Cuantificación por cromatografía líquida de alta eficiencia (CLAE) de ácidos orgánicos, antioxidantes y azúcares en alimentos

Los aditivos alimentarios son sustancias que se incorporan a los alimentos preparados, con el propósito de mejorar la calidad y las características sensoriales de estos, pero muchas de estas sustancias presentan efectos adversos en la salud del hom- bre, por lo tanto, deben ser controladas. Por tal razón, se analizaron por cromatografía líquida de alta eficiencia (CLAE) muestras comerciales de jugos, mermelada, galletas, pan y mayonesa mediante el método del estándar externo, en las cuales se deter- minaron concentraciones de los ácidos ascórbico y cítrico entre 0,0100-0,395g/L y 0,1000-3,098g/L, respectivamente. También se evaluaron muestras de leche, aceite, margarina, galletas y tostadas, en las cuales se encontraron los antioxidantes butil- hidroxitolueno (BHT) y vitamina E en una concentración entre 0,0180-0,0778g/L y 0,00820-0,0125g/L, respectivamente. Asimismo, se examinaron muestras de miel de abeja, leche, jugos y mermelada, por sus contenidos de fructosa, glucosa, lactosa y sacarosa, cuyos valores oscilaron entre 0,2636-19,89g/L, 0,3818-24,38g/L, 9,299-39,60g/L y 0,2738-82,27g/L, respectivamente. Para cada uno de los análisis anterio- res se obtuvieron curvas de calibración con un coeficiente de correlación de r2>0,99. En cada una de las diferentes determinaciones se lograron coeficientes de variación (CV) entre 0,4100-2,680% y porcentajes de recuperación superiores al 90%. Los métodos establecidos permitieron cuantificar los analitos evaluados en las diferentes matrices analizadas, por lo cual, estos protocolos se pueden proponer para realizar estas determinaciones en alimentos preparados

Evaluación de ácidos orgánicos en refrescos de fruta comerciales por cromatografía líquida de alta eficiencia

Organic acids are one of the major molecules in the fruit juice and are important component for these beverages quality. A high performance liquid chromatographic (HPLC) method for the determination of six organic acids including ascorbic, citric, malic, formic, succinic and tartaric acid were evaluated. The chromatographic separation was performed using a C18 column under isocratic conditions with 1,0 mM H2SO4 as mobile phase at a flow of 1,0 mL min-1, total time ran was of 10,0 minutes and an ultraviolet detection at 210 nm was used. Ten commercial fruit drink from eight different fruits were tested, independently from the fruit, citric and ascorbic acids were the main acids detected, with amounts ranged from 375,3 to 5073,7 mg L-1 and 28,4 to 749,0 mg L-1, respectively. The methodology used was simple and appropriate for the fast and accurate (RSD less than 5%), sensitive and simultaneous separation and quantification of the majority acids in the fruit drink evaluated. The calibration curves for citric and ascorbic acid presented excellent linearity and a high coefficient of determination (r2 > 0.99) in the concentration ranges used.Los ácidos orgánicos son una de las moléculas constitutivas de los jugos y juegan un papel importante en la determinación de la autenticidad de estos. Este trabajo presenta un método de separación por cromatografía líquida de alta eficiencia (CLAE) de 6 ácidos orgánicos: ascórbico, cítrico, málico, fórmico, succínico y tartárico. El análisis se llevó a cabo empleando una fase estacionaria reversa (C18), una fase móvil constituida por ácido sulfúrico 1,0 mM a un flujo de 1,0 mL min-1 en un tiempo total de corrida de 10,0 minutos y detección por ultravioleta (UV) a 210 nm. Bajo las condiciones anteriormente descritas se evaluaron diez muestras comerciales de bebidas de frutas, encontrándose como únicos ácidos el cítrico y el ascórbico, con intervalos de concentraciones de 375,3 – 5073,7 mg L-1 y 28,4 – 749,0 mg L-1, respectivamente. La metodología empleada fue simple y apropiada para la separación y la cuantificación rápida, precisa (RSD inferiores al 5%), sensible y simultánea de los ácidos mayoritarios en las bebidas de jugos evaluados. Las curvas de calibración para los ácido cítrico y ascórbico presentaron excelente linealidad y un alto coeficiente de determinación (r2>0,99) en los intervalos de concentración empleados

Optimización del protocolo para la extracción y la cuantificación de proteínas totales en semillas germinadas de maíz (Zea mays L.)

