Comparison of Apoptotic Cells Between Cryopreserved Ejaculated Sperm and Epididymal Sperm in Stallions

AbstractThe development of a reliable technique to freeze epididymal semen would provide a unique opportunity to preserve valuable genetic material from unexpectedly lost stallions. The aim of this study was to compare the apoptotic indices of sperm obtained from ejaculate, sperm recently recovered from the epididymides (EP), and sperm recovered from epididymides stored at 5°C for 24 hours (EP-stored). For the first category, two ejaculates from seven stallions were collected and then submitted to cryopreservation using an egg yolk-based extender. One week after the last semen collection, the stallions were submitted to bilateral orchiectomy, and sperm from one of the cauda epididymis was harvested immediately after castration (EP). The remaining testicle was stored in a passive refrigeration container at 5°C for 24 hours before the cauda epididymal sperm was harvested (EP-stored). Sperm harvesting from the epididymis for EP and EP-stored was performed by retrograde flushing of the caudal portion of the epididymis using a skim milk-based extender. The recovered sperm was then cryopreserved using the egg yolk-based extender. Sperm motility parameters were studied by computer-assisted semen analysis, and apoptosis was estimated by measuring caspase activity and membrane phospholipid translocation using epifluorescence microscopy. The samples were evaluated immediately (0 hour) and 8 hours after thawing. At 0 hour, no differences in sperm parameters were observed among the groups, but after 8 hours, significant statistical differences were observed in sperm motility parameters and plasma membrane integrity among the treatment groups. In addition, viable cells with no apoptotic signs were more prevalent in EP and EP-stored, suggesting that epididymal sperm is less sensitive to the cold shock caused by sperm cryopreservation

Modelo operacional do estudo de caso como estratégia de ensino na disciplina de enfermagem médico-cirúrgica: avaliação dos alunos

The study deals with a descriptive research, with the aim of assessing the contribution and difficulties expressed by students, utilizing the case study operational model, proposed by the authors as one of the teaching strategies used in Medical-Surgical Courses. In order to implement and perform the answer content analysis given by the students, authors used thematic analysis according to Bardin. With the performance of this investigation, we concluded that: students recognize the model as a teaching strategy in the formation of themselves, mainly related to theoretical and practical knowledge (70%). It encouraged them to decision making process autonomy and problem solving area besides stimulated them by using library resources. The other contribution related to knowledge refers to scientific methodology (30%), where the model emerges as an initiation strategy to this activity. Difficulties expressed by students in preparing the case study occurred in the following stage; - bibliographical survey (58%), to mainly lack of specific and updated bibliography in nursing area and lack of access indexes; - in the work essay (27%). It also revealed that study case contributed to basic knowledge about the elaboration of a scientific essay; among others (15%).Este estudio es una investigación descriptiva, tiene como objetivo evaluar las contribuciones y dificultades sentidas por alumnos en la utilización del Modelo Operacional del Estudio de Caso, propuesto por las autoras como una de las estrategias de enseñanza utilizada por la disciplina de Enfermería Médico-Quirúrgica. Para instrumentalizar y operacionalizar el análisis del contenido de las respuestas dadas por los alumnos, usamos el análisis temática, según Bardin. Con la realización de esta investigación concluimos que los alumnos reconocen el modelo como estrategia de enseñanza en su formación, principalmente encuanto al conocimiento teórico-práctico de la asistencia (70%) que este ofrece, estimulándolos a la autonomía en la toma de decisiones y solución de problemas en la área, además de incitarlos en la utilización de la biblioteca, otra contribución está relacionada al conocimiento referente a la Metodología Científica (30%), donde el modelo emerge como una estrategia de iniciación a esta actividad. Las dificultades sentidas por los alumnos en la elaboración de estudio de casos ocurrieron en las siguientes etapas: - en la consulta bibliográfica (58%), principalmente, encuanto a la falta de bibliografía específica y reciente en la área de enfermería y al no acceso de los alumnos de pregrado a los índices informatizados; - en la redacción del trabajo (27%), pero al mismo tiempo revelando que el estudio de caso propicia conocimientos básicos sobre como elaborar y escribir uno trabajo científico; y otras (15%).O estudo trata-se de uma pesquisa descritiva, com o objetivo de avaliar as contribuições e dificuldades sentidas pelos alunos, na utilização do Modelo Operacional do Estudo de Caso, proposto pelas autoras como uma das estratégias de ensino utilizada pela disciplina de Enfermagem Médico-Cirúrgica. Para instrumentalizar e operacionalizar a análise de conteúdo das respostas concedidas pelos alunos, utilizamos da análise temática, segundo Bardin. Com a realização desta investigação concluímos que os alunos reconhecem o modelo como estratégia de ensino na formação dos mesmos, principalmente, quanto ao conhecimento teórico-prático da assistência (70%) que este oferece, estimulando-os à autonomia na tomada de decisões e solução de problemas na área, além de incentivá-los na utilização do acervo da biblioteca. A outra contribuição está relacionada ao conhecimento referente à metodologia científica (30%), onde o modelo emerge a eles como uma estratégia de iniciação a esta atividade. As dificuldades sentidas pelos alunos na elaboração do estudo de caso ocorreram nas seguintes etapas: - no levantamento bibliográfico (58%), principalmente, quanto a falta de bibliografia específica e recente na área de enfermagem e ao não acesso dos alunos da graduação aos índices informatizados: - na redação do trabalho(27%), porém ao mesmo tempo revelando que o estudo de caso propiciou conhecimentos básicos de como elaborar e escrever um trabalho científico; dentre outras (15%)

