Education thérapeutique à l'insulinothérapie fonctionnelle au CHU d'Angers au sein d'une cohorte de 124 diabétiques de type 1 (évaluation de l'impact sur les paramètres clinico-biologiques et sur la qualité de vie à 6 mois)

L'insulinothérapie fonctionnelle (IF) est un modèle d'éducation thérapeutique qui a pour objectif d'améliorer l'équilibre glycémique et de restaurer une bonne qualité de vie, en offrant au patient une plus grande souplesse dans le maniement de son traitement. L IF a considérablement amélioré la prise en charge thérapeutique des diabétiques de type 1. Matériel et méthodes : Depuis 2008, un programme d'éducation à l'IF est proposé au CHU d'Angers et a conduit à l'élaboration d'une cohorte de 124 diabétiques de type 1 éduqués à l'IF. Notre travail a consisté à étudier l'évolution de l'équilibre métabolique et de la qualité de vie au sein de cette cohorte. L'hémoglobine glyquée, la fréquence des hypoglycémies sévères et non sévères et le poids ont été analysés. Les questionnaires utilisés pour apprécier la qualité de vie sont l'ADDQoL et le DTSQ. Résultats : Les patients les plus déséquilibrés réduisent leur hémoglobine glyquée de plus de 0,5 %. De plus, les patients dont l'objectif personnalisé est de rééquilibrer leur diabète améliorent également leur HbA1C. Nous ne retrouvons pas de différence significative concernant les hypoglycémies, le poids ou la qualité de vie. Conclusion : Notre étude démontre que l'IF permet d'améliorer l'HbA1C des patients très déséquilibrés. Les patients ayant pour objectif personnalisé de rééquilibrer leur diabète améliorent également leur HbA1C. Ces résultats soulignent l'importance du diagnostic éducatif au sein d'un programme d'ETP, car il permet de susciter la motivation du patient et d'atteindre ainsi les objectifs définis avec l'équipe médicale.Functional intensified insulin therapy (FIT) is a model of structured education program, which objective is to improve glycemic control and to restaure a good quality of life. Giving the patient an easier way to manage his treatment, FIT has improved therapeutic management of type 1 diabetic persons. Material & methods : A structured education program to FIT is proposed in the diabetology unit of the Hospital of Angers since 2008. We followed a cohort of 124 type 1 diabetic patients trained to IIT during 6 months. Our aim is to assess the changes in glycemic control, biomedical outcomes and quality of life of these patients. The questionnaires used to assess quality of life are ADDQoL and DTSQ. Results : Patients with poor glycemic control improve their HbA1C, better than 0,5 % (main outcome). Moreover, patients whose personal objective was improving their metabolic control reach a significant value of HbA1C decrease. There is no difference regarding hypoglycemias, weight or quality of life. Conclusion : Our study show a better improvement of HbA1C among patients with poorer glycemic control, and in patients who attempt to improve their HbA1C. These results highlight the importance of the "shared educational assessment" within structured education programs, which define patients' needs and allow him to achieve this goal, by exploring his motivation to change.ANGERS-BU Médecine-Pharmacie (490072105) / SudocSudocFranceF

A hybrid CMV-H1 construct improves efficiency of PEI-delivered shRNA in the mouse brain

RNA-interference-driven loss of function in specific tissues in vivo should permit analysis of gene function in temporally and spatially defined contexts. However, delivery of efficient short hairpin RNA (shRNA) to target tissues in vivo remains problematic. Here, we demonstrate that efficiency of polyethylenimine (PEI)-delivered shRNA depends on the regulatory sequences used, both in vivo and in vitro. When tested in vivo, silencing of a luciferase target gene by shRNA produced from a hybrid construct composed of the CMV enhancer/promoter placed immediately upstream of an H1 promoter (50%) exceeds that obtained with the H1 promoter alone (20%). In contrast, in NIH 3T3 cells, the H1 promoter was more efficient than the hybrid construct (75 versus 60% inhibition of target gene expression, respectively). To test CMV-H1 shRNA efficiency against an endogenous gene in vivo, we used shRNA against thyroid hormone receptor α1 (TRα1). When vectorized in the mouse brain, the hybrid construct strongly derepressed CyclinD1-luciferase reporter gene expression, CyclinD1 being a negatively regulated thyroid hormone target gene. We conclude that promoter choice affects shRNA efficiency distinctly in different in vitro and in vivo situations and that a hybrid CMV-H1 construct is optimal for shRNA delivery in the mouse brain

