia variedad hospedero, tal como la borreliosis de Lyme la cual es una zoonosis de distribución mundial y es la enfermedad más común transmitida por estos vectores en los Estados Unidos de América. Sin embargo, en el norte de México también existen las condiciones propicias para que se presente la enfermedad de Lyme, debido a que han identificado vectores, huéspedes intermediarios y la ecología adecuada. Este trabajo tiene como objetivo determinar la distribución de especies de garrapatas en hospederos habituales como lo es el venado cola blanca (Odocoileus virginianus couesi), venado bura (Odocoileus hemionus) y borrego cimarrón (Ovis canadiensis) así como también la identificación de Borrelia burgdorferi mediante la técnica de reacción en cadena de la polimerasa (PCR) para determinar la prevalencia de esta espiroqueta.Ticks are vectors of a large number of infectious agents which can be transmitted to a wide variety of host, such as Lyme borreliosis, a worldwide zoonosis and the most common disease transmitted by these vectors in the United States. However at Northern Mexico there are also favorable conditions to the occurrence of Lyme disease, based on previous reports on vectors identification, intermediate hosts and proper ecology. This work aims to determine the distribution of ticks species in common hosts as is the white-tailed deer (Odocoileus virginianus couesi), mule deer (Odocoileus hemionus) and bighorn sheep (Ovis canadensis) as well as the identification of Borrelia burgdorferi using the polymerase chain reaction technique (PCR) to determine the prevalence of this spirochaete

Estandarización de qPCR para el diagnóstico de patógenos transmitidos por garrapatas

Las garrapatas pueden transmitir numerosos agentes patógenos, lo que les confiere gran importancia como vectores. En el país la anaplasmosis bovina está presente en más del 50% de todo el ganado muestreado, a su vez el estado de Baja California ha reportado el más alto índice de defunciones por Rickettsia rickettsii, por último, Erlichia chaffeensis se detectó en el 5.5% de roedores Peromyscus spp. lo que representa un riesgo potencial para los seres humanos. La PCR en tiempo real se considera una alternativa a los ensayos moleculares convencionales debido a su mayor sensibilidad y rapidez. Por lo que en el presente trabajo se optimizaron protocolos de PCR tiempo real cuantitativo mediante la realización de curva estándar, para el diagnóstico de R. rickettsi, E.chaffensis y Anaplasma phagocytophilum en garrapatas de hospederos silvestres, como el venado cola blanca, del estado de Nuevo León, lo que será de vital importancia para visualizar el riesgo de la población humana de la zona.Ticks can transmit numerous pathogens, which gives them great importance as vectors. In the country bovine anaplasmosis is present in more than 50% of all the cattle sampled, in turn the state of Baja California has reported the highest death rate by Rickettsia rickettsii, finally, Erlichia chaffeensis was detected in 5.5% of rodents Peromyscus spp. what represents a potential risk for human beings. Real-time PCR is considered an alternative to conventional molecular assays due to its greater sensitivity and speed. Therefore, in the present work, quiantitaive real time PCR protocols were optimized by performing a standar curve for the diagnosis of R. rickettsi, E.chaffensis and Anaplasma phagocytophilum in ticks of wild hosts, such as white-tailed deer, from the state of Nuevo León, which will be of vital importance to be able to visualize the risk of the human population of the area

Anticuerpos anti-Trypanosoma cruzi en migrantes latinoamericanos en tránsito por el cruce fronterizo entre México y los Estados Unidos

