Fitoquímica e ensaios biológicos do extrato bruto etanólico, frações e substâncias isoladas provenientes das cascas de Geissospermum vellosii Allemão (Apocynaceae)

Orientador : Prof. Dr. Obdulio Gomes MiguelCo-orientador: Prof. Dr. Paulo Roberto WunderTese (doutorado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Ciências Farmacêuticas. Defesa: Curitiba,25/05/2012Bibliografia: fls. 121-132Área de concentração: Insumos, medicamentos e correlatosResumoResumo: Este trabalho teve como objetivo realizar o estudo fitoquímico e biológico do extrato etanólico, frações e constituintes isolados provenientes das cascas de Geissospermum vellosii Allemão (Apocynaceae). O extrato etanólico foi fracionado obtendo-se as frações diclorometano, acetato de etila, butanol e hidroalcóolica remanescente. A fração diclorometano foi submetida à cromatografia em coluna e foram isolados os constituintes (1), (3), F12 e F14. A substância (2) foi obtida após a purificação da F12 por CLAE semi-preparativa. A substância (1) foi identificada como lupeol, a (2) como (+)-sesamina, a (3) como (+)-aspidospermina e a F14 como a mistura de sesamina e aspidospermina. O extrato etanolico e frações foram submetidos à atividade alelopática por meio de caixa de poliestireno e placa de Petri; a amostra F12 e aspidospermina por meio de caixa de poliestireno e cromatoplaca; e o lupeol por meio de cromatoplaca. As amostras testadas nos ensaios alelopáticos apresentaram vários resultados sobre Triticum aestivum L. e Lactuca sativa L. Os resultados demostraram o potencial fitotóxico em mono e dicotiledôneas com influência na germinação, crescimento, respiração, teor de clorofila, atividade enzimática, índice mitótico e capacidade de recuperação. A atividade antibacteriana do extrato etanólico, frações, F12 e aspidospermina foi realizada por meio de disco difusão e MIC; e da fração diclorometano, aspidospermina e F12 por meio de bioautografia. No ensaio de disco difusão não foi verificada a inibição das bactérias testadas. No ensaio de CIM verificou-se que o extrato etanólico e a fração butanol inibiram o crescimento de S. aureus. No ensaio bioautográfico a fração diclorometano inibiu o crescimento de S. aureus, E. coli, S. epidermidis e S. typhimurium, e a aspidospermina inibiu o crescimento de S. epidermidis e S. typhimurium. A atividade antioxidante da aspidospermina e da fração diclorometano foi investigada. No ensaio antioxidante pelo método do fosfomolibdênio a aspidospermina apresentou uma capacidade antioxidante superior a rutina e inferior ao ácido ascórbico; pelo método do ácido tiobarbitúrico-espécies reativas apresentou atividade semelhante ao BHT na concentração de 1000 e 100 ppm, e ao ácido ascórbico na concentração de 500 e 100 ppm. Na verificação do potencial antioxidante pela atividade das enzimas catalase, peroxidase e superóxido dismutase, as enzimas tiveram suas atividades influenciadas pela aspidospermina e fração diclorometano. O extrato etanólico, frações, F12 e aspidospermina frente a A. salina apresentaram resultados menores que 1000 _g mL-1, indicativo de toxicidade. A aspidospermina, sesamina e F14 apresentaram imunomodulação, sendo capazes de estimular os neutrófilos humanos promovendo a liberação de complexos de oxigênio.Abstract: This work aimed to carry out the phytochemical and biological study of ethanolic extract, fractions and isolated compounds of barks from Geissospermum vellosii Allemão (Apocynaceae). The ethanolic extract was partitioned resulting in dichloromethane, ethyl acetate, buthanol and remaining hydroethanol fractions. The dichloromethane fraction was submitted to column chromatography and the compounds (1), (3), F12 and F14 were isolated. The substance (2) was obtained after F12 purification by the semi-preparative HPLC. The (1) was identified as lupeol, (2) as (+)-sesamin, (3) as (+)-aspidospermine, and F14 as sesamin and aspidospermine mixture. The ethanolic extract and fractions were submitted in allelopathic activity by way of polystyrene box and Petri plate; the F12 sample and aspidospermine by way of polystyrene box and TLC plate; and the lupeol by way of TLC plate. The samples tested in allelophaty bioassays showed several results on Triticum aestivum L. and Lactuca sativa L. These results demonstrate the phytotoxic potential against monocotyledons and dicotyledons affecting germination, growth, cellular respiration, chlorophyll content, enzymatic activity, mitotic index and recovery capacity. The antibacterial activity of ethanolic extract, F12 and aspidospermine were verified by way of disk diffusion and MIC; and dichloromethane fraction, F12 and aspidospermine by way of bioautography. However, it was not checked inhibition bacterial on the disk diffusion bioassay. The ethanolic extract and buthanol fraction inhibited the S. aureus growth on the MIC bioassay. Dichloromethane fraction inhibited the S. aureus, E. coli, S. epidermidis and S. typhimurium growth, and aspidospermine inhibited the S. epidermidis e S. typhimurium growth on the bioautographic bioassay. The antioxidant activity of aspidospermine and dichloromethane fraction were investigated. The aspidospermine presented a antioxidant capacity higher than rutin, and lower than ascorbic acid on the antioxidant activity by phosphomolybdenum method; by thiobarbituric acid reactive species method, the aspidospermine presented a similar activity as the BHT in a 1000 and 100 ppm concentration, and as ascorbic acid in 500 and 100 ppm concentration. The catalase, peroxidase and superoxide dismutase enzymes had their activities influenced by aspidospermine and dichloromethane fraction on the antioxidant potential verification. The ethanolic extract, fractions, F12 and aspidospermine tested against A. salina showed results lower than 1000 _g mL-1 which indicative a degree of toxicity. The aspidospermine, sesamine and F14 showed immunomodulation, were able to stimulate human neutrophils by releasing of oxygen complexes

