Avaliação da atividade antifúngica dos compostos cumarínicos frente às cepas do gênero aspergillus.

In recent decades fungal infections have increased, and their high rates of morbidity and mortality have brought them much attention. Immunocompromised patients are more susceptible to microorganism infections; in particular, fungal species of the genus Aspergillus spp. Among the current infectious filamentous fungi they have a rather high incidence. Antifungal treatments have been subjected to numerous studies, and the increasing number of resistant fungal species has been highlighted. Thus, we see the importance of seeking new, more effective, and less toxic therapeutic sources. The aim of this study was to evaluate the in vitro antifungal activity and structure activity relationships of coumarin compounds against Aspergillus species. For this the MIC of 24 coumarin compounds was determined and subsequent SAR studies were performed with computer software. 12 of the 24 tested coumarin derivatives have antifungal activity, with 5 has shown excelent activity. Thus two derivatives, 7-hydroxy-6-nitrocoumarin (Cou-UNO2), and 4-acetoxycoumarin (Cou-UMB16), with better MIC values were evaluated via inhibition of mycelial growth and conidial germination, and by mechanism of action testing. The products were evaluated in combination with antifungals standards. The results showed that 12 of the 24 tested coumarin derivatives have antifungal activity, with MIC values ranging from 1024-16μg/ml. SAR studies have showed that the presence of a short aliphatic chain, and/or electronegative groups like ring substituents are favorable for antifungal activity. The coumarin derivatives with better MIC values (16μg/ml); Cou-UNO2 and Cou-UMB16 were capable of inhibiting both the mycelial growth and conidial germination of Aspergillus spp. Their activity is on the structure of the fungal cell wall. Cou-NO2, in a sub-inhibitory concentration, enhanced the in vitro effects of azoles, and in combination with azoles (voriconazole and itraconazole) there was an additive effect. Cou-UMB16 in combination with azoles (voriconazole and itraconazole) had synergistic or additive effects depending on the strain used. Thus this study concludes that coumarin derivatives have antifungal activity against the species A. flavus and A. fumigatus. The coumarin Cou-UMB16 and Cou-UNO2 have able to inhibit the mycelial growth and conidio germination and that this activity is due to its action on the fungal cell wall and the presence of electronegative groups as substituents of the benzopyrone ring favors this activity.Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPESAs infecções fúngicas, nas últimas décadas, têm se destacado devido ao seu crescente aumento e suas elevadas taxas de morbidade e mortalidade. Pacientes imunocomprometidos são os que possuem maior susceptibilidade a estes micro-organismos. Dentre estas infecções fúngicas, as espécies pertencentes ao gênero Aspergillus spp. possuem alta incidência entre os fungos filamentosos. A terapêutica antifúngica tem sido alvo de numerosos estudos e nestes tem sido destacado o crescente aumento de espécies fúngicas resistentes. Dessa forma, destaca-se a importância da busca de novas fontes terapêuticas que se apresentem mais eficazes e com menos tóxicas ao hospedeiro. Assim o objetivo deste estudo foi avaliar a atividade antifúngica in vitro e relação estrutura atividade (SAR) dos compostos cumarínicos frente às espécies do gênero Aspergillus. Para tal foi determinada a CIM de 24 compostos cumarínicos e posteriormente realizado estudos SAR com softwares computacionais. Dos 24 compostos ensaiados, 12 demonstraram possuir atividade antifúngica e 5 obtiveram forte atividade antifúngica. Destes derivados cumarínicos com forte atividade antifúngica, dois merecem destaque, 7-hidroxi-6-nitrocumarina (Cou-UNO2) e 4-acetóxicumarina (Cou-UMB16), com melhores valores de CIM, foram avaliados via testes de inibição do crescimento micelial, germinação dos conídios e testes de determinação do mecanismo de ação. Por fim os produtos foram avaliados em combinação com antifúngicos padrões. Os resultados demonstraram que 12 derivados cumarínicos dos 24 ensaiados possuem atividade antifúngica, com valores de CIMs variando entre 1024-16μg/mL. A SAR demonstra que a adição de grupos eletronegativos, como substituintes do anel benzopirona, favorece a atividade antifúngica destes compostos. Os derivados cumarínicos com melhores CIM (16μg/mL), 7-hidroxi-6-nitrocumarina (Cou-UNO2) e 4-acetóxicumarina (Cou-UMB16) foram capazes de inibir o crescimento micelial e a germinação dos conídios de Aspergillus spp. E estes possuem ação sobre a estrutura da parede celular fúngica. Em uma concentração subinibitória, Cou-UNO2 potencializou a ação in vitro dos derivados azólicos e em combinação com os derivados azólicos (voriconazol e itraconazol) observou-se um efeito aditivo. Já Cou-UMB16 em combinação com os derivados azólicos (voriconazol e itraconazol) obteve um efeito sinérgico a aditivo, dependendo da linhagem utilizada. Logo este estudo conclui que os derivados cumarínicos possuem atividade antifúngica contra as espécies de A. flavus e A. fumigatus. As cumarinas Cou-UNO2 e Cou-UMB16 foram capazes de inibir o crescimento micelial e a germinação dos conídios e que esta atividade seja devido a sua ação sobre a parede celular fúngica. E que esta atividade é favorecida pela presença de moléculas eletronegativas no anel básico da cumarina (1,2-benzopirona)

