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    Cyberbullying : as perceções e o descomprometimento moral no discurso dos professores

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    Tese de mestrado, Psicologia (Área de Especialização em Psicologia da Educação e da Orientação), Universidade de Lisboa, Faculdade de Psicologia, 2019O presente estudo tem como objetivo perceber que mecanismos de descomprometimento moral emergem no discurso dos professores, relativamente ao comportamento de agressores de cyberbullying. Propõe-se de igual forma perceber quais as perceções dos professores sobre o fenómeno de cyberbullying. Neste âmbito, foram realizadas 20 entrevistas semiestruturadas, a professores, com idades compreendidas entre os 25 e os 65 anos. A análise temática dos dados revelou que os mecanismos de descomprometimento moral que apresentaram maior incidência no discurso dos professores foram a linguagem eufemística e a comparação vantajosa. Estes resultados indicam, assim, que os professores desvalorizaram a gravidade do comportamento do agressor, comparativamente com situações que consideravam mais graves e tentam justificá-lo. Verificou-se também alguma incidência no que respeita à atribuição de culpa à vítima e ao deslocamento da responsabilidade. Estes resultados indicam que os professores que se descomprometem moralmente das situações de cyberbullying parecem desvalorizar o grau de seriedade do comportamento do agressor, utilizando uma justificação moral ou comparandoo com algo que para si é percecionado como mais grave (i.e., justificação moral e comparação vantajosa), além de atribuírem frequentemente a responsabilidade pelo comportamento do agressor à vítima (i.e., atribuição de culpa). Quando às perceções, verificou-se que a maioria dos professores tinha conhecimento do fenómeno de cyberbullying e que a escola tinha tomado prevenções no âmbito desta problemática. No entanto verificou-se entre os professores uma confusão de conceitos na medida em que referiram que o conceito de cyberbullying era uma agressão, não mencionando características específicas, como a repetição e a intencionalidade. No que respeita às estratégias de intervenção, foi referido que existe pouca intervenção ainda neste âmbito, no entanto os professores mencionaram algumas estratégias, tais como o diálogo com a turma, participação do comportamento ao diretor de turma, falar com a vítima, falar com os alunos, falar com a família ou a polícia e a elaboração de formações e workshops. O presente estudo contribuiu para providenciar uma maior compreensão do papel dos professores na intervenção em situações de cyberbullying. Este estudo torna-se importante na medida em que, com os resultados obtidos das perceções dos professores, podem-se definir estratégias de intervenção no que respeita a este fenómeno.The present study aims to investigate teachers’ perceptions of cyberbullying and the moral disengagement mechanisms that may emerge in their discourse regarding the phenomenon. It also proposed to understand the strategies teachers suggest to resolve cyberbullying situations. Twenty semi-structured interviews were conducted with 25 to 65-year-old teachers from a group of schools. A thematic analysis revealed that most teachers were aware of the concept of cyberbullying and the prevention measures which have been taken in their schools with regards to this phenomenon. Regarding teachers’ perceptions of cyberbullying, most were aware of the phenomenon and that the school had taken precautions in the context of this problem. However, specific characteristics of cyberbullying which are included in its definition, such as repetition and intentionality, were not mentioned. The mechanisms of moral disengagement that emerged with greater frequency in teachers’ discourse were euphemistic labelling and advantageous comparison. These findings indicate that teachers who were morally disengaged from cyberbullying situations seemed to devalue the degree of seriousness of the aggressor's behavior in some way, when compared to situations that they found severer and therefore, tried to justify it. Findings also indicated that there was some attribution of guilt to the victim and displacement of responsibility. Regarding intervention strategies, teachers mentioned that there is little intervention in this area. However, teachers referred to some strategies, such as debating with the class, reporting the behavior to the class director, speaking to the victim, other students, with family the or police, and preparing training and workshops. In line with these findings, this study contributed to providing a greater understanding of the role of teachers in preventing and intervening in cyberbullying situations. This study also provides important insights to define intervention strategies regarding this phenomenon

    Estudo da proteína humana centrossomal TBCCD1 em condições de stress oxidativo causadas por H202 em estado estacionário