El maíz (Zea mays L.) es el cereal de mayor cultivo a nivel mundial, del cual se pueden obtener para consumo humano, harina, fibra, aceite y proteínas; de estas últimas se han aislado diferentes tipos tales como albúminas, globulinas, prolaminas y gluteninas; sin embargo, dada la variedad de estas biomoléculas, su obtención no ha sido fácil. Este trabajo se realizó para determinar el mejor método para la extracción y la cuantificación de las proteínas totales en semillas germinadas de maíz (Zea mays L.), para lo cual se compararon seis protocolos de extracción que resultaron al combinar dos métodos físicos convencionales: agitación orbital o asistida con ultrasonido, y tres solventes de extracción: ácido tricloroacético, Tris-Base y Tris-HCl. Previamente se eligió el mejor método de cuantificación por espectroscopía de ultravioleta visible empleando los reactivos cromogénicos de: Lowry, Bio-Rad y Bradford. Los mejores resultados (10,83 mg/l de proteína) se obtuvieron con la extracción asistida con ultrasonido en combinación con Tris-Base y empleando el reactivo de Bradford para la generación del color y la posterior cuantificación por espectroscopía de ultravioleta-visible

Cuantificación por cromatografía líquida de alta eficiencia (HPLC) de taxón y baccatin III en Callos de taxus baccata

Los organismos vivos han desarrollado a lo largo de los millones de años de evolución una maquinaria enzimática potente para producir compuestos que son indispensables para el mantenimiento de la vida, los cuales cumplen funciones específicas en ellos y se conocen como metabolitos primarios.1. Introducción 72. Estado Del Arte 91. Justificación 34PregradoQuímic

Biotransformación de los sustratos cinemaldehído y ácido (+-)-2,4-isobutilfenilpropanóico mediante el hongo fitopatógeno Colletotrichum acutatum

La biotransformación de los sustratos orgánicos aromáticos alquil sustituidos, trans-cinamaldehído y el ácido (+-)-2,4-isobutilfenilpropanóico (ibuprofeno), mediante el hongo fitopatógeno Colletotrichum acutatum, se realizó empleando la concentración mínima a la cual estos compuestos presentan una inhibición en el crecimiento micelar del 50% (MIC50); los valores obtenidos corresponden a 200 mg/L para el trans-cinamaldehído y 250 mg/L para el ibuprofeno. A partir del trans-cinamaldehído (A) se obtuvieron los metabolitos alcohol cinamílico (B), 3-fenil-1-propanol (C), y el 3-fenil-1,3-propanodiol (D) y desde el ibuprofeno (F) el ácido-2-[4-(-hidroxi-2-metilpropil)fenil]propanóico (G). / Abstract. The biotransformation of alkyl substituted aromatic substrates, such as trans-cinnamaldehyde and (+-)-2,4-isobutylphenylpropanoic acid (ibuprofen) by the phytopathogen fungus Colletotrichum acutatum was performed by using the minimum concentration at which these compounds inhibit the mycelial growth on 50% (MIC50); the values obtained were 200 mg/L for trans-cinnamaldehyde and 250 mg/L for ibuprofen. From trans-cinnamaldehyde (A) were obtained after biotransformation cinnamyl alcohol (B), 3-phenyl-1-propanol (C) and 3-phenyl-1,3-propanediol (D); while, from ibuprofen (F) was isolated 2-[4-(-hydroxy-2-methyl propyl)phenyl] propanoic acid (G).Maestrí

Estudio de la adsorción-degradación desde solución acuosa de cafeína y diclofenaco sódico sobre materiales funcionalizados a partir de biocarbonizados de bagazo de fique

