Erythrina velutina Willd. alkaloids: Piecing biosynthesis together from transcriptome analysis and metabolite profiling of seeds and leaves

Introduction: Natural products of pharmaceutical interest often do not reach the drug market due to the associated low yields and difficult extraction. Knowledge of biosynthetic pathways is a key element in the development of biotechnological strategies for plant specialized metabolite production. The scarce studies regarding non-model plants impair advances in this field. Erythrina spp. are mainly used as central nervous system depressants in folk medicine and are important sources of bioactive tetracyclic benzylisoquinoline alkaloids, which can act on several pathology-related biological targets. Objective: Herein the purpose is to employ combined transcriptome and metabolome analyses (seeds and leaves) of a non-model medicinal Fabaceae species grown in its unique arid natural habitat. The study tries to propose a putative biosynthetic pathway for the bioactive alkaloids by using an omic integrated approach. Methods: The Next Generation Sequencing-based transcriptome (de novo RNA sequencing) was carried out in a Illumina NextSeq 500 platform. Regarding the targeted metabolite profiling, Nuclear Magnetic Resonance and the High-Performance Liquid Chromatography coupled to a micrOTOF-QII, High Resolution Mass Spectrometer, were used. Results: This detailed macro and micromolecular approach applied to seeds and leaves of E. velutina revealed 42 alkaloids by metabolome tools. Based on the combined evidence, 24 gene candidates were put together in a putative pathway leading to the singular alkaloid diversity of this species. Conclusion: These results contribute by indicating potential biotechnological targets Erythrina alkaloids biosynthesis as well as to improve molecular databases with omic data from a non-model medicinal plant. Furthermore, they reveal an interesting chemical diversity in Erythrina velutina harvested in Caatinga. Last, but not least, this data may also contribute to tap Brazilian biodiversity in a rational and sustainable fashion, promoting adequate public policies for preservation and protection of sensitive areas within the Caatinga

Estudo do res?duo gerado pela ind?stria cervejeira artesanal, trub quente, caracteriza??o fitoqu?mica e avalia??o de atividades antimicrobiana e antioxidante.

Disserta??o (Mestrado em Biotecnologia) ? N?cleo de Pesquisas em Ci?ncias Biol?gicas, Universidade Federal de Ouro Preto, Ouro Preto, 2018.Durante o processo de produ??o de cerveja, grandes volumes de res?duos s?o gerados, e por possu?rem baixo valor agregado, s?o destinados ? alimenta??o animal ou eliminados diretamente no ambiente. O trub quente, segundo res?duo obtido no processo de produ??o de cerveja pela adi??o do l?pulo, ? um subproduto predominantemente prot?ico e com quantidades consider?veis de l?pulo, entretanto, devido ? baixa solubilidade de alguns compostos e/ou insuficiente extra??o, o trub quente pode ser considerado fonte de compostos com atividade biol?gica. Desta forma, os objetivos deste estudo foram realizar a caracteriza??o qu?mica e avaliar as atividades biol?gicas do extrato etan?lico bruto (EEB) e suas fra??es, frente a ensaios antimicrobianos, antioxidantes e citot?xico. Em an?lises realizadas por CLUE-DAD-EM/EM, foi poss?vel sugerir a presen?a de alguns constituintes qu?micos, baseando na massa molecular e nos padr?es de fragmenta??o estabelecidos na literatura, pertencentes ? classe dos flavonoides (xanthohumol e isoxanthohumol) e compostos derivados dos ?-?cidos (cohulupona, hulupona/adhulupona, ep?meros de hidroxitriciclocolupona, ep?meros de hidroxitriciclolupona/hidroxitricicloadlupona e nortriciclocolupona), todos provenientes do l?pulo. As an?lises qu?micas quantitativas demonstraram que o teor de compostos fen?licos nas fra??es BuOH (13,39?0,45 mg EAG/g) e AcOEt (12,28?0,74 mg EAG/g) foram superiores ?s concentra??es obtidas para o EEB e fra??o Hex. No entanto, as concentra??es de flavonoides totais foram maiores nas fra??es menos polares, n?o diferindo estatisticamente, entre EBB e fra??es Hex e AcOEt (1,31?0,19 mg EQ/g, 1,17?0,16 mg EQ/g, 1,64?0,32 mg EQ/g, respectivamente). Na atividade antioxidante, observaram-se valores inferiores de CE50, obtidos para as fra??es, quando determinados pelo m?todo ABTS. Foi constada, atrav?s de teste de correla??o de Spearman, a necessidade de utiliza??o de mais de uma metodologia para determina??o da atividade antioxidante, devido a n?o proporcionalidade dos resultados apresentados pelos m?todos ABTS e DPPH. Baixa e/ou negativa correla??o, n?o significante, foi obtida entre os teores de compostos fen?licos e flavonoides totais e a atividade antioxidante, atrav?s do teste de correla??o de Spearman, indicando que a atividade resultante n?o se relaciona majoritariamente com compostos pertencentes a estas classes. A atividade antimicrobiana, determinada pelos m?todos de difus?o em ?gar e microdilui??o em caldo, revelaram que todos os extratos foram capazes de inibir o crescimento de pelo menos um microrganismo testado, sendo menores valores de CIM e maiores %AAT, encontrados para a fra??o Hex, contra bact?rias Gram-positivas. Observou-se que a AAT do EEB foi, em geral, foi superior ? soma da AAT das fra??es (?AAT), indicando, no entanto, que n?o houve uma a??o sin?rgica entre os componentes das fra??es. Correla??es majorit?rias, fracas e/ou negativas, por?m, n?o significativas, foram observadas entre os teores de compostos fen?licos e flavonoides totais e a atividade antimicrobiana, determinadas pelo teste de correla??o de Spearman, indicando, que esses compostos n?o s?o majoritariamente respons?veis pela atividade apresentada. Atrav?s da CI50 (0,76?0,2 mg/mL) obtida para fra??o Hex, avaliada em c?lulas de fibroblastos L929, foi poss?vel constatar alta atividade inibit?ria contra bact?rias gram-positivas, uma vez que a mesma apresentou CIM inferiores ? CI50 para todas as bact?rias, exceto para E. faecium. Esses resultados mostram-se promissores e indicam um grande potencial da aplica??o de compostos presentes na fra??o Hex para futuros estudos para tratamento de infec??es causadas por S. aureus, S. aureus MARSA, S. saprophyticus, L. monocytogenes e E. faecalis.During the brewing process, large volumes of waste are generated, and because they have low added value, are destined to animal feed or disposed directly in the environment. The trub, second solid waste obtained in brewing process by the addition of hops, is predominantly a protein by-product and with considerable quantities of hops, however, due to the low solubility of some compounds and/or insufficient extraction, hot trub can be considered a source of compounds with biological activity. Therefore, the aims of this work were to perform the chemical characterization and evaluate the biological activities of the crude ethanolic extract (CEE) and fractions, through antimicrobial, antioxidant and cytotoxic assays. Based on UHPLC-DAD-MS/MS, it was possible to suggest the presence of some chemical constituents, based on the molecular mass and the fragmentation patterns established in the literature, belonging to the class of flavonoids (xanthohumol and isoxanthohumol) and compounds derived from ?-acids (cohulupone, hulupone/adhulupone, hydroxytricyclocolupone epimers, hydroxytricyclolupone/hydroxytricicloadlupone epimers and nortricyclocolupone), all from hops. Quantitative chemical analysis showed that the content of phenolic compounds in BuOH fractions (13.39 ? 0.45 mg GAE/g) and AcOEt (12.28 ? 0.74 mg GAE/g) were higher than the concentrations obtained for CEE and Hex fraction. However, concentrations of total flavonoids were higher in the less polar fractions, not statistically differing, between CEE and Hex and AcOEt fractions (1.31 ? 0.19 mg EQ/g, 1.17 ? 0.16 mg EQ/g, 1.64 ? 0.32 mg EQ/g, respectively). In the antioxidant activity, lower values of EC50 were obtained for the fractions when determined by the ABTS method. The use of more than one methodology to determine the antioxidant activity was verified through Spearman's correlation test, due to the non-proportionality of the results presented by the ABTS and DPPH methods. High correlation, but not significant, was obtained between the contents of phenolic compounds and total flavonoids and antioxidant activity, through the Spearman correlation test, indicating that the resulting activity is not related mainly to compounds belonging to these classes. The antimicrobial activity , determined by broth agar and microdilution methods, revealed that all the extracts could inhibit the growth of at least one microorganism tested, being lower values of MIC and higher percentage of antimicrobial activity (%TAA) found for the fraction Hex, against Gram-positive bacteria. It was observed that the total antimicrobial activity (TAA) of the CEE was, in general, higher than the sum of TAA of the fractions (?TAA), indicating, however, that there was no synergistic action among the components of the fractions. Non-significant, weak and/or negative correlations were observed between total phenolic compounds and total flavonoids and antimicrobial activity, as determined by the Spearman correlation test, indicating that these compounds are not predominantly responsible for the presented activity. The IC50 (0.76 ? 0.2 mg / mL) obtained for Hex fraction, evaluated in L929 fibroblast cells, showed that high inhibitory activity against gram-positive bacteria, since the same showed MIC lower than IC50 for all bacteria, except for E. faecium. These results are promising and indicate a great potential of the application of compounds present in the Hex fraction for future studies to treat infections caused by S. aureus, S. aureus MARSA, S. saprophyticus, L. monocytogenes and E. faecalis

DIFICULDADES DE APRENDIZAGEM E RETARDO MENTAL: ESTUDO DE CASO

O diagnóstico precoce é sempre um forte aliado na terapêutica de qualquer patologia, inclusive em casos de retardo mental. Assim, pode-se planejar uma intervenção mais adequada e efetiva, viabilizando a inserção social do indivíduo. O objetivo deste estudo é observar o quadro de Dificuldades de Aprendizagem como manifestação de Retardo Mental em dois irmãos gêmeos de 5 anos e 7 meses, cursando o Estágio II (série que antecede o Ensino Fundamental em dois anos) de uma escola de rede pública de ensino de São Paulo. Para a sua elaboração foram aplicados, nas crianças, testes do desenvolvimento em várias áreas e um teste de inteligência, e realizadas entrevistas dirigidas com sua mãe e suas professoras. Desta forma, dispusemos de informações acerca do desenvolvimento motor, psicológico e social dos gêmeos, as quais possibilitarão o acompanhamento dos quadros de maneira mais próxima do ideal

