Human Breast Tumour Effect Cells Viability of African Dioscorea rotundata Tuber Extracts in MCF-7 and MDA-MB231 Cell Lines

Objective: We aim to test the efficacy of edible Dioscorea species grown and consumed in Nigeria, Africa on two breast cancer cell lines; MCF-7 and MDAMB231 derived from a luminal and a Triple-Negative Breast Cancer (TNBC) respectively and to confirm safety in non-tumour cells MCF-10A using a wellestablished cytotoxic compound paclitaxel as a standard. Metastatic breast cancer is a prevalent cause of mortality in women around the world. Breast cancer therapies have greatly advanced in recent years, but many patients develop cancer re-occurrence and metastasis and subsequently yield to the disease because of chemoresistance. Methods: Ethanolic extracts of Dioscorea rotundata boiled and raw (DiosB and DiosR) respectively were chemically analyzed for the presence of diosgenin using HPLC and the cytotoxic activities of the extracts were tested on MCF-7, MDA-MB-231 and MCF-10 A cells In vitro by MTT assay. Results: DiosB and DiosR extracts showed a higher maximal effect on MCF-7 cells than on MDA-MB231 after 24 h and 48 h treatments (p<0.0001 and p<0.05 respectively). DiosR, if applied at a range between 50-70 g/ml, can be effective to reduce breast tumor cell viability without affecting non tumorigenic MCF-10 A cells either at 24 h or at 48 h. DiosB showed an IC50 of 38.83 µg/ml while DiosR showed an IC50 of 41.80 µg/ml. Conclusion: These results show that ethanolic extracts of Dioscorea rotundata tubers could be used effectively to treat breast cancer tumors and this is in sync with its diosgenin content as other Dioscorea species applied for similar treatments in Asia and elsewhere.Fil: Odimegwu, Joy. University Of Lagos; NigeriaFil: Odukoya Olukemi. University Of Lagos; NigeriaFil: Español, Alejandro Javier. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Centro de Estudios Farmacológicos y Botánicos. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Centro de Estudios Farmacológicos y Botánicos; ArgentinaFil: Rosales, Eliana María. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Centro de Estudios Farmacológicos y Botánicos. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Centro de Estudios Farmacológicos y Botánicos; Argentin

Breast cancer: Muscarinic receptors as new targets for tumor therapy

The development of breast cancer is a complex process that involves theparticipation of different factors. Several authors have demonstrated the overexpressionof muscarinic acetylcholine receptors (mAChRs) in different tumortissues and their role in the modulation of tumor biology, positioning them astherapeutic targets in cancer. The conventional treatment for breast cancerinvolves surgery, radiotherapy, and/or chemotherapy. The latter presentsdisadvantages such as limited specificity, the appearance of resistance totreatment and other side effects. To prevent these side effects, several schedules ofdrug administration, like metronomic therapy, have been developed. Metronomictherapy is a type of chemotherapy in which one or more drugs are administeredat low concentrations repetitively. Recently, two chemotherapeutic agents usuallyused to treat breast cancer have been considered able to activate mAChRs. Thecombination of low concentrations of these chemotherapeutic agents withmuscarinic agonists could be a useful option to be applied in breast cancertreatment, since this combination not only reduces tumor cell survival withoutaffecting normal cells, but also decreases pathological neo-angiogenesis, theexpression of drug extrusion proteins and the cancer stem cell fraction. In thisreview, we focus on the previous evidences that have positioned mAChRs asrelevant therapeutic targets in breast cancer and analyze the effects of administeringmuscarinic agonists in combination with conventional chemotherapeuticagents in a metronomic schedule.Fil: Español, Alejandro Javier. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Centro de Estudios Farmacológicos y Botánicos. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Centro de Estudios Farmacológicos y Botánicos; ArgentinaFil: Salem, Agustina Reina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Centro de Estudios Farmacológicos y Botánicos. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Centro de Estudios Farmacológicos y Botánicos; ArgentinaFil: Sanchez, Yamila. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Centro de Estudios Farmacológicos y Botánicos. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Centro de Estudios Farmacológicos y Botánicos; ArgentinaFil: Sales, María Elena. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Centro de Estudios Farmacológicos y Botánicos. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Centro de Estudios Farmacológicos y Botánicos; Argentin

