Big five personality and influencer marketing related behaviors and attitudes : an exploration

With social media deeply rooted into individual’s lives, influencer marketing has become one of the most used marketing tools by brands. However, it is still necessary to conduct more empiric research to understand the factors involved in consumer’s answers to influencer market. This study aims to explore relations between consumers’ personality, supported by the Big Five personality theory, and influencer marketing related attitudes and behaviors. To do so, data was collected through an online survey targeted at Millennials and Generation Z. Results were tested for covariance and significante mean differences. Findings indicate correlation between extraversion and active engagement with influencers, and between conscientiousness and previous purchases made by influencer recommendation. When it comes to platform utilization, there was evidence of higher conscientiousness in users of LinkedIn, while Twitter users showed a lower score in this personality trait. Meanwhile, TikTok users demonstrated higher neuroticism and Twitch users demonstrated lower extraversion. Higher conscientiousness and openness to experience were found in followers of influencers on LinkedIn, lower openness to experience was found in followers of influencers on YouTube, and lower extraversion when it comes to followers of influencers on Twitch. Additionally, higher agreeableness was found in followers of celebrities, higher conscientiousness in fashion and beauty followers, lower conscientiousness was found in gamming followers and lower extraversion in humor followers. Lastly neuroticism was lower in users preferring travel content, conscientiousness was higher in users preferring fashion and beauty content and extraversion was lower in users preferring lifestyle content. This research intends to complement and extend the literature in influencer marketing and consumer behavior, and to provide relevant guidelines to the definition of brands’ influencer marketing strategy.Com as redes sociais enraizadas na rotina das pessoas, o influencer marketing tornouse uma das ferramentas de marketing mais utilizadas pelas marcas. No entanto, é ainda necessário desenvolver estudos empíricos para compreender melhor os fatores que afetam a resposta dos consumidores ao influencer marketing. Este estudo pretende contribuir para esta lacuna na investigação, ao explorar as relações entre a personalidade dos consumidores, suportada pela teoria de personalidade dos Cinco Fatores, e as suas atitudes e comportamentos face ao influencer marketing. Nesse sentido foram recolhidos dados através de um questionário junto de uma amostra de consumidores das gerações Millennial e Z. Os resultados foram testados para a covariância e diferenças significativas de médias. As evidências indicam que existe uma correlação entre a extroversão e o envolvimento ativo com influenciadores e entre a conscienciosidade e as compras passadas, feitas devido a recomendações de influencers. No que diz respeito às plataformas, os utilizadores do LinkedIn, revelaram uma conscienciosidade mais alta, enquanto os do Twitter registaram um valor mais baixo nesta dimensão da personalidade. Por outro lado, os utilizadores do TikTok demonstraram um neuroticismo mais elevado e os do Twitch uma menor extroversão. Indivíduos que seguem influencers no LinkedIn denotam uma maior conscienciosidade e abertura a novas experiências, aqueles que os seguem no YouTube caracterizam-se por uma mais baixa abertura a novas experiências e os que o fazem no Twitch apresentam valores mais baixos de extroversão. Relativamente às categorias de conteúdo, os seguidores de conteúdos de celebridades revelaram valores mais altos de amabilidade, os de moda e beleza uma maior conscienciosidade, os de gamming uma menor conscienciosidade e os de humor uma menor extroversão do que não seguidores destes temas. Por último, o neuroticismo registou valores mais baixos em indivíduos que preferem conteúdo de viagens, a conscienciosidade foi mais elevada em quem prefere conteúdo de moda e beleza e a extroversão foi mais baixa em quem prefere conteúdo de estilo de vida. Os resultados deste estudo contribuem para completar e alargar a literatura sobre influencer marketing e comportamento do consumidor, e trazem contributos relevantes para a definição da estratégia das marcas que recorrem a esta ferramenta