The Motor Protein Myosin-X Transports VE-Cadherin along Filopodia To Allow the Formation of Early Endothelial Cell-Cell Contacts: MYOSIN-X TRANSPORT OF VE-CADHERIN ALONG FILOPODIA

International audienceVascular endothelium (VE), the monolayer of endothelial cells that lines the vascular tree, undergoes damage at the basis of some vascular diseases. Its integrity is maintained by VE-cadherin, an adhesive receptor localized at cell-cell junctions. Here, we show that VE-cadherin is also located at the tip and along filopodia in sparse or subconfluent endothelial cells. We observed that VE-cadherin navigates along intrafilopodial actin filaments. We found that the actin motor protein myosin-X is colocalized and moves synchronously with filopodial VE-cadherin. Immunoprecipitation and pulldown assays confirmed that myosin-X is directly associated with the VE-cadherin complex. Furthermore, expression of a dominant-negative mutant of myosin-X revealed that myosin-X is required for VE-cadherin export to cell edges and filopodia. These features indicate that myosin-X establishes a link between the actin cytoskeleton and VE-cadherin, thereby allowing VEcadherin transportation along intrafilopodial actin cables. In conclusion, we propose that VE-cadherin trafficking along filopodia using myosin-X motor protein is a prerequisite for cell-cell junction formation. This mechanism may have functional consequences for endothelium repair in pathological settings

Chronic hypoxia aggravates monocrotaline-induced pulmonary arterial hypertension: a rodent relevant model to the human severe form of the disease

International audienc

Exploring Functional β-Cell Heterogeneity In Vivo Using PSA-NCAM as a Specific Marker

BACKGROUND:The mass of pancreatic beta-cells varies according to increases in insulin demand. It is hypothesized that functionally heterogeneous beta-cell subpopulations take part in this process. Here we characterized two functionally distinct groups of beta-cells and investigated their physiological relevance in increased insulin demand conditions in rats. METHODS:Two rat beta-cell populations were sorted by FACS according to their PSA-NCAM surface expression, i.e. beta(high) and beta(low)-cells. Insulin release, Ca(2+) movements, ATP and cAMP contents in response to various secretagogues were analyzed. Gene expression profiles and exocytosis machinery were also investigated. In a second part, beta(high) and beta(low)-cell distribution and functionality were investigated in animal models with decreased or increased beta-cell function: the Zucker Diabetic Fatty rat and the 48 h glucose-infused rat. RESULTS:We show that beta-cells are heterogeneous for PSA-NCAM in rat pancreas. Unlike beta(low)-cells, beta(high)-cells express functional beta-cell markers and are highly responsive to various insulin secretagogues. Whereas beta(low)-cells represent the main population in diabetic pancreas, an increase in beta(high)-cells is associated with gain of function that follows sustained glucose overload. CONCLUSION:Our data show that a functional heterogeneity of beta-cells, assessed by PSA-NCAM surface expression, exists in vivo. These findings pinpoint new target populations involved in endocrine pancreas plasticity and in beta-cell defects in type 2 diabetes

Associations among hypertension, dementia biomarkers, and cognition: The MEMENTO cohort

Introduction Approximately 40% of dementia cases could be delayed or prevented acting on modifiable risk factors including hypertension. However, the mechanisms underlying the hypertension–dementia association are still poorly understood. Methods We conducted a cross-sectional analysis in 2048 patients from the MEMENTO cohort, a French multicenter clinic-based study of outpatients with either isolated cognitive complaints or mild cognitive impairment. Exposure to hypertension was defined as a combination of high blood pressure (BP) status and antihypertensive treatment intake. Pathway associations were examined through structural equation modeling integrating extensive collection of neuroimaging biomarkers and clinical data. Results Participants treated with high BP had significantly lower cognition compared to the others. This association was mediated by higher neurodegeneration and higher white matter hyperintensities load but not by Alzheimer's disease (AD) biomarkers. Discussion These results highlight the importance of controlling hypertension for prevention of cognitive decline and offer new insights on mechanisms underlying the hypertension–dementia association. Highlights Paths of hypertension–cognition association were assessed by structural equation models. The hypertension–cognition association is not mediated by Alzheimer's disease biomarkers. The hypertension–cognition association is mediated by neurodegeneration and leukoaraiosis. Lower cognition was limited to participants treated with uncontrolled blood pressure. Blood pressure control could contribute to promote healthier brain aging.Stopping cognitive decline and dementia by fighting covert cerebral small vessel diseas

Impact of hyperglycemia on cardiac sensitivity to ischemia-reperfusion : complex interplay between mitochondrial dynamics, calcium homeostasis and reactive oxygen species production