Nicotinic receptors modulate antitumor therapy response in triple negative breast cancer cells

Triple negative breast cancer is more aggressive than other breast cancer subtypes and constitutes a public health problem worldwide since it has high morbidity and mortality due to the lack of defined therapeutic targets. Resistance to chemotherapy complicates the evolution of these patients. Several authors have highlighted the participation of nicotinic acetylcholine receptors (nAChR) in the modulation of conventional chemotherapy treatment in lung, head and neck, oral and nasal cavity, and pancreatic cancers. However, in smoking cancer patients, the action of nicotine on nAChR expressed in the breast or other organs near the tumor during chemotherapy treatment is less known.AIMTo investigate the effect of nicotine on paclitaxel treatment and the signaling pathways involved in human breast MDA-MB231 tumor cells.METHODSCells were treated with paclitaxel alone or in combination with nicotine, administered for one or three 48 h cycles. The effect of the addition of nicotine (in a concentration similar to that found in smokers? blood) on the treatment with paclitaxel (in a therapeutic concentration) was determined by using the 3-(4,5 dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide assay. The signaling mediators involved in this effect were determined by using selective inhibitors. We also investigated nAChR expression, and ATP ?binding cassette? G2 drug transporter (ABCG2) expression and its modulation by the different treatments by Western blot. The effect of the treatments on apoptosis induction was determined by flow cytometry using annexin-V and 7AAD markers. RESULTSOur results confirmed that the treatment with paclitaxel reduced MDA-MB231 cell viability in a concentration-dependent manner and that the presence of nicotine reversed the cytotoxic effect induced by paclitaxel by involving the expression of functional α7 and α9 nAChRs in these cells. The action of nicotine on paclitaxel treatment was linked to the modulation of the protein kinase C, mitogen-activated protein kinase, extracellular signal-regulated kinase, and NF-B signaling pathways, and to an up-regulation of ABCG2 protein expression. We also detected that nicotine significantly reduced the increase in cell apoptosis induced by paclitaxel treatment. Moreover, we observed that the presence of nicotine reduced the efficacy of paclitaxel treatment administered in three cycles to MDA-MB231 tumor cells. CONCLUSIONOur findings point to nAChRs as responsible for the decrease in the chemotherapeutic effect of paclitaxel in triple negative tumors. Thus, they should be considered as targets in smoking patients.Fil: Español, Alejandro Javier. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Centro de Estudios Farmacológicos y Botánicos. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Centro de Estudios Farmacológicos y Botánicos; ArgentinaFil: Sanchez, Yamila. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Centro de Estudios Farmacológicos y Botánicos. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Centro de Estudios Farmacológicos y Botánicos; ArgentinaFil: Salem, Agustina Reina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Centro de Estudios Farmacológicos y Botánicos. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Centro de Estudios Farmacológicos y Botánicos; ArgentinaFil: Obregon, Jaqueline. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Centro de Estudios Farmacológicos y Botánicos. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Centro de Estudios Farmacológicos y Botánicos; ArgentinaFil: Sales, María Elena. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Centro de Estudios Farmacológicos y Botánicos. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Centro de Estudios Farmacológicos y Botánicos; Argentin

Cholinergic Actions of Autoantibodies from Breast Cancer Patients on Dendritic Cells

