Stress-induced Gene Expression Sensing Intracellular Heating Triggered by Magnetic Hyperthermia

It is known that alternating magnetic field applications on eukaryotic cells loaded with single domain iron oxide nanoparticles result in high hyperthermic citotoxicity leading to cell dead. Although magnetic hyperthermia therapy for cancer tumours is being developed under this idea, some in vitro assays have shown controversial results indicating that alternating magnetic field triggers large apoptotic effect without significant culture-temperature increase. In agreement with these observations a huge lowering in nanoparticle specific heating rates, when going from the colloidal suspension to cell endosomes, together with cell death, has been reported. Here, we propose a new methodology to determine the occurrence of local heating in cells when alternating magnetic fields in the radiofrequency field range are applied to cell cultures holding very low iron oxide concentrations, being these concentrations insufficient to produce a global cell-culture temperature increase up to therapeutic values. To this end, human lung adenocarcinoma cells (A549 cell line) were transduced with a lentiviral vector encoding the expression of the enhanced green fluorescence protein, EGFP, under the action of the inducible human heat shock protein 70B promoter. This modified A549 cell line was incubated with aqueous suspensions of magnetite core nanoparticles (uncoated or covered with coating agents like citric acid or silicon oxide), and exposed to radiofrequency fields. The application of an alternating magnetic field to cell cultures loaded with nanoparticles resulted in no global temperature increase but EGFP expression. Stress-inducible gene expression scales with uptake and nanoparticle properties like saturation magnetization and heat dissipation efficiency. Our analysis demonstrates that EGFP expression is linked to a localized intracellular temperature increase.Fil: de Sousa, María Elisa. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - La Plata. Instituto de Física La Plata. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Exactas. Instituto de Física La Plata; ArgentinaFil: Carrea, Alejandra. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - La Plata. Instituto de Investigaciones Biotecnológicas. Instituto de Investigaciones Biotecnológicas "Dr. Raúl Alfonsín" (sede Chascomús). Universidad Nacional de San Martín. Instituto de Investigaciones Biotecnológicas. Instituto de Investigaciones Biotecnológicas "Dr. Raúl Alfonsín" (sede Chascomús); ArgentinaFil: Mendoza Zélis, Pedro. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - La Plata. Instituto de Física La Plata. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Exactas. Instituto de Física La Plata; ArgentinaFil: Muraca, Diego. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Universidade Estadual de Campinas; BrasilFil: Mykhaylyk, Olga. Technische Universitat Munchen; AlemaniaFil: Sosa, Yolanda Elena. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - La Plata. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de La Plata "Prof. Dr. Rodolfo R. Brenner". Universidad Nacional de la Plata. Facultad de Ciencias Médicas. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de La Plata ; ArgentinaFil: Goya, Rodolfo Gustavo. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - La Plata. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de La Plata "Prof. Dr. Rodolfo R. Brenner". Universidad Nacional de la Plata. Facultad de Ciencias Médicas. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de La Plata ; ArgentinaFil: Sánchez, Francisco Homero. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - La Plata. Instituto de Física La Plata. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Exactas. Instituto de Física La Plata; ArgentinaFil: Dewey, Ricardo. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - La Plata. Instituto de Investigaciones Biotecnológicas. Instituto de Investigaciones Biotecnológicas "Dr. Raúl Alfonsín" (sede Chascomús). Universidad Nacional de San Martín. Instituto de Investigaciones Biotecnológicas. Instituto de Investigaciones Biotecnológicas "Dr. Raúl Alfonsín" (sede Chascomús); ArgentinaFil: Fernández van Raap, Marcela Beatriz. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - La Plata. Instituto de Física La Plata. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Exactas. Instituto de Física La Plata; Argentin

Human adipose-derived mesenchymal stem/stromal cells handling protocols. Lipid droplets and proteins double-staining