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    Tese de mestrado, Bioquímica (Bioquímica Médica), Universidade de Lisboa, Faculdade de Ciências, 2010O peróxido de hidrogénio (H2O2) embora seja um oxidante relativamente fraco, é capaz de alterar o nível de oxidação dos grupos tióis ao reagir com resíduos de cisteínas. Essas propriedades tornam o H2O2 uma das espécies reactivas de oxigénio (ERO) com potencialidade para participar em vias de sinalização. Deste modo, o desencadeamento de uma determinada via de sinalização, ou a sua modulação, deverá ocorrer pelo aumento temporário das concentrações de H2O2, como por exemplo, durante a resposta inflamatória. Por outro lado, a exposição prolongada a algumas ERO têm vindo a ser relacionada com o início, progressão e desenvolvimento tumoral. Muitos dos tumores são caracterizados por aneuploidia e anormalidades centrossomais. Por exemplo, células de mamífero expostas a H2O2, por bolus addition, apresentam centrossomas supra-numerários. Neste contexto iniciou-se o estudo da influência de concentrações sinalizadoras de H2O2 nos níveis de duas proteínas centrossomais, a proteína TBCCD1 (TBCC-domain containing protein 1) e a y−tubulina nas linhas celulares humanas HeLa e hTERT-RPE-1. O TBCCD1 é um potencial regulador do posicionamento do centrossoma e da organização citoplasmática, a y−tubulina é uma proteína chave na nucleação dos microtúbulos nos centros organizadores de microtúbulos, como o centrossoma. Por western blot mostrou-se, em ambas as linhas celulares, o aumento dos níveis de TBCCD1 ao longo do tempo de exposição de H2O2 em estado estacionário. A análise da velocidade de consumo de H2O2 em células hTERT-RPE-1 que sobre-expressam a proteína de fusão TBCCD1-GFP mostrou um relação directa desta com o aumento dos níveis de TBCCD1-GFP. Esta proteína, na presença de H2O2, varia de modo análogo à proteína endógena. Estudos similares mostraram a diminuição dos níveis de y−tubulina ao longo do tempo de exposição de H2O2. Por microscopia de imunofluorescência indirecta observou-se também a diminuição dos níveis desta proteína no centrossoma em células HeLa. Observou-se ainda uma alteração da capacidade de nucleação dos microtúbulos pelo centrossoma e uma modificação na organização destes após repolimerização em células previamente tratadas com nocodazole e após remoção desta. No conjunto, estes resultados mostram que ambos os níveis destas proteínas variam na presença de baixos concentrações de H2O2, constituindo este trabalho uma abordagem inicial do efeito do H2O2 em concentrações reguladoras no centrossoma.The hydrogen peroxide (H2O2) although a relatively weak oxidant, is highly reactive with sulfhydryl groups. These properties make the H2O2 a reactive oxygen species (ROS) with the potential to participate as a regulator in signaling pathways. Thus, the temporary increase in the concentrations of H2O2 should trigger or modulate a signal pathway, such as during the inflammatory response. Moreover, prolonged exposure to some ROS has been related with the initiation, progression and tumor development. Many tumors are characterized by aneuploidy and centrosomal abnormalities. For example, mammalian cells exposed to H2O2 by bolus addition showed supra-numerary centrosomes. In this context we began the study of the influence of signaling concentrations of H2O2 in the levels of two centrosomal proteins, protein TBCCD1 (TBCC domain-containing protein 1) and y − tubulin in HeLa and hTERT-RPE-1 human cell lines. The TBCCD1 is a potential regulator of the positioning of the centrosome and cytoplasmic organization and the y − tubulin is a key protein in the nucleation of microtubules on microtubule organizing centers, such as the centrosome. By western blot, we detected in both cell lines, increased levels of TBCCD1 over time of exposure to a steady state of H2O2. The analysis of H2O2 consumption by intact hTERT-RPE-1 cells that over-expresses the fusion protein TBCCD1-GFP showed a direct relationship of this with increased levels of TBCCD1-GFP. Noteworthy, in the presence of H2O2, the TBCCD1-GFP levels, showed the same variation that those of the endogenous protein. Similar studies showed that −tubulin levels decreased of upon an exposition to H2O2. By immunolocalization microscopy we observed in HeLa cells a decrease of y − tubulin’s levels at the centrosome. To investigate if this observation has an impact in the ability of centrosomes to nucleate microtubules we have treated HeLa cells, previously exposed to steady-state levels of H2O2, with the antimitotic drug nocodozole. After washing out this microtubule depolymerizing agent we follow microtubule repolymerization by immunofluorescence microscopy. We observed that cells treated with H2O2 present a different ability to nucleate microtubules in comparison to control cells. At end these cells presented a distinct organization of the microtubule cytoskeleton. Taken together the results presented in this work show that a low concentration of H2O2 promotes a variation of the TBCCD1 and y − tubulin’s levels. Therefore, this work constitutes an initial approach to the study of the impact at the centrosome of H2O2 at levels expected for a signaling role