En esta investigación se estudiaron biocarbonizados, con y sin modificaciones, obtenidos a partir de bagazo de fique, un residuo agroindustrial el cual es un contaminante de suelos y aguas, razón por la cual se buscan alternativas para el uso funcional de esta biomasa. Por otra parte, los biocarbonizados son materiales con una comprobada capacidad para eliminar una diversidad de moléculas presentes en diferentes medios, lo cual los convierte en una alternativa potencial para la remoción de contaminantes. Siendo así, se evaluó su capacidad para adsorber los contaminantes emergentes diclofenaco sódico (DCF) y cafeína (CFN) desde solución acuosa. Posterior a la adsorción, estos sólidos fueron sometidos a procesos mecanoquímicos con el ánimo de evaluar la degradación de las moléculas en estudio. Adicionalmente, se obtuvieron las propiedades texturales y químicas de los biocarbonizados preparados a partir de bagazo de fique usando técnicas analíticas tales como: análisis elemental, fisisorción de N2 a -196 °C, microscopía de barrido electrónico, espectroscopía de infrarrojo, titulaciones Boehm, análisis termogravimétrico y calorimetría de inmersión. También, en los procesos de adsorción se estudiaron el efecto de la concentración inicial de los analítos en estudio, el pH de la solución, el tiempo y la temperatura del proceso, lo que permitió determinar los cambios de: energía libre de Gibbs ([Delta]G), entalpía ([Delta]H) y entropía ([Delta]S). Los resultados mostraron que las características fisicoquímicas de los biocarbonizados de bagazo de fique variaron tanto con el tratamiento de pirólisis usado, como con los procesos de modificación empleados. También se determinó que en el intervalo de pH evaluado no hubo diferencias significativas en la capacidad de adsorción, mientras que el tiempo de adsorción, la temperatura y la concentración fueron parámetros que afectaron la capacidad de adsorción de todos los biocarbonizados empleados. Además se evidenció que el biocarbonizado más eficiente sin modificación fue el obtenido a 850°C con un tiempo de residencia de vapor de 3 horas (FB850-3) y el mejor de los modificados fue el tratado con hidróxido de sodio (FB850-3Na), este material tuvo una capacidad de adsorción de 80,65 y 57,13 mg/g a 20 °C para la cafeína y el diclofenaco, respectivamente. Asimismo, se determinó que los datos experimentales de la cinética de adsorción de cafeína y diclofenaco, sobre los biocarbonizados evaluados, se ajustaron al modelo de pseudo primer orden, mientras que en los procesos de adsorción se observó una mejor correlación con el modelo de Sips. Además, se estableció que en la evaluación de la adsorción competitiva, los biocarbonizados de bagazo de fique tuvieron preferencia por la CFN frente al DCF. Adicionalmente, se comprobó que los procesos de adsorción fueron favorables y exotérmicos. Lo anterior permitió concluir que los biocarbonizados de bagazo de fique ix fueron sólidos heterogéneos, los cuales tuvieron diversidad de sitios disponibles para la adsorción, en los que la adsorción tanto de la CFN como del DCF se llevó a cabo a través de mecanismos tales como: interacciones ¿-¿, enlaces de hidrógeno, fuerzas de van der Waals, sorción hidrofóbica, complejación y precipitación superficial. Finalmente, en el proceso mecanoquímico llevado a cabo se determinó que la transformación tanto de la cafeína como del diclofenaco fue posible cuando se mezcló el biocarbonizado (FB850-3) con polvo de aluminio (Al) como reactivo de co-molienda, lográndose la identificación de siete productos de degradación con cada contaminante evaluado.In this research, biochar with and without modifications where studied. Biochar was obtained from fique bagasse, an agro-industrial residue which pollutes soils and waters, therefore, alternatives are being search for the use of this biomass. On the other hand, biochar has a proven capacity to eliminate a number of molecules detected in different environments, making them a potent alternative for pollutants remotion, thus, an assessment of its capacity to adsorption the emergent contaminants diclofenac sodium (DCF) and caffeine (CFN) from aqueous solution, following the adsorption, these solids where subjected to mechanochemical processes with the aim of evaluating degradation molecules under study. In addition, textural and chemical properties for biochar prepared from fique bagasse were obtained using techniques such as: elemental analyses, physisorption of N2 at -196 °C, scanning electron microscopy, Infrared spectroscopy, Boehm titrations, thermogravimetric analysis and immersion calorimetry. Additionally, effects of initial concentration for the analytes under study in adsorption processes where analyzed, as well as the solution¿s pH, time and temperature of process, which allowed to determinate changes in Gibbs free energy ([Delta]G), enthalpy ([Delta]H) and entropy ([Delta]S). Results showed that physicochemical characteristics of fique bagasse biochars changed with both pyrolysis treatment used and modification processes employed. Also, was evidenced that there was no significant variance in adsorption capacity for pH interval evaluated, while adsorption time, temperature and concentration were parameters that affected adsorption capacity of caffeine and diclofenac in the biochar used. It was also determined that the most efficient unmodified biochar was the one obtained at 850 °C with a vapor residence time of 3 hours (FB850-3) and the one treated with sodium hydroxide (FB850-3Na) was the best one from the modified group, this one had an adsorption capacity of 80.65 and 57.13 mg/g at 20 °C for CFN and DCF, respectively. Moreover, there was also evidence that the experimental kinetic data of CFN and DCF adsorption in the evaluated biochar, were fitted well with pseudo first order model, while in adsorption processes a better adjusted was established with Sips model. Likewise, it was determined that in evaluation of competitive adsorption, fique bagasse biochar had a preference for CFN over DCF. Furthermore, adsorption process was found to be favorable and exothermic. The above results allowed to conclude that fique bagasse biochars were heterogeneous solids, which had a diversity of sites available for adsorption, in which the adsorption of both CFN and DCF was carried out through mechanisms such as: interactions ¿-¿, hydrogen bonds, van der Waals forces, hydrophobic sorption, complexation and surface precipitation. xi Finally, in mechanochemical process carried out, it was determined that transformation of both caffeine and diclofenac was possible when the biochar FB850-3 was mixed with aluminum powder (Al) as co-grinding reagent, achieving identification of seven degradation products with each pollutant evaluated.Doctor en Ciencias - QuímicaDoctorad