Human Adipose-derived mesenchymal stem/stromal cells (hASCs) are of great interest because of their potential for therapeutic approaches. The method described here covers every single step necessary for hASCs isolation from subcutaneous abdominal adipose tissue, multicolor phenotyping by flow cytometry, and quantitative determination of adipogenic differentiation status by means of lipid droplets (LDs) accumulation, and Western blot analysis. Moreover, to simultaneously analyze both LDs accumulation and cellular proteins localization by fluorescence microscopy, we combined Oil Red O (ORO) staining with immunofluorescence detection. For LDs quantification we wrote a program for automatic ORO-stained digital image processing implemented in Octave, a freely available software package. Our method is based on the use of the traditional low cost neutral lipids dye ORO, which can be imaged both by bright-field and fluorescence microscopy. The utilization of ORO instead of other more expensive lipid-specific dyes, together with the fact that the whole method has been designed employing cost-effective culture reagents (standard culture medium and serum), makes it affordable for tight-budget research laboratories. These may be replaced, if necessary or desired, by defined xeno-free reagents for clinical research and applications.Fil: Gojanovich, Aldana Daniela. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Mendoza. Instituto de Histología y Embriología de Mendoza Dr. Mario H. Burgos. Universidad Nacional de Cuyo. Facultad de Ciencias Médicas. Instituto de Histología y Embriología de Mendoza Dr. Mario H. Burgos; ArgentinaFil: Gimenez, María Cecilia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Mendoza. Instituto de Histología y Embriología de Mendoza Dr. Mario H. Burgos. Universidad Nacional de Cuyo. Facultad de Ciencias Médicas. Instituto de Histología y Embriología de Mendoza Dr. Mario H. Burgos; Argentina. Universidad Juan Agustín Maza, Facultad de de Ciencias Veterinarias y Ambientales; ArgentinaFil: Masone, Diego Fernando. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Mendoza. Instituto de Histología y Embriología de Mendoza Dr. Mario H. Burgos. Universidad Nacional de Cuyo. Facultad de Ciencias Médicas. Instituto de Histología y Embriología de Mendoza Dr. Mario H. Burgos; Argentina. Universidad Nacional de Cuyo; ArgentinaFil: Rodríguez, Tania Melina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - La Plata. Instituto de Investigaciones Biotecnológicas. Instituto de Investigaciones Biotecnológicas "Dr. Raúl Alfonsín" (sede Chascomús). Universidad Nacional de San Martín. Instituto de Investigaciones Biotecnológicas. Instituto de Investigaciones Biotecnológicas "Dr. Raúl Alfonsín" (sede Chascomús); ArgentinaFil: Dewey, Ricardo. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - La Plata. Instituto de Investigaciones Biotecnológicas. Instituto de Investigaciones Biotecnológicas "Dr. Raúl Alfonsín" (sede Chascomús). Universidad Nacional de San Martín. Instituto de Investigaciones Biotecnológicas. Instituto de Investigaciones Biotecnológicas "Dr. Raúl Alfonsín" (sede Chascomús); ArgentinaFil: Delgui, Laura Ruth. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Mendoza. Instituto de Histología y Embriología de Mendoza Dr. Mario H. Burgos. Universidad Nacional de Cuyo. Facultad de Ciencias Médicas. Instituto de Histología y Embriología de Mendoza Dr. Mario H. Burgos; Argentina. Universidad Nacional de Cuyo; ArgentinaFil: Bustos, Diego Martin. Universidad Nacional de Cuyo; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Mendoza. Instituto de Histología y Embriología de Mendoza Dr. Mario H. Burgos. Universidad Nacional de Cuyo. Facultad de Ciencias Médicas. Instituto de Histología y Embriología de Mendoza Dr. Mario H. Burgos; ArgentinaFil: Uhart, Marina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Mendoza. Instituto de Histología y Embriología de Mendoza Dr. Mario H. Burgos. Universidad Nacional de Cuyo. Facultad de Ciencias Médicas. Instituto de Histología y Embriología de Mendoza Dr. Mario H. Burgos; Argentin

Curcumin ameliorates autoimmune diabetes. Evidences in accelerated murine models of type 1 diabetes