Distribuicao de dermatofitos isolados de solos de cidades do Estado da Paraiba, Brasil

SUMMARY The dermatophytes, keratinophilic fungi, represent important microorganisms of the soil microbiota, where there are cosmopolitan species and others with restricted geographic distribution. The aim of this study was to broaden the knowledge about the presence of dermatophytes in soils of urban (empty lots, schools, slums, squares, beaches and homes) and rural areas and about the evolution of their prevalence in soils of varying pH in cities of the four mesoregions of Paraiba State, Brazil. Soil samples were collected from 31 cities of Paraiba State. Of 212 samples, 62% showed fungal growth, particularly those from the Mata Paraibana mesoregion (43.5%), which has a tropical climate, hot and humid. Soil pH varied from 4.65 to 9.06, with 71% of the growth of dermatophytes occurring at alkaline pH (7.02 - 9.06) (ρ = 0.000). Of 131 strains isolated, 57.3% were geophilic species, particularly Trichophyton terrestre (31.3%) and Mycrosporum gypseum (21.4%). M. nanum and T. ajelloi were isolated for the first time in Paraiba State. The zoophilic species identified were T. mentagrophytes var. mentagrophytes (31.3 %) and T. verrucosum (7.6 %), and T. tonsurans was isolated as an anthropophilic species. The soils of urban areas including empty lots, schools, slums and squares of cities in the mesoregions of Paraiba State were found to be the most suitable reservoirs for almost all dermatophytes; their growth may have been influenced by environmental factors, soils with residues of human and/or animal keratin and alkaline pH.RESUMO Os dermatófitos, fungos queratinofílicos, representam importantes microrganismos da microbiota do solo, onde existem espécies cosmopolitas e outras de distribuição geográfica restrita. Este estudo teve como objetivo ampliar o conhecimento da distribuição de dermatófitos do solo proveniente de áreas urbanas (terrenos baldios, escolas, favelas, praças, praias e residências) e rurais de quatro mesorregiões paraibanas e da influência do pH na adaptação desse grupo de fungos. Amostras de solos urbanos e rurais foram coletadas de 31 cidades do estado da Paraíba, Brasil. De 212 amostras 62% apresentaram crescimento fúngico, destacando-se a Mesorregião da Mata Paraibana (43.5%), a qual apresenta clima tropical, quente e úmido. O pH das amostras de solo variou de 4.65 a 9.06, com crescimento de 71% dos dermatófitos em pH alcalino (7.02 - 9.06) (ρ = 0.000). Das 131 cepas isoladas 57.3% eram espécies geofílicas, destacando-se Trichophyton terrestre (31.3%) e Microsporum gypseum (21.4%). M. nanum e T. ajelloi foram isolados pela primeira vez no estado da Paraíba. Entre as espécies zoofílicas foram identificadas T. mentagrophytes var. mentagrophytes (31.3%) e T. verrucosum (7.6%) e como espécie antropofílica foi isolada T. tonsurans. Os solos de terrenos baldios, escolas, favelas e praças de cidades paraibanas são os reservatórios mais adequados dos dermatófitos, cujo crescimento pode ter sido influenciado por fatores ambientais, solos com resíduos de queratina humana e ou animal e pH alcalino