Introduction: In recent years, American trypanosomiasis has become an emergent public health problem in countries receiving migrant populations such as México, USA, Canada or those in Europe.Objective: To analyze the prevalence of anti-Trypanosoma cruzi antibodies in Latin American migrants on their way to USA and Canada by means of serological techniques.Material and methods: ELISA and IHA were performed to detect anti-T. cruzi antibodies. Also, each participant filled out a socioeconomic questionnaire to determine the associated factors with seropositive cases, which could facilitate the transmission in the migrants’ country of origin.Results: Total seroprevalence among the studied population was 20% (24/120). The highest prevalence was found in migrants from Guatemala with 37.5% (6/16), followed by Honduras (22.6%; 12/53), El Salvador (16%; 4/25), and México (8.7%, 3/23). From the total 120 surveyed migrants, 105 (87.5%) recognized the vector of Chagas’ disease, and 62 (59%) assured having been bitten by it. Highly significant statistical associations were found between infection and the construction materials for walls and the presence of pets (dogs) inside houses (p≤0.01), as well as with the building materials for backyards, inadequate basic services, and animal breeding inside corrals built around dwellings (p≤0.05).Conclusion: Non-endemic countries receiving migrants from endemic areas should enhance or develop better health policies to prevent transfusion-transmitted Chagas or congenital parasite transmission.Introducción. En los últimos años, la tripanosomiasis americana se ha convertido en un problema de salud pública emergente en países receptores de poblaciones migrantes, como México, Estados Unidos, Canadá y los países europeos.Objetivo. Analizar la prevalencia de anticuerpos anti-Trypanosoma cruzi mediante técnicas serológicas, en los migrantes latinos en su paso hacia Estados Unidos y Canadá.Materiales y métodos. Se hicieron análisis serológicos mediante ELISA y la prueba de hemaglutinación indirecta (HAI) para detectar anticuerpos anti-T. cruzi, y encuestas socioeconómicas para determinar los factores asociados a los casos seropositivos que favorecieron la transmisión en el país de origen de los migrantes.Resultados. La seroprevalencia total en la población estudiada fue del 20 % (24/120). La prevalencia más alta se encontró en migrantes de Guatemala, con 37,5 % (6/16), seguidos de los de Honduras (22,6 %; 12/53), El Salvador (16 %; 4/25) y México (8,7 %; 3/23). De los 120 migrantes encuestados, 105 (87,5 %) reconocieron el vector y 62 (59 %) afirmaron haber sido picados por este. La asociación de la infección con los materiales de construcción de las paredes de las viviendas, así como con la presencia de mascotas (perros) en los hogares, fue muy significativa (p≤0,01). La asociación con el material de construcción del patio, los servicios básicos precarios, así como la cría de animales dentro de corrales en la periferia de los hogares, también fue significativa (p≤0,05).Conclusión. Los países no endémicos que reciben migrantes de zonas endémicas deben mejorar o desarrollar políticas de salud para prevenir la transmisión del parásito por transfusión o por vía congénita

Evaluación in vitro de extractos de plantas medicinales contra Trypanosoma cruzi, agente causal de la enfermedad de Chagas

La enfermedad de Chagas, causada por Trypanosoma cruzi, representa un importante problema de salud pública en América Latina ya que afecta entre 6-7 millones de personas. El tratamiento común para esta enfermedad es el uso de nifurtimox y benznidazol. No obstante, estos fármacos presentan diversos efectos adversos y baja eficacia según la fase de la enfermedad y el genotipo del parásito; por lo cual es necesaria la búsqueda de nuevos tratamientos alternativos. En este trabajo se evaluó la actividad tripanosomicida de los extractos acuosos y metanólicos de Trigonella foenum-graecum y Haematoxylum brasiletto sobre epimastigotes de las cepas Y y Nuevo León de T. cruzi mediante el método del bromuro de 3-(4,5-dimetiltiazol-2- ilo)-2,5-difeniltetrazol (MTT) y conteo en cámara de Neubauer. Todos los extractos mostraron tener buena actividad tripanosomicida al ser las concentraciones letales encontradas menores que las reportadas contra otros microorganismos, además estos extractos han sido reportados como no tóxicos en otras investigaciones.Chagas disease, caused by Trypanosoma cruzi, represents an important public health problem in Latin America, affecting between 6-7 million people. The common treatment for this disease is the use of nifurtimox and benznidazole. However, these drugs produce adverse side effects and present low efficacy according to the stage of the disease and the parasite genotype; therefore, the search for new alternative treatments is necessary. For this reason, in this work we evaluated the trypanosomicidal activity of the aqueous and methanolic extracts of Trigonella foenum-graecum and Haematoxylum brasiletto on epimastigotes of the strains Y and Nuevo Leon of T. cruzi, using the colorimetric method of the 3-(4,5-Dimethylthiazolyl-2)-2,5-Diphenyl Tetrazolium Bromide (MTT) and the Neubauer chamber. All the extracts showed good trypanosomicidal activity, being the lethal concentrations found lower than those reported against other microorganisms, in addition, these extracts have been reported as non-toxic according to the established in other investigations