A força de centrifugação pode comprometer a integridade de membrana plasmática, acrossomal e DNA de espermatozoides caprinos?

Protocols for cooling or freezing goat semen usually recommend centrifugation for seminal plasma removal. However, little is known about the effect of this process on goat sperm viability and functionality. The present study evaluated the effects of centrifugation force on the plasma membrane, acrosomes, and DNA integrity of goat semen. Four ejaculates from each of the four different Anglo Nubian male goats were used. Semen samples were obtained using artificial vagina, and immediately after collection, ejaculates were diluted using Ringer’s sodium lactate solution and split into three groups: Control (CG, without centrifugation), G1 (centrifugation 600 x g/10 min), G2 (centrifugation 1200 x g/10 min). After centrifugation, seminal plasma was removed, the sperm pellets were resuspended using Tris-egg yolk extender (80 x 106 spermatozoa/mL) and the sperm morphology was analyzed. Samples were cooled at 5°C for 5, 24, 36, and 48 h and then sperm plasma membrane and acrosome integrity (PMAI, %) and sperm DNA fragmentation index (SDF, %) were evaluated at each time-point, using a flow cytometer. Additionally, sperm movement was determined using computer semen analysis (CASA) after 5, 24, and 48 h of refrigeration period. The semen centrifugation did not induce additional sperm morphology defect or reduction in sperm kinetics in the experimental groups. Differences were not observed (p > 0.05) in PMAI and SDF among different groups, in any of each timepointof the cooling process. In conclusion, centrifugation, even at high speeds, did not affect goat sperm integrity and functionality when submitted to refrigeration process.A maior parte dos protocolos de refrigeração e criopreservação do sêmen caprino recomenda o uso de centrifugação para remoção do plasma seminal. No entanto, não existe consenso sobre o risco que esse tipo de processamento pode ocasionar à viabilidade espermática. Nesse contexto, o presente trabalho investigou os possíveis efeitos deletérios da centrifugação sobre a integridade estrutural e DNA de espermatozoides caprinos. Para a pesquisa foram selecionados quatro reprodutores para colheita de sêmen (n = 4 ejaculados/bode). Cada ejaculado foi fracionado em três alíquotas iguais, diluídas em ringer e divididas em três grupos: Controle (GC, não centrifugado), G1 (centrifugação a 600 g/10 minutos) e G2 (centrifugação a 1200 g/10 minutos). As amostras seminais por grupo foram diluídas em meio Tris gema respeitando-se a concentração final de 80 milhões de espermatozoides/mL e foram submetidas à avaliação de morfologia espermática. Todas as amostras foram acondicionadas a 5°C, sendo analisadas nos momentos 5, 24, 36 e 48 horas do processo de refrigeração por meio da avaliação da integridade de membrana plasmática e acrossomal (MPAI, %) e índice de fragmentação de DNA (IDF, %). Adicionalmente, a cinética espermática foi avaliada com o emprego de um sistema computadorizado de análise (CASA) nos momentos 5, 24 e 48 horas da refrigeração. A centrifugação não induziu a manifestação de defeitos morfológicos ou redução significativa da cinética de espermatozoides caprinos. Não foram observadas diferenças para a integridade de membrana plasmática e para o índice de fragmentação de DNA quando comparados, respectivamente, GC, G1 e G2 em cada um dos quatro momentos experimentais. Conclui-se que mesmo quando empregadas altas forças de rotação não ocorre lesão à ultraestrutura dos espermatozoides caprinos submetidos ao processo de refrigeração

