La convergence réelle selon la Théorie de la Croissance: Quelles explications pour l’Union Européenne?

L'Union Européenne est toujours et restera sûrement pendant quelque temps (avec l'élargissement) un groupe de pays marqué par des différences importantes dans les niveaux de revenu. Bien que les pays européens du Sud, qui dans les années 50 étaient classés par la Banque Mondiale comme des pays en voie de développement, fassent maintenant partie du monde développé, la vérité est qu’ils sont encore loin d’atteindre les niveaux de revenu de leur contre-partie nordique. Il semble alors que comprendre le processus de convergence réelle qui s'est produit en Europe, soit tout à fait important et puisse être utile dans un proche avenir. La Théorie Néoclassique de la Croissance peut nous aider à étudier la convergence réelle dans l'UE. Il semble y avoir deux explications qui s’opposent: pour les théoriciens de la croissance exogène, la convergence existe et est due à des productivités marginales décroissantes des facteurs; pour les théoriciens de la croissance endogène, il peut n’y avoir aucune convergence. Après avoir présenté brièvement ces deux approches théoriques, nous évaluerons l'hypothèse de convergence pour les quinze Etats membres entre 1960 et 1990 en utilisant des données en cross section et en séries temporelles et nous vérifierons s' il y a eu convergence due aux rendements décroissants. En plus de l’obtention de résultats qui supportent l’hypothèse de la convergence, nous essaierons également de définir quelques mesures de politique économique qui, selon la théorie de la croissance, doivent stimuler la convergence des Etats membres, présents et futurs.The European Union is still and will probably remain for sometime (with the enlargement) a group of countries with important differences in income levels. Although the southern european countries, which in the 50’s were classified by the World Bank as developing countries, are now part of the developed world, the truth is that they are still far from reaching the income levels of their northern counterparts. It seems then that understanding some of the real convergence process that has occurred in Europe is quite important and can be of use in the near future. The Neoclassical Theory of Growth can help us study real convergence in the EU. Here there seems to be two opposing explanations: for exogenous growth theorists convergence exists and is due to diminishing marginal productivities to inputs; for endogenous growth theorists there can be no convergence. After presenting briefly both theories we test the convergence hypothesis for the 15 member states between 1960 and 1990 using both cross section and time series data and verify if there has been convergence due to diminishing returns. In the presence of results that support the convergence hypoyhesis we also try to establish some economic policy measures that, according to the Theory of Growth, can stimulate convergence between present and future member states.A União Europeia é constituída por países que apresentam diferenciais de níveis de rendimento per capita significativos. Esta situação vai permanecer ainda durante alguns anos e agravar-se-á com o alargamento. Apesar dos países do Sul terem registado taxas de crescimento notáveis nas últimas décadas, podendo ser já classificados como países desenvolvidos, ao contrário do que acontecia na década de 50, a verdade é que o seu rendimento per capita fica ainda muito aquém do dos países do Norte. Tentar perceber se há ou não convergência real no seio da União Europeia e quais as suas causas é assim de extrema importância no contexto actual. Através da Teoria Neoclássica do Crescimento é possível analisar o processo de convergência real na UE. Esta oferece-nos contudo dois tipos de análises, aparentemente contradiórias. A Teoria do Crescimento Exógeno defende a existência de convergência real entre grupos de países na presença de produtividades marginais decrescentes dos factores. A Teoria do Crescimento Endógeno nega a existência de convergência. Depois de uma breve apresentação de ambas as teorias testa-se a hipótese de convergência real para os quinze estados-membros da UE entre 1960 e 1990 com base quer em dados seccionais quer em dados cronológicos. Dado que os resultados apoiam a hipótese de convergência são então propostas algumas medidas de política económica que podem, de acordo com a Teoria do Crescimento, estimular a convergência real entre os actuias e futuros estados-membros