Composition of essential oil and allelopathic activity of aromatic water of Aster lanceolatus Willd: (Asteraceae)

The essential oil obtained from flowers of Aster lanceolatus was submitted the CG-MS and presented as result thirteen substances with largest concentration; among them, the caryophyllene oxide with the larger one. The aromatic water obtained during the extraction process of this essential oil was forwarded to allelopathic test, and demonstrated to be capable to inhibit the germination and growth of Lactuca sativa.O óleo essencial obtido das flores de Aster lanceolatus foi submetido a CG-EM e apresentou como resultado treze substâncias, entre elas o óxido de cariofileno com a maior concentração. A água aromática obtida durante o processo de extração do óleo essencial foi encaminhada para teste alelopático, a qual demonstrou ser capaz de inibir a germinação e crescimento de Lactuca sativa

Chemical review and studies related to species from the genus Tynanthus (Bignoniaceae)

As espécies da família Bignoniaceae possuem grande predominância na região da América tropical e entre elas, as espécies do gênero Tynanthus, com representantes em grande parte do território brasileiro. Estas plantas são comumente utilizadas na medicina tradicional para os mais diversos fins e algumas pesquisas já descrevem a constituição química além de outros estudos relacionados a alguns integrantes deste gênero. Este trabalho de revisão teve como objetivo reunir informações de trabalhos publicados a respeito das espécies do gênero Tynanthus e permitiu detectar a deficiência nas pesquisas relacionadas a estas plantas, que podem trazer consigo grande importância biológica e farmacológica. Além disto, este trabalho tornou possível apontar algumas características químicas em comum entre as espécies, trazendo informações que podem auxiliar novos pesquisadores que procuram melhorar seus conhecimentos acerca destas plantas.Species from the Bignoniaceae Family, including the genus Tynanthus, are very prevalent in the tropical Americas, with specimens found in a large part of the Brazilian territory. These plants are commonly used in traditional medicine for several purposes, and some studies have described their chemical structure, in addition to other reports related to some species from this genus. This review aimed to gather information from published works concerning species of the genus Tynanthus, as well as to detect flaws in research related to these plants, which may have great biological and pharmaceutical importance. Also, this review points out some common chemical characteristics of these species, providing information that may help new researchers to improve their knowledge about these plants

A evolução do registro e prescrição de fitoterápicos no Brasil sob a perspectiva legal e sanitária