Linfoma anaplásico de células grandes associado à implante mamário - revisão de literatura / Anaplastic large cell lymphoma associated with breast implant - literature review

Os implantes mamários têm sido amplamente utilizados e estão sujeitos a complicações, sendo um deles o linfoma anaplásico de grandes células associado ao implante de mama (BIA-ALCL). Assim, este trabalho objetiva trazer atualizações acerca dessa relação para melhor prognóstico.

ELABORAÇÃO DE SORVETES FUNCIONAIS ADICIONADOS DE FRUTA EXÓTICA

Atualmente, os consumidores têm mostrado grande preocupação em adquirir produtos mais nutritivos e saudáveis, com sabores diferenciados e, acima de tudo, seguro para o consumo. Isso é uma tendência de mercado e, sendo o sorvete muito apreciado no Brasil, o objetivo deste estudo foi desenvolver e otimizar sorvetes funcionais adicionados de kinkan. Para este efeito, foram usadas três fibras dietéticas (amido modificado, polidextrose e inulina) isoladas e em diferentes combinações, a fim de se obter um produto rico em fibras e em compostos bioativos. Verificou-se que o kinkan tem boas propriedades físico-químicas, tanto em sua forma in natura e quanto processado, além de possuir elevados teores de antioxidantes. Estas características fazem com que o kinkan seja uma boa escolha para ser adicionado aos sorvetes rico em fibras. O sorvete funcional adicionado com kinkan demonstrou boa aceitabilidade, alta atividade antioxidante e alto teor de compostos fenólicos, o que o torna uma alternativa saudável e interessante para o mercado de alimentos funcionais. No que diz respeito as fibras utilizadas, pode-se concluir que, para uma melhor aceitabilidade do consumidor, deve ser adicionado inulina (0,25% a 0,75%) e polidextrose (0,25% a 0,75%) na formulação dos sorvete

Elabora??o de sorvetes funcionais adicionados de fruta ex?tica.

Atualmente, os consumidores t?m mostrado grande preocupa??o em adquirir produtos mais nutritivos e saud?veis, com sabores diferenciados e, acima de tudo, seguro para o consumo. Isso ? uma tend?ncia de mercado e, sendo o sorvete muito apreciado no Brasil, o objetivo deste estudo foi desenvolver e otimizar sorvetes funcionais adicionados de kinkan. Para este efeito, foram usadas tr?s fi bras diet?ticas (amido modifi cado, polidextrose e inulina) isoladas e em diferentes combina??es, a fi m de se obter um produto rico em fi bras e em compostos bioativos. Verifi cou-se que o kinkan tem boas propriedades f?sico-qu?micas, tanto em sua forma in natura e quanto processado, al?m de possuir elevados teores de antioxidantes. Estas caracter?sticas fazem com que o kinkan seja uma boa escolha para ser adicionado aos sorvetes rico em fi bras. O sorvete funcional adicionado com kinkan demonstrou boa aceitabilidade, alta atividade antioxidante e alto teor de compostos fen?licos, o que o torna uma alternativa saud?vel e interessante para o mercado de alimentos funcionais. No que diz respeito as fi bras utilizadas, podese concluir que, para uma melhor aceitabilidade do consumidor, deve ser adicionado inulina (0,25% a 0,75%) e polidextrose (0,25% a 0,75%) na formula??o dos sorvetes

Ticks infesting wildlife species in Northeastern Brazil with new host and locality records

From September 2008 to March 2010, 397 ticks (315 larvae, 33 nymphs, 23 females, and 26 males) were collected from captive and free-living wildlife species in northeastern Brazil. Six tick species were identified, including Amblyomma auricularium (Conil) on Tamandua tetradactyla (L), Amblyomma dubitatum Neumann on Hydrochaeris hydrochaeris (L.), Nectomys rattus (Pelzen) and T. tetradactyla, Amblyomma parvum Aragão on T. tetradactyla, Amblyomma rotundatum Koch on Boa constrictor L., Chelonoidis carbonaria (Spix), Kinosternon scorpioides (L.) and Rhinella jimi (Stevaux), Amblyomma varium Koch on Bradypus variegatus Schinz, and Rhipicephalus sanguineus (Latreille) on Lycalopex vetulus (Lund). Nectomys rattus and T. tetradactyla are new hosts for A. dubitatum. This study extends the known distribution of A. dubitatum in South America and provides evidence that its geographical range has been underestimated because of the lack of research. Four (A. dubitatum, A. parvum, A. rotundatum, and R. sanguineus) of six tick species identified in this study have previously been found on humans in South America, some of them being potentially involved in the transmission of pathogens of zoonotic concer