Type 1 diabetes (T1DM) is a T cell-mediated autoimmune disease that selectively destroys pancreatic β cells. The only possible cure for T1DM is to control autoimmunity against β cell-specific antigens. We explored whether the natural compound curcumin, with anti-oxidant and anti-inflammatory activities, might down-regulate the T cell response that destroys pancreatic β cells to improve disease outcome in autoimmune diabetes. We employed two accelerated autoimmune diabetes models: (i) cyclophosphamide (CYP) administration to non-obese diabetic (NOD) mice and (ii) adoptive transfer of diabetogenic splenocytes into NODscid mice. Curcumin treatment led to significant delay of disease onset, and in some instances prevented autoimmune diabetes by inhibiting pancreatic leucocyte infiltration and preserving insulin-expressing cells. To investigate the mechanisms of protection we studied the effect of curcumin on key immune cell populations involved in the pathogenesis of the disease. Curcumin modulates the T lymphocyte response impairing proliferation and interferon (IFN)-γ production through modulation of T-box expressed in T cells (T-bet), a key transcription factor for proinflammatory T helper type 1 (Th1) lymphocyte differentiation, both at the transcriptional and translational levels. Also, curcumin reduces nuclear factor (NF)-κB activation in T cell receptor (TCR)-stimulated NOD lymphocytes. In addition, curcumin impairs the T cell stimulatory function of dendritic cells with reduced secretion of proinflammatory cytokines and nitric oxide (NO) and low surface expression of co-stimulatory molecules, leading to an overall diminished antigen-presenting cell activity. These in-vitro effects correlated with ex-vivo analysis of cells obtained from curcumin-treated mice during the course of autoimmune diabetes. These findings reveal an effective therapeutic effect of curcumin in autoimmune diabetes by its actions on key immune cells responsible for β cell death.Fil: Castro, Carla Noemí. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Parque Centenario. Instituto de Investigación En Biomedicina de Buenos Aires; ArgentinaFil: Barcala Tabarrozzi, Andrés Ezequiel. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Parque Centenario. Instituto de Investigación En Biomedicina de Buenos Aires; ArgentinaFil: Winnewisser, Julia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Parque Centenario. Instituto de Investigación En Biomedicina de Buenos Aires; ArgentinaFil: Gimeno, Maria Laura. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Parque Centenario. Instituto de Investigación En Biomedicina de Buenos Aires; ArgentinaFil: Antunica Noguerol, María de Las Nieves. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Parque Centenario. Instituto de Investigación En Biomedicina de Buenos Aires; ArgentinaFil: Liberman, Ana Clara. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Parque Centenario. Instituto de Investigación En Biomedicina de Buenos Aires; ArgentinaFil: Paz, Dante Agustin. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Ciudad Universitaria. Instituto de Fisiología, Biología Molecular y Neurociencias; ArgentinaFil: Dewey, Ricardo. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico La Plata. Instituto de Investigaciones Biotecnológicas - Instituto Tecnológico Chascomús. Instituto de Investigaciones Biotecnológicas (sede Chascomús); ArgentinaFil: Perone, Marcelo Javier. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Parque Centenario. Instituto de Investigación En Biomedicina de Buenos Aires; Argentin

Stress-induced Gene Expression Sensing Intracellular Heating Triggered by Magnetic Hyperthermia