Autoantibodies (autoAbs) against self-proteins have been localized in tumor microenvironment exerting acomplex network of interactions. We reported the presence of autoAbs in breast cancer patients, which promotetumor progression by activating muscarinic acetylcholine receptors (mAChR) in tumor cells. Cholinergic receptorsare also expressed in dendritic cells (DC) and much clear evidence demonstrated a deficient functional activity ofDC in cancer. Here we investigated whether autoAbs can modulate the expression of maturation markers and theproduction of cytokines by DC. IgG from breast cancer patients in stage I reduced the expression of HLA-DR andCD86 as well as tumor necrosis factor alpha liberation and augmented interleukin IL-12 and IL-10 levels bycholinergic activation of mature DC. The latter cytokines are also up-regulated in patients? sera, probably due totumor influence, since the addition of breast tumor extract increased cytokine levels in immature DC reaching levelsof mature DC mainly for IL-10 and IL-12. It could be assumed that autoAbs are reinforcing the tolerogenic/immunosuppressive profile mediated by DC in breast cancer.Fil: Lombardi, María Gabriela. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Centro de Estudios Farmacológicos y Botánicos. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Centro de Estudios Farmacológicos y Botánicos; ArgentinaFil: Salamone, Gabriela Veronica. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Medicina Experimental. Academia Nacional de Medicina de Buenos Aires. Instituto de Medicina Experimental; ArgentinaFil: Gori, María Soledad. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Medicina Experimental. Academia Nacional de Medicina de Buenos Aires. Instituto de Medicina Experimental; ArgentinaFil: Oroño Marcano, Manuel Alejandro. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Centro de Estudios Farmacológicos y Botánicos. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Centro de Estudios Farmacológicos y Botánicos; ArgentinaFil: Español, Alejandro Javier. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Centro de Estudios Farmacológicos y Botánicos. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Centro de Estudios Farmacológicos y Botánicos; ArgentinaFil: Sales, María Elena. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Centro de Estudios Farmacológicos y Botánicos. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Centro de Estudios Farmacológicos y Botánicos; Argentin

The rigid steroid 21-hydroxy-6,19-epoxyprogesterone (21OH-6,19OP) is a dissociated glucocorticoid receptor modulator potentially useful as a novel coadjuvant in breast cancer chemotherapy

Glucocorticoids (GCs) are steroid hormones widely used as coadjuvants in the treatment of solid tumors due to their anti-inflammatory effects. However, evidence show that they also may induce chemotherapy resistance, probably through their capacity to inhibit apoptosis triggered by antineoplastic drugs. GCs exert their action by regulating gene expression throughout two main mechanisms: transactivation, where the activated glucocorticoid receptor (GR) directly binds to certain genes; and transrepression, an indirect mechanism by which GR regulates other transcription factors activities. Recently, our group has shown that the rigid steroid 21-hydroxy-6,19-epoxyprogesterone (21OH-6,19OP) is a selective GR ligand that behaves as an agonist in transrepression assays and as an antagonist in transactivation ones. Here, we have evaluated the anti-inflammatory activity of 21OH-6,19OP, its capacity to generate chemoresistance, as well as its mechanism of action. We found that 21OH-6,19OP inhibits nitrites formation and the inducible nitric oxide synthase (Nos-2) expression in macrophages. It also blocks the expression of both cyclooxygenase-2 (COX-2) and interleukin-8 (IL-8) triggered by tumor necrosis factor-alpha (TNF-α) in epithelial lung cancer cells. However, contrary to dexamethasone (DEX), 21OH-6,19OP neither reverts the paclitaxel-induced caspase-3 activity, nor induces the anti-apoptotic Bcl-XL gene expression in murine tumor mammary epithelial cells; and importantly, it lacks GCs-associated chemoresistance in a mouse mammary tumor model. Together, our findings suggest that 21OH-6,19OP behaves as a dissociated GC that keeps anti-inflammatory action without affecting the apoptotic process triggered by chemotherapeutic drugs. For these reasons, this steroid may become a putative novel coadjuvant in the treatment of breast cancer.Fil: Orqueda, Andres Javier. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Ciudad Universitaria. Instituto de Fisiología, Biología Molecular y Neurociencias; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Departamento de Química Biológica; ArgentinaFil: Dansey, Maria Virginia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Ciudad Universitaria. Instituto de Fisiología, Biología Molecular y Neurociencias; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Departamento de Química Orgánica; ArgentinaFil: Español, Alejandro Javier. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Centro de Estudios Farmacológicos y Botánicos; ArgentinaFil: Veleiro, Adriana Silvia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Ciudad Universitaria. Unidad de Microanálisis y Métodos Físicos Aplicados a la Química Orgánica (i); Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Departamento de Química Orgánica; ArgentinaFil: Bal, Elisa Dora. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Oncologia "Angel H. Roffo"; ArgentinaFil: Sales, Maria Elena. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Centro de Estudios Farmacológicos y Botánicos; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina; ArgentinaFil: Burton, Gerardo. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Ciudad Universitaria. Unidad de Microanálisis y Métodos Físicos Aplicados a la Química Orgánica (i); Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Departamento de Química Orgánica; ArgentinaFil: Pecci, Adali. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Ciudad Universitaria. Instituto de Fisiología, Biología Molecular y Neurociencias; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Departamento de Química Biológica; Argentin

The metronomic combination of paclitaxel with cholinergic agonists inhibits triple negative breast tumor progression. Participation of M2 receptor subtype

Triple negative tumors are more aggressive than other breast cancer subtypes and there is a lack of specific therapeutic targets on them. Since muscarinic receptors have been linked to tumor progression, we investigated the effect of metronomic therapy employing a traditional anti-cancer drug, paclitaxel plus muscarinic agonists at low doses on this type of tumor. We observed that MDA-MB231 tumor cells express muscarinic receptors, while they are absent in the non-tumorigenic MCF-10A cell line, which was used as control. The addition of carbachol or arecaidine propargyl ester, a non-selective or a selective subtype 2 muscarinic receptor agonist respectively, plus paclitaxel reduces cell viability involving a downregulation in the expression of ATP “binding cassette” G2 drug transporter and epidermal growth factor receptor. We also detected an inhibition of tumor cell migration and anti-angiogenic effects produced by those drug combinations in vitro and in vivo (in NUDE mice) respectively. Our findings provide substantial evidence about subtype 2 muscarinic receptors as therapeutic targets for the treatment of triple negative tumors.Fil: Español, Alejandro Javier. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Centro de Estudios Farmacológicos y Botánicos. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Centro de Estudios Farmacológicos y Botánicos; ArgentinaFil: Salem, Agustina Reina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Centro de Estudios Farmacológicos y Botánicos. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Centro de Estudios Farmacológicos y Botánicos; ArgentinaFil: Di Bari, María. Università degli Studi di Roma "La Sapienza"; ItaliaFil: Cristofaro, Ilaria. Università degli Studi di Roma "La Sapienza"; ItaliaFil: Sanchez, Yamila. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Centro de Estudios Farmacológicos y Botánicos. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Centro de Estudios Farmacológicos y Botánicos; ArgentinaFil: Tata, Ada Maria. Università degli Studi di Roma "La Sapienza"; ItaliaFil: Sales, María Elena. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Centro de Estudios Farmacológicos y Botánicos. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Centro de Estudios Farmacológicos y Botánicos; Argentin

Hexachlorobenzene promotes angiogenesis in vivo, in a breast cancer model and neovasculogenesis in vitro, in the human microvascular endothelial cell line HMEC-1

Exposure to environmental pollutants may alter proangiogenic ability and promotes tumor growth. Hexachlorobenzene (HCB) is an organochlorine pesticide found in maternal milk and in lipid foods, and a weak ligand of the aryl hydrocarbon receptor (AhR). HCB induces migration and invasion in human breast cancer cells, as well as tumor growth and metastasis in vivo. In this study, we examined HCB action on angiogenesis in mammary carcinogenesis. HCB stimulates angiogenesis and increases vascular endothelial growth factor (VEGF) expression in a xenograft model with the human breast cancer cell line MDA-MB-231. Human microvascular endothelial cells HMEC-1 exposed to HCB (0.005, 0.05, 0.5 and 5 μM) showed an increase in cyclooxygenase-2 (COX-2) and VEGF protein expression involving AhR. In addition, we found that HCB enhances VEGF-Receptor 2 (VEGFR2) expression, and activates its downstream pathways p38 and ERK1/2. HCB induces cell migration and neovasculogenesis in a dose-dependent manner. Cells pretreatment with AhR, COX-2 and VEGFR2 selective inhibitors, suppressed these effects. In conclusion, our results show that HCB promotes angiogenesis in vivo and in vitro. HCB-induced cell migration and tubulogenesis are mediated by AhR, COX-2 and VEGFR2 in HMEC-1. These findings may help to understand the association among HCB exposure, angiogenesis and mammary carcinogenesis.Fil: Pontillo, Carolina Andrea. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Departamento de Bioquímica Humana; ArgentinaFil: Español, Alejandro Javier. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Centro de Estudios Farmacológicos y Botánicos; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina; ArgentinaFil: Chiappini, Florencia Ana. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Centro de Estudios Farmacológicos y Botánicos; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Departamento de Bioquímica Humana; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina; ArgentinaFil: Miret, Noelia Victoria. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Departamento de Bioquímica Humana; ArgentinaFil: Cocca, Claudia Marcela. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Departamento de Físico Matemática; ArgentinaFil: Alvarez, Laura. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Departamento de Bioquímica Humana; ArgentinaFil: Kleiman, Diana Leonor. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Departamento de Bioquímica Humana; ArgentinaFil: Sales, Maria Elena. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Centro de Estudios Farmacológicos y Botánicos; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina; ArgentinaFil: Randi, Andrea Silvana. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Departamento de Bioquímica Humana; Argentin

Albiglutide and cardiovascular outcomes in patients with type 2 diabetes and cardiovascular disease (Harmony Outcomes): a double-blind, randomised placebo-controlled trial

Background: Glucagon-like peptide 1 receptor agonists differ in chemical structure, duration of action, and in their effects on clinical outcomes. The cardiovascular effects of once-weekly albiglutide in type 2 diabetes are unknown. We aimed to determine the safety and efficacy of albiglutide in preventing cardiovascular death, myocardial infarction, or stroke. Methods: We did a double-blind, randomised, placebo-controlled trial in 610 sites across 28 countries. We randomly assigned patients aged 40 years and older with type 2 diabetes and cardiovascular disease (at a 1:1 ratio) to groups that either received a subcutaneous injection of albiglutide (30–50 mg, based on glycaemic response and tolerability) or of a matched volume of placebo once a week, in addition to their standard care. Investigators used an interactive voice or web response system to obtain treatment assignment, and patients and all study investigators were masked to their treatment allocation. We hypothesised that albiglutide would be non-inferior to placebo for the primary outcome of the first occurrence of cardiovascular death, myocardial infarction, or stroke, which was assessed in the intention-to-treat population. If non-inferiority was confirmed by an upper limit of the 95% CI for a hazard ratio of less than 1·30, closed testing for superiority was prespecified. This study is registered with ClinicalTrials.gov, number NCT02465515. Findings: Patients were screened between July 1, 2015, and Nov 24, 2016. 10 793 patients were screened and 9463 participants were enrolled and randomly assigned to groups: 4731 patients were assigned to receive albiglutide and 4732 patients to receive placebo. On Nov 8, 2017, it was determined that 611 primary endpoints and a median follow-up of at least 1·5 years had accrued, and participants returned for a final visit and discontinuation from study treatment; the last patient visit was on March 12, 2018. These 9463 patients, the intention-to-treat population, were evaluated for a median duration of 1·6 years and were assessed for the primary outcome. The primary composite outcome occurred in 338 (7%) of 4731 patients at an incidence rate of 4·6 events per 100 person-years in the albiglutide group and in 428 (9%) of 4732 patients at an incidence rate of 5·9 events per 100 person-years in the placebo group (hazard ratio 0·78, 95% CI 0·68–0·90), which indicated that albiglutide was superior to placebo (p&lt;0·0001 for non-inferiority; p=0·0006 for superiority). The incidence of acute pancreatitis (ten patients in the albiglutide group and seven patients in the placebo group), pancreatic cancer (six patients in the albiglutide group and five patients in the placebo group), medullary thyroid carcinoma (zero patients in both groups), and other serious adverse events did not differ between the two groups. There were three (&lt;1%) deaths in the placebo group that were assessed by investigators, who were masked to study drug assignment, to be treatment-related and two (&lt;1%) deaths in the albiglutide group. Interpretation: In patients with type 2 diabetes and cardiovascular disease, albiglutide was superior to placebo with respect to major adverse cardiovascular events. Evidence-based glucagon-like peptide 1 receptor agonists should therefore be considered as part of a comprehensive strategy to reduce the risk of cardiovascular events in patients with type 2 diabetes. Funding: GlaxoSmithKline

VIII Encuentro de Docentes e Investigadores en Historia del Diseño, la Arquitectura y la Ciudad