Cuantificación por cromatografía líquida de alta eficiencia (CLAE) de ácidos orgánicos, antioxidantes y azúcares en alimentos

Los aditivos alimentarios son sustancias que se incorporan a los alimentos preparados, con el propósito de mejorar la calidad y las características sensoriales de estos, pero muchas de estas sustancias presentan efectos adversos en la salud del hombre, por lo tanto, deben ser controladas. Por tal razón, se analizaron por cromatografía líquida de alta eficiencia (CLAE) muestras comerciales de jugos, mermelada, galletas, pan y mayonesa mediante el método del estándar externo, en las cuales se determinaron concentraciones de los ácidos ascórbico y cítrico entre 0,0100-0,395g/L y 0,1000-3,098g/L, respectivamente. También se evaluaron muestras de leche, aceite, margarina, galletas y tostadas, en las cuales se encontraron los antioxidantes butilhidroxitolueno(BHT) y vitamina E en una concentración entre 0,0180-0,0778g/L y 0,00820-0,0125g/L, respectivamente. Asimismo, se examinaron muestras de miel de abeja, leche, jugos y mermelada, por sus contenidos de fructosa, glucosa, lactosay sacarosa, cuyos valores oscilaron entre 0,2636-19,89g/L, 0,3818-24,38g/L, 9,299- 39,60g/L y 0,2738-82,27g/L, respectivamente. Para cada uno de los análisis anterioresse obtuvieron curvas de calibración con un coeficiente de correlación de r2>0,99. En cada una de las diferentes determinaciones se lograron coeficientes de variación (CV) entre 0,4100-2,680% y porcentajes de recuperación superiores al 90%. Los métodos establecidos permitieron cuantificar los analitos evaluados en las diferentes matrices analizadas, por lo cual, estos protocolos se pueden proponer para realizar estas determinaciones en alimentos preparados

Evaluación de ácidos orgánicos en refrescos de fruta comerciales por cromatografía líquida de alta eficiencia

Organic acids are one of the major molecules in the fruit juice and are important component for these beverages quality. A high performance liquid chromatographic (HPLC) method for the determination of six organic acids including ascorbic, citric, malic, formic, succinic and tartaric acid were evaluated. The chromatographic separation was performed using a C18 column under isocratic conditions with 1,0 mM H2SO4 as mobile phase at a flow of 1,0 mL min-1, total time ran was of 10,0 minutes and an ultraviolet detection at 210 nm was used. Ten commercial fruit drink from eight different fruits were tested, independently from the fruit, citric and ascorbic acids were the main acids detected, with amounts ranged from 375,3 to 5073,7 mg L-1 and 28,4 to 749,0 mg L-1, respectively. The methodology used was simple and appropriate for the fast and accurate (RSD less than 5%), sensitive and simultaneous separation and quantification of the majority acids in the fruit drink evaluated. The calibration curves for citric and ascorbic acid presented excellent linearity and a high coefficient of determination (r2 > 0.99) in the concentration ranges used.Los ácidos orgánicos son una de las moléculas constitutivas de los jugos y juegan un papel importante en la determinación de la autenticidad de estos. Este trabajo presenta un método de separación por cromatografía líquida de alta eficiencia (CLAE) de 6 ácidos orgánicos: ascórbico, cítrico, málico, fórmico, succínico y tartárico. El análisis se llevó a cabo empleando una fase estacionaria reversa (C18), una fase móvil constituida por ácido sulfúrico 1,0 mM a un flujo de 1,0 mL min-1 en un tiempo total de corrida de 10,0 minutos y detección por ultravioleta (UV) a 210 nm. Bajo las condiciones anteriormente descritas se evaluaron diez muestras comerciales de bebidas de frutas, encontrándose como únicos ácidos el cítrico y el ascórbico, con intervalos de concentraciones de 375,3 – 5073,7 mg L-1 y 28,4 – 749,0 mg L-1, respectivamente. La metodología empleada fue simple y apropiada para la separación y la cuantificación rápida, precisa (RSD inferiores al 5%), sensible y simultánea de los ácidos mayoritarios en las bebidas de jugos evaluados. Las curvas de calibración para los ácido cítrico y ascórbico presentaron excelente linealidad y un alto coeficiente de determinación (r2>0,99) en los intervalos de concentración empleados