The portrayals of fathers and daughters in Mary di Michele's poetry

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Comunicação e Expressão, Programa de Pós-Graduação em Letras/Inglês e Literatura Correspondente, Florianópolis, 2010Esta dissertação analisa a poesia da escritora ítalo-canadense Mary di Michele focando nos retratos de pais e filhas. O relacionamento entre pai e filhas revela dois dilemas. O primeiro dilema é caracterizado pela aceitação ou rebelião por parte das filhas em relação ao tradicional papel patriarcal do pai. O segundo dilema é caracterizado pela sustentação ou abandono das tradições italianas numa nova terra. O objetivo desta dissertação é analisar os poemas de di Michele que retratam o papel do pai e das filhas em famílias italianas de tradição patriarcal observando como o deslocamento cultural causa um choque em tradições sócio-culturais, como o patriarcado. Para atingir esse objetivo, os conceitos de patriarcado e entre-cultura são discutidos no primeiro capítulo desta dissertação juntamente com uma revisão crítica da relevante literatura sobre o trabalho de di Michele. Nesta seção alguns autores cujos trabalhos eu discuto são: Adrienne Rich, Angelika Bammer, Fred Wah, Gloria Anzaldúa, James Clifford, Judith Bennet, Simone de Beauvoir, Sylvia Walby e Smaro Kamboureli. O segundo capítulo analisa como o retrato do pai e sua conduta patriarcal irão influenciar na criação das filhas. O terceiro capítulo analisa como as filhas são retratadas para compreender a posição delas de manter ou abandonar as tradições de seu pai como conseqüência do deslocamento. O quarto capítulo analisa como questões de gênero e de cultura da criação das filhas influencia as escolhas de vida delas, especialmente as escolhas de parceiros. Essa dissertação conclui que o pai é retratado de forma opressiva e autoritária caracterizando uma sociedade patriarcal de opressão emocional. O comportamento dele não o leva a felicidade, alívio do cansaço, ou satisfação em relação às escolhas das filhas. As escolhas de vida das filhas refletem uma crítica sobre família e condições de casamento por causa delas sentirem-se desconfortáveis com os parceiros que elas escolheram; o que as leva a viver submissivamente infelizes como escravas dos maridos ou a subverter as normas patriarcais revoltando-se contra elas

Role of adenosine on the resistance to temozolomide anti-tumor agent in glioblastoma