Estudo do potencial antifúngico e do mecanismo de ação do timol contra cepas de Candida parapsilosis resistentes ao fluconazol e a anfotericina B

Objetivo: Investigar a suscetibilidade antifúngica do timol contra cepas de Candida parapsilosis isoladas de sangue humano, bem como seu possível mecanismo de ação. Métodos: Foram utilizadas técnicas de microdiluição em placas de 96 poços para determinar a concentração inibitória mínima (CIM) e concentração fungicida mínima (CFM). Além disso, foram realizados testes com o sorbitol e o ergosterol para investigar a ação do timol na parede e na membrana celular fúngica respectivamente. Resultados: Nos testes de CIM e CFM, foi observado que as cepas de C. parapsilosis são resistentes ao fluconazol e a anfotericina B, no entanto, o timol desempenhou efeito fungicida com razão CFM/CIM entre 1 e 2. Além disso, a CIM do timol não aumentou quando o sorbitol ou o ergosterol foi adicionado no meio, sugerindo fortemente que este monoterpeno não age na parede celular fúngica ou por ligação ao ergosterol na membrana plasmática. Conclusão: Portanto, esses resultados contribuem para a elucidação do mecanismo de ação do timol, sugerindo outros possíveis alvos de interação fármaco-receptor. No entanto, mais investigações de caráter enzimático e molecular em modelos in vitro são necessários para que se possa elucidar completamente o modo de ação desse promissor monoterpeno

Antifungal Activity of Essential Oils against Candida albicans

Objective. The objective of this study was to analyze the antifungal activity of citral, selected by screening natural products, against Candida albicans isolates from subjects who use dental prostheses. Methodology. Screening of essential oils, including those from Mentha piperita L. (Briq), Origanum vulgare, and Zingiber officinale L., and the phytoconstituents citral and limonene, to select an appropriate natural product. Citral, which mediated the best antifungal response, was selected for biological assays. The minimum inhibitory concentrations (MICs) and minimum fungicidal concentrations (MFCs) for citral and nystatin were determined by the microdilution method. Micromorphological analyses, time-kill curve, and modulation tests were performed. Results. The MIC and MFC of citral were established as 32 μg/mL, consistent with fungicidal activity. The clinical strains were resistant to nystatin. Citral caused micromorphological alteration in the strains. In the time-kill curve, the growth of the clinical strain was reduction in growth equal to 3 log10 colony-forming units per milliliter after exposure to the MIC and MIC×2 of citral for 2 h. Citral did not modulate the resistance of the studied strains to nystatin. Conclusion. This study revealed the potential of citral as a fungicidal agent and highlighted the resistance of clinical strains of C. albicans to nystatin

Atividade antibacteriana do óleo essencial de Citrus limon frente cepas multidroga resistentes do gênero Acinetobacter.

