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    Estudo do envoltório externo de sementes de Magonia pubescens St. Hil.(Tingüi)

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    Orientadores: Prof. Dr. Philip A. J. Gorin, Prof. Dr. Marcello IacominiTese (doutorado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências Biológicas, Curso de Pós-Graduação em BioquímicaInclui referências: p. 102-113Resumo: Estudos do envoltório externo de sementes de Magonia pubescens foram realizados utilizando-se microscopia de luz e microscopia eletrônica de varredura, assim como espectroscopia de RMN-13C de sólido (PC/RAM). Este envoltório é composto por cinco regiões e, quando as sementes são imersas em água, um gel é liberado a partir da segunda região. O gel contém principalmente oligossacarídeos celulósicos, agregados a uma xilana ácida ramificada. Além dos experimentos de microscopia e espectroscopia, as propriedades reológicas de uma fração do hidrogel original (fração gMpl) foram caracterizadas. A organização tridimensional do gel foi visualizada por microscopia eletrônica de varredura, tendo como característica predominante uma estrutura de exsudação lamelar. Quando coradas com azul de p-toluidina, as células da segunda região reagiram positivamente revelando a presença de dois componentes aniônicos com graus variados de carga. O citoplasma destas células, em oposição ao das outras regiões, apresentaram resposta positiva com o reagente ácido periódico-Schiff (PAS), demonstrando a presença de carboidratos contendo hidroxilas vicinais. Esta região PAS-positiva reagiu com o corante vermelho de rutênio, específico para substâncias ácidas, indicando que pelo menos parte destes carboidratos consiste em polissacarídeos ácidos. As células da segunda região apresentaram reação com calcoflúor, cuja intensidade reduziu em grande parte no citoplasma, quando os cortes foram pré-tratados com celulase, sugerindo que pelo menos parte das (3-glucanas presentes neste estrato é representada por material celulósico. Compostos fenólicos não foram detectados na segunda região usando o teste do cloreto férrico e do floroglucinol/HCl, porém estavam presentes nas outras, tendo sido sugerida a presença de lignina para as paredes celulares dos estratos 3, 4 e 5. A técnica de RMN-13C-PC/RAM foi incorporada a este trabalho como um auxílio às análises microscópicas padrão dos componentes celulares. A espectroscopia de RMN de sólido apresentou resultados em concordância com os dados microscópicos, no entanto para algumas regiões a resposta foi mais sensível e quantitativa. Sinais de ressonância de lignina foram identificados para as regiões 3, 4 e 5 do envoltório externo. A presença majoritária de carboidratos foi prontamente identificada em todos os estratos analisados usando os dados de RMN. Análises reológicas de soluções aquosas da fração gMpl do hidrogel original das sementes em estudo foram realizadas em modo dinâmico e estático de velocidade de cisalhamento. Experimentos envolvendo a aplicação de tensões crescentes sobre gMpl nas concentrações de 2 e 4 g.L'1 em H2O e LiCl 0.1 mol.L'1 revelaram características tixotrópicas. A avaliação das propriedades dinâmicas viscoelásticas na região linear (deformação de 1%, 1 Hz) demonstrou valores do módulo de cisalhamento dinâmico elástico (G') maiores que do viscoso (G"), para ambas as concentrações e solventes testados ao longo de toda a faixa de frequência analisada. Desta forma, foi possível classificar a fração gMpl como um gel forte, havendo dependência da concentração, com G' e G" apresentando valores superiores para concentrações crescentes. Para géis preparados em solução aquosa de LiCl, valores menores de G' e G" foram