Biosynthesis of rare methylglucose lipopolysaccharides in rapidly-growing mycobacteria : characterization of a key hydrolase

Dissertação de mestrado em Bioquímica, apresentada ao Departamento de Ciências da Vida da Faculdade de Ciências e Tecnologia da Universidade de Coimbra.Mycobacterium tuberculosis is the most infamous member among mycobacteria, although this genus already contains over 160 species, many of which opportunistic pathogens. These nontuberculous mycobacteria (NTM) are ubiquitous inhabitants of soils and waters and the cause of atypical infections frequently acquired in natural and man-made environments namely water distribution systems and hospitals. The emergence of drug- and disinfectant-resistant strains claims for urgent measures to fight these pathogens. The adaptive success and resilience of mycobacteria is intimately associated to a lipid-rich cell wall that includes a thick layer of mycolic acids, which is impermeable to many antimicrobial agents and an effective barrier to host defenses. Mycobacteria produce unique polymers namely the intracellular polysaccharides of methylglucose (MGLP) or methylmannose (MMP), which have indirect but crucial involvement in cell wall biogenesis as they modulate the synthesis of fatty-acids, the precursors of mycolic acids. Although MGLPs and MMPs have been discovered decades ago, only recently have their biosynthetic pathways been investigated at the genetic detail. The primer for MGLP synthesis is glucosylglycerate (GG), which was shown to accumulate during growth in nitrogen-starved M. smegmatis but not in nitrogen-rich medium. The addition of a nitrogen source to nitrogen-restricted cultures led to depletion of GG, implying the existence of an enzyme for its hydrolysis. We selected M. hassiacum to investigate the fate of GG during growth in nitrogen-depleted versus nitrogen-rich media. Since a hydrolase with GG-hydrolytic activity had recently been described in thermophilic bacteria, we probed this organism’s genome and cloned the homologous gene. The purified recombinant GG hydrolase (GgH) specifically hydrolysed GG to glucose and glycerate at 42ºC and pH 5.7 (optimal conditions), with Mg2+ and KCl significantly enhancing activity and GgH stability. The enzyme exhibited Michaelis-Menten kinetics at 37, 42 and 50ºC with comparable catalytic efficiencies. The purified GgH showed a single 51.2 kDa band on denaturing electrophoresis, but behaved as a dimeric protein in solution with a molecular mass of about 108.9 ± 2.6 kDa in size-exclusion chromatography. Since GgH activity likely depletes cellular GG and may represent a regulatory node in MGLP biosynthesis, the understanding of the regulation of its expression by nitrogen fluctuations is crucial. The unique biochemical features of a novel enzymatic function reported here, furthers our knowledge of mycobacterial metabolism, physiology and lifestyle, and may lead to new strategies to fight infections caused by these ominous bacteria.Mycobacterium tuberculosis é a espécie mais ameaçadora do género Mycobacterium, que à data inclui mais de 160 espécies, na sua maioria espécies ambientais designadas não-tuberculosas (MNT), que podem ser patogénios oportunistas. As MNT são habitantes ubíquos de solos e águas de ambientes naturais ou artificiais, incluindo sistemas de distribuição de águas e hospitais. O surgimento de estirpes resistentes a antibióticos e desinfectantes reforça a necessidade urgente de medidas para combater infecções provocadas por estes patógenios. O sucesso adaptativo e resiliência das micobactérias está intimamente associado à sua parede celular rica em lípidos, que inclui uma espessa camada de ácidos micólicos, o que a torna uma estrutura impermeável a agentes antimicrobianos e uma importante barreira contra defesas dos hospedeiros. As micobactérias sintetizam polímeros únicos, incluindo os polissacáridos intracelulares de metilglucose (MGLP) e de metilmanose (MMP), que têm um papel crucial na biogénese da parede, uma vez que modulam a síntese de ácidos gordos, os precursores dos ácidos micólicos. Embora o MGLP e o MMP tenham sido descobertos há décadas, só recentemente as suas vias de biossíntese foram investigadas ao nível genético. O precursor da síntese do MGLP é glucosilglicerato (GG), um metabolito acumulado por M. smegmatis em condições limitantes de azoto. A adição de uma fonte de azoto levou à diminuição dos níveis de GG, implicando a existência de uma enzima dedicada à hidrólise deste composto. Seleccionámos M. hassiacum para investigar a