The aim of this paper is to review the herbal registration regulations (RDC no. 26/14) and to evaluate the outlook for prescription of herbal medicine at SUS. For this purpose, we’ve tracked and analyzed the record of political measures related to herbal medicine within the Brazilian health system as well as herbal registration norms which existed prior to the publication of RDC no. 26/14. The classification of herbal medicine formulated by legislation (herbal medicine and traditional herbal product) allows immediate visualization of safety and efficacy, since not all medicinal plants have clinical studies to prove safety and efficacy. The new legislation and herbal medicine monographs presented in Brazilian Pharmacopeia have brought reliability and safety to prescribers and healthcare professionals regarding drug treatment through herbal medicine. The current herbal registration legislation reveals the unceasing concern from Brazilian authorities to develop legislation that corroborates with the National Policy on Integrative and Complementary Practices and with the National Policy of Herbal Medicine at SUS and in agreement with World Health Organization recommendations in order to foster the quality of health among the Brazilian population.Este artigo propõe-se a avaliar a regulamentação de registro de fitoterápico em vigor (RDC nº 26, de 13 de maio de 2014) e as perspectivas em relação à prescrição de fitoterápicos no Sistema Único de Saúde (SUS). Para tanto, analisou-se o histórico das medidas políticas relacionadas à introdução de fitoterápicos no sistema de saúde brasileiro e as legislações de registro de fitoterápicos que vigoravam anteriormente à publicação da RDC nº 26/14. A classificação dos fitoterápicos elaborada pela legislação em vigor (medicamento fitoterápico e produto tradicional fitoterápico) permitiu a visualização imediata da comprovação de segurança e eficácia do medicamento, uma vez que nem todas as plantas medicinais possuem estudos clínicos para comprovação de sua segurança e eficácia. A nova legislação e as monografias de fitoterápicos apresentados na Farmacopeia Brasileira trouxeram maior credibilidade e segurança aos prescritores e profissionais de saúde com relação ao tratamento medicamentoso com fitoterápicos. A atual legislação de registro de fitoterápicos revela a constante preocupação das autoridades brasileiras em desenvolver normas que corroborem com a Política Nacional de Práticas Integrativas e Complementares (PNPIC) e com a Política Nacional de Plantas Medicinais e Fitoterápicos (PNPMF) introduzidas no SUS e as recomendações da Organização Mundial de Saúde (OMS) em promover qualidade no estado de saúde da população brasileira

EMERGÊNCIA E RESSURGIMENTO DE DOENÇAS INFECCIOSAS: OS DESAFIOS DAS FRONTEIRAS SANITÁRIAS

O processo de globalização, o aumento do trânsito internacional de pessoas e mercadorias e a mudança contínua da situação epidemiológica mundial, trouxeram como consequência, o aumento da porosidade das fronteiras dos países para a entrada de doenças infecciosas emergentes e reemergentes. Esse estudo realizou uma revisão da importância das fronteiras sanitárias e suas particularidades, no contexto das doenças infectocontagiosas. Recentemente, além da COVID-19, a varíola do macaco, identificada em diversos países de forma simultânea, estão no centro das atenções da OMS. Além disso, crises humanitárias complexas ocorrem em diversos países, com uma convergência de doenças, seca, fome e guerra, alimentadas pelas mudanças climáticas, desigualdade e rivalidade geopolítica, criam um cenário global de difícil controle. A integração dos sistemas de saúde de países fronteiriços, a consolidação de redes de saúde assistencial organizadas e a capacitação das redes diagnósticas, qualificadas em responder rapidamente a possíveis eventos de risco em saúde, são aspectos importantes para o fortalecimento da saúde globa

Production and characterization of alginate-starch-chitosan microparticles containing stigmasterol through the external ionic gelation technique

Stigmasterol - a plant sterol with several pharmacological activities - is susceptible to oxidation when exposed to air, a process enhanced by heat and humidity. In this context, microencapsulation is a way of preventing oxidation, allowing stigmasterol to be incorporated into various pharmaceutical forms while increasing its absorption. Microparticles were obtained using a blend of polymers of sodium alginate, starch and chitosan as the coating material through a one-stage process using the external gelation technique. Resultant microparticles were spherical, averaging 1.4 mm in size. Encapsulation efficiency was 90.42% and method yield 94.87%. The amount of stigmasterol in the oil recovered from microparticles was 9.97 mg/g. This technique proved feasible for the microencapsulation of stigmasterol.O estigmasterol, um fitoesterol com diversas atividades farmacológicas, é suscetível à oxidação quando exposto ao ar, calor e umidade. Neste contexto, a microencapsulação é uma forma de proteção contra oxidação, permitindo a incorporação do estigmasterol em diversas formas farmacêuticas e aumentar sua absorção. As micropartículas foram obtidas por gelificação iônica externa, em uma etapa, utilizando como revestimento polímeros naturais de alginato de sódio, amido de milho e quitosana. As micropartículas apresentaram formato esférico com tamanho aproximado de 1,4 mm. O rendimento foi de 94,87% e a eficiência média de encapsulação de 90,42%. A quantidade de estigmasterol no óleo recuperado das micropartículas foi de 9,97 mg/g. O método mostrou-se viável para a microencapsulação do estigmasterol

PHYTOCHEMISTRY AND BIOLOGICAL ACTIVITIES OF Zanthoxylum rhoifolium LAM., RUTACEAE - MINI REVIEW

A família Rutaceae apresenta inúmeros exemplares utilizados pela população com fim medicinal. A espécie Zanthoxylum rhoifolium é conhecido no Brasil com diversos nomes vulgares os mais conhecidos são: mamica-de-porca, tinguaciba-da-folha miúda, mamica-de-cadela, teta-de-cadela, teta-de-porca, tembetaru, tambatarão, juva, juvevê, tamanqueira-de-espinho e carne-de-anta. Os seguintes metabólitos já foram isolados de Z. rhoifolium: alcaloides, cumarinas, flavonoides, lignanas e triterpenos. A população relata diversos usos da planta no tratamento de doenças. Este trabalho tem como objetivo discutir e reunir trabalhos relacionados a espécie medicinal.PALAVRAS-CHAVE: Alcaloide; Rutaceae; Zanthoxylu