It is known that alternating magnetic field applications on eukaryotic cells loaded with single domain iron oxide nanoparticles result in high hyperthermic citotoxicity leading to cell dead. Although magnetic hyperthermia therapy for cancer tumours is being developed under this idea, some in vitro assays have shown controversial results indicating that alternating magnetic field triggers large apoptotic effect without significant culture-temperature increase. In agreement with these observations a huge lowering in nanoparticle specific heating rates, when going from the colloidal suspension to cell endosomes, together with cell death, has been reported. Here, we propose a new methodology to determine the occurrence of local heating in cells when alternating magnetic fields in the radiofrequency field range are applied to cell cultures holding very low iron oxide concentrations, being these concentrations insufficient to produce a global cell-culture temperature increase up to therapeutic values. To this end, human lung adenocarcinoma cells (A549 cell line) were transduced with a lentiviral vector encoding the expression of the enhanced green fluorescence protein, EGFP, under the action of the inducible human heat shock protein 70B promoter. This modified A549 cell line was incubated with aqueous suspensions of magnetite core nanoparticles (uncoated or covered with coating agents like citric acid or silicon oxide), and exposed to radiofrequency fields. The application of an alternating magnetic field to cell cultures loaded with nanoparticles resulted in no global temperature increase but EGFP expression. Stress-inducible gene expression scales with uptake and nanoparticle properties like saturation magnetization and heat dissipation efficiency. Our analysis demonstrates that EGFP expression is linked to a localized intracellular temperature increase.Facultad de Ciencias ExactasInstituto de Física La PlataFacultad de Ciencias MédicasInstituto de Investigaciones Bioquímicas de La Plat

Rheumatoid arthritis and TGF β

La artritis reumatoidea (AR) es una enfermedad autoinmune caracterizada por la inflamación crónica de las articulaciones con su consiguiente deterioro estructural. Las diversas poblaciones de glóbulos blancos, incluyendo monocitos/macrófagos, células dendríticas, neutrófilos y linfocitos, contribuyen al daño estructural de las articulaciones. Existen evidencias que la citoquina pleiotrópica TGF-ß y sus receptores actúan como un potente regulador de los eventos inflamatorios, en el tejido sinovial de AR. De modo adicional, los niveles aumentados de TGF-ß1 encontrados en el microambiente sinovial de pacientes con AR, además de producir inflamación, parecen afectar el potencial regenerativo de las células madre mesenquimales presentes en el líquido sinovial. En la presente revisión queda en evidencia que a pesar de que son necesarios estudios adicionales, la modulación de TGF-ß y sus receptores en pacientes con AR, podría ofrecer una alternativa terapéutica para el tratamiento de esta enfermedad.Rheumatoid Arthritis (RA) is an autoimmune disease characterized by chronic inflammation of the joints with structural deterioration. Different subpopulations of white blood cells, including monocytes/ macrophages, dendritic cells, neutrophils and lymphocytes, directly contribute to the damage of the articulations. Evidences indicate that the pleiotropic cytokine TGF-ß and its receptors act as a potent regulator of inflammation in RA synovial tissue. In addition to the increased inflammation, high levels of TGF-ß1 in the RA synovial microenvironment, seem to affect the regenerative potential of Synovial Fluid Mesenchymal Stem Cells (SF-MSCs). Although further in depth studies must be performed, in this review, evidences are given that modulation of TGF-ß and receptors in RA patients could offer an alternative therapeutic strategy for the treatment of the disease.Fil: Dewey, Ricardo. Laboratorio de Terapia Genica y Celulas Madre, Instituto de Investigaciones Biotecnologicas-Instituto Teconogico de Chascomus; ArgentinaFil: Velazco Zamora, Jose Luis. Servicio de Reumatología, Instituto Medico CER, Quilmes; ArgentinaFil: Carrea, Alejandra. Laboratorio de Terapia Genica y Celulas Madre, Instituto de Investigaciones Biotecnologicas-Instituto Teconogico de Chascomus; ArgentinaFil: T. A. Rodríquez. Laboratorio de Terapia Genica y Celulas Madre, Instituto de Investigaciones Biotecnologicas-Instituto Teconogico de Chascomus; ArgentinaFil: Perone, Marcelo Javier. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Parque Centenario. Instituto de Investigación en Biomedicina de Buenos Aires - Instituto Partner de la Sociedad Max Planck; ArgentinaFil: Velazco Zamora, Jorge. Servicio de Reumatologia, Instituto Medico CER, Quilmes; Argentin

Setting up of the process of expansion of dental tissue derived cells

La presencia de células madre (CM) en tejidos dentales abrió nuevas líneas de investigación en el área de la odontología regenerativa. Los objetivos de este trabajo fueron poner a punto el método de obtención, aislamiento y expansión de CM derivadas de tejidos dentales y caracterizarlas. Se utilizaron terceros molares cuyas pulpas y saco periodontal se procesaron de la siguiente manera: 1) digestión enzimática; 2) obtención de explantes. En ambos casos, se cultivaron en DMEM suplementado. Las células fueron caracterizadas en el estadio P2 (pasaje 2) mediante el estudio de marcadores de superficie específicos de CM (CD73, CD90 y CD105) por citometría de flujo, obteniéndose porcentajes similares en ambos tratamientos: CD73 99.2%; CD90 85.5% y CD105 62.01%. Previo al procesamiento, se observó morfológicamente la pulpa dental mediante MET, destacándose la presencia de células de morfología variable, con signos que indican una intensa actividad metabólica. Se evidencian mitocondrias en todas las células, gran cantidad de vesículas y gránulos de secreción. Las células cultivadas fueron analizadas mediante microscopía con contraste de fases, y se observó la formación de numerosas colonias de células fusiformes y estrelladas, formando agregados en forma irradiada, paralelas unas a otras. Para el tratamiento 1, se alcanzó confluencia celular luego de 21 días de cultivo. En cambio, para el tratamiento 2 el crecimiento fue más rápido y se alcanzó el estado de semiconfluencia a los 14 días. Con estos resultados preliminares podemos concluir que el explante es el mejor método para obtener CM mesenquimales derivadas de los tejidos dentales, ya que se obtiene mayor número de células en menor tiempo, lo que es coincidente con la bibliografía publicada al respecto. Además, la morfología celular es un buen indicador de calidad y desarrollo del cultivo, pudiendo utilizarse como control de calidad biológico en este tipo de procedimientos.The presence of stem cellsln dental tissues opened new lines of research In the regenerative dentistry area. The objectives of this work were to develop and characterize a method for obtaining, isolating and expanding dental tissues derived stem cells. Third molars were used, which pulps and periodontal sac were processed using one of these two methods: 1) enzymatic digestion 2) explants. In both cases, the obtained cells were cultured in supplemented DMEM. The cells were characterized In stage P2 (passage 2) by studying specific surface markers of stem cells(CD73, CD90 and CD105) by flow cytometry, obtaining similar percentages in both treatments: CD73 99.2%; CD90 85.5% and CD105 62.01%. Prior to processing, dental pulp was morphologically analyzed by MET, highlighting the presence of cells with variable morphology, with signs Indicating Intense metabolic activity. Mitochondria, large amount of vesicles and secretion granulesare evidenced in all cells. Cultured cells were analyzed through contrast phase microscopy, the formation of numerous spindle and stellate cells colonies were observed, forming aggregates In irradiated form, parallel to one another. For treatment 1, cell confluence was reached after 21 days of culture. On the other hand, for treatment 2, the growth was faster and the state of semi confluence was reached after 14 days. With these preliminary results we can conclude that the explant is the best method to obtain stem cells derived from dental tissues, since a greater number of cells Is obtained in less time, which coincides with the published literature. In addition, cell morphology Is a good Indicator of culture quality and development, and can be used as a biological quality control in this type of procedure.Facultad de Odontología (FOLP