dinâmica de acumulação de GG durante o crescimento em meio com limitação de azoto versus meio rico em azoto. Uma vez que foi recentemente identificada uma enzima capaz de hidrolisar GG, o gene homólogo de M. hassiacum foi detectado no genoma e clonado. A GG hidrolase (GgH) recombinante hidrolisa GG em glucose e glicerato a 42ºC e pH 5.7 (condições óptimas). Os iões Mg2+ e KCl potenciam a actividade e a estabilidade da GgH. A enzima exibe cinética Michaelis-Menten a 37, 42 e 50ºC com eficiência catalítica comparável. A GgH apresenta-se com 51.2 kDa em gel desnaturante, mas comporta-se como um dímero de massa 108.9 ± 2.6 kDa em solução. Sendo a GgH a possível responsável pelo consumo do GG intracelular e pela regulação da biossíntese do MGLP, estudos futuros para melhor compreender a regulação da expressão deste gene durante flutuações de azoto são essenciais. As características bioquímicas desta enzima descritas neste trabalho, contribuem para o conhecimento do metabolismo, da fisiologia e do modo de vida micobacteriano, podendo levar ao desenvolvimento de estratégias para combater as infecções provocadas por micobactérias

Known Glass Compositions in Iron Age Europe - Current Synthesis and Emerging Questions

Ancient glass has been extensively studied from a technological and raw material provenance perspective since the middle of the 20th century. With the rising applications of analytical techniques in the field of Heritage Studies, the last two decades saw an exponential increase in publications on ancient and historical glass technology from around the globe. Given the amount of works on glass chemical composition, it is surprising to note that the long-held production model for Iron Age glasses found in Europe has only recently been challenged by the publication of uncharacteristic glass compositions. Traditionally, LBA glass industries based on plant-ash fluxes/HMG (Egypt and the Levant) and mixed-alkali fluxes/LMHK (Italy) are thought to be supplanted by natron-fluxed/LMG production operating in Egypt and the Levant since around the 9th century BCE. Recently, however, arguments have been put forth for a more diversified network of glassmaking traditions, including small-scale autonomous European workshops. This article reviews the current state of research into Iron Age (1st millennium BCE) glasses in Europe by examining the available published data on glass compositions to critically assess some practical and theoretical issues stemming from this heterogenous field of research. Key questions are addressed, and future lanes of research are proposed

Development of bioactive materials for dental implants using powder metallurgy

The long-term success of a dental implant is dictated by a crucial group of conditions. Beyond being able to withstand masticatory loads, the implant must also be able to promote a good integration of its surface with the surrounding bone (osseointegration). In this context, various studies have been made with the aim of improving the osseointegration process in these implants. Usually, dental implants are made from titanium, normally titanium alloy Ti6Al4V, due to its good mechanical properties. Currently, several studies have also introduced zirconia (ZrO2) and polyetherether- ketone (PEEK) due to their inherent mechanical properties. However, due to the inert nature of these materials, coating their surface with bioactive materials is an effective solution to improve the osseointegration process. Among the bioactive materials, the most commonly used in these applications are Hydroxyapatite (HAp) and tricalcium phosphate (generally β-TCP) since they are very similar to the inorganic phase of bone. However, during the implantation process, the detachment of the coating may occur. In the present work, in order to overcome this problem, various bioactive composites were produced by hot pressing (hot pressing) or by cold pressing followed by sintering (Press and sintering) where the matrix is constituted by the material owing suitable mechanical properties and the reinforcement is a bioactive material. In this sense, the composites produced were: Ti6Al4V reinforced with 10 vol% HAp (Ti6Al4V-10%HAp), Ti6Al4V-10%βTCP, ZrO2-10%HAp, ZrO2-10%βTCP, PEEK-10%HAp, PEEK-βTCP10% (vol.