    Biallelic BUB1 mutations cause microcephaly, developmental delay, and variable effects on cohesion and chromosome segregation

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    Budding uninhibited by benzimidazoles (BUB1) contributes to multiple mitotic processes. Here, we describe the first two patients with biallelic BUB1 germline mutations, who both display microcephaly, intellectual disability, and several patient-specific features. The identified mutations cause variable degrees of reduced total protein level and kinase activity, leading to distinct mitotic defects. Both patients' cells show prolonged mitosis duration, chromosome segregation errors, and an overall functional spindle assembly checkpoint. However, while BUB1 levels mostly affect BUBR1 kinetochore recruitment, impaired kinase activity prohibits centromeric recruitment of Aurora B, SGO1, and TOP2A, correlating with anaphase bridges, aneuploidy, and defective sister chromatid cohesion. We do not observe accelerated cohesion fatigue. We hypothesize that unresolved DNA catenanes increase cohesion strength, with concomitant increase in anaphase bridges. In conclusion, BUB1 mutations cause a neurodevelopmental disorder, with clinical and cellular phenotypes that partially resemble previously described syndromes, including autosomal recessive primary microcephaly, mosaic variegated aneuploidy, and cohesinopathies.info:eu-repo/semantics/publishedVersio

    ALADIN is Required for the Production of Fertile Mouse Oocytes

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    Asymmetric cell divisions depend on the precise placement of the spindle apparatus. In mammalian oocytes, spindles assemble close to the cell's center, but chromosome segregation takes place at the cell periphery where half of the chromosomes are expelled into small, nondeveloping polar bodies at anaphase. By dividing so asymmetrically, most of the cytoplasmic content within the oocyte is preserved, which is critical for successful fertilization and early development. Recently we determined that the nucleoporin ALADIN participates in spindle assembly in somatic cells, and we have also shown that female mice homozygously null for ALADIN are sterile. In this study we show that this protein is involved in specific meiotic stages, including meiotic resumption, spindle assembly, and spindle positioning. In the absence of ALADIN, polar body extrusion is compromised due to problems in spindle orientation and anchoring at the first meiotic anaphase. ALADIN null oocytes that mature far enough to be fertilized in vitro are unable to support embryonic development beyond the two-cell stage. Overall, we find that ALADIN is critical for oocyte maturation and appears to be far more essential for this process than for somatic cell divisions

    The nucleoporin ALADIN regulates Aurora A localization to ensure robust mitotic spindle formation

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    The formation of the mitotic spindle is a complex process that requires massive cellular reorganization. Regulation by mitotic kinases controls this entire process. One of these mitotic controllers is Aurora A kinase, which is itself highly regulated. In this study, we show that the nuclear pore protein ALADIN is a novel spatial regulator of Aurora A. Without ALADIN, Aurora A spreads from centrosomes onto spindle microtubules, which affects the distribution of a subset of microtubule regulators and slows spindle assembly and chromosome alignment. ALADIN interacts with inactive Aurora A and is recruited to the spindle pole after Aurora A inhibition. Of interest, mutations in ALADIN cause triple A syndrome. We find that some of the mitotic phenotypes that we observe after ALADIN depletion also occur in cells from triple A syndrome patients, which raises the possibility that mitotic errors may underlie part of the etiology of this syndrome

    Innovative Platforms for MRI : based Applications

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    Tese de doutoramento em Bioquímica, na especialidade de Bioinorgânica, apresentada à Faculdade de Ciências e Tecnologia da Universidade de CoimbraUm dos principais objectivos da Imagem Molecular é o desenvolvimento de protocolos para a visualização de eventos moleculares e/ou celulares que ocorrem em organismos vivos. A Imagem Molecular lida com a visualização in vivo de processos biológicos que ocorrem a nível sub-celular e/ou molecular, facultando informações importantes, especialmente sobre o estado patológico, permitindo, também, o acompanhamento personalizado da evolução de um determinado tratamento terapêutico (medicina molecular). Protocolos de Imagem Molecular envolvem o uso de agentes de contraste que podem ser utilizados singularmente ou de forma combinada, em técnicas como Imagem Óptica, Ultrasons, Imagem Fotoacústica, imagem por Ressonância Magnética, espectroscopia por Ressonância Magnética, Tomografia por Emissão de Positrões e Tomografia Computadorizada por Emissão de um Único Fotão. Sendo a ressonância magnética a modalidade de imagem de eleição, é necessário projectar sistemas altamente sensíveis, de modo a superar a sensibilidade relativamente baixa da técnica. Muitos esforços têm sido feitos nas últimas décadas, com o principal objectivo de superar a pobre sensibilidade intrínseca da Ressonância Magnética, através do design de agentes de contraste. A estratégia mais eficaz para atingir essa tarefa é através do recurso a nano ou micro-vesículas, capazes de entregar um alto número de agentes de contraste para Ressonância Magnética directamente no alvo biológico. Do mesmo modo, tais sistemas podem ter um tropismo específico para alguns órgãos ou regiões patológicos que os tornam excelentes candidatos para protocolos de imagem molecular. Deste modo, projectámos várias abordagens de modo a construir agentes altamente sensíveis, baseados no uso do ião metálico Gadolínio (III), com a expectativa de que as partículas preparadas auxiliem no estudo de processos biológicos, bem como no diagnóstico e tratamento de doenças. Um protocolo adequado para a entrega de um grande número de unidades de agentes de contraste no alvo biológico de interesse, consiste no uso de nano-sistemas. A natureza tem servido como fonte de inspiração na procura deste tipo de carriers, sendo um exemplo de grande importância os lipossomas, um dos nano-carriers mais utilizados na entrega de fármacos. Para além de lipossomas, outro tipo de sondas inspiradas pela natureza têm sido investigadas, incluindo proteínas, vírus, lipoproteínas ou ainda células inteiras, principalmente em modalidades de diagnóstico. O trabalho realizado no contexto desta tese demonstrou o grande potencial da Ressonância Magnética como ferramenta de imagem, através do uso de plataformas inovadoras baseadas em elementos existentes na natureza.The main goal of Molecular Imaging is the development of technologies and assays for the visualization of molecular and/or cellular events occurring in living organisms. As molecular imaging deals with the in vivo visualization of biological processes occurring at sub-cellular and/or molecular level, thus allowing the attainment of extremely important information, especially about the onset of pathologic states and the monitoring, on a personalized base, of the outcome of a given therapeutic treatment (molecular medicine). Molecular Imaging protocols involve the use of imaging tracers to be used in single or combined imaging modalities like optical imaging, ultrasounds, photoacoustic imaging, magnetic resonance imaging, magnetic resonance spectroscopy, positron emission tomography and single photon emission computed tomography. As Magnetic Resonance is the imaging modality of choice it is necessary to design highly sensitive systems in order to overcome the relatively low sensitivity of such imaging modality. Many efforts has been done in the past decade with the aim of overcoming the intrinsic poor sensitivity of MRI through the design of contrast agents that make feasible the detection of the processes of interest in the Molecular Imaging field. The most effective strategy for achieving this task was to recur to nano/micro-carriers able to deliver a high number of MRI tracers at the biological target. In addition, such systems may have a specific tropism for some organs or pathological body districts that make them excellent candidates for Molecular imaging protocols. On this basis, we have envisaged several approaches to design highly sensitive agents based on the use of the Gadolinium (III) metal ion with the expectation that the given particles should help to lead to better methods for studying biological processes as well as diagnosing and managing diseases. A protocol suitable for the delivery a large number of imaging units to a given biological target is through the use of nanosystems. Nature has strongly inspired the search for carriers. For instance, liposomes, one the most used nanocarriers for drug delivery purposes. In addition to liposomes, many other nature-like carriers have been investigated so far including proteins, virus capsids, lipoproteins and even whole cells have been used, primarily for cell-tracking purposes. The work performed in the context of this Ph.D. thesis has demonstrated the great potential of MRI as imaging tool, through the use of innovative naturally-occurring platforms.Supported by a four-year scholarship from FCT (Fundação para a Ciência e Tecnologia), with the reference SFRH/BD/33187/200

    Business support networks for social enterprises: a study of the Brazilian support ecosystem

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    Social enterprises, economically self-sufficient businesses with primarily social objectives, are emerging and promising to help tackling Brazil’s social problems. Nevertheless, such promise is contingent on the development of a supportive ecosystem. This study explores the business support ecosystem for social enterprises in Brazil by providing a preliminary qualitative analysis of the effectiveness of the support network for social enterprises according to the perceptions of both social entrepreneurs and support providers. Such analysis is developed using Turrini et al. (2010)’sconceptual model on the determinants of network effectiveness for pattern matching. Results suggest that such network has been marked by a rapid growth of high quality business support availability but that such services are still concentrated in the South east of Brazil, being higher levels of both interaction and formalization among support organizations and of financial resources, public awareness and government support considered paramount to enhance ecosystem building
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