Setting up of the process of expansion of dental tissue derived cells

La presencia de células madre (CM) en tejidos dentales abrió nuevas líneas de investigación en el área de la odontología regenerativa. Los objetivos de este trabajo fueron poner a punto el método de obtención, aislamiento y expansión de CM derivadas de tejidos dentales y caracterizarlas. Se utilizaron terceros molares cuyas pulpas y saco periodontal se procesaron de la siguiente manera: 1) digestión enzimática; 2) obtención de explantes. En ambos casos, se cultivaron en DMEM suplementado. Las células fueron caracterizadas en el estadio P2 (pasaje 2) mediante el estudio de marcadores de superficie específicos de CM (CD73, CD90 y CD105) por citometría de flujo, obteniéndose porcentajes similares en ambos tratamientos: CD73 99.2%; CD90 85.5% y CD105 62.01%. Previo al procesamiento, se observó morfológicamente la pulpa dental mediante MET, destacándose la presencia de células de morfología variable, con signos que indican una intensa actividad metabólica. Se evidencian mitocondrias en todas las células, gran cantidad de vesículas y gránulos de secreción. Las células cultivadas fueron analizadas mediante microscopía con contraste de fases, y se observó la formación de numerosas colonias de células fusiformes y estrelladas, formando agregados en forma irradiada, paralelas unas a otras. Para el tratamiento 1, se alcanzó confluencia celular luego de 21 días de cultivo. En cambio, para el tratamiento 2 el crecimiento fue más rápido y se alcanzó el estado de semiconfluencia a los 14 días. Con estos resultados preliminares podemos concluir que el explante es el mejor método para obtener CM mesenquimales derivadas de los tejidos dentales, ya que se obtiene mayor número de células en menor tiempo, lo que es coincidente con la bibliografía publicada al respecto. Además, la morfología celular es un buen indicador de calidad y desarrollo del cultivo, pudiendo utilizarse como control de calidad biológico en este tipo de procedimientos.The presence of stem cellsln dental tissues opened new lines of research In the regenerative dentistry area. The objectives of this work were to develop and characterize a method for obtaining, isolating and expanding dental tissues derived stem cells. Third molars were used, which pulps and periodontal sac were processed using one of these two methods: 1) enzymatic digestion 2) explants. In both cases, the obtained cells were cultured in supplemented DMEM. The cells were characterized In stage P2 (passage 2) by studying specific surface markers of stem cells(CD73, CD90 and CD105) by flow cytometry, obtaining similar percentages in both treatments: CD73 99.2%; CD90 85.5% and CD105 62.01%. Prior to processing, dental pulp was morphologically analyzed by MET, highlighting the presence of cells with variable morphology, with signs Indicating Intense metabolic activity. Mitochondria, large amount of vesicles and secretion granulesare evidenced in all cells. Cultured cells were analyzed through contrast phase microscopy, the formation of numerous spindle and stellate cells colonies were observed, forming aggregates In irradiated form, parallel to one another. For treatment 1, cell confluence was reached after 21 days of culture. On the other hand, for treatment 2, the growth was faster and the state of semi confluence was reached after 14 days. With these preliminary results we can conclude that the explant is the best method to obtain stem cells derived from dental tissues, since a greater number of cells Is obtained in less time, which coincides with the published literature. In addition, cell morphology Is a good Indicator of culture quality and development, and can be used as a biological quality control in this type of procedure.Facultad de Odontología (FOLP

Morphological and phenotypic comparison between human stem cells from dental pulp and dental sac

Objetivo: Las piezas dentarias son una fuente importante decélulas madres. Se pueden obtener de diferentes tejidos dentales (pulpa, saco, ligamento periodontal). El objetivo de este trabajo fue comparar las características fenotípicas y morfológicas de las células madre mesenquimales aisladas de la pulpa dental y el saco dental.Se obtuvieron tres muestras de tejido de pulpa y tres muestras de tejido de saco de terceros molares indicados para exodoncia. Las células aisladas se cultivaron en iguales condiciones y se caracterizaron mediante microscopía de contraste de fases, MET y citometría de flujo, utilizando marcadores CD73, CD90 y CD105. Se observaron células fusiformes y estrelladas con morfología similar a fibroblastos y disposición paralela. Células cuboides fueron encontradas en los cultivos derivados de saco. Resultados similares fueron obtenidos por citometría de flujo en ambas poblaciones. Estos resultados preliminares confirman que las células madre de ambos tejidos dentales tienen características similares.Dental pieces are an important source of mesenchymal stem cells. They can be obtained from different dental tissues (pulp, sac, periodontal ligament). The aim of this research wasto compare phenotypic and morphological characteristics of stem cells isolated from dental pulp and dental sac. Three samples of pulp tissue and three samples of sac tissue were obtained from third molars indicated for exodontia. The isolated cells were cultured under the same conditions, and characterized by phase contrast microscopy, MET and flowcytometry, using CD73, CD 90 and CD105 markers. Fusiform and stellate cells were observed, with fibroblast likeshape and parallel arrangement. Cuboids like cells were found in sac tissue derived cultures. Similar results were obtained by Flow cytometry in both populations.These preliminary results confirm that stem cells from bot h dental tissues have similar characteristics.Facultad de Odontologí

