Garantia da qualidade dos exames de fenotipagem ABO e RhD: revisão de escopo

Entre os 43 sistemas de grupos sanguíneos já descritos, que contemplam 345 antígenos eritrocitários, apenas os antígenos do sistema ABO e o antígeno RhD do sistema Rhesus (Rh) são rotineiramente avaliados para a seleção dos hemocomponentes devido às características dos seus respectivos anticorpos. O objetivo deste estudo foi sintetizar os critérios para a garantia da qualidade dos exames de fenotipagem ABO e RhD. Foi realizada uma revisão narrativa descritiva da literatura, com abordagem dos temas relacionados à técnica, à evolução dos reagentes e às especificações da qualidade. A determinação laboratorial do fenótipo ABO/RhD se mostra harmonizada internacionalmente, utilizando reagentes que detectam a presença ou ausência dos antígenos/anticorpos eritrocitários através de reações sorológicas de hemaglutinação por diferentes técnicas. A substituição dos reagentes policlonais por monoclonais tem proporcionado testes com anticorpos de alta qualidade, mais potentes e específicos. As normativas preconizam, em vários países, a avaliação dos reagentes antes do uso, sendo no Brasil especificada para cada lote/remessa recebida. Controles internos, durante o uso, e externos da qualidade também são preconizados aos serviços de hemoterapia brasileiros, europeus, britânicos, australianos e neozelandeses. Assim, foi observada robustez na legislação brasileira quanto à garantia da qualidade dos exames imuno-hematológicos

The top-down approach to measurement uncertainty: which formula should we use in laboratory medicine?

Introduction: By quantifying the measurement uncertainty (MU), both the laboratory and the physician can have an objective estimate of the results’ quality. There is significant flexibility on how to determine the MU in laboratory medicine and different approaches have been proposed by Nordtest, Eurolab and Cofrac to obtain the data and apply them in formulas. The purpose of this study is to compare three different top-down approaches for the estimation of the MU and to suggest which of these approaches could be the most suitable choice for routine use in clinical laboratories. Materials and methods: Imprecision and bias of the methods were considered as components of the MU. The bias was obtained from certified reference calibrators (CRC), proficiency tests (PT), and inter-laboratory internal quality control scheme (IQCS) programs. The bias uncertainty, the combined and the expanded uncertainty were estimated using the Nordtest, Eurolab and Cofrac approaches. Results: Using different approaches, the expanded uncertainty estimates ranged from 18.9-40.4%, 18.2-22.8%, 9.3-20.9%, and 7.1-18.6% for cancer antigen (CA) 19-9, testosterone, alkaline phosphatase (ALP), and creatinine, respectively. Permissible values for MU and total error ranged from 16.0-46.1%, 13.1-21.6%, 10.7-26.2%, and 7.5-17.3%, respectively. Conclusion: The bias was highest using PT, followed by CRC and IQCS data, which were similar. The Cofrac approach showed the highest uncertainties, followed by Eurolab and Nordtest. However, the Eurolab approach requires additional measurements to obtain uncertainty data. In summary, the Nordtest approach using IQCS data was therefore found to be the most practical formula

Análise de recomendações de ajuste de dose de antimicrobianos de acordo com a função renal

Introdução: A doença renal crônica (DRC) é definida como alteração funcional e/ou estrutural do rim e caracterizada por evolução lenta, progressiva e irreversível. Alterações na farmacocinética de antimicrobianos podem ser observadas devido à insuficiência renal, as quais podem ocasionar acúmulo desses medicamentos, levando a reações adversas se posologias não forem ajustadas. Frente a diversidade de informações, o objetivo deste estudo foi comparar as recomendações de ajuste de dose de antimicrobianos, de acordo com a função renal, em diferentes bases de dados. Método: Foram selecionados 77 antimicrobianos e três bases de dados, Medscape®, Micromedex® e UpToDate®. A concordância entre as bases de dados e as recomendações para o uso dos antimicrobianos, categorizados segundo a Anatomical Therapeutic Chemical Code, foi analisada pelo coeficiente de Kappa. Resultados: Recomendações numéricas, as quais consideram o clearance de creatinina e/ou a taxa de filtração glomerular estimada, foram encontradas para a maior parte dos antimicrobianos e nenhum medicamento teve seu uso contraindicado na DRC. A base de dados Medscape® apresentou o maior número de ausência de recomendação, para 33,7% dos antimicrobianos, seguida de 11,6% no Micromedex® e 1,2% no UpToDate®. O ajuste de dose foi considerado desnecessário para 39,5% dos antimicrobianos analisados no UpToDate®, 20,9% no Micromedex® e 11,6% no Medscape®. O coeficiente Kappa indicou concordância moderada entre a categorização de recomendações e entre as bases de dados. Conclusão: As discrepâncias observadas dificultam a decisão sobre qual base de dados é mais confiável e demonstram a necessidade de uniformização das recomendações, para que o ajuste de dose seja confiável e de fácil aplicação

Implementation of Internal Quality Control in Clinical Laboratories of Portuguese Speaking Countries

ProMeQuaLab (Laboratory Quality Improvement Project for Portuguese Speaking Countries) is an ongoing project started in 2015 aiming to improve the quality of laboratory results in Portuguese Speaking countries ( It focuses on training in laboratory quality control, implementation and monitoring of quality indicators, and the organisation of a biennial congress. In 2023 within the scope of ProMeQuaLab and in collaboration with the National Health Institute Doctor Ricardo Jorge ( and the Faculty of Pharmacy of University of Lisbon, the Master's thesis "Development of tools and documentation for implementation of laboratory Quality Control in Portuguese Speaking countries" is being carried out. AIMS: Development and application tools for implementation of Internal Quality Control in the areas of Clinical Chemistry and Haematology, in PLP laboratories, from February to August 2023info:eu-repo/semantics/publishedVersio

Laboratory quality improvement project (ProMeQuaLab): One Health in Portuguese-speaking Countries

A abordagem de “Uma só Saúde” é essencial para identificar, monitorizar, controlar, prevenir e erradicar as doenças transmissíveis entre o homem e os animais, permitindo uma vigilância epidemiológica eficaz. A qualidade dos dados de diagnóstico laboratorial de doenças de origem humana e ani- mal, é imprescindível para a vigilância epidemiológica de base laboratorial eficaz das zoonoses. O ProMeQuaLab (Projeto da Melhoria da Qualidade Laboratorial) visa a ca- pacitação de técnicos no diagnóstico laboratorial, para avaliação, monitori- zação e otimização do desempenho das metodologias utilizadas, de modo a gerar informação harmonizada, padronizada e comparável, que possa ser partilhada para ser avaliada epidemiologicamente. As atividades na área clínica humana já realizadas neste projeto desde 2015, foram alargadas à área veterinária desde 2023, com planeamento de aplica- ção de questionários para caracterizar os laboratórios veterinários, avaliar o seu nível de implementação do controlo da qualidade, identificar necessida- des de formação, e implementar melhoria da capacidade instalada e forma- ção de profissionais. Os documentos já produzidos e os profissionais já formados no âmbito das atividades do ProMeQuaLab serão multiplicadores do conhecimento para aplicação na área veterinária. Promover “Uma Só Saúde” exige ampliar oportunidades de formação e profis- sionais no diagnóstico laboratorial, fortalecendo laboratórios para oferecer ser- viços de alta qualidade e contribuir para promoção da saúde humana e animal.The One-Health approach is essential to identify, monitor, control, prevent and eradicate diseases communicable between humans and animals, enabling effective epidemiological surveillance. The quality of laboratory diagnostic data for diseases of human and animal origin is essential for effective laboratory-based epidemiological surveillance of zoonoses. ProMeQuaLab (Laboratory Quality Improvement Project) aims to train technicians in laboratory diagnosis to evaluate, monitor and optimize the performance of the methodologies used, in order to generate harmonized, standardized and comparable information, which can be shared for epidemiological investigation. Activities in the human clinical area already carried out in this project since 2015, have been extended to the veterinary area since 2023, with planning to apply questionnaires to characterize veterinary laboratories, evaluate their level of implementation of quality control, identify training needs, and implement improvements in installed capacity and training of professionals. The technical and scientific documents already produced and the profes- sionals already trained within the scope of ProMeQuaLab activities will be multipliers of knowledge for application in the veterinary field. Promoting One Health requires expanding training opportunities and professio- nals in laboratory diagnosis, strengthening laboratories to offer high-quality services contributing to the promotion of human and animal health.info:eu-repo/semantics/publishedVersio

Interferência do ácido ascórbico em determinações bioquímicas

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências da Saúde. Programa de Pós-Graduação em FarmáciaO ácido ascórbico (AA), quando presente em amostras biológicas, pode interferir nos ensaios laboratoriais modificando o diagnóstico clínico-laboratorial. Os objetivos desse estudo foram: i) avaliar o grau de interferência de várias doses de AA nos ensaios bioquímicos séricos e urinários que utilizam reações de óxido-redução, em amostras coletadas em diferentes períodos de tempo após a ingestão de vitamina C; ii) comparar o nível de interferência do AA em diferentes "kits" e tiras reativas para urinálise após a adição do AA; iii) verificar o tempo de oxidação do AA em amostras de soro necessário para diminuir o efeito interferente e; iv) estudar os possíveis mecanismos da interferência do AA em ensaios baseados no sistema de reação oxidase/peroxidase com 4-aminofenazona e compostos fenólicos (Trinder). Após a ingestão de 0,15 a 4 g/d de vitamina C por uma semana, os níveis séricos de AA elevaram-se significativamente provocando inibição até 12 e 24 h após a ingestão nas determinações séricas de bilirrubina total e ácido úrico, respectivamente (p<0,05). Colesterol total, glicose e creatinina não sofreram interferências, enquanto que os triglicerídeos apresentaram uma inibição 12 h após a ingestão de 4 g/d de vitamina C. Os níveis urinários de AA foram suficientemente elevados para provocar uma inibição significativa nas reações para a detecção de glicose e hemoglobina urinárias, inclusive em amostras coletadas após 48 h a ingestão. A adição ao soro de AA, em concentrações semelhantes àquelas encontradas após a suplementação vitamínica, causou interferências significativas nas reações para a determinação de ácido úrico, enquanto doses maiores de AA, encontradas após a administração endovenosa, também interferiram nas reações para triglicerídeos, colesterol, glicose e bilirrubina. A comparação dos níveis de interferência ex vivo e in vitro demonstraram que o AA parece interferir no metabolismo da bilirrubina, enquanto que para os demais analitos a interferência foi somente analítica. O AA adicionado em diferentes concentrações às amostras de urina também provocou inibição nas reações para a detecção de glicose, hemoglobina, nitrito, bilirrubina e, em menor extensão, para leucócitos. Em geral, o grau de interferência foi diretamente proporcional à concentração de AA e inversamente proporcional à quantidade de analito na amostra. As diferentes marcas de "kits" e tiras reativas estudadas não apresentaram diferenças importantes em relação ao efeito interferente do AA. Dependendo da concentração de AA, o mesmo continuou a interferir nas reações de Trinder, principalmente para ácido úrico, até 72 h após a adição do AA. Os resultados dos estudos in vitro demonstraram que o ácido de hidroascórbico não interferiu nas reações. A quantificação do AA nas amostras de soro demonstrou uma estabilidade elevada se comparada com a sua meia-vida em solução aquosa, sendo este o responsável pela prolongada interferência. O estudo do mecanismo de interferência demonstrou que o AA interfere nas reações de Trinder com 4-aminofenazona e compostos fenólicos através do consumo do peróxido de hidrogênio, responsável pela formação do cromógeno oxidado. O AA não interferiu, portanto, com os constituintes da reação nem tampouco na redução do cromógeno oxidado. Baseados nesses resultados, podemos concluir que mesmo pequenas doses de AA provocaram importantes interferências nos ensaios laboratoriais, dependendo do tempo em que as amostras foram coletadas após a ingestão. Assim, para evitar resultados falso-negativos sugerimos a suspensão da ingestão de altas doses de vitamina C (2-4g), 48 e 72 h antes das coletas de sangue e de urina, respectivamente. Devido à alta estabilidade do AA no soro, para evitar o efeito interferente é necessário esperar um tempo superior ao recomendado para a realização dos ensaios. Finalmente, baseado no mecanismo de interferência, podemos sugerir que substâncias redutoras do AA deveriam ser acrescentadas aos reagentes para aumentar a resistência contra o efeito interferente do AA, tendo em vista que a 4-aminofenazona e os compostos fenólicos não reagiram com o AA