Agentes infecciosos de Litopenaeus vannamei (Boone, 1931) y su relación con parámetros físicoquímicos de tres diferentes sistemas de cultivo en el golfo de México.

La producción de camarón aumentó de 33.480 toneladas por año en 2000-2001 a 128 000 t en el período 2008-2009, lo que representa el 69% de la producción total en México. Se colectaron muestras de L. vannamei desde 2008 hasta 2009, durante dos ciclos de producción de tres granjas de camarón en el estado de Tamaulipas. Durante el ciclo 2009, se analizaron un total de 600 organismos; 180 de Reynosa, 180 de La Pesca, y 240 de Morón. Se midio el oxígeno disuelto (OD, mg/L) y la temperatura (°C) dos veces al día (mañana y noche). La salinidad, el pH y la turbidez del agua se midieron diariamente. Durante el ciclo de cultivo del 2008, un total de 660 organismos fueron muestreados. Este estudio representa el primer registro geográfico de la presencia de L. mucor, Zoothamnium sp, Epistylis sp, Acineta sp y Nematopsis sp en L. vannamei de piscifactorías en Tamaulipas

Efecto de los extractos de plantas medicinales en los cultivos de Trypansoma cruzi, causante de la tripanosomiasis americana

La enfermedad de Chagas es una enfermedad parasitaria tropical, generalmente crónica, causada por el protozoo hemoflagelado Trypanosoma cruzi. Se extiende desde el Sur de EUA hasta Sudamérica. Durante el desarrollo de la enfermedad se presentan dos etapas: una aguda y una crónica, causando una sintomatología diferente en cada una de estas. Actualmente sólo se conocen dos fármacos con los que se puede tratar puede tratar a la tripanosomiasis: el nifurtimox y el benznidazol, ambos con una toxicidad alta y sólo son útiles durante la fase aguda. El objetivo fue: determinar la actividad de extractos metanólicos de cinco plantas medicinales usadas en el Noreste de México en los cultivos de Trypanosoma cruzi, entre las plantas utilizadas se encuentran Schinus molle (Pirul), Marrubium vulgare (Marrubio), Ruta chalepensis (Ruda), Persea americana (Aguacate) y Lippia graveolens (Orégano); de las cuales las dos primeras mostraron una actividad inhibitoria importante contra el crecimiento del parásito con una IC₅₀ de 16.31 µg/ml para S. molle y 22.66 µg/ml para M. vulgar.Chagas disease is usually a chronic tropical parasitic disease, which is caused by the haemoflagellate protozoan Trypanosoma cruzi. It is extends from the southern US to South America. During the development of the disease, it presents two stages: acute and chronic, causing different symptoms in each one of them. The unique available medicines are currently and nifurtimox and benznidazole, both them are highly toxic and are useful only during the acute phase. The objective of this work was to determine the activity of methanol extracts of five medicinal plants used in northeastern Mexico on cultures of Trypanosoma cruzi; the studied plants were Schinus molle (Pirul) Marrubium vulgare (Marrubio), Ruta chalepensis (Ruda), Persea americana (aguacate) and Lippia graveolens (Oregano). The first two showed significant inhibitory activity against the growth of protozoans, with an IC₅₀ of 16.31 µg/ml for S. molle and 22.66 µg/ml for M. vulgar