Glioblastoma is a primary brain tumor of glial cells with a high incidence in adults and is one of the most abundant brain cancer pathologies. This type of tumor is associated with high genomic instability caused by global hypomethylation of the DNA, that induces activation of oncogenes, loss of imprinting and increased genomic instability. Adenosine is a purine nucleoside important to neuroprotection, neuromodulation, synaptic plasticity and immunomodulation. In hypoxic and stress regions in the brain tumors, commonly found in glioblastoma, factors induced by hypoxia (HIF) are activated. These factors modulate the expression of different proteins, particularly the CD39 and CD73. These enzymes are involved in the metabolism of adenosine, increasing the formation of this nucleoside extracellularly. Increased extracellular levels of adenosine lead to increased adenosine uptake into the cell by nucleoside transporters, producing accumulation of intracellular adenosine. Increased intracellular levels of adenosine or homocysteine lead to an increase of Sadenosylhomocysteine (SAH) levels and a decrease of the S-adenosylmethionine (SAM)/SAH ratio, since the reaction of adenosine with homocysteine to give SAH, catalyzed by SAH hydrolase, is near equilibrium. SAH is a competitive inhibitor of SAMdependent methyltransferases, its accumulation causing global hypomethylation of DNA. The O-6-methylguanine-DNA methyltransferase (MGMT) is a DNA repair protein whose function is to remove methyl groups from the guanines in DNA. Although, very different mutations can cause the lack of MGMT expression, the hypermethylation of MGMT gene promoter is the main responsible for this. Early mutations in glioblastoma frequently lead to hypermethylation in the MGMT gene promoter, which causes gene silencing and lack of expression of the MGMT DNA repairing protein. It is known that the expression of this tumor suppressor protein is responsible for the lack of glioblastoma’s sensitivity to available first-line treatment, the alkylating drug Temozolomide (TMZ). TMZ is an alkylating agent used in glioblastomas treatment, usually combined with radiotherapy. However, the success of this agent is very low, above 20 % response rat, and the prognosis of the glioblastoma patients around one year. The TMZ effect is influenced by several factors inside the cell, like DNA mismatch repair system, MGMT expression, and base excision repair system. The expected final effect of TMZ is the apoptosis of the glioblastoma cells. Another important effect is the acquired resistance which happens after the first treatment with TMZ in many patients. In vitro, different mechanisms became active after a first TMZ treatment, like an increase of MGMT expression and mutations in the DNA mismatch repair system proteins. The aim of this study is to understand if there is a relationship between the increased intracellular adenosine, associated with global hypomethylation of DNA, and the chemotherapeutic resistance to TMZ caused by an increased in MGMT expression and activity. Three glioblastoma cell lines, U87, U373, and SNB19 were used. Intracellular adenosine levels were increased by incubating cells for 72h with ABT 702 dihydrochloride (ABT, 15µM), an adenosine kinase inhibitor. TMZ (100 and 500 µM) was added for the last 1, 2, 3, 24 and 48 hours of incubation. MGMT expression and localization were visualized by immunocytochemistry and western blot, respectively. Cell viability/proliferation was assessed by CCK8 assay. The results by western blot analysis showed that increased levels of adenosine do not affect MGMT expression. A decrease in cell viability/proliferation was observed after treatment with ABT in U373 cell line. After immunocytochemistry against active caspase 3, a marker of cell apoptosis, it was possible to see that the decrease of cells number produced by ABT is due to a decrease in cell proliferation and not cell apoptosis. TMZ (500 µM) was able to decrease the cell viability/proliferation in SNB19 and U373 cell lines. We prove by immunocytochemistry that this effect involves cell death mechanisms mediated by caspase 3 activation, like apoptosis. The combined treatment with TMZ plus an inhibitor of MGMT, we visualized a more accentuated effect on cell survival, but the relative effect of TMZ was not affected because the inhibitor causes its own cytotoxicity. Increasing levels of adenosine with ABT did not modified the TMZ effect on cell survival in U373 cell line, but in SNB19 cell lines seems to be a recovery of cell survival after combined treatment with ABT and TMZ.O Glioblastoma é o tipo de tumor cerebral mais comum e mais agressivo do sistema nervoso central. Constitui 60 a 70% de todos os gliomas. Este tipo de tumores englobam um conjunto de caraterísticas próprias. Apresenta elevada quimiorresitência através da ativação do sistema MRD (sistema de resistência a múltiplas drogas) e aumento da expressão de transportadores ABC que facilitam a expulsão de agentes externos à célula. São encontrados no interior do tecido tumoral vários nichos com subpopulações celulares de células tipo-estaminal de glioblastoma (GSC - “Glioblastoma Stem-like Cells”), que conferem alta capacidade tumorigénica e de quimiorresistência. As GSC encontrarem-se principalmente em zonas de hipoxia e apresentam uma elevada capacidade de autorrenovação, diferenciação celular e propagação. O glioblastoma é designado comumente como um glioma de grau 4 por apresentar características próprias que o diferem de outros tumores cerebrais, como a elevada taxa de proliferação, grande capacidade de invasão, heterogeneidade celular com vários tipos de células e diferentes graus de diferenciação, elevada angiogénese e extensas áreas de necrose. O tempo médio de sobrevivência de um paciente com glioblastoma ronda os 12 meses, sendo que o tratamento padrão passa por recessão cirúrgica, radioterapia e quimioterapia com agentes alquilantes, principalmente. Pesquisas de novas terapias têm surgido tendo como alvo a inibição de proteínas das vias de sinalização que regulam o estado de hipoxia. Por análise de transcriptoma identificaram-se quatro subtipos de glioblastomas de alto grau, sendo eles o pré-neural, neural, clássico e mesenquimal. Cada subtipo apresenta um perfil clínico próprio sendo o mesenquimal o mais agressivo e com mais potencial tumorigénico. Nestes tumores a formação de novos vasos sanguíneos ocorre lentamente, limitando a distribuição de oxigénio e nutrientes nas células. É esta a principal causa das longas áreas de necrose e hipóxia que contribuem para um mau prognóstico da doença. Em condições fisiológicas normais a pressão de oxigénio mantêm-se no intervalo de 20- 100 mm Hg, quando as pressões descem abaixo desse intervalo considera-se estado de hipoxia moderado. Se a pressão for inferior a 4 mm Hg é considerado um estado celular de hipoxia severa. Contribuindo para este estado está ainda o facto de o fluxo sanguíneo no interior do tumor não ser contínuo, acontecendo oscilações de estado normal, hipoxico moderado ou hipoxico severo. O estado de hipoxia controla a expressão de vários factores essenciais para a sobrevivência tumoral, instabilidade genómica, invasão, metástases e metabolismo celular. Esta regulação acontece pela activação de factores de transcrição induzidos por Hipóxia (FIH), existindo três tipos de FIHs (1a, 2a e 3a). Com a diminuição dos níveis de oxigénio torna-se possível a ligação dos FIHs aos elementos de resposta a hipóxia (ERHs) iniciando a transcrição de diversos genes. Consoante o tipo de hipóxia são ativados diferentes