EFFECTS OF PROBIOTIC INTAKE ON INTESTINAL BIFIDOBACTERIA OF CELIAC PATIENTS

ABSTRACT BACKGROUND Healthy individuals exhibit a significantly higher concentration of faecal bifidobacteria in comparison to celiac patients. Even though there are potential benefits in probiotic usage, they have been little explored as an adjunctive therapy in celiac disease. OBJECTIVE This study aimed at the comparison of faecal bifidobacteria concentration and pH among celiac patients and healthy subjects before and after the daily intake of 100 g of yogurt containing probiotic for a thirty-day period. METHODS Feces from 17 healthy subjects and 14 celiac patients were analyzed, in which stool culture was performed for the isolation and quantification of faecal bifidobacteria. Furthermore, Gram’s method was employed for the microscopic analysis of the colonies, while the identification of the Bifidobacterium genus was made through determination of the fructose-6-phosphate phosphoketolase enzyme. Faecal pH was measured using a calibrated pHmeter. RESULTS Faecal bifidobacteria concentration before probiotic consumption was significantly higher in healthy individuals (2.3x108±6.3x107 CFU/g) when compared to celiac patients (1.0x107±1.7x107 CFU/g). Faecal pH values did not show a significant difference. After the daily consumption of probiotic-containing yogurt both groups showed a significant increase in the concentration of faecal bifidobacteria, but healthy subjects presented significantly higher bifidobacteria concentrations (14.7x108±0.2x108 CFU/g) than the celiac group (0.76x108±0.1x108 CFU/g). The obtained pH values from both groups were not significantly different, being 7.28±0.518 for the celiac patients and 7.07±0.570 for healthy individuals after the probiotic intake. CONCLUSION The probiotic supplementation significantly increased the number of bifidobacteria in the feces of celiac patients, although it was not sufficient to reach the concentration found in healthy individuals prior to its consumption

Tuberculous Meningitis: a case report of a late diagnosis

Introduction: Tuberculous meningitis (TM) is the most severe form of tuberculosis, it has high morbidity and mortality. Once it is diagnosed early, treatment response is excellent. Objective: To report and discuss a case of delayed diagnosis of TM. Methodology: It was selected a case from University Hospital of Federal University of Santa Catarina, the analysis of medical records was performed and discussed based on the scientific literature. Results: It was reported the case of a patient that was diagnosed with leukocytoclasticvasculitis (LV) for six months and was admitted presenting granulomatous lung injury, weight loss, fever and dry cough for eigth months. The delay in the diagnosis of tuberculosis (TB) allowed an evolution to TM and the late onset of treatment impaired the patient’s prognosis. It was discussed the vasculitis as a first symptom of tuberculosis, which can occur by deposition of immune complexesformed by antibodies against antigens of bacilli in the vascular wall. Conclusions: Previous diagnosis of LV deviated the focus of the case for their cause, and suggested other pathologic conditions, which contributed to delay in the diagnosis of TB. Despite the late diagnosis and treatment, the therapeutic approaches used for vasculitis, TB and TM followed the protocols described in the literature

LOWER BIFIDOBACTERIA COUNTS IN ADULT PATIENTS WITH CELIAC DISEASE ON A GLUTEN-FREE DIET

Context The ingestion of gluten is responsible for the symptoms of Celiac disease, but other environmental factors can also influence. Strains of the Bifidobacterium genus have been shown to afford protection against the inflammatory response and mucosal damage caused by gliadin peptides in vitro. Objectives This study was designed to compare the concentration of fecal bifidobacteria and pH of patients with celiac disease on gluten-free diet and control subjects in order to identify if the imbalance on fecal microbiota still remain during the treatment of celiac disease and identify the necessity of dietary supplementation with pre- or probiotics. Methods It was analyzed the feces of 42 healthy subjects and 14 celiac patients. The bifidobacteria count in feces was done in selective medium BIM-25. Microscopic analysis of the colonies was performed by Gram stain. The identification of the genus Bifidobacterium was performed by determination of fructose-6-phosphate phosphoketolase. Fecal pH was measured using a pH meter. Results The concentration of bifidobacteria per gram of feces was significantly higher in healthy subjects (controls) (1.5 ± 0.63 x108 CFU/g) when compared to celiac patients (2.5 ± 1.5 x107 CFU/g). The fecal pH was not different between celiac patients (7.19 ± 0.521) and controls (7.18 ± 0.522). Conclusions These results suggest that with lower levels of bifidobacteria, celiac patients have an imbalance in the intestinal microbiota, regardless of pH, even while on a gluten-free diet. This fact could favor the pathological process of the disorder