Biochar from Fique Bagasse for Remotion of Caffeine and Diclofenac from Aqueous Solution

Caffeine and diclofenac are molecules with high human intake, and both belong to the ‘emergent’ class of contaminants. These compounds have been found at different concentrations in many sources of water worldwide and have several negative impacts on aquatic life systems; that is why the search for new alternatives for their removal from aqueous media is of transcendental importance. In this sense, adsorption processes are an option to attack this problem and for this reason, biochar could be a good alternative. In this regard, were prepared six different biochar from fique bagasse (FB), a useless agroindustry by-product from fique processing. The six biochar preparations were characterized through several physicochemical procedures, while for the adsorption processes, pH, adsorption time and concentration of caffeine and diclofenac were evaluated. Results showed that the biochar obtained by pyrolysis at 850 °C and residence time of 3 h, labeled as FB850-3, was the material with the highest adsorbent capacity with values of 40.2 mg g−1 and 5.40 mg g−1 for caffeine and diclofenac, respectively. It was also shown that the experimental data from FB850-3 fitted very well the Redlich–Peterson isotherm model and followed a pseudo-first and pseudo-second-order kinetic for caffeine and diclofenac, respectively

Inhibicion de adn por extractos vegetales de plantas de la ecorregion cafetera.

This study present the results of DNA inhibition of 52 methanol and 51 dichloromethane crude plant extracts against the with Herring sperm DNA evaluated in terms of absorbance reduction of the peak, following the HPLC method described by Pezzuto and his colleagues. The 103 plant extracts belong to the Asteraceae, Euphorbiaceae, Melastomataceae, Rubiaceae and Solanaceae families and were collected in the Regional Natural Park Ucumarí (RNPU, Colombia). The highest percentages of DNA inhibition within the six plant families studied were shown by the methanol extracts of Schistocarpha sinforosi Cuatrec. (68.30%), Aspilla quinquenervis Blake (50.74%) and Verbesina nudipes Blake (43.20%) all members of the Asteraceae family; followed by the methanol extract of Deprea glabra (Standl.) A.T. Hunziker (41.01%) a member of the Solanaceae family. The dichloromethane plant extracts studied displayed weak percentage of DNA inhibition.Este estudio presenta los resultados de la inhibición del ADN de 52 extractos metanólicos y 51 de diclorometano evaluados con el ADN del esperma de Herring mediante la reducción de la señal de absorción al ultravioleta a través del método de HPLC descrito por Pezzuto y colaboradores. Se evaluaron 103 extractos pertenecientes a plantas de las familias: Asteraceae, Euphorbiaceae, Melastomataceae, Rubiaceae y Solanaceae recolectadas en el Parque Regional Natural Ucumarí (PRNU, Colombia). Los porcentajes de inhibición más altos del ADN lo presentaron los extractos metanólicos de las siguientes especies pertenecientes a la familia Asteraceae: Schistocarpha sinforisi Cuatrec. (68.3%), Aspilla quinquernervis Blake (50.74%) y Verbesina nudipes Blake (43.20%); adicionalmente, el porcentaje de inhibición de la Solanaceae, Deprea glabra Standl fue del 41.01%. Todos los extractos de diclorometano evaluados mostraron baja inhibición del ADN