Acta de congresoLa conmemoración de los cien años de la Reforma Universitaria de 1918 se presentó como una ocasión propicia para debatir el rol de la historia, la teoría y la crítica en la formación y en la práctica profesional de diseñadores, arquitectos y urbanistas. En ese marco el VIII Encuentro de Docentes e Investigadores en Historia del Diseño, la Arquitectura y la Ciudad constituyó un espacio de intercambio y reflexión cuya realización ha sido posible gracias a la colaboración entre Facultades de Arquitectura, Urbanismo y Diseño de la Universidad Nacional y la Facultad de Arquitectura de la Universidad Católica de Córdoba, contando además con la activa participación de mayoría de las Facultades, Centros e Institutos de Historia de la Arquitectura del país y la región. Orientado en su convocatoria tanto a docentes como a estudiantes de Arquitectura y Diseño Industrial de todos los niveles de la FAUD-UNC promovió el debate de ideas a partir de experiencias concretas en instancias tales como mesas temáticas de carácter interdisciplinario, que adoptaron la modalidad de presentación de ponencias, entre otras actividades. En el ámbito de VIII Encuentro, desarrollado en la sede Ciudad Universitaria de Córdoba, se desplegaron numerosas posiciones sobre la enseñanza, la investigación y la formación en historia, teoría y crítica del diseño, la arquitectura y la ciudad; sumándose el aporte realizado a través de sus respectivas conferencias de Ana Clarisa Agüero, Bibiana Cicutti, Fernando Aliata y Alberto Petrina. El conjunto de ponencias que se publican en este Repositorio de la UNC son el resultado de dos intensas jornadas de exposiciones, cuyos contenidos han posibilitado actualizar viejos dilemas y promover nuevos debates. El evento recibió el apoyo de las autoridades de la FAUD-UNC, en especial de la Secretaría de Investigación y de la Biblioteca de nuestra casa, como así también de la Facultad de Arquitectura de la UCC; va para todos ellos un especial agradecimiento

Parasympathetic autonomic nervous system modulates the murine mammary adenocarcinoma derived-cell lines biological activity