tipos de FIHs e a resposta celular é diferente, por exemplo, a ativação do HIF1a tem como alvo enzimas glicolíticas enquanto que o HIF2a atua em proteínas de invasão. O HIF 1a é o que tem o maior nível de expressão no glioblastoma e atua sobre-expressando ectonucleotidases como a CD39 e CD73. Por sua vez, a enzima CD39 contribui para a hidrólise do ATP a AMP e CD73 pela formação de adenosina a partir do AMP. Assim, a sobre-expressão da CD39 e CD73 provoca um aumento de adenosina extracelular. O aumento dos níveis extracelulares de adenosina conduz ao aumento da passagem desta para o interior da célula através dos transportadores de nucleósidos. A adenosina é um nucleósido envolvido na homeostase do metabolismo energético e de ácidos nucleicos e do ciclo de metionina, produz proteção contra insultos neurotóxicos e plasticidade sináptica. A maioris das acções da adenosina são mediadas por activação de receptores de adenosina acoplados a proteína G (A1, A2A, A2B e A3). A concentração deste nucleósido em zonas hipoxicas, esquémicas, tumorais e inflamatórias aumenta cerca de cem vezes relativamente às concentrações fisiológicas. A ação da adenosina mediada pelos receptores em glioblastoma, não é consensual, sendo que em muitos trabalhos é referido um papel anti-apoptotico e noutros, pelo contrário, ações pró-apoptoticas. Novas evidências sugerem que a adenosina também pode atuar por mecanismos intracelulares independentes dos receptores. A adenosina é removida por acção da cinase da adenosina, que catalisa a fosforilação desta a AMP, e pela desaminase da adenosina, qua catalisa a hidrólise da adenosina a Inosina. Intracelularmente a adenosina é formada pela hidrólise do AMP a adenosina catalisada pela 5-nucleotidase. Outra via para a sua formação é mediada pela ação da hidrolase da S-adenosilhomocisteína (SAH) que converte Sadenosilhomocisteína em adenosina e homocisteína. A reacção catalisada pela hidrolase da S-adenosilhomocisteína encontra-se em equilíbrio rápido e, como tal, um aumento de adenosina ou homocisteína conduz ao rápido excesso de S-adenosilhomocisteína. Por sua vez, a S-adenosilhomocisteína é um potente inibidor das transmetilases dependentes de S-adenosilmetionina (SAM), o principal doador de grupos metilo nas células. Os grupos metilo estão envolvidos numa das principais modificações covalentes que ocorrem a nível genético nas células, a metilação. Vários trabalhos têm suportado a hipótese de o aumento intracelular de adenosina poder causar uma hipometilação global do ADN nas células. A diminuição da metilação do DNA é uma das principais características do glioblastoma causando instabilidade genómica e perda de “imprinting”, em muitos casos conduzindo à diminuição da expressão de proteínas próapoptoticas e por outro lado à sobre-expressão de proteínas que contribuem para a progressão tumoral. A relação entre a adenosina e o metabolismo dos grupos metilo pode contribuir para perceber mecanismos promotores-tumorais neste tipo de tumor. A metilação do DNA ocorre em locais específicos chamados “ilhas CpG”. No entanto, apesar de se observar uma hipometilação global do DNA no glioblastoma, pode ocorrer hipermetilação local na região promotora de alguns genes específicos. Esta característica dos gliomas confere-lhes a capacidade de bloquear algumas proteínas supressoras de tumor como por exemplo a metiltransferase da O6-metilguanina (MGMT). A MGMT é uma proteína reparadora de DNA cuja sua função é remover grupos alquilo da posição O6 das guaninas sendo que esta é a principal lesão que acontece a nível genético nas células. 60 a 85% dos gliomas apresenta perda local do cromossoma 10 onde está localizado o gene que codifica para a MGMT. Por outro lado, em 45 a 70% dos gliomas o promotor do gene MGMT encontra-se hipermetilado não permitindo a transcrição do gene e expressão da proteína. O tratamento quimioterapêutico padrão aplicado a glioblastomas baseia-se em agentes alquilantes. Embora este tipo de tratamento já tenha sido imensamente estudado e otimizado ainda apresenta taxas de sucesso demasiado baixas. O temozolomide (TMZ) é um agente quimioterapêutico de primeira linha no tratamento de glioblastoma, o qual apresenta uma taxa de sucesso de apenas 20%. A ação do TMZ baseia-se na adição de grupos metilo nas posições O6 e N7 das guaninas e N3 das adeninas, sendo que a mais agressiva para a célula é a adição na posição O6 da guanina produzindo O6- metilguanina. Este tipo de lesão deveria, em condições normais, acionar o sistema de reparação de mismatch do ADN (MMR). Esta ativação do sistema MMR deveria causar elevada citotoxicidade para a célula e terminar em apoptose. No entanto, em células com expressão de MGMT, o TMZ não consegue exercer qualquer função pois sempre que é adicionado um grupo metilo na posição O6 das guaninas este é imediatamente retirado e a lesão do ADN deixa de existir. Esta é a principal causa de resistência aos tratamentos alquilantes, principalmente porque parecem haver mecanismos que conseguem reativar a expressão de MGMT depois de um tratamento com agentes alquilantes, o que é comumente chamado como resitência adquirida e uma das principais causas da tão pouca taxa de sobrevivência destes pacientes. Por outro lado, mesmo que não exista qualquer expressão da proteína MGMT, se o sistema MMR não estiver funcional também não é acionado qualquer mecanismo que cause citotoxicidade na célula, mais grave ainda é que muitas proteínas que fazem parte deste sistema deixam de estar funcionais depois de um primeiro tratamento com TMZ. O objetivo deste trabalho consistiu em perceber, por um lado, se a adenosina tem algum efeito nos níveis de expressão de MGMT, uma vez que a possível hipometilação global do ADN causada pelo aumento da concentração de adenosina poderá afetar o nível de metilação do promotor do seu gene. Por outro lado pretende-se estudar se ao aumentar os níveis de expressão da MGMT, a adenosina diminuirá o efeito citotóxico do temozolomide em glioblastoma. Para tal incubaram-se durante 3 dias linhas celulares de glioblastoma, na presença de um inibidor selectivo da cinase da adenosina, o ABT 702, e na presença ou na ausência de temozolomide. O ABT 702 qual promove o aumento da concentração da adenosina endógena por inibição da sua degradação. Foram estudadas 3 linhas de glioblastoma: U87, SNB19 e U373. Os níveis de expressão de MGMT foi analisado por Wester Blot e a sobrevivência/proliferação celular foi analisada pelo método do CCK-8. Os resultados mostraram que o ABT 702 (15 µM) não afetou a expressão dos níveis de MGMT em nenhuma das linhas. No entanto o ABT 702 mostrou reduzir proliferação celular em células U373. Por outro lado, foi importante avaliar qual a resposta das células ao agente quimioterapêutico TMZ. O TMZ (500 µM) diminuiu a sobrevivência/proliferação celular nas células U373 e SNB19 mas não nas U87. Em condições de concentrações de adenosina aumentada o efeito do TMZ na viabilidade/proliferação celular não sofreu alteração nas células U373, embora fosse observada uma tendência para diminuição do efeito do TMZ na células SNB19. Por último, era importante saber se a diminuição da sobrevivência celular, avaliada pelo ensaio CCK8, produzida por condições de adenosina aumentada, por tratamento com ABT 702, e produzida tratamento com TMZ, envolviam o mesmo mecanismo. Por immunocitoquímica foi possível avaliar que a diminuição celular causada pelo incremento de adenosina não envolve mecanismos de morte celular, enquanto que a diminuição celular após tratamento com TMZ deve-se a mecanismos apoptoticos, tal como descrito na literatura

Econometric models for spatio-temporal count data

To contribute to a better understanding of the fundamental process behind the spatial and temporal correlation as well as to describe the resulted dynamics, sometimes still less reflected in econometric models, is the aim of this study. It is intended to improve the development of the necessary economic analysis which allow to optimize management policies in the most diverse areas of activity, be it hospital, road or other. This work develops and applies econometric models for count data with dependencies in space and time. The existing models are often based on the Gaussian assumption, which is sometimes inadequate. It is interesting to extend it to other types of distributions, generalizing the applicability of the available models and accompanying this development with estimation methods that make them useful. Bayesian spatial autoregressive and hierarchical models are considered as alternatives to the aforementioned models, since they are a valid and flexible alternative in the modeling of spatial effects. Spatial and spatio-temporal versions of autoregressive Bayesian models are proposed, establishing the same mathematical framework for autoregressive and hierarchical models for counting data. This is an area still underdeveloped within econometrics, given the associated but necessary complexity, and it is essential to quantify the advantages and disadvantages of its use. For the proposed methodologies, it is considered its application and implementation, in several areas of activity with scientific and technological interest, namely in the health area. In this context, a study of hospital management data is carried out, specifically the calls for the national health care line, Saúde24, in order to the development of indicators for decision support, evaluation and implementation of management and government policies, as well as to the prediction of future behavior under different scenarios. Another application in the area of road safety is also considered

Phonological Awareness Tests of Coimbra’s Neuropsychological Assessment Battery : reliability and validity studies

A Bateria de Avaliação Neuropsicológica de Coimbra (BANC) integra, entre diversos outros instrumentos de avaliação, três testes de consciência fonémica: um teste de eliminação e dois de substituição de fonemas. No presente trabalho, apresentam-se dados relativos às propriedades psicométricas destes testes, designadamente à precisão (consistência interna e estabilidade temporal), à validade de constructo (progressão dos resultados em função da idade e intercorrelações entre os testes), à validade discriminante (diferenciação do desempenho de grupos com e sem problemas de aprendizagem), e à validade concorrente (correlações com testes de inteligência, outros testes da BANC e os resultados escolares dos sujeitos). Os resultados obtidos atestam a adequação psicométrica do teste de eliminação e de um dos testes de substituição, sendo menos favoráveis, em termos de precisão e progressão em função da idade, no que concerne ao outro teste de substituição.Coimbra’s Neuropsychological Assessment Battery contains, amongst several other assessment instruments, phonemic awareness tests: one phoneme elision test and two phoneme substitution tests. This paper presents data concerning their psychometric properties, namely precision (internal consistency and temporal stability), construct validity (age differentiation and tests’ intercorrelations), discriminant validity (differentiation of groups with and without learning problems) and concurrent validity (correlations with intelligence tests, other tests from the Battery and academic grades of subjects). The results obtained demonstrate the psychometric adequacy of the elision test and of one of the substitution’s tests, but are less favourable regarding the other substitution test, namely in terms of precision and age differentiation

Biomarkers for the identification of atrial fibrillation in ischemic stroke : atrial natriuretic peptide versus N-terminal-pro brain natriuretic peptide

Trabalho Final do Curso de Mestrado Integrado em Medicina, Faculdade de Medicina, Universidade de Lisboa, 2021Um terço dos acidentes vasculares cerebrais (AVC) isquémicos têm etiologia indeterminada pela classificação TOAST. Parte deve-se a episódios paroxísticos de fibrilhação auricular (FA). Vários estudos mostraram a utilidade do N-terminal do péptido natriurético cerebral (NT-proBNP) na identificação de AVC cardioembólico associado a FA. Porém, o péptido atrial natriurético (ANP), produzido nas aurículas, poderá ter maior acuidade que o NT-proBNP no diagnóstico de FA, sendo esta uma arritmia de origem atrial. O objetivo deste trabalho foi determinar qual dos biomarcadores, ANP ou NT-proBNP, tem maior acuidade para diagnosticar FA em doentes com AVC isquémico. Realizou-se um estudo observacional utilizando uma coorte de doentes com amostras biológicas guardadas no biobanco do Instituto de Medicina Molecular, internados de agosto de 2012 a outubro de 2013 na Unidade de AVC do Hospital de Santa Maria. Critérios de inclusão: AVC isquémico agudo ou acidente isquémico transitório (AIT); consentimento para recolha e análise de amostras de sangue e sua disponibilidade no biobanco do IMM. Critérios de exclusão: TFG72 horas após o início de sintomas ou quantidade insuficiente; etiologia indeterminada por duas ou mais causas possíveis. Determinou-se a etiologia do AVC pela classificação TOAST. A análise estatística incluiu determinação e comparação de curvas ROC. Incluíram-se 198 doentes, 61.6% homens, com idade mediana 65 anos. As curvas ROC para o diagnóstico de eventos cardioembólicos com FA versus não cardioembólicos obtiveram as AUC: NT-proBNP 0.82 (IC 95% 0.74-0.89) e ANP 0.69 (IC 95% 0.60-0.78). No diagnóstico de cardioembólicos com FA versus indeterminados: NT-proBNP 0.83 (IC 95% 0.75-0.91) e ANP 0.68 (IC 95% 0.57-0.79). NT-proBNP mostrou maior acuidade para diagnosticar FA que o ANP, o que pode dever-se à semi-vida plasmática do ANP ser inferior à do NT-proBNP. Concluiu-se que o NT-proBNP deverá permanecer o biomarcador de eleição para auxiliar o diagnóstico de FA no AVC isquémico.One-third of ischemic stroke’s etiology is undetermined according to the TOAST classification. A fraction is due to paroxysmal atrial fibrillation (AF) events. Many studies demonstrated the utility of N-terminal probrain natriuretic peptide (NT-proBNP) for identifying cardioembolic stroke associated with AF. However, atrial natriuretic peptide (ANP), synthesized in the atria, could have higher acuity than NT-proBNP for diagnosing AF, an atrium originated arrhythmia. The objective of this study was to determine which biomarker, ANP or NT-proBNP, has higher diagnostic accuracy for AF in patients with ischemic stroke. An observational study was carried out, with a cohort of patients whose biological samples were stored in the biobank of Instituto de Medicina Molecular and who were admitted to the stroke unit of Hospital de Santa Maria between August of 2012 and October of 2013. Inclusion criteria: acute ischemic stroke or transient ischemic attack (TIA); consent to collecting and analyzing blood samples and their availability in the biobank of IMM. Exclusion criteria: GFR72 hours after the start of symptoms or insufficient amount; undetermined etiology due to two or more possible causes. Stroke etiology was determined with the TOAST classification. Statistical analysis included determination and comparison of ROC curves. A sample of 198 patients was included, with median age of 65 years and 61.6% of men. The ROC curves for cardioembolic with AF versus noncardioembolic stroke had the following AUC: NT-proBNP 0.82 (95% CI 0.74- 0.89) and ANP 0.69 (95% CI 0.60-0.78). For diagnosing cardioembolic with AF versus undetermined stroke: NTproBNP 0.83 (95% CI 0.75-0.91) and ANP 0.68 (95% CI 0.57-0.79). NT-proBNP presented a higher accuracy than ANP for diagnosing AF. This can be explained by the fact that ANP’s plasma half-life is shorter than NT-proBNP’s. In conclusion, NT-proBNP should remain the biomarker of choice for diagnosing AF in ischemic stroke

Paclitaxel-loaded PLGA nanoparticles: preparation, physicochemical characterization and in vitro anti-tumoral activity

The main objective of this study was to develop a polymeric drug delivery system for paclitaxel, intended to be intravenously administered, capable of improving the therapeutic index of the drug and devoid of the adverse effects of Cremophor® EL. To achieve this goal paclitaxel (Ptx)-loaded poly(lactic-co-glycolic acid) (PLGA) nanoparticles (Ptx-PLGA-Nps) were prepared by the interfacial deposition method. The influence of different experimental parameters on the incorporation efficiency of paclitaxel in the nanoparticles was evaluated. Our results demonstrate that the incorporation efficiency of paclitaxel in nanoparticles was mostly affected by the method of preparation of the organic phase and also by the organic phase/aqueous phase ratio. Our data indicate that the methodology of preparation allowed the formation of spherical nanometric (<200 nm), homogeneous and negatively charged particles which are suitable for intravenous administration. The release behaviour of paclitaxel from the developed Nps exhibited a biphasic pattern characterised by an initial fast release during the first 24 h, followed by a slower and continuous release. The in vitro anti-tumoral activity of Ptx-PLGA-Nps developed in this work was assessed using a human small cell lung cancer cell line (NCI-H69 SCLC) and compared to the in vitro anti-tumoral activity of the commercial formulation Taxol®. The influence of Cremophor® EL on cell viability was also investigated. Exposure of NCI-H69 cells to 25 [mu]g/ml Taxol® resulted in a steep decrease in cell viability. Our results demonstrate that incorporation of Ptx in nanoparticles strongly enhances the cytotoxic effect of the drug as compared to Taxol®, this effect being more relevant for prolonged incubation times.http://www.sciencedirect.com/science/article/B6T3D-46SG28H-4/1/5653b932f0531b537a3a12747fab894

Histoplasmosis in Portugal: rare infection?

O Histoplasma capsulatum é o agente etiológico da histoplasmose, apresenta duas variedades com caraterísticas epidemiológicas diferentes var. capsulatum e var. duboisii endémicas no continente americano e no continente africano, respetivamente. Nas últimas décadas têm sido descritos casos de histoplasmose na Europa e em países asiáticos como a China, onde esta infeção não é considerada endémica. A facilidade de movimentação das populações tem contribuído para alterar o padrão epidemiológico desta infeção. Este trabalho tem como objetivo analisar o número de casos registados em Portugal e chamar a atenção para a importância de melhor se conhecer a epidemiologia desta infeção no nosso país. A histoplasmose não é uma doença de declaração obrigatória, os casos de histoplasmose existentes resultam de diagnósticos clínicos observados no âmbito dos internamentos hospitalares. O número médio de episódios de internamento hospitalar referenciados nos Base de dados de Grupos de Diagnóstico Homogéneo durante o período de 2009 a 2014 foi de 23 episódios/ano. No mesmo período foram descritos na literatura dez casos de Histoplasmose em Portugal, tratando-se sobretudo de apresentações clínicas de interesse científico em que algumas se referem a casos com período de latência de 40 anos após exposição. Apesar de ser considerada uma doença rara na Europa, clínicos e microbiologistas devem estar em alerta e aumentar o seu conhecimento sobre a patogenicidade, os métodos de diagnóstico diferencial, o tratamento e a evolução do padrão epidemiológico desta e de outras infeções fúngicas.Histoplasma capsulatum is the etiologic agent of histoplasmosis; it has two varieties with different epidemiological features: var. capsulatum and var. duboisii, endemic in America and Africa, respectively. In the last decades, several cases of histoplasmosis have been reported in European and Asian countries like China, where this infection is not considered endemic. The continuous flow of populations around the world has contributed to the change the epidemiological pattern of this infection. This work aims to analyze the number of cases registered in Portugal and raise attention to the importance of a better understanding of the epidemiology of this infection in our country. Histoplasmosis is not a notifiable disease and therefore, the existing cases of histoplasmosis in our country result of clinical diagnosis in the context of hospital admissions. The average number of hospitalization episodes referenced in the Homogeneous Diagnostic Group Database during the period 2009-2014 was of 23 episodes/year. In the same period, ten cases of histoplasmosis were published. These publications are mostly clinical presentations of scientific interest, some of which describe histoplasmosis cases with a latent period of 40 years after exposure. Although considered as a rare disease in Europe, physicians and clinical microbiologists should be aware of this infection. An increased knowledge on the pathogenicity, methods of differential diagnosis, and treatment is, therefore, mandatory to understand the evolution of the epidemiological pattern of this and other fungal infections

Algorithm for the diagnosis of deep fungal infections

Amostras de tecidos de doentes com suspeita de infeções fúngicas profundas ou subcutâneas foram analisadas no Laboratório Nacional de Referência de Infeções Parasitárias e Fúngicas do INSA, de acordo com um algoritmo de diagnóstico desenvolvido que apresenta uma abordagem polifásica, que tem por objetivo permitir um diagnóstico laboratorial mais rápido das infeções fúngicas profundas. Quarenta e seis amostras de tecido de 39 doentes com suspeita de infeções fúngicas profundas ou subcutâneas foram analisadas durante um período de 26 meses ( janeiro de 2015-fevereiro de 2017) pelo laboratório do INSA, usando uma abordagem laboratorial que incluiu cultura, PCR panfúngica e PCR dirigida a Aspergillus. Do total de amostras estudadas, 23 foram positivas para fungos (PCR, cultura e/ou histologia). Das 46 amostras, 16 apresentaram resultados positivos para DNA fúngico. Em 12 amostras foi detetado um sinal positivo por PCR panfúngica e em 6 por PCR dirigida a Aspergillus (em 2 das amostras ocorreu deteção pelas duas metodologias). Em 61% (22/36) das amostras estudadas, houve concordância entre os métodos moleculares e culturais. Os agentes etiológicos identificados foram Candida albicans, C. glabrata, C. tropicalis, Trichosporon montevideense, Alternaria spp., Exophiala sp., Trichoderma sp., Histoplasma spp., Aspergillus fumigatus, Trichophyton rubrum e Paracoccidioides brasiliensis. Os resultados obtidos mostraram que a abordagem polifásica proposta parece ser uma boa estratégia na deteção de fungos em amostras de tecidos, permitindo eventualmente um melhor prognóstico. Em estudos posteriores, pretende-se estudar um maior número de amostras clinicas e implementar mais metodologias moleculares que permitam a deteção dirigida a determinados géneros fúngicos.Tissue specimens from patients with suspicion of having deep or subcutaneous fungal infections were analyzed at the National Reference Laboratory for Parasitic and Fungal Infections of INSA, according to a developed diagnostic algorithm comprising a polyphasic approach. This algorithm might allow a faster laboratory diagnosis of deep fungal infections. Fortysix tissue samples from 39 patients suspected of having deep or subcutaneous fungal infections were analyzed during a 26-month period (January 2015-February 2017) by the laboratory of INSA, using a laboratory approach that includes culture, panfungal PCR and Aspergillus-directed PCR. From the total samples studied, 23 were positive for fungi (PCR, culture and/or histology). From the 46 samples, 16 showed positive results for fungal DNA. In 12 samples a positive signal was detected by panfungal PCR and in 6 by Aspergillus-directed PCR (in 2 samples, there was positive detection using both methods). In 61% (22/36) of the samples studied, there was concordance between molecular and cultural methods. The etiological agents identified were Candida albicans, C. glabrata, C. tropicalis, Trichosporon montevideense, Alternaria spp., Exophiala sp., Trichoderma sp., Histoplasma spp., Aspergillus fumigatus, Trichophyton rubrum and Paracoccidioides brasiliensis. The results showed that the proposed polyphasic approach seems to be a good strategy for the detection of fungi in tissue samples, possibly allowing a better prognosis. In subsequent studies, it is intended to study a higher number of clinical samples and to establish more directed PCRs, allowing the detection of specific fungal genera.info:eu-repo/semantics/publishedVersio