L’hyperglycémie per se est reconnue comme un facteur prédictif de la sévérité des lésions cardiaques suite à un infarctus du myocarde. Cependant, les mécanismes cellulaires sous-jacents restent à investiguer. La dynamique mitochondriale, processus décrivant à la fois les changements de morphologie des mitochondries ainsi que leur interaction avec d’autres organites tels que le réticulum, a émergée ces dernières années comme un acteur clé de la sensibilité du cœur à l’ischémie-reperfusion (IR). Néanmoins, son rôle dans les effets délétères de l’hyperglycémie au cours de l’IR n’a jamais été investigué. Ainsi, nous avons émis l’hypothèse (i) que la sensibilité accrue du cœur à l’IR en condition d’hyperglycémie pouvait s’expliquer par un impact de l’hyperglycémie sur l’interaction complexe entre la dynamique mitochondriale, l’homéostasie calcique cellulaire et la production d’espèces réactives de l’oxygène (ERO) et (ii) que l’activation de Drp1, régulateur majeur de la dynamique mitochondriale, pouvait jouer un rôle central dans ce phénomène. Nous avons pu rapporter dans ce travail de thèse, une augmentation des interactions entre le réticulum sarcoplasmique et les mitochondries, associée à une fission mitochondriale exacerbée lorsque l’IR est réalisée sur des cœurs isolés perfusés avec une solution hyperglycémique, en comparaison avec une solution normoglycémique. De plus, nous avons observé, sur mitochondries et cardiomyocytes isolés, que l’hyperglycémie est à l’origine d’un cercle vicieux entre surproduction d’ERO d’origine mitochondriale, instabilité du récepteur à la ryanodine et entrée accrue de calcium dans les mitochondries. Cette interaction complexe pourrait contribuer à expliquer l'activation précoce du mPTP observée sur les mitochondries issues de cœurs perfusés avec une solution hyperglycémique ou de cœurs de rats traités à la streptozotocine. Pour finir, de manière intéressante, nous avons rapporté quel’inhibition de Drp1, via l’injection de Mdivi-1 au cours de la phase hyperglycémique, permet de normaliser les troubles de l'homéostasie calcique, la production de ROS, l'activation du mPTP et in fine réduit la sensibilité du cœur à l'IR chez les rats traités à la streptozotocine. En conclusion, ce travail de thèse a permis de mettre en évidence que l'activation de Drp1 en réponse à l'hyperglycémie entraîne une altération de la dynamique mitochondriale et de l'homéostasie calcique cellulaire, participant à la vulnérabilité accrue du cœur à l'IR.Hyperglycemia increases the heart sensitivity to ischemia-reperfusion (IR), but the underlying cellular mechanisms remain unclear. Mitochondrial dynamics (the processes that govern mitochondrial morphology and their interactions with other organelles, such as the reticulum), has emerged as a key factor in the heart vulnerability to IR. However, it is unknown whether mitochondrial dynamics contributes to hyperglycemia deleterious effect during IR. We hypothesized that (i) the higher heart vulnerability to IR in hyperglycemic conditions could be explained by hyperglycemia effect on the complex interplay between mitochondrial dynamics, Ca2+ homeostasis, and reactive oxygen species (ROS) production; and (ii) the activation of Drp1, a key regulator of mitochondrial dynamics, could play a central role. Using transmission electron microscopy and proteomic analysis, we showed that the interactions between sarcoplasmic reticulum and mitochondria and mitochondrial fission were increased during IR in isolated rat hearts perfused with a hyperglycemic buffer compared with hearts perfused with a normoglycemic buffer. In isolated mitochondria and cardiomyocytes, hyperglycemia increased mitochondrial ROS production and Ca2+ uptake. This was associated with higher RyR2instability. These results could contribute to explain the early mPTP activation in mitochondria from isolated hearts perfused with a hyperglycemic buffer and in hearts from streptozotocin-treated rats (to increase the blood glucose). Drp1 inhibition by Mdivi-1 during the hyperglycemic phase, normalized Ca2+ homeostasis, ROS production, mPTP activation, and reduced the heart sensitivity to IR in streptozotocin-treated rats. In conclusion, hyperglycemia-dependent Drp1 activation results in altered mitochondrial dynamics and Ca2+ homeostasis that contribute to the higher heart vulnerability to IR

Impact de l’hyperglycémie sur la sensibilité du cœur à l’ischémie-reperfusion : interaction complexe entre dynamique mitochondriale, homéostasie calcique et production d’espèces réactives de l’oxygène