%) which were subsequently characterized through a microstructural and mechanical analysis (hardness and shear tests). This work allowed to conclude that all samples have reached an effective densification and that the addition of bioactive materials increased the hardness of the samples, when compared to the unreinforced metal, polymer or ceramic matrix. When comparing both processing methods, hot pressing was found more capable to promote full densification and consequently higher mechanical properties. Although, in all samples, the presence of bioactive materials caused a shear strength decrease, the benefits of having a bioactive material and also an implant design solution based in functionally graded materials (FGM) would largely compensate these results.O sucesso a longo prazo de um implante dentário é ditado por um grupo de condições cruciais. Além de ser capaz de suportar cargas mastigatórias, o implante deve ser capaz de promover uma boa integração da sua superfície com o osso adjacente (osseointegração). Desta forma, vários estudos têm vindo a ser feitos com o intuito de melhorar o processo de osseointegração. Habitualmente, os implantes dentários são feitos em titânio, geralmente liga Ti6Al4V, devido às suas boas propriedades mecânicas. Atualmente, vários estudos têm introduzido a zirconia (ZrO2) e o poliéter- éter-cetona (PEEK) devido às suas propriedades mecânicas inerentes. No entanto, devido à natureza inerte destes materiais, o revestimento superficial com materiais bioativos é uma solução efetiva para melhorar o processo de osseointegração. De entre os materiais bioativos, os mais utilizados nestas aplicações são a hidroxiapatite (HAp) e os fosfatos de tricalcio (geralmente, β-TCP) uma vez que são materiais muito semelhantes à fase inorgânica do osso. No entanto, durante o processo de implantação, o destacamento do revestimento pode ocorrer. No presente trabalho, de forma a superar este problema, produziram-se vários compósitos bioativos por prensagem a quente (Hot pressing) ou por prensagem a frio seguido de sinterização (Press and sintering) onde a matriz é constituída pelo material que apresenta propriedades mecânicas adequadas e o reforço é um material bioativo. Desta forma, os compósitos produzidos foram: Ti6Al4V reforçado com 10 vol.% HAp (Ti6Al4V-10%HAp), Ti6Al4V-10%βTCP, ZrO2-10%HAp, ZrO2-10%βTCP, PEEK- 10%HAp, PEEK-10%βTCP (vol.%) que foram posteriormente caracterizados através de uma análise microestrutural e mecânica (ensaios de dureza e testes de corte). Este trabalho permitiu concluir que todas as amostras atingiram uma densificação eficaz e que a adição de materiais bioativos aumenta a dureza das amostras, quando comparadas com a matriz metálica, polimérica ou cerâmica não reforçada. Comparando ambos métodos de processamento, o hot pressing mostrou-se mais apto a promover uma densificação total e consequentemente, melhores propriedades mecânicas. Apesar de, em todas as amostras, a presença dos materiais bioativos ter causado a diminuição da resistência ao corte, os benefícios da presença do material bioativo e também a solução de um design do implante baseado em materiais com gradientes funcionais (FGM), compensa largamente estes resultados.This work was supported by FTC through the project PTDC/EMS-TEC/5422/2014 and also by project NORTE 01-0145_FEDER-000018. Additionally, this work was supported by FCT with the reference project UID/EEA/04436/2013, by FEDER funds through the COMPETE 2020 – Programa Operacional Competitividade e Internacionalização (POCI) with the reference project POCI-01-0145-FEDER-00694

Zara's case study: the strategy of the fast fashion pioneer

The Fashion Industry has been changing among the years, and fashion companies are changing the way they do business. They are focusing each day more on the consumers, and what they are looking for at that moment. Fast Fashion concept is gaining ground in the industry because now it is more important to always follow the latest trends and produce according to that, than to have just two collections per year for a higher price. Now, consumers are always looking for different products and those companies who can give them that will achieve the success more easily. Consumers not only are looking for different products, but even more, are using different channels to shop. The online shopping is winning users day by day because now people search for convenience and comfort. However, this behaviour can be different from the different generations, and it is important to know exactly which target it is important to reach and satisfy their desires. This way, fashion companies need to adapt their business and turn it more technological, to make the shopping experience