PACIENTE CRÍTICO: PERCEPÇÃO DE ALUNOS DE ENFERMAGEM PÓSINTERVENÇÃO DE MUSICOTERAPIA

A musicoterapia é uma estratégia que vem sendo adotada cada vez mais como uma terapia complementar. Sabe-se que para ampliar o bem-estar do ser humano é necessário considerar as dimensões no âmbito biopsicossocial e espiritual. É comprovada sua relevância para a diminuição da dor e queda do nível de ansiedade, bem como o aumento da adesão ao tratamento e do conforto espiritual, principalmente em pacientes críticos internados em Unidades de Terapia Intensiva (UTI). Objetivo: Relatar a percepção de alunos de enfermagem em relação ao paciente, durante o desenvolvimento da musicoterapia em UTI. Metodologia: Trata-se de um relato de experiência sobre a implementação do projeto de extensão “Musicoterapia com Paciente Crítico e equipe de Saúde” sob o registro n° 4681, destinado aos pacientes críticos. Este projeto foi realizado na UTI da Santa Casa de Misericórdia de Bandeirantes –PR, às sextas-feiras. Após autorização, cada paciente escolheu e recebeu individualmente uma música, podendo ser do gênero musical popular e ou gospel. Esta ação tem a duração total de uma hora no setor. Processos avaliativos: Percebeu-se que a musicoterapia tem influência em diversos aspectos biopsicossociais e espirituais, validando a utilidade da estratégia, por meio de relatos verbais como agradecimento e participação, e não verbais, tais como expressões de afeto, choro ou sorriso, com possível alteração dos parâmetros vitais. Observou-se a satisfação, os sinais vitais, conforto e o favorecimento à ambiência em um local crítico. Percebeu-se que houve a promoção do encorajamento e a disposição melhorada à adesão ao tratamento intrahospitalar e a possível perspectiva do enfrentamento extra-hospitalar. Considerações finais: Conclui-se que terapias alternativas como a musicoterapia em consonância ao modelo biopsicossocial e tratamento alopático, são intervenções que quando aliadas, podem proporcionar ao paciente um desfecho positivo, por meio do cuidado ampliado, integral e humanizado

Results of the Ambient Air Experiments during the EUSAAR 2009 Absorption Photometer Workshop.

International Aerosol Conference 2010. Helsinki, Finland, August 29-September 3.Develop methodologies to compensate for apparent absorption caused by scattering dueto the use of filter matrix support

Efeito da córtico-terapia e plasma seminal na resposta inflamatória e fertilidade de éguas submetidas à inseminação arterial

Com o intuito de verificar a ação do acetato de prednisolona e do plasma seminal sobre a resposta inflamatória uterina de éguas inseminadas com sêmen congelado, desenvolveu-se os seguintes procedimentos: inicialmente 36 éguas foram aleatoriamente divididas em 6 grupos experimentais: G1 grupo controle, éguas não inseminadas; G2 éguas inseminadas com 800 x 106 de espermatozóides in natura; G3 éguas inseminadas com sêmen congelado 800 x 106 de espermatozóides viáveis pré-congelação; G4 éguas inseminadas com sêmen congelado 800 x 106 de espermatozóides viáveis pré-congelação + adição de 20 mL de plasma seminal; G5 éguas inseminadas com sêmen congelado 800 x 106 de espermatozóides viáveis pré-congelação + corticóide-terapia; G6 éguas inseminadas com sêmen congelado 800 x 106 de espermatozóides viáveis pré-congelação + adição de 20 mL de plasma seminal + corticóide-terapia. A corticóide-terapia foi iniciada quando os animais apresentavam folículos de 35 mm e edema uterino, neste momento, se efetuava a administração da gonadotrofina coriônica humana (hCG) e concomitantemente 0,1 mg/kg de acetato de prednisolona por via intramuscular (Predef ), e repetia-se o corticóide a cada 12 horas até a ovulação. Os animais dos grupos tratados com corticóide G5 e G6, demonstraram um decréscimo significativo na função neutrofílica, frente ao teste da redução do tetrazólio nitroazul (NBT). O plasma seminal não alterou a intensidade da resposta inflamatória em nenhum dos testes realizados. No teste de fertilidade foram realizados dois grupos de inseminação, no primeiro, foram utilizadas éguas sem histórico de resposta inflamatória intensa pós-inseminação e não foi vista diferença estatística nos resultados de prenhes. Entretanto, no segundo teste de fertilidade, onde foram usadas éguas problemas, com... .Aiming to verify the action of prednizolone acetate and of seminal plasma on the uterine inflammatory response of mares inseminated with frozen semen, the following procedures were developed. Thirty six mares were randomly allocated in 6 experimental groups: G1 control groups, with non-inseminated mares; G2 mares inseminated with 800 x 106 in natura sperm cells; G3 mares inseminated with 800 x 106 frozen-thawed sperm cells; G4 mares inseminated with 800 x 106 frozen-thawed sperm cells + 20 mL seminal plasma; G5 mares inseminated with 800 x 106 frozen-thawed sperm cells + cortico-therapy; G6 mares inseminated with 800 x 106 frozen-thawed sperm cells + 20 mL seminal plasma + cortico-therapy. The therapy with 0,1 mg/kg of prednizolone acetate (IM) (Predef ), was performed when the mares presented follicles with 35 mm and uterine edema. At this moment the ovulation was induced with human corionic gonadotrophin (hCG), and the corticoid administrations repeated every 12 hours until ovulation. In G5 and G6 when the animals were treated with corticoid, it was observed a significant decrease on the neutrophil function, analyzed by the tetrazolio nitroazul test (NBT). The infusion of seminal plasma did not modify the uterine inflammatory response in any of the performed tests. For the fertility test, two groups of inseminated mares were used. On the first one, mares with no history of intense uterine inflammatory response after insemination were used. No statistic differences were observed on pregnancy results. However, on the second group of fertility test when problem mares, with history of post-insemination endometritis, were used, the corticoid-treated group presented a significant high pregnancy rate when compared with the control group (67% and 0% respectively). The cortico-therapy showed to be a safe method with no side effects on treated animals, representing an adequate choice for animals... (Complete abstract, click electronic address below).Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP

The Effects of Refrigeration Temperature and Storage Time on Apoptotic Markers in Equine Semen

Evaluation of the damage caused by the sperm preservation process is crucial to improving fertilization rates. The objective of this study was to evaluate the effects of refrigeration temperature (5°C and 15°C) and storage time (0, 12, 24, 48, and 72 hours) on apoptotic markers in equine semen. Membrane phosphatidylserine translocation index, caspase activation index, and DNA fragmentation index were analyzed using epifluorescence microscopy. Analysis of variance was used for statistical analysis, and Tukey test was used to compare means. The significance level was set at P < .05. The results demonstrated that for transport duration shorter than 24 hours, semen quality was maintained when stored at either 5°C or 15°C. A storage temperature of 5°C should be used when it is necessary to transport semen for longer than 24 hours. There was a significant decrease in semen quality after 48 hours of refrigeration. © 2013 Elsevier Inc

Credit Market Concentration, Relationship Lending and the Cost of Debt

textabstractWe investigate how the banking industry concentration and the strength of credit relationships (relationship lending) jointly affect the cost of borrowing of firms. Our results indicate that relationship lending is not associated with the rent extraction mechanism deriving from informational lock-in. Conversely, market concentration appears to be associated with firms’ higher cost of funding. But the effect is fully compensated if the relationship between the firm and the bank is long and comprehensive. Controlling for a number of covariates and for endogeneity concerns leaves results unchanged. Our results shed some new light on the unclear effects documented by Kysucky and Norden (2016) of relationship lending on the cost of financing

Avaliação dos marcadores de apoptose e cinética espermática no ejaculado de garanhões

The study aimed to evaluate the semen quality through the kinetic sperm and verify the presence of markers of apoptosis in the ejaculate of stallions. Thus, three different ejaculates from six stallions were evaluated by CASA, index of translocation of membrane phospholipids (ITPS), activation of caspase (Icasp) and DNA fragmentation index (DFI) by epifluorescence microscopy at 0, 3, 6 and 12 h. ANOVA was performed and contrasts between means by Tukey method, with significance level P < 0.05. The parameters evaluated by CASA that showed differences at all times evaluated were: total and progressive sperm motility, sperm count fast and linear velocity, as for markers of apoptosis only the IDF showed differences between times 0, 6 and 12 h.O trabalho objetivou avaliar a qualidade seminal por meio da cinética espermática e verificar a presença de marcadores de apoptose no ejaculado de garanhões. Assim, três ejaculados de seis diferentes garanhões foram avaliados, com auxílio do método CASA, em relação ao índice de translocação de fosfolipídeos de membrana (ITPS), à ativação de caspase (Icasp) e ao índice de fragmentação de DNA (IDF) com microscopia de epifluorescência às zero, três, seis e 12 horas. Foi realizada ANOVA, contrastes entre médias pelo método Tukey, com nível de significância P < 0,05. Os parâmetros avaliados pelo CASA que apresentaram diferenças em todos os momentos avaliados foram: motilidades total e progressiva, número de espermatozoides rápidos e velocidade linear; já para os marcadores de apoptose, apenas o IDF apresentou diferenças entre os momentos zero, seis e 12 horas.Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP