The Properties and Functions of Glial Cell Types of the Hypothalamic Median Eminence

The median eminence (ME) is part of the neuroendocrine system (NES) that functions as a crucial interface between the hypothalamus and pituitary gland. The ME contains many non-neuronal cell types, including oligodendrocytes, oligodendrocyte precursor cells (OPCs), tanycytes, astrocytes, pericytes, microglia and other immune cells, which may be involved in the regulation of NES function. For example, in mice, ablation of tanycytes (a special class of ependymal glia with stem cell-like functions) results in weight gain, feeding, insulin insensitivity and increased visceral adipose, consistent with the demonstrated ability of these cells to sense and transport both glucose and leptin, and to differentiate into neurons that control feeding and metabolism in the hypothalamus. To give a further example, OPCs in the ME of mice have been shown to rapidly respond to dietary signals, in turn controlling composition of the extracellular matrix in the ME, derived from oligodendrocyte-lineage cells, which may contribute to the previously described role of these cells in actively maintaining leptin-receptor-expressing dendrites in the ME. In this review, we explore and discuss recent advances such as these, that have developed our understanding of how the various cell types of the ME contribute to its function in the NES as the interface between the hypothalamus and pituitary gland. We also highlight avenues of future research which promise to uncover additional functions of the ME and the glia, stem and progenitor cells it contains

Nestin-Cre Mice Are Affected by Hypopituitarism, Which Is Not Due to Significant Activity of the Transgene in the Pituitary Gland

Nestin-Cre mice express Cre recombinase under control of the rat nestin promoter and central nervous system (CNS) enhancer. While endogenous Nestin is expressed in some other tissues including the pituitary gland, Nestin-Cre mice induce recombination predominantly in the CNS. For this reason, they have been widely used to explore gene function or cell fate in the latter. Pituitary hormonal deficiencies, or hypopituitarism, are associated with a wide range of symptoms and with a significant morbidity. These can have a neural and/or a pituitary origin as the gland's secretions are controlled by the hypothalamus. We report here that Nestin-Cre mice themselves are affected by mild hypopituitarism. Hence, physiological consequences are expected, especially in combination with defects resulting from Cre mediated deletion of any gene under investigation. To further investigate the origin of this phenotype, we re-examined the activity of the transgene. We compared it with expression of Nestin itself in the context of the hypothalamo-pituitary axis, especially in the light of a recent report showing pituitary Nestin-Cre activity, which contrasts with previous data. Our results disagree with those of this recent study and do not support the claim that Nestin positive cells are present in the pituitary anlagen, the Rathke's pouch (RP). Moreover we did not observe any significant activity in the post-natal pituitary, in agreement with the initial report

Pathogenic variants in RNPC3 are associated with hypopituitarism and primary ovarian insufficiency

Purpose We aimed to investigate the molecular basis underlying a novel phenotype including hypopituitarism associated with primary ovarian insufficiency. Methods We used next-generation sequencing to identify variants in all pedigrees. Expression of Rnpc3/RNPC3 was analyzed by in situ hybridization on murine/human embryonic sections. CRISPR/Cas9 was used to generate mice carrying the p.Leu483Phe pathogenic variant in the conserved murine Rnpc3 RRM2 domain. Results We described 15 patients from 9 pedigrees with biallelic pathogenic variants in RNPC3, encoding a specific protein component of the minor spliceosome, which is associated with a hypopituitary phenotype, including severe growth hormone (GH) deficiency, hypoprolactinemia, variable thyrotropin (also known as thyroid-stimulating hormone) deficiency, and anterior pituitary hypoplasia. Primary ovarian insufficiency was diagnosed in 8 of 9 affected females, whereas males had normal gonadal function. In addition, 2 affected males displayed normal growth when off GH treatment despite severe biochemical GH deficiency. In both mouse and human embryos, Rnpc3/RNPC3 was expressed in the developing forebrain, including the hypothalamus and Rathke’s pouch. Female Rnpc3 mutant mice displayed a reduction in pituitary GH content but with no reproductive impairment in young mice. Male mice exhibited no obvious phenotype. Conclusion Our findings suggest novel insights into the role of RNPC3 in female-specific gonadal function and emphasize a critical role for the minor spliceosome in pituitary and ovarian development and function

Etude des facteurs de transcription proneuraux dans la formation du gyrus dente de l'hippocampe chez la souris

Une question fondamentale en neurobiologie est de comprendre comment une cellule souche multipotente est capable de générer l ensemble du système nerveux central (SNC) que sont les neurones et les cellules gliales. Les gènes proneuraux jouent notamment un rôle dans la transition de l état multipotent de la cellule souche à un état pluripotent, celui du progéniteur neural. Mon projet de thèse a consisté en l analyse du rôle du gène proneural Neurogénine2 (Ngn2) au cours de la neurogenèse embryonnaire et adulte de l hippocampe chez la souris.Les gènes proneuraux (Neurogénines et Mash1), qui codent pour des facteurs de transcription à domaine bHLH (basic Helix Loop Helix), jouent un rôle important dans la formation du SNC. Chez les vertébrés, par exemple, Ngn2 a été impliqué dans le développent du télencéphale dorsal (cortex). Des expériences in vitro ont montrées que Ngn2 favorise la formation de neurones et inhibe la formation de cellules gliales. L analyse du patron d expression de Ngn2 montre que ce dernier est exprimé dans l hippocampe en développement. Cependant, l identité des cellules exprimant Ngn2, leur devenir et la fonction de Ngn2 dans l hippocampe restait méconnue. Ces questions ont été à la base de mon projet de thèse.Le gyrus denté (GD) de l hippocampe est un lieu de neurogenèse secondaire chez l adulte et jouerait un rôle important dans la mémoire spatiale et l apprentissage. Les neurones du GD proviennent de trois groupes de progéniteurs, ou matrices, générés séquentiellement pendant l embryogenèse tardive et la vie post-natale précoce de la souris (du jour embryonnaire 16.5 jusqu au jour post-natal 7). La zone ventriculaire (ZV) médiale du télencéphale contient les progéniteurs qui constituent la matrice primaire. Celle-ci donne naissance à une population de progéniteurs en migration qui constituent la matrice secondaire. Enfin, un troisième groupe de progéniteurs situés dans le GD en développement forme la matrice tertiaire. C est cette dernière qui continue de produire de nouveaux neurones durant la vie adulte de l animal.Nous avons montré par immunohistochimie que Ngn2 est exprimé par les progéniteurs dans les trois matrices formant le GD chez l embryon ainsi que chez le nouveau-né et l adulte. De plus, nous disposons d une lignée de souris Knock-in (KI) GFP pour le gène Ngn2 (Ngn2KIGFP). La stabilité de la GFP nous a permis d analyser le lignage des cellules exprimant et ayant exprimé Ngn2 chez les animaux hétérozygotes (Ngn2GFP/+). Ainsi, nous avons montré que la majorité des neurones granulaires du GD proviennent du lignage Ngn2. L analyse des souris homozygotes mutantes a permis l étude de la fonction de Ngn2 dans la formation du GD. Nous avons observé une perte de progéniteurs et de différenciation des progéniteurs dans les trois matrices formant le GD. D une part, l expression du facteur de transcription NeuroD est une cible directe de Ngn2 dans d autre partie du système nerveux, d autre part il est impliqué dans la différenciation des cellules granulaires du GD. Cependant, l expression de NeuroD ne varie pas chez le mutant Ngn2 supposant que: 1/ NeuroD ne serait pas une cible directe de Ngn2 dans l hippocampe; 2/ un des mécanismes impliqués dans la neurogenèse du GD serait dépendant de Ngn2. Etant donné que la neurogenèse du GD persiste post-natalement, nous avons poursuivi cette analyse au cours de la neurogenèse adulte.L étude des souris hétérozygotes Ngn2KIGFP/+ dans la neurogenèse adulte du GD, ainsi que l utilisation de marqueurs spécifiques des progéniteurs du GD, nous a permis de montrer que Ngn2 est exprimé par les progéniteurs neuronaux qui donnent naissance à des neurones granulaires, comme chez l embryon. En utilisant l acide kainate pour stimuler la neurogenèse adulte, nous avons observé une augmentation de l expression de Ngn2 montrant que Ngn2 peut être utilisé comme marqueur de progéniteurs dans le neurogenèse adulte du GD. Dans le but de discriminer le rôle de Ngn2 chez l adulte de son rôle chez l embryon, nous souhaitons utiliser une approche d inactivation conditionnelle du gène.La stratégie adoptée consiste à croiser les souris Ngn2 floxées avec une lignée de souris transgéniques exprimant la recombinase Cre inductible au tamoxifen (CreERT2). Cette stratégie nous permettra d inactiver Ngn2 à un temps précis. Dans un premier temps, nous avons analysé une nouvelle lignée de souris transgéniques exprimant CreERT2 sous le contrôle du promoteur CMV et de l enhancer du gène b-actin de poulet (pCAGGS). L activité de CreERT2 s avère hautement dépendante du dosage de tamoxifen administré et montre un patron de recombinaison mosaïque, aussi bien chez l embryon que chez l adulte. Cependant, tous les types cellulaires analysés sont affecté par la recombinaison. Afin d analyser la fonction de Ngn2 chez l adulte, nous sommes en train de croiser et d administrer le tamoxifen aux souris Ngn2 floxées; CreERT2.STRASBOURG-Sc. et Techniques (674822102) / SudocSudocFranceF

Fuzzy Processing for Electrical Machines

International audienc

Hybrid dynamic model and simulation of a mould pouring machine

International audienc

Hybrid dynamic model and simulation of a mould pouring machine

International audienc

Nestin-Cre activity and Nestin expression.

<p>(A, B) Immunofluorescence for GFP and Nestin in 13.5dpc NestinCre; R26RYFP embryo. Ventral diencephalon (VD) (A) and Ratkhe's pouch (RP) (B). Note that EYFP expression always correlates with that of Nestin within the CNS. (C, D) Immunofluorescence for Nestin on 16.5dpc (C) and 18.5dpc (D) wild-type pituitaries. (E, F) Immunofluorescence for GFP (E) and for GFP and Nestin (F) on Nestin-Cre; R26ReporterEYFP eleven month-old pituitaries. The arrows point to Nestin^+ve, EYFP^+ve cells. Scale bar: 50 µm; ant.: anterior; int.: intermediate; pos.: posterior; inf: infundibulum</p

Strategic Choices in Optimization

International audienceMany decision problems have two levels: one for strategic decisions, and an- other for tactical management. This paper focuses on the strategic level, more specifically the sequential exploration of the possible options and the final selec- tion (recommendation) of the best option. Several sequential exploration and recommendation criteria are considered and empirically compared on real world problems (board games, card games and energy management problems) in the uniform (1-player) and adversarial (2-player) settings. W.r.t. the sequential ex- ploration part, the classical upper confidence bound algorithm, the exponential exploration-exploitation algorithm, the successive reject algorithm (designed specifically for simple regret), and the Bernstein races, are considered. W.r.t. the recommendation part, the selection is based on the empirically best arm, most played arm, lower confidence bounds, based on the reward distribution or variants thereof designed for risk control. This paper presents a systematic study, comparing the coupling of the sequential exploration and recommenda- tion variants on the considered problems in terms of their simple regret. A secondary contribution is that, to the best of our knowledge, this is the first win ever of a computer-kill-all Go player against professional human players