the more enjoyable as possible. This Case Study has the objective of study Zara’s strategies, from their supply chain until their marketing and communication strategies, and the strategy in the physical stores versus at the online store. Then the study will focus on the consumer: their behavior according to the different generations and the brand perception according to them. A Market Research, through an online survey, will be conducted in order to help the development of this study.A indústria da Moda tem vindo a mudar ao longo dos anos e as empresas de moda têm vindo a alterar a maneira como fazem negócio. Cada vez mais se focam no consumidor e naquilo que ele está a procura no momento. O conceito de "Fast Fashion" tem vido a ganhar terreno na indústria, porque agora é mais importante seguir as últimas tendências e produzir de acordo com isso do que apenas lançar duas coleções anuais por um preço mais elevado. Agora, os consumidores estão constantemente a procurar produtos diferentes, e as empresas de moda que são capazes de lhes dar isso irão alcançar o sucesso mais facilmente. Os consumidores não procuram apenas produtos diferentes, mas cada vez mais usam diferentes canais para realizar as suas compras. As compras "online" estão a ganhar utilizadores de dia para dia, pois cada vez mais eles procuram conveniência e conforto. Mas este comportamento pode ser diferente de acordo com as diferentes gerações, e é importante saber exatamente o tipo de "target" que interessa para assim satisfazer as suas necessidades. Desta forma, as empresas de moda precisam de adaptar o seu negócio e torná-lo mais tecnológico, de forma a tornar a experiência de compra o mais agradável possível. Este Caso Pedagógico tem como objetivo estudar a estratégia da Zara, desde a cadeia de abastecimento até as estratégias de marketing e comunicação, e também comparar a estratégia nas lojas físicas com as da loja "online". Depois o estudo irá focar-se no consumidor: o seu comportamento tendo em conta as diferentes gerações e a sua perceção de marca. Um estudo de mercado, através de um inquérito "online", será realizado para ajudar o desenvolvimento deste estudo

Leadership of multicultural teams at a french company: project globe based study

Leadership is always present in everyone’s professional life, challenging managers and leaders, especially when they need to manage teams. Nevertheless, the challenge is even bigger when they have to manage a team composed by people with different cultural backgrounds. This dissertation falls under the leadership scope and its aim is to characterise the leadership style of multicultural teams at a French company operating in Portugal for more than 30 years, using a deductive study case. This study is based in the project GLOBE’s theory (Global Leadership and Organisational Behaviour Effectiveness), an investigation initiated in the 90’s by Robert House, which objective is to investigate the relationship between culture and organisational behaviour. By taking advantage of the questionnaire already created by GLOBE, the employees of this French organisation were asked to rate 89 leadership attributes using a 7-point scale, where 1 stands for a characteristic that greatly inhibits a person from being an outstanding leader and 7 stands for a characteristic that greatly contributes to a person being an outstanding leader. The results obtained in this questionnaire enabled to determine the leadership attributes more desirable by the employees and to verify that charismatic/value-based leadership style is the most preferable one. In addition, this investigation shows that both managers and subordinates value the same leadership features, which suggests that the leadership in this company is effective. At the end of this dissertation, the main conclusions, limitations and future research suggestions are presented.A liderança está constantemente presente na vida profissional de qualquer pessoa, provocando mais desafios aos gestores e líderes quando estes têm que chefiar equipas. Ora, o desafio é ainda maior quando se trata da gestão de equipas com mais do que uma nacionalidade. É nesta realidade que esta dissertação se insere, cujo objetivo é, através de um estudo de caso dedutivo, caracterizar o estilo de liderança de equipas multiculturais numa empresa francesa a operar em Portugal há mais de 30 anos. O presente estudo baseia-se na teoria proposta pelo projecto GLOBE (Global Leadership and Organisational Behaviour