Existen evidencias contradictoras acerca del efecto que ejerce el sistema nervioso autónomo parasimpático sobre la progresión tumoral. Por esto investigamos el papel que desempeña la activación de los receptores colinérgicos muscarínicos (RCM) (incluidas sus vías de transducción) en líneas celulares derivadas de adenocarcinomas mamarios murinos (LM2 y LM3) en diversas etapas del crecimiento tumoral. Primeramente caracterizamos la expresión de RCM por ensayos de unión y saturación con bencilato de quinuclidinilo, un antagonista muscarínico tritiado. Observamos que las células LM3 expresan mayor número de sitios receptores que las células LM2. Las células de epitelio mamario murino normal NMuMG, no mostraron unión específica del radioligando. Ensayos de desplazamiento con diversos antagonistas muscarínicos: atropina (AT), metoctramina, 4-DAMP y pirenzepina indicaron que el subtipo M2 predomina en las células de ambas líneas tumorales. Utilizando anticuerpos específicos contra los distintos subtipos de RCM (M1-M5) en ensayos de Western blot corroboramos un orden de expresión M2³M4>M3>M1>>M5 en ambas líneas celulares. Las células NMuMG expresan escasamente los subtipos M3 y M2. El tratamiento con el agonista muscarínico carbacol (CARB) durante 15 minutos, estimula la proliferación celular en forma concentración dependiente, siendo la concentración efectiva máxima de CARB 10-7M. La preincubación con AT previno el incremento de la proliferación ejercido por CARB. El agonista no tuvo efecto sobre las células NMuMG en ninguna de las concentraciones utilizadas. En las células LM3 el CARB promueve la proliferación, por activación del receptor M3, induciendo la producción de inositol 1,4,5-trifosfato vía fosfolipasa C (PLC) y óxido nítrico vía óxido nítrico sintasa tipo 1 (NOS1). La proliferación inducida por CARB en las células LM2 necesita la activación de los receptores M2 que promueven la liberación de prostaglandina E2 (PGE2) vía ciclooxigenasa 1 y 2 (COX-1 y COX-2). Además la activación del subtipo M1 estimula la actividad de arginasa. La neoangiogénesis es esencial para el crecimiento tumoral, observamos que ambas líneas tumorales presentan un efecto proangiogénico “per se”, el cual se incrementa por el agregado de CARB. En las células LM3 la activación de los subtipos M1, M2 y M3 induce la participación de las enzimas PLC y NOS; mientras que en las células LM2 la activación de los subtipos M1 y M2 induce la participación de las enzimas COX y arginasa. Este incremento de la angiogénesis puede ser el resultado del incremento en los niveles del factor de crecimiento del endotelio vascular, que produce el tratamiento con CARB, en ambas líneas celulares. También observamos que el CARB incrementó significativamente el crecimiento tumoral “in vivo”. En las células LM3 el efecto se debe a la estimulación de receptores M3 con formación de productos de PLC y NOS1, mientras que en las células LM2 depende de la producción de PGE2 derivada de COX-2 por activación de receptores M1. El tratamiento de las células tumorales con la misma concentración del agonista, que promueve la proliferación pero por tiempos prolongados (hasta 24 hs), produce necrosis y apoptosis de las células tumorales de manera análoga al taxol, droga de elección para el tratamiento del cáncer de mama. Concluimos que la activación parasimpática puede producir efectos antagónicos en células tumorales dependiendo de la duración del estímulo. Así el tratamiento por períodos reducidos (minutos) promueve la proliferación celular, la angiogénesis y el crecimiento tumoral; mientras que el tratamiento prolongado (horas) produce un efecto citotóxico (necrosis/apoptosis) que podría ser favorable en la terapia antineoplásica.Contradictory evidences are stated about the action of parasympathetic nervous system on tumor progression. We here characterize muscarinic acetylcholine receptors (mAchR) expression and activity in relation to tumor cells proliferation, and angiogenesis and in vivo tumor growth Saturation binding assays with tritiated quinuclidinyl benzilate (&#91;3H&#93;-QNB) indicated that LM3 cells express higher amounts of binding sites than LM2 cells, without exhibiting differences in their affinity constants. Normal murine mammary epithelial cells, NMuMG, didn't exhibit &#91;3H&#93;-QNB specific binding. Displacement assays using different muscarinic antagonists: atropine (AT), methoctramine, 4-DAMP y pirenzepine, indicated that M2 receptor subtype is predominant in both cell lines. Western blot assays, performed in LM3 and LM2 membrane enriched fraction, using specific antibodies against mAchR subtypes (M1-M5) revealed the following order of protein receptor expression: M2≥M4>M3>M1>>M5. NMuMG cells slightly express M3 and M2 receptor subtypes. LM3 and LM2 tumor cells treatment with the muscarínic agonist carbachol (CARB) during 15 minutes, stimulates cellular proliferation in a concentration dependent manner being 10-7M the maximal effective dose. The preincubation of cells with AT prevented proliferative action of CARB. NMuMG didn't respond to the agonist at any tested concentration. In LM3 cells, CARB promotes proliferation, by activating M3 receptors, inducing IP3 production via phospholipase C (PLC) and nitric oxide by neuronal nitric oxide synthase (NOS1). Proliferative action of CARB in LM2 cells needs the activation of M2 receptors that promotes prostaglandin E2 (PGE2) liberation by cyclooxygenase-1 and 2 (COX-1 and COX-2). We also demonstrated that arginase products are needed for CARB proliferative action via M1 receptor subtype activation. Neoangiogenesis is essential for tumor growth. We observed that LM3 and LM2 cells are potent angiogenic stimuli, when are inoculated into syngeneic BALB/c mice Preincubation of tumor cells with 10-7M CARB potentated angiogenic response. In LM3 cells the activation of M1, M2 and M3 receptor subtypes triggers the participation of the PLC and NOS enzymes in tumor blood vessels formation; while in LM2 cells, M1 and M2 receptors induce the participation of COX and arginase products. We have also described that CARB is able to stimulate vascular endothelial growth factor levels, that could be up regulating angiogenic response in both tumor cell lines. In addition, CARB stimulated LM3 tumor growth by activating M3 receptors and as a consequence PLC and NOS1 products formation, while the increment in LM2 tumor volume promoted by CARB is due to COX-2 derived PGE2 liberation via M1 receptor activation. Prolonged treatment of tumor cells with 10-7M CARB (24 h) induces necrosis and apoptosis comparable to taxol treatment, a well known effective antineoplastic drug for breast cancer treatment. We can conclude that mAchR activation of murine mammary tumor cells can produce opposite effects depending on the last of action. Short term treatment of tumor cells (15 minutes) promotes cellular proliferation, angiogenesis and the tumora growth; while prolonged treatment (hours) produces cytotoxic effects (necrosis/apoptosis) that could favor antineoplasic therapyFil: Español, Alejandro Javier. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales; Argentina