encontrados. As associações intercadeias dos carboidratos da fração gMpl não apresentaram dependência em relação ao tempo, tendo sido observados valores constantes de G' e G" por 1800 s. Rampas de temperatura (5°-95°C) mostraram que gMpl é um gel termoestável em modo de tensão controlada. Considerando todas as características da rede do gel gMpl, este componente de Tingui parece ser único.Abstract: A study of the external coat from seeds of Magonia pubescens was carried out using light and scanning electron microscopy, as well as CP-MAS 13C NMR spectroscopy. This coat consisted of five regions, and when the seeds were put in contact with water, a gel was extruded from their second layer. The gel contains mainly cellulosic oligosaccharides, aggregated with a branched acidic xylan. In addition to the microscopic and spectroscopic experiments, we now characterize the rheological properties of a fraction of crude hydrogel (fraction gMpl). The three-dimensional organization of the gel was visualised by scanning electron microscopy as a predominant feature, having an extruded cylindrical, laminated structure. When stained with p-toluidine blue, the cells of the second layer reacted positively revealing the presence of two anionic components. The cytoplasm of these cells, on the opposite side from the other layers, gave a positive response with the periodic acid-Schiff (PAS) reagent, showing the presence of carbohydrates containing vicinal hydroxyl groups. This PAS-positive region also reacted with ruthenium red, specific for acidic material, indicating that at least some of these carbohydrates are acidic polysaccharides. A positive reaction of cells of the second region following calcofluor staining, which decreased for the most part in the cytoplasm from this layer if samples were pretreated with cellulase, suggests that at least part of the (3-linked glucan present in this layer is cellulosic material. Phenolic compounds were not detected in the second layer using the ferric trichloride and floroglucinol/HCl tests, but existed in others, the presence of lignin being suggested for cell walls of the three innermost layers. CP-MAS 13C NMR was incorporated as an aid for the standard microscopic analysis of the cell components. The former technique gave results agreeing with those of the latter, and for some layers the response was more sensitive and quantitative. Resonances of lignin were identified for the three innermost layers. The presence of carbohydrates was readily identified for all analysed layers using the NMR data. We report dynamic viscoelastic and steady shear measurements of aqueous solutions of fraction gMpl isolated from the M. pubescens crude gel. Stress-growth experiments at analyzed gMpl concentrations of 2 and 4 g.L' 1 in H2O and 0.1 mol.L'1 LiCl revealed pseudoplastic and thixotropic characteristics. Linear dynamic viscoelastic properties (1% strain, 1 Hz) showed that the magnitudes of the elastic component (G') were higher than those of the loss moduli (G"), for both concentrations and solvents over the entire frequency range. This frequency sweep data allowed the classification of gMpl as a strong gel former, and showed a concentration dependence, with G' and G" becoming greater with increasing concentration. When the gel was prepared in aqueous LiCl, lower G' and G" values were found. The interchain associations of carbohydrates from gMpl were not time-dependent, values of G' and G" remaining constant over 1800 s. Heat treatment over a temperature range of 5°-95°C showed that gMpl in a controlled stress is a heat-stable gel. Considering all the gelling characteristics of the gMpl network, this Tingui component appears to be unique

    Educação ambiental, ludicidade e pesquisa participante no ensino fundamental

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    O presente estudo teve como objetivo elaborar e executar um programa de educação  ambiental  com estudantes  de uma escola pública. Tomou-­‐se  por base o diagnóstico da realidade, adotando-­‐se como ferramentas a aplicação de estratégias definidas pela metodologia da pesquisa participante e sua articulação  com o desenvolvimento  de atividades lúdicas, entre as quais se destacaram   o  teatro,  a  confecção   de  jogos  de  tabuleiro,   cartilhas  e  o exercício  lúdico  da  aplicação  de  questionários   junto  à  comunidade.   Há diversos fatores que contribuem para os índices de desenvolvimento socioeconômico   e   cultural   na   cidade   de   Bocaiúva   do   Sul,   com   uma população  predominantemente  rural, que padece  em decorrência  da ação da indústria madeireira na exploração da mão-­‐de-­‐obra local no plantio de culturas  exóticas.  Os resultados  demonstram  a efetividade  do desenvolvimento e aplicação de um programa de educação ambiental estruturado na ludicidade como estratégia facilitadora da participação social rumo  à  tomada  de  consciência  da  população  sobre  problemas  ambientais locais

    Co-infecção pelo vírus dengue 3 e 4 em pacientes da Amazônia brasileira

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    The natural co-infection with dengue virus can occur in highly endemic areas where different serotypes have been observed for many years. We report here four cases of DENV-3/DENV-4 co-infection detected by serological and molecular tests among 674 patients with acute undifferentiated fever from the tropical medicine reference center of Manaus City, Brazil, between 2005 and 2010. Analysis of the sequences obtained indicated the presence of genotype 3 and 1 for DENV-3 and DENV-4 respectively.A co-infecção natural com os vírus dengue pode ocorre em áreas altamente endêmicas onde diferentes sorotipos têm sido transmitidos por muitos anos. Relatamos aqui quatro casos de co-infecção com DENV-3/DENV-4 detectados por testes sorológicos e moleculares entre 674 pacientes com febre indiferenciada aguda, atendidos em um centro de medicina tropical de referência da cidade de Manaus, Brasil, entre 2005 e 2010. As análises das sequências obtidas indicaram a presença dos genotipos 3 e 1 para DENV-3 e DENV-4 respectivamente

    Serological evidence of hantavirus infection in rural and urban regions in the state of Amazonas, Brazil

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    Hantavirus disease is caused by the hantavirus, which is an RNA virus belonging to the family Bunyaviridae. Hantavirus disease is an anthropozoonotic infection transmitted through the inhalation of aerosols from the excreta of hantavirus-infected rodents. In the county of Itacoatiara in the state of Amazonas (AM), Brazil, the first human cases of hantavirus pulmonary and cardiovascular syndrome were described in July 2004. These first cases were followed by two fatal cases, one in the municipality of Maues in 2005 and another in Itacoatiara in 2007. In this study, we investigated the antibody levels to hantavirus in a population of 1,731 individuals from four different counties of AM. Sera were tested by IgG/IgM-enzyme-linked immune-sorbent assay using a recombinant nucleocapsid protein of the Araraquara hantavirus as an antigen. Ten sera were IgG positive to hantavirus (0.6%). Among the positive sera, 0.8% (1/122), 0.4% (1/256), 0.2% (1/556) and 0.9% (7/797) were from Atalaia do Norte, Careiro Castanho, Itacoatiara and Labrea, respectively. None of the sera in this survey were IgM-positive. Because these counties are distributed in different areas of AM, we can assume that infected individuals are found throughout the entire state, which suggests that hantavirus disease could be a local emerging health problem.FAPEAMFAPEAMCNPqCNPqCAPESCAPESSUFRAMASUFRAM

    IPVConcilia- sistema de gest?o da concilia??o

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    O Instituto Polit?cnico de Viana do Castelo (IPVC), no ?mbito do Plano Estrat?gico IPVC2024, iniciou, em 2019, a implementa??o do Sistema de Gest?o da Concilia??o entre a vida profissional, familiar e pessoal, segundo a NP 4552, em integra??o com o atual Sistema de Gest?o (SG-IPVC), da Qualidade (ISSO 9001) e da Responsabilidade Social (NP 4469). Para a implementa??o do IPVConcilia e Integra??o do SGConcilia??o no SG-IPVC houve um forte investimento na capacita??o em Sistema de Gest?o da Concilia??o e em benchmarking. A concilia??o entre a vida profissional, familiar e pessoal permanece um desafio para as organiza??es e suas pessoas, tendo implica??es na qualidade de vida no trabalho e na qualidade de vida geral dos seus colaboradores. Com a implementa??o do IPVConcilia, o IPVC pretende refor?ar a resposta a necessidades e expetativas dos/as colaboradores/as e implementar a??es que promovam a concilia??o. Para isso, t?m sido adotadas medidas para a melhoria da qualidade de vida dos/as colaboradores/as, promovendo o bem-estar, o desenvolvimento pessoal e a Concilia??o e para refor?ar essas medidas realizou-se uma ausculta??o aos colaboradores. Os resultados mostram que os colaboradores est?o, de uma forma geral, muito satisfeitos havendo, no entanto, dimens?es a melhorar, entre elas: Ritmo de trabalho, Exig?ncias cognitivas e Exig?ncias emocionais. Espera-se obter a certifica??o do SG-Concilia??o do IPVC at? setembro de 2022.DA17-66FE-09A6 | Helena Sofia RodriguesN/

    12,500+ and counting: biodiversity of the Brazilian Pampa

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    Knowledge on biodiversity is fundamental for conservation strategies. The Brazilian Pampa region, located in subtropical southern Brazil, is neglected in terms of conservation, and knowledge of its biodiversity is fragmented. We aim to answer the question: how many, and which, species occur in the Brazilian Pampa? In a collaborative effort, we built species lists for plants, animals, bacteria, and fungi that occur in the Brazilian Pampa. We included information on distribution patterns, main habitat types, and conservation status. Our study resulted in referenced lists totaling 12,503 species (12,854 taxa, when considering infraspecific taxonomic categories [or units]). Vascular plants amount to 3,642 species (including 165 Pteridophytes), while algae have 2,046 species (2,378 taxa) and bryophytes 316 species (318 taxa). Fungi (incl. lichenized fungi) contains 1,141 species (1,144 taxa). Animals total 5,358 species (5,372 taxa). Among the latter, vertebrates comprise 1,136 species, while invertebrates are represented by 4,222 species. Our data indicate that, according to current knowledge, the Pampa holds approximately 9% of the Brazilian biodiversity in an area of little more than 2% of Brazil’s total land The proportion of species restricted to the Brazilian Pampa is low (with few groups as exceptions), as it is part of a larger grassland ecoregion and in a transitional climatic setting. Our study yielded considerably higher species numbers than previously known for many species groups; for some, it provides the first published compilation. Further efforts are needed to increase knowledge in the Pampa and other regions of Brazil. Considering the strategic importance of biodiversity and its conservation, appropriate government policies are needed to fund studies on biodiversity, create accessible and constantly updated biodiversity databases, and consider biodiversity in school curricula and other outreach activitie

    Estudo do envoltório externo de sementes de Magonia pubescens St. Hil.(Tingüi)

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    Orientadores: Prof. Dr. Philip A. J. Gorin, Prof. Dr. Marcello IacominiTese (doutorado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências Biológicas, Curso de Pós-Graduação em BioquímicaInclui referências: p. 102-113Resumo: Estudos do envoltório externo de sementes de Magonia pubescens foram realizados utilizando-se microscopia de luz e microscopia eletrônica de varredura, assim como espectroscopia de RMN-13C de sólido (PC/RAM). Este envoltório é composto por cinco regiões e, quando as sementes são imersas em água, um gel é liberado a partir da segunda região. O gel contém principalmente oligossacarídeos celulósicos, agregados a uma xilana ácida ramificada. Além dos experimentos de microscopia e espectroscopia, as propriedades reológicas de uma fração do hidrogel original (fração gMpl) foram caracterizadas. A organização tridimensional do gel foi visualizada por microscopia eletrônica de varredura, tendo como característica predominante uma estrutura de exsudação lamelar. Quando coradas com azul de p-toluidina, as células da segunda região reagiram positivamente revelando a presença de dois componentes aniônicos com graus variados de carga. O citoplasma destas células, em oposição ao das outras regiões, apresentaram resposta positiva com o reagente ácido periódico-Schiff (PAS), demonstrando a presença de carboidratos contendo hidroxilas vicinais. Esta região PAS-positiva reagiu com o corante vermelho de rutênio, específico para substâncias ácidas, indicando que pelo menos parte destes carboidratos consiste em polissacarídeos ácidos. As células da segunda região apresentaram reação com calcoflúor, cuja intensidade reduziu em grande parte no citoplasma, quando os cortes foram pré-tratados com celulase, sugerindo que pelo menos parte das (3-glucanas presentes neste estrato é representada por material celulósico. Compostos fenólicos não foram detectados na segunda região usando o teste do cloreto férrico e do floroglucinol/HCl, porém estavam presentes nas outras, tendo sido sugerida a presença de lignina para as paredes celulares dos estratos 3, 4 e 5. A técnica de RMN-13C-PC/RAM foi incorporada a este trabalho como um auxílio às análises microscópicas padrão dos componentes celulares. A espectroscopia de RMN de sólido apresentou resultados em concordância com os dados microscópicos, no entanto para algumas regiões a resposta foi mais sensível e quantitativa. Sinais de ressonância de lignina foram identificados para as regiões 3, 4 e 5 do envoltório externo. A presença majoritária de carboidratos foi prontamente identificada em todos os estratos analisados usando os dados de RMN. Análises reológicas de soluções aquosas da fração gMpl do hidrogel original das sementes em estudo foram realizadas em modo dinâmico e estático de velocidade de cisalhamento. Experimentos envolvendo a aplicação de tensões crescentes sobre gMpl nas concentrações de 2 e 4 g.L'1 em H2O e LiCl 0.1 mol.L'1 revelaram características tixotrópicas. A avaliação das propriedades dinâmicas viscoelásticas na região linear (deformação de 1%, 1 Hz) demonstrou valores do módulo de cisalhamento dinâmico elástico (G') maiores que do viscoso (G"), para ambas as concentrações e solventes testados ao longo de toda a faixa de frequência analisada. Desta forma, foi possível classificar a fração gMpl como um gel forte, havendo dependência da concentração, com G' e G" apresentando valores superiores para concentrações crescentes. Para géis preparados em solução aquosa de LiCl, valores menores de G' e G" foram encontrados. As associações intercadeias dos carboidratos da fração gMpl não apresentaram dependência em relação ao tempo, tendo sido observados valores constantes de G' e G" por 1800 s. Rampas de temperatura (5°-95°C) mostraram que gMpl é um gel termoestável em modo de tensão controlada. Considerando todas as características da rede do gel gMpl, este componente de Tingui parece ser único.Abstract: A study of the external coat from seeds of Magonia pubescens was carried out using light and scanning electron microscopy, as well as CP-MAS 13C NMR spectroscopy. This coat consisted of five regions, and when the seeds were put in contact with water, a gel was extruded from their second layer. The gel contains mainly cellulosic oligosaccharides, aggregated with a branched acidic xylan. In addition to the microscopic and spectroscopic experiments, we now characterize the rheological properties of a fraction of crude hydrogel (fraction gMpl). The three-dimensional organization of the gel was visualised by scanning electron microscopy as a predominant feature, having an extruded cylindrical, laminated structure. When stained with p-toluidine blue, the cells of the second layer reacted positively revealing the presence of two anionic components. The cytoplasm of these cells, on the opposite side from the other layers, gave a positive response with the periodic acid-Schiff (PAS) reagent, showing the presence of carbohydrates containing vicinal hydroxyl groups. This PAS-positive region also reacted with ruthenium red, specific for acidic material, indicating that at least some of these carbohydrates are acidic polysaccharides. A positive reaction of cells of the second region following calcofluor staining, which decreased for the most part in the cytoplasm from this layer if samples were pretreated with cellulase, suggests that at least part of the (3-linked glucan present in this layer is cellulosic material. Phenolic compounds were not detected in the second layer using the ferric trichloride and floroglucinol/HCl tests, but existed in others, the presence of lignin being suggested for cell walls of the three innermost layers. CP-MAS 13C NMR was incorporated as an aid for the standard microscopic analysis of the cell components. The former technique gave results agreeing with those of the latter, and for some layers the response was more sensitive and quantitative. Resonances of lignin were identified for the three innermost layers. The presence of carbohydrates was readily identified for all analysed layers using the NMR data. We report dynamic viscoelastic and steady shear measurements of aqueous solutions of fraction gMpl isolated from the M. pubescens crude gel. Stress-growth experiments at analyzed gMpl concentrations of 2 and 4 g.L' 1 in H2O and 0.1 mol.L'1 LiCl revealed pseudoplastic and thixotropic characteristics. Linear dynamic viscoelastic properties (1% strain, 1 Hz) showed that the magnitudes of the elastic component (G') were higher than those of the loss moduli (G"), for both concentrations and solvents over the entire frequency range. This frequency sweep data allowed the classification of gMpl as a strong gel former, and showed a concentration dependence, with G' and G" becoming greater with increasing concentration. When the gel was prepared in aqueous LiCl, lower G' and G" values were found. The interchain associations of carbohydrates from gMpl were not time-dependent, values of G' and G" remaining constant over 1800 s. Heat treatment over a temperature range of 5°-95°C showed that gMpl in a controlled stress is a heat-stable gel. Considering all the gelling characteristics of the gMpl network, this Tingui component appears to be unique
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