Effectiveness), estudo iniciado na década de 90, tendo Robert House como seu propulsionador e inverstigador principal, e que se dedicou a investigar a relação entre cultura e comportamento organizacional. Utilizando uma adaptação do questionário criado pelo projecto GLOBE, os colaboradores desta empresa francesa classificaram 89 atributos de liderança numa escala de 1 (inibe a pessoa de ser um bom líder) a 7 (contribui para que a pessoa seja um bom líder). Os resultados obtidos neste questionário permitiram apurar os traços de liderança mais valorizados pelos colaboradores e verificar que o tipo de liderança preferível é a liderança carismática. Adicionalmente, este estudo demonstra que tanto gestores como subordinados valorizam os mesmos atributos num líder, o que sugere que a liderança nesta empresa é eficaz. Esta dissertação termina com as principais conclusões, limitações e sugestões para futuras pesquisas

Generation and characterization of a Cerl2-KO embryonic stem cell line

Tese de mestrado integrado em Engenharia Biomédica e Biofísica, apresentada à Universidade de Lisboa, através da Faculdade de Ciências, 2017Até aos dias de hoje, a Embriogénese é considerada um dos mecanismos mais fascinantes e complexos de decifrar. Os processos que medeiam a origem, desenvolvimento e especialização de um oócito até este formar um organismo completo são exaustivamente estudados de forma a entender a origem das doenças congénitas. Nos vertebrados, o coração é o primeiro órgão a ser formado tendo a funcionalidade de bombear o sangue e, desta forma, suprimir as constantes necessidades nutritivas do embrião. Por detrás da sua formação, várias vias de sinalização moleculares necessitam de estar intimamente relacionadas entre si. A mais pequena alteração numa delas leva ao surgimento de doenças cardíacas congénitas, afetando desde à nascença a qualidade de vida do Ser vivo. Deste modo, é crucial que sejam decifrados os mecanismos e moléculas por detrás da origem destas doenças, culminando na descoberta de terapias específicas bem como na sua prevenção. Durante o desenvolvimento embrionário, são vários os mecanismos que determinam o correto posicionamento do coração através da origem sequenciada dos três eixos principais: o Anterior-Posterior (A-P), o Dorso-Ventral (D-V) e o Esquerdo-Direito (E-D). Este último, está implicado na definição do posicionamento do coração na caixa torácica, na sua rotação final bem como na correta morfologia dos ventrículos e aurículas. Uma das principais vias de sinalização que inicialmente medeia a diferenciação da mesoderme e o estabelecimento do eixo E-D é a via Nodal, integrante da família TGF-β composta por vários outros membros também fatores de crescimento. No ratinho, nas etapas iniciais, as proteínas Nodal deslocam-se assimetricamente para o lado esquerdo do nó, uma estrutura embrionária transiente, e aí interagem com várias proteínas antagonistas capazes de direcionar o seu fluxo para a Placa Lateral Esquerda da Mesoderme. Quando se verifica uma mutação em algum dos genes codificadores destas proteínas antagonistas do Nodal, a indução da sua cascata de sinalização é rapidamente afetada resultando em defeitos de lateralidade dos órgãos, nomeadamente do coração e das suas artérias. Nas últimas décadas, vários modelos animais e celulares têm sido usados para mimetizar o fenótipo e genótipo característico de algumas patologias cardíacas humanas resultantes de anomalias de lateralidade. Nomeadamente, ratinhos knockout para o gene Cerberus-like 2 (Cerl2) foram anteriormente desenvolvidos de forma a estudar as implicações por detrás da perda de função deste gene. Este mesmo gene é expresso assimetricamente no lado direito do nó, codificando a proteína Cerl2 identificada como uma relevante antagonista da via de sinalização Nodal. Aquando a ausência da sua atividade antagonista, verifica-se uma anormal ativação da sinalização Nodal também na Placa Lateral Direita da Mesoderme. Tendo em conta as suas funções moleculares, seria de esperar que os ratinhos mutantes apresentassem fenótipos de lateralidade anormal. Deste modo, foram descritos defeitos na orientação do eixo cardíaco (looping randomizado), falhas na formação do septo ventricular e auricular, transposição das grandes artérias, hipertrofia ventricular, entre outros. Ainda, verificou-se uma taxa de morte neonatal considerável, no primeiro dia após o nascimento, tendo sido estabelecida uma relação direta entre a perda de função deste gene e o fenótipo mortal nestes