Ocotea nutans (Nees) Mez (Lauraceae): chemical composition, antioxidant capacity and biological properties of essential oil

The present study was undertaken to assess the potential uses of the essential oil obtained from Ocotea nutans (Nees) Mez. The hydrodistilled essential oil from O. nutans leaves was analyzed by gas chromatography-mass spectrometry. Fifty-eight compounds representing 87,29% of the total leaf essential oil components were identified, of which biciclogermacrene(11.41%), germacrene-D (4.89%), bisabolol11-ol(3.73%) and spathulenol (3.71%) were the major compounds. The essential oil from O. nutans were tested for antibacterial activity using the minimum inhibitory concentracion (MIC) method, Artemia salina method, larvicidal activity in Aedes aegypti, and antioxidant capacity.The antioxidant activity measured by the phosphomolybdenum complex and Prussian blue method had positive results. The minimum inhibitory concentration for the microorganisms tested allowed moderate inhibitionfor Enterococcus faecalis(MIC=500 µg/mL). Artemia salina were toxic to the organisms in the study (LC50= 71,70 μg /mL). The essential oil showed remarkable larvicidal activity potencial (LC50= 250 µg/mL). The present results showed that O. nutans essential oil has potential biological uses

Phytochemical constituents and preliminary toxicity evaluation of leaves from Rourea induta Planch. (Connaraceae)

A maioria das plantas ativas é tóxica em doses elevadas, portanto, é importante a investigação da toxicidade preliminar dos extratos das plantas. A espécie Rourea induta é uma droga potencial que não apresenta estudo fitoquímico ou biológico descrito na literatura. Assim, um estudo fitoquímico e análises toxicológicas foram realizados com o extrato etanólico obtido das folhas de Rourea induta Planch., Connaraceae. Foram obtidos um hidrocarboneto de cadeia longa, n-tetracosano, e quatro flavonóides, quercetina e três derivados glicosilados, quercetina-3-O-α-arabinofuranosideo, quercetina-3-O-β-xilosideo e quercetina-3-O-β-galactosideo. Esta é a primeira vez que estes compostos são isolados nesta espécie. As estruturas foram elucidadas por espectroscopia de RMN-13C, RMN-¹H, ultravioleta e infravermelho. A avaliação da toxicidade dos extratos foi analisada pelo método da Artemia salina e atividade hemolítica. Nenhuma das amostras testadas apresentou um potencial tóxico pelos métodos analisados.Most active plants are toxic at high doses and it is therefore important to investigate the preliminary toxicity of plant extracts. The Rourea induta species is a potential drug with no phytochemical or biological studies registered in the literature. Thus, a phytochemical study and a toxicity analysis of the ethanolic extract obtained from the leaves of Rourea induta Planch., Connaraceae, was run. A long chain hydrocarbon, n-tetracosane, and four flavonoids were identified: quercetin, and three glycosylated derivates, quercetin-3-O-α-arabinofuranoside, quercetin-3-O-β-xyloside and quercetin-3-O-β-galactoside. This is the first time these have been isolated in this species. The structures were elucidated by 13C NMR, ¹H NMR, UV and IR spectroscopy. The toxicity evaluation of extracts was performed by the brine shrimp method and determination of hemolytic activity. The samples demonstrated no toxic potential by the analyzed methods

EFEITOS ALELOPÁTICOS DAS FLORES DA Acacia podalyriaefolia A. CUNN.

Foi investigado o potencial alelopático das flores de Acacia podalyriaefolia A. Cunn.. O estudo da atividade alelopática demonstrou que o extrato etanólico bruto e suas frações diclorometano e acetato de etila tem influência significativa sobre a germinação e crescimento das radículas e hipocótilos de Lactuca sativa. O efeito verificado foi de ativação da germinação das sementes, porém sem o desenvolvimento dos folíolos tornando as mudinhas inviáveis. ALLELOPATHIC EFFECTS FROM FLOWERS of Acacia podalyriaefolia A. CUNN. Abstract The allelopathic potential from the flowers of Acacia podalyriaefolia A. Cunn. was investigated. The study of the allelopathic activity have demonstrated that the crude ethanolic extract and its fractions dichloromethane and ethyl acetate have significant influence in the germination and in the growth of radicle and of the hypocotyls from the Lactuca sativa. The effect was the activation of the germination of the seeds, although the developing of the follicles was prejudiced turning the saplings unviable