Nucleophile-Catalyzed Additions to Activated Triple Bonds. Protection of Lactams, Imides, and Nucleosides with MocVinyl and Related Groups

Additions of lactams, imides, (S)-4-benzyl-1,3-oxazolidin-2-one, 2-pyridone, pyrimidine-2,4-diones (AZT derivatives), or inosines to the electron-deficient triple bonds of methyl propynoate, tert-butyl propynoate, 3-butyn-2-one, N-propynoylmorpholine, or N-methoxy-N-methylpropynamide in the presence of many potential catalysts were examined. DABCO and, second, DMAP appeared to be the best (highest reaction rates and E/Z ratios), while RuCl3, RuClCp*(PPh3)2, AuCl, AuCl(PPh3), CuI, and Cu2(OTf)2 were incapable of catalyzing such additions. The groups incorporated (for example, the 2-(methoxycarbonyl)ethenyl group that we name MocVinyl) serve as protecting groups for the above-mentioned heterocyclic CONH or CONHCO moieties. Deprotections were accomplished via exchange with good nucleophiles: the 1-dodecanethiolate anion turned out to be the most general and efficient reagent, but in some particular cases other nucleophiles also worked (e.g., MocVinyl-inosines can be cleaved with succinimide anion). Some structural and mechanistic details have been accounted for with the help of DFT and MP2 calculations

Synthesis of a Non-Radioactive Hepatitis B Virus DNA Probe from Human Serum by the Polymerase Chain Reaction

Peer Reviewe

Programa de cribado para el déficit de alfa-antitripsina en pacientes con EPOC mediante el uso de gota de sangre en papel secante

El déficit de a1-antitripsina (AAT) es una enfermedad infradiagnosticada, por lo que se recomienda establecer programas de cribado en pacientes con EPOC. Presentamos los resultados de la fase piloto de un programa de cribado del déficit de AAT, con el objetivo de evaluar la técnica utilizada, los circuitos de envío de muestras y los resultados obtenidos. Participaron en el estudio 5 centros, que recogieron durante el período de un mes muestras de todos los pacientes con EPOC en los que nunca se hubieran determinado las concentraciones plasmáticas de AAT o el fenotipo Pi. Se aplicaron gotas de sangre capilar sobre discos de papel secante, que posteriormente se enviaban por correo postal al laboratorio central del estudio. Las muestras se procesaron para la determinación cuantitativa de los valores de AAT mediante un método de inmunonefelometría y, para la determinación del genotipo de AAT, con un analizador de ADN del tipo LightCycler. Se analizaron muestras de 86 pacientes con EPOC (76 varones, 10 mujeres) con una edad media de 68,2 años. En 74 pacientes (86%) se descartó el déficit por presentar concentraciones de AAT por encima del punto de corte establecido, aunque uno de ellos fue heterocigoto MZ por genotipificación. De los 12 restantes (13,9%), sólo 2 individuos presentaban también un alelo Z. El resto correspondió a pacientes con concentraciones por debajo del umbral establecido y sin evidencia del alelo Z (10 pacientes; 11,6%). La frecuencia observada del alelo Z (3/172; 1,74%) es muy similar a la encontrada en la población general. Los resultados de esta fase inicial permiten comprobar el correcto funcionamiento del circuito utilizado para la obtención y envío de las muestras. Es un método aplicable, cómodo y bien aceptado por los médicos participantes y permite la cuantificación de AAT, así como la detección del alelo deficitario Z en las muestras con una excelente correlación con las técnicas estándar que usan muestras de sangre total

Ultra-Deep Pyrosequencing Detects Conserved Genomic Sites and Quantifies Linkage of Drug-Resistant Amino Acid Changes in the Hepatitis B Virus Genome

Selection of amino acid substitutions associated with resistance to nucleos(t)ide-analog (NA) therapy in the hepatitis B virus (HBV) reverse transcriptase (RT) and their combination in a single viral genome complicates treatment of chronic HBV infection and may affect the overlapping surface coding region. In this study, the variability of an overlapping polymerase-surface region, critical for NA resistance, is investigated before treatment and under antiviral therapy, with assessment of NA-resistant amino acid changes simultaneously occurring in the same genome (linkage analysis) and their influence on the surface coding region