Morphological and phenotypic comparison between human stem cells from dental pulp and dental sac

Objetivo: Las piezas dentarias son una fuente importante decélulas madres. Se pueden obtener de diferentes tejidos dentales (pulpa, saco, ligamento periodontal). El objetivo de este trabajo fue comparar las características fenotípicas y morfológicas de las células madre mesenquimales aisladas de la pulpa dental y el saco dental.Se obtuvieron tres muestras de tejido de pulpa y tres muestras de tejido de saco de terceros molares indicados para exodoncia. Las células aisladas se cultivaron en iguales condiciones y se caracterizaron mediante microscopía de contraste de fases, MET y citometría de flujo, utilizando marcadores CD73, CD90 y CD105. Se observaron células fusiformes y estrelladas con morfología similar a fibroblastos y disposición paralela. Células cuboides fueron encontradas en los cultivos derivados de saco. Resultados similares fueron obtenidos por citometría de flujo en ambas poblaciones. Estos resultados preliminares confirman que las células madre de ambos tejidos dentales tienen características similares.Dental pieces are an important source of mesenchymal stem cells. They can be obtained from different dental tissues (pulp, sac, periodontal ligament). The aim of this research wasto compare phenotypic and morphological characteristics of stem cells isolated from dental pulp and dental sac. Three samples of pulp tissue and three samples of sac tissue were obtained from third molars indicated for exodontia. The isolated cells were cultured under the same conditions, and characterized by phase contrast microscopy, MET and flowcytometry, using CD73, CD 90 and CD105 markers. Fusiform and stellate cells were observed, with fibroblast likeshape and parallel arrangement. Cuboids like cells were found in sac tissue derived cultures. Similar results were obtained by Flow cytometry in both populations.These preliminary results confirm that stem cells from bot h dental tissues have similar characteristics.Facultad de Odontologí

Morphological and phenotypic comparison between human stem cells from dental pulp and dental sac

Objetivo: Las piezas dentarias son una fuente importante decélulas madres. Se pueden obtener de diferentes tejidos dentales (pulpa, saco, ligamento periodontal). El objetivo de este trabajo fue comparar las características fenotípicas y morfológicas de las células madre mesenquimales aisladas de la pulpa dental y el saco dental.Se obtuvieron tres muestras de tejido de pulpa y tres muestras de tejido de saco de terceros molares indicados para exodoncia. Las células aisladas se cultivaron en iguales condiciones y se caracterizaron mediante microscopía de contraste de fases, MET y citometría de flujo, utilizando marcadores CD73, CD90 y CD105. Se observaron células fusiformes y estrelladas con morfología similar a fibroblastos y disposición paralela. Células cuboides fueron encontradas en los cultivos derivados de saco. Resultados similares fueron obtenidos por citometría de flujo en ambas poblaciones. Estos resultados preliminares confirman que las células madre de ambos tejidos dentales tienen características similares.Dental pieces are an important source of mesenchymal stem cells. They can be obtained from different dental tissues (pulp, sac, periodontal ligament). The aim of this research wasto compare phenotypic and morphological characteristics of stem cells isolated from dental pulp and dental sac. Three samples of pulp tissue and three samples of sac tissue were obtained from third molars indicated for exodontia. The isolated cells were cultured under the same conditions, and characterized by phase contrast microscopy, MET and flowcytometry, using CD73, CD 90 and CD105 markers. Fusiform and stellate cells were observed, with fibroblast likeshape and parallel arrangement. Cuboids like cells were found in sac tissue derived cultures. Similar results were obtained by Flow cytometry in both populations.These preliminary results confirm that stem cells from bot h dental tissues have similar characteristics.Facultad de Odontologí