Hyperglycemia increases the heart sensitivity to ischemia-reperfusion (IR), but the underlying cellular mechanisms remain unclear. Mitochondrial dynamics (the processes that govern mitochondrial morphology and their interactions with other organelles, such as the reticulum), has emerged as a key factor in the heart vulnerability to IR. However, it is unknown whether mitochondrial dynamics contributes to hyperglycemia deleterious effect during IR. We hypothesized that (i) the higher heart vulnerability to IR in hyperglycemic conditions could be explained by hyperglycemia effect on the complex interplay between mitochondrial dynamics, Ca2+ homeostasis, and reactive oxygen species (ROS) production; and (ii) the activation of Drp1, a key regulator of mitochondrial dynamics, could play a central role. Using transmission electron microscopy and proteomic analysis, we showed that the interactions between sarcoplasmic reticulum and mitochondria and mitochondrial fission were increased during IR in isolated rat hearts perfused with a hyperglycemic buffer compared with hearts perfused with a normoglycemic buffer. In isolated mitochondria and cardiomyocytes, hyperglycemia increased mitochondrial ROS production and Ca2+ uptake. This was associated with higher RyR2instability. These results could contribute to explain the early mPTP activation in mitochondria from isolated hearts perfused with a hyperglycemic buffer and in hearts from streptozotocin-treated rats (to increase the blood glucose). Drp1 inhibition by Mdivi-1 during the hyperglycemic phase, normalized Ca2+ homeostasis, ROS production, mPTP activation, and reduced the heart sensitivity to IR in streptozotocin-treated rats. In conclusion, hyperglycemia-dependent Drp1 activation results in altered mitochondrial dynamics and Ca2+ homeostasis that contribute to the higher heart vulnerability to IR.L’hyperglycémie per se est reconnue comme un facteur prédictif de la sévérité des lésions cardiaques suite à un infarctus du myocarde. Cependant, les mécanismes cellulaires sous-jacents restent à investiguer. La dynamique mitochondriale, processus décrivant à la fois les changements de morphologie des mitochondries ainsi que leur interaction avec d’autres organites tels que le réticulum, a émergée ces dernières années comme un acteur clé de la sensibilité du cœur à l’ischémie-reperfusion (IR). Néanmoins, son rôle dans les effets délétères de l’hyperglycémie au cours de l’IR n’a jamais été investigué. Ainsi, nous avons émis l’hypothèse (i) que la sensibilité accrue du cœur à l’IR en condition d’hyperglycémie pouvait s’expliquer par un impact de l’hyperglycémie sur l’interaction complexe entre la dynamique mitochondriale, l’homéostasie calcique cellulaire et la production d’espèces réactives de l’oxygène (ERO) et (ii) que l’activation de Drp1, régulateur majeur de la dynamique mitochondriale, pouvait jouer un rôle central dans ce phénomène. Nous avons pu rapporter dans ce travail de thèse, une augmentation des interactions entre le réticulum sarcoplasmique et les mitochondries, associée à une fission mitochondriale exacerbée lorsque l’IR est réalisée sur des cœurs isolés perfusés avec une solution hyperglycémique, en comparaison avec une solution normoglycémique. De plus, nous avons observé, sur mitochondries et cardiomyocytes isolés, que l’hyperglycémie est à l’origine d’un cercle vicieux entre surproduction d’ERO d’origine mitochondriale, instabilité du récepteur à la ryanodine et entrée accrue de calcium dans les mitochondries. Cette interaction complexe pourrait contribuer à expliquer l'activation précoce du mPTP observée sur les mitochondries issues de cœurs perfusés avec une solution hyperglycémique ou de cœurs de rats traités à la streptozotocine. Pour finir, de manière intéressante, nous avons rapporté quel’inhibition de Drp1, via l’injection de Mdivi-1 au cours de la phase hyperglycémique, permet de normaliser les troubles de l'homéostasie calcique, la production de ROS, l'activation du mPTP et in fine réduit la sensibilité du cœur à l'IR chez les rats traités à la streptozotocine. En conclusion, ce travail de thèse a permis de mettre en évidence que l'activation de Drp1 en réponse à l'hyperglycémie entraîne une altération de la dynamique mitochondriale et de l'homéostasie calcique cellulaire, participant à la vulnérabilité accrue du cœur à l'IR

Dysfonctionnement des cellules b au cours du diabète de type 2 (rôle de la glucotoxicité et de la lipotoxicité et influence du Peroxisome Proliferator-Activated Receptor g)

LILLE2-BU Santé-Recherche (593502101) / SudocSudocFranceF