ratinhos. No entanto, entre a população de ratinhos knockout foram identificadas ligeiras diferenças nos fenótipos apresentados, sendo alguns livres de malformações no estabelecimento do eixo E-D. Posteriormente, estudos de eletrocardiografia realizados a embriões e ratinhos neonatais Cerl2-/- permitiram estudar a eletrofisiologia e morfologia dos seus corações. De forma a ser independentemente estudado o mecanismo de ação molecular do Cerl2, foram considerados apenas ratinhos sem fenótipo anormal de lateralidade. Os resultados revelaram um aumento do índice de massa ventricular esquerda, uma redução do pico de velocidade da artéria pulmonar e uma diminuição do ritmo cardíaco, comparativamente com a população wild-type. Com o intuito de desvendar o papel deste gene, foram realizadas análises histológicas a amostras de corações em diversas fases de desenvolvimento embrionário e fetal. O estudo revelou um aumento significativo da espessura do miocárdio constituinte do ventrículo esquerdo demonstrando ainda que este fenómeno se deve a hiperplasia dos cardiomiócitos, com um aumento associado do número de eventos mitóticos. Verificou-se, ainda, um aumento dos níveis de fosforilação Smad2 sugerindo que a via de sinalização Nodal/Activin/Smad2 poderá estar super estimulada na ausência de proteínas Cerl2. Salientando, esta via de sinalização foi identificada como uma das principais reguladoras do processo de cardiogénese. No presente projeto, com o objetivo de analisar o papel do Cerl2 no processo de cardiomiogénese, células estaminais embrionárias foram derivadas de blastocistos dos ratinhos knockout. Foram usados os protocolos chave para a confirmação da estabilidade e propriedades de pluripotência das células geradas, podendo posteriormente ser usadas como um modelo de doença fiável. Análises ao cariótipo demonstraram que as linhas celulares derivadas apresentam estabilidade cromossómica, tanto a nível numérico como estrutural. Ao recorrer à técnica de imunofluorescência as células Estaminais Embrionárias revelaram marcação positiva para os marcadores NANOG, OCT4 e SSEA1 indicando a existência de expressão proteica dos mesmos. Corroborando estes resultados, níveis de expressão génica positivos foram identificados através da técnica de PCR quantitativo em tempo real (RT-PCR). Assim, foram amplificadas de forma significativa, amostras da sequência genética de Nanog, Oct4 e Sox2, revelando uma vez mais a existência de propriedades de pluripotência. De forma a demonstrar a capacidade de diferenciação em todas as linhagens celulares que compõem um organismo, procedeu-se à diferenciação espontânea das células Estaminais Embrionárias Cerl2-/- através do método de cultura de Corpos Embrióides (EBs). Recorrendo uma vez mais a testes de imunofluorescência, verificou-se a capacidade de diferenciação nas três camadas germinativas – endoderme, mesoderme e ectoderme – através da presença de marcadores proteicos específicos para cada uma delas. Usando o protocolo de diferenciação cardíaca por EBs, testou-se a hipótese de nas células estaminais Cerl2-/- a capacidade de diferenciação na mesoderme estar aumentada, comparativamente com células estaminais controlo (linha comercial E14). Observou-se um aumento substancial da capacidade de adesão, às placas de cultura, dos EBs derivados da linha mutante. Constatou-se, o surgimento de regiões com atividade cardíaca nos EBs knockout a partir do dia 6 de diferenciação, enquanto nos EBs derivados da linha wild-type estas regiões com contratilidade cardíaca apenas eram visíveis a partir dos dias 7 ou 8 de diferenciação. Durante este processo, foram contabilizadas as áreas de contratilidade verificando-se que, em média, no dia 10 do protocolo de diferenciação, cada EB knockout continha o dobro do número de áreas comparativamente com um EB da linha controlo. Estudando as variações temporais da expressão de genes característicos das várias etapas de diferenciação desde a mesoderme até à formação de cardiomiócitos maduros, através de RT-PCR, verificou-se um aumento da expressão de Mesp-1, Isl1 e Nkx2.5 indicando um incremento no número de células progenitoras cardíacas geradas. Analisando os níveis de expressão de genes implicados na maturação dos cardiomiócitos, verificou-se um aumento da regulação de α-MHC e uma diminuição na regulação de cTnT nas células diferenciadas Cerl2-/-. Conclui-se que as células KO têm uma maior capacidade de diferenciação mesodérmica, levando à produção de um maior número de