Acinetobacter species have gained importance in recent years due to their increased involvement in serious infections and antimicrobial resistance. Since multidrug resistant bacteria pose a challenge to the treatment of infections, it is necessary to find new substances with antimicrobial properties in combating these microorganisms. Thus, medicinal plants are studied, since they are used for treatment of various illnesses. Therefore, many studies on biological activity have been performed with essential oils obtained from medicinal plants, such as the essential oil from Citrus limon (EOCL), attempting to help overcome this problem. Thus the present study aimed to evaluate the effect of the essential oil of EOCL against multidrug resistant strains of Acinetobacter spp. Its chemical composition was determined by GC/MS and its antibacterial activity was assessed by determining their MIC and MBC by microplate bioassay, its Time kill too was determinated. Also was analyzed the effect of modulating action of conventional antibiotics by microplate bioassay. Among phytochemicals, Neral (29.4%) presented as the major essential component of EOCL. The oil caused growth inhibition in 16 (67%) of 24 strains tested, showing a MIC of 625 μg/ml and MBC of 1250 μg/mL. In a time kill study, the oil displayed a concentration-dependent antibacterial activity. Results of combining antibiotics and EOCL had shown us a synergistic and additive effect with EOCL /antibiotics combinations. The results of this study suggest that essential oil of C. limon may suppress the growth of Acinetobacter species and could be a source of metabolites with modified antibacterial activity.Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPESEspécies do gênero Acinetobacter ganharam importância nos últimos anos devido ao seu envolvimento crescente em infecções graves e resistência antimicrobiana. Uma vez que bactérias resistentes a múltiplas drogas representam um desafio para o tratamento de infecções, é necessário encontrar novas substâncias com propriedades antimicrobianas no combate a estes microrganismos. Para tentar superar este panorama, várias pesquisas vêm sendo desenvolvidas em busca de novos produtos antibacterianos, dentre elas estão os estudos com os metabólitos de plantas, como o óleo essencial de Citrus limon (OECL). Assim, o presente estudo teve como objetivo avaliar o efeito do óleo essencial de Citrus limon contra cepas de Acinetobacter multidroga resistentes. Sua composição química foi determinada por CG/EM e sua atividade antibacteriana avaliada pela determinação de sua CIM e CBM pela técnica de microdiluição, sua cinética de morte microbiana também foi analisada. Verificou-se também seu efeito modulador da ação dos antibióticos convencionais por técnicas de microdiluição. Entre os fitoconstituintes, neral (29,4%) apresenta-se como o principal componente de OECL. O referido óleo inibiu o crescimento de 67% das 24 cepas ensaiadas, tendo sua CIM estabelecida em 625 μg/mL e a CBM em 1250 μg/mL Este óleo possui atividade antibacteriana dependente de sua concentração e do tempo de exposição no microrganismo e é um modulador da ação dos antibióticos convencionais. Os resultados deste estudo sugerem que o referido óleo pode suprimir o crescimento de espécies de Acinetobacter e poderia ser uma fonte de metabólitos com atividade modificadora antibacteriana

Evaluation of Antifungal Activity and Mode of Action of New Coumarin Derivative, 7-Hydroxy-6-nitro-2H-1-benzopyran-2-one, against Aspergillus spp.

Aspergillus spp. produce a wide variety of diseases. For the treatment of such infections, the azoles and Amphotericin B are used in various formulations. The treatment of fungal diseases is often ineffective, because of increases in azole resistance and their several associated adverse effects. To overcome these problems, natural products and their derivatives are interesting alternatives. The aim of this study was to examine the effects of coumarin derivative, 7-hydroxy-6-nitro-2H-1-benzopyran-2-one (Cou-NO2), both alone and with antifungal drugs. Its mode of action against Aspergillus spp. Cou-NO2 was tested to evaluate its effects on mycelia growth and germination of fungal conidia of Aspergillus spp. We also investigated possible Cou-NO2 action on cell walls (0.8 M sorbitol) and on Cou-NO2 to ergosterol binding in the cell membrane. The study shows that Cou-NO2 is capable of inhibiting both the mycelia growth and germination of conidia for the species tested, and that its action affects the structure of the fungal cell wall. At subinhibitory concentration, Cou-NO2 enhanced the in vitro effects of azoles. Moreover, in combination with azoles (voriconazole and itraconazole) Cou-NO2 displays an additive effect. Thus, our study supports the use of coumarin derivative 7-hydroxy-6-nitro-2H-1-benzopyran-2-one as an antifungal agent against Aspergillus species