progenitores cardíacos e, consequentemente, a um aumento no número de cardiomiócitos gerados. No entanto, estes aparentam ter uma maturação incompleta. Em conclusão, os resultados desenvolvidos neste projeto possibilitaram o estabelecimento e caracterização de linhas estaminais Cerl2-/- de ratinho servindo estas como um modelo para estudar as patologias congénitas relacionadas com este gene. Foram reveladas as primeiras descobertas sobre as alterações nos mecanismos de cardiomiogénese resultantes da perda de função do gene Cerl2. Futuramente, poderão ser usadas como ferramenta para a descoberta de novos mecanismos biológicos das proteínas Cerl2 ou mesmo até para o desenvolvimento de terapias celulares.Embryogenesis is a well-organized process capable of originating the complex mammalian organisms. Even a slight change in the signaling pathways is capable of significantly altering the biological mechanisms leading to a mutant phenotype. The heart is the first organ to be formed during this process, according to its vital functions since the first days of an embryo’s life throughout the entire life of the mammalian organism. Sporadically, cardiogenesis does not occur with the normal coordination and some signaling pathways are altered resulting in congenital heart diseases. Thus, it is crucial to uncover the molecular and morphogenetic mechanisms that lead to these pathologies in order to discover new therapies’ insights and provide genetic prevention. A Cerberus/Dan family member, the mouse Cerberus-like 2 (Cerl2) gene, has been studied and identified as a Nodal antagonist, capable of interfering in the most relevant steps during Left-Right (L-R) axis establishment that lead to the asymmetric patterning of the heart. Its function consists to spatially regulate Nodal proteins to the Left Lateral Plate Mesoderm, at the embryonic stage of development. In Cerl2 knockout mice, it was reported a wide range of laterality defects with associated cardiac failure and significant death rate on the first day after birth. Previously, a massive increase of the ventricle walls was observed as a consequence of cardiomyocytes’ hyperplasia, verified by an increase in their mitotic index. In order to uncover the possible roles of Cerl2 in the regulation of the signaling pathways underlying cardiomyocyte proliferation and differentiation, three Cerl2-/- Embryonic Stem cell (ES cell) lines were derived from blastocysts of the mutant mice. Using this disease model, it was possible to begin the study of the implications of Cerl2 in the spatiotemporal control of cardiac progenitors’ proliferation and its differentiation into mature cardiomyocytes. Firstly, the normal chromosomic number and structural stability of the derived lines was confirmed by G-banding staining. Then, pluripotency properties were verified using standard protocols, such as immunofluorescence microscopy that demonstrate positive protein expression for NANOG, OCT4 and SSEA1 markers. Also, through real-time amplification of endogenous RNA expression for Nanog, Oct4 and Sox2 genes it was confirmed the presence of pluripotency properties. In order to prove the differentiation capacity in the three germ layers, the ES cells were spontaneously differentiated and positive protein expression for endoderm, mesoderm and ectoderm was confirmed through immunostaining. Using the Embryoid Bodies culture, the Cerl2-/- ES cells were differentiated into cardiac cells. It was notorious a significant change in the number of produced beating foci areas compared to the control line: the knockout cells originated the double of the cardiac foci compared to the wild type cells, even at day 10 of the differentiation protocol. Using the real-time PCR technique, the levels of early cardiac genes expression were studied, showing a statistical upregulation of Mesp-1, Nkx2.5 and Isl1 genes in the differentiated Cerl2-/- cells. Also, the expression of mature cardiac markers was evaluated resulting in increased levels of α-MHC and reduced levels of cTnT in these cells. Concluding, loss-of-function of Cerl2 leads to a possible increase in the cardiac progenitor cells resulting in a higher number of derived cardiomyocytes. However, despite of showing early beating actions they did not reveal a complete maturation. Ultimately, the present project uncovers the first insights in the Cerl2 role during mouse cardiomyogenesis, mainly in the specification of the